Uma das características de qualidade dos vinhos espumantes, e que também impõe a sua identidade, é a aparência das borbulhas. Tradicionalmente, acredita-se que a capacidade de formação e estabilização dessas borbulhas depende de macromoléculas do vinho, em especial das proteínas, devido a sua ação tensoativa. Este trabalho de doutorado visou o estudo proteômico do vinho espumante brasileiro a fim de identificar quais proteínas estão presentes nesses vinhos para entender melhor a influência dessas na estabilização da espuma (perlage e colarinho), e com o intuito de potencializar essa característica em nossos produtos. Foram utilizados os métodos de extração de proteínas clássico, ácido tricloroacético/acetona e de última geração, biblioteca combinatória de ligantes peptídicos, sendo estas separadas por SDS-PAGE, 2DE e OFFGEL. As proteínas extraídas foram digeridas com tripsina e a mistura de peptídeos analisada por nLC-MS/MS com metodologia shotgun. Os resultados iniciais obtidos por eletroforese 2DE e OFFGEL, mostraram a presença de três grupos de proteínas de massa molecular distintas, sendo duas próximas a 25 kDa e uma próxima a 70 kDa. Estas proteínas parecem estar presentes nos vinhos em mais de uma isoforma evidenciado pelo espalhamento de todas as bandas de mesma massa molecular em diferentes pH. Foram identificadas 40 proteínas, sendo 17 proteínas de organismos do sub-reino Viridiplantae e 23 proteínas pertencentes ao gênero Saccharomyces, onde 10 e 6 proteínas, respectivamente, estão presentes em pelo menos duas amostras de espumantes nacionais. Dessas, seis proteínas foram identificadas pela primeira vez em vinhos. Três proteínas originárias da levedura Saccharomyces cerevisiae estão presentes em todos os produtos analisados, podendo essas proteínas serem as responsáveis pela melhor formação de espuma observada em nossos produtos em relação ao Champagne (vinho espumante tradicional da França). / The type of fizzy bubbles is one of the aspects that characterizes the quality of sparkling wines and also helps defining their identity. Traditionally, it is believed that the ability of these bubbles to form and stabilize depends on the macromolecules found in the wine, particularly proteins, due to their surfactant action. The aim of this work is the proteomic study of the brazilian sparkling wines in order to identify which proteins are present to better understand the influence of these molecules in the foam formation (perlage and collar), in order to improve our products. The protein extraction methods used were the classical TCA/acetone precipitation and the modern combinatory peptide ligand library. Then, proteins were separated by SDS-PAGE, 2DE and OFFGEL. The protein extracted were digested with trypsin and the peptide mixture were analyzed with nLC-MS/MS using the shotgun method. The first results obtained by electrophoresis 2DE and OFFGEL showed the presence of three groups of proteins with different molecular mass, two of them close to 25 kDa and the other one close to 70 kDa. These proteins appear to be present in wine in more than one isoform evidenced by spreading in all bands of similar molecular weight at different pH. In total, 40 proteins were identified, 17 protein from Viridiplantae sub-kingdom organisms and 23 proteins belonging to Saccharomyces genus, where 10 and 6 proteins, respectively, are present in at least two samples of domestic sparkling wines. Six of those proteins were identified in wine for the first time. Three proteins originating from Saccharomyces cerevisiae are present in all analyzed products, and those may be responsible for a better foam formation observed in our products in comparison to Champagne (traditional French sparkling wine).

Uma das características de qualidade dos vinhos espumantes, e que também impõe a sua identidade, é a aparência das borbulhas. Tradicionalmente, acredita-se que a capacidade de formação e estabilização dessas borbulhas depende de macromoléculas do vinho, em especial das proteínas, devido a sua ação tensoativa. Este trabalho de doutorado visou o estudo proteômico do vinho espumante brasileiro a fim de identificar quais proteínas estão presentes nesses vinhos para entender melhor a influência dessas na estabilização da espuma (perlage e colarinho), e com o intuito de potencializar essa característica em nossos produtos. Foram utilizados os métodos de extração de proteínas clássico, ácido tricloroacético/acetona e de última geração, biblioteca combinatória de ligantes peptídicos, sendo estas separadas por SDS-PAGE, 2DE e OFFGEL. As proteínas extraídas foram digeridas com tripsina e a mistura de peptídeos analisada por nLC-MS/MS com metodologia shotgun. Os resultados iniciais obtidos por eletroforese 2DE e OFFGEL, mostraram a presença de três grupos de proteínas de massa molecular distintas, sendo duas próximas a 25 kDa e uma próxima a 70 kDa. Estas proteínas parecem estar presentes nos vinhos em mais de uma isoforma evidenciado pelo espalhamento de todas as bandas de mesma massa molecular em diferentes pH. Foram identificadas 40 proteínas, sendo 17 proteínas de organismos do sub-reino Viridiplantae e 23 proteínas pertencentes ao gênero Saccharomyces, onde 10 e 6 proteínas, respectivamente, estão presentes em pelo menos duas amostras de espumantes nacionais. Dessas, seis proteínas foram identificadas pela primeira vez em vinhos. Três proteínas originárias da levedura Saccharomyces cerevisiae estão presentes em todos os produtos analisados, podendo essas proteínas serem as responsáveis pela melhor formação de espuma observada em nossos produtos em relação ao Champagne (vinho espumante tradicional da França). / The type of fizzy bubbles is one of the aspects that characterizes the quality of sparkling wines and also helps defining their identity. Traditionally, it is believed that the ability of these bubbles to form and stabilize depends on the macromolecules found in the wine, particularly proteins, due to their surfactant action. The aim of this work is the proteomic study of the brazilian sparkling wines in order to identify which proteins are present to better understand the influence of these molecules in the foam formation (perlage and collar), in order to improve our products. The protein extraction methods used were the classical TCA/acetone precipitation and the modern combinatory peptide ligand library. Then, proteins were separated by SDS-PAGE, 2DE and OFFGEL. The protein extracted were digested with trypsin and the peptide mixture were analyzed with nLC-MS/MS using the shotgun method. The first results obtained by electrophoresis 2DE and OFFGEL showed the presence of three groups of proteins with different molecular mass, two of them close to 25 kDa and the other one close to 70 kDa. These proteins appear to be present in wine in more than one isoform evidenced by spreading in all bands of similar molecular weight at different pH. In total, 40 proteins were identified, 17 protein from Viridiplantae sub-kingdom organisms and 23 proteins belonging to Saccharomyces genus, where 10 and 6 proteins, respectively, are present in at least two samples of domestic sparkling wines. Six of those proteins were identified in wine for the first time. Three proteins originating from Saccharomyces cerevisiae are present in all analyzed products, and those may be responsible for a better foam formation observed in our products in comparison to Champagne (traditional French sparkling wine).

A influência da cultivar e da época de colheita na composição físico-química e na qualidade sensorial dos espumantes da Serra Gaúcha, Rio Grande do Sul, elaborados pelo método Champenoise nas safras 2006 e 2007, foi avaliada. As cultivares utilizadas foram Riesling Itálico, Chardonnay e Pinot Noir. As uvas foram colhidas em duas épocas distintas: uma referente ao ponto de colheita definido como ideal (época 1) e outra oito dias após (época 2). Os mostos, os vinhos base e espumantes foram analisados quanto à composição básica conforme a metodologia oficial brasileira. Além disso, nos vinhos base e espumantes foram analisados os elementos minerais e compostos aromáticos, através de absorção atômica e cromatografia gasosa, respectivamente. Os espumantes foram avaliados sensorialmente, por uma equipe de degustadores qualificados. Os resultados das análises clássicas dos mostos e vinhos base diferenciaram cultivares e épocas de colheita, nas duas safras estudadas. O mosto de Chardonnay apresentou maior valor de grau º Brix e de álcool potencial. O Pinot Noir se diferenciou pela acidez mais elevada, enquanto que o Riesling Itálico apresentou menores grau Brix e acidez total. Os mostos das uvas colhidas na segunda época apresentaram maiores teores de açúcar, álcool potencial, pH e relação brix/acidez total, e menor acidez. Nos vinhos base, as cultivares Chardonnay e Riesling Itálico apresentaram, respectivamente, maior e menor teor alcoólico e os vinhos das uvas de colheita mais tardia apresentaram menor acidez total. Entretanto, nos vinhos espumantes as análises clássicas não apresentaram diferenças significativas em relação às cultivares e épocas de colheita. Entre os elementos minerais dos vinhos base e dos espumantes correspondentes, o Zn foi único elemento que apresentou diferença significativa entre as cultivares sendo que os vinhos Chardonnay obtiveram os maiores teores. Os vinhos base provenientes das uvas com maior grau de maturação apresentaram, independente da cultivar, maiores níveis de K, Ca, Mg, Mn, Fe, Rb, Li e P e concentrações mais baixas em Cu e Zn. Quanto aos compostos voláteis, maiores quantidades de 2-fenil etanol e dietil succinato diferenciaram os vinhos da cultivar Chardonnay e maiores concentrações de hexanoato de etila e de acetato de isoamila diferenciaram os vinhos da cultivar Riesling Itálico. Já os vinhos Pinot Noir apresentaram teores de 2-metil-1-propanol e 2-metil-1-butanol significativamente superiores às outras variedades. Os vinhos obtidos de uvas colhidas na segunda época apresentaram menores teores de ácido butírico, diferenciando as duas épocas de colheita. Quanto à avaliação sensorial, a variedade Riesling Itálico apresentou maiores notas florais e a Chardonnay maior nota no frutado, tanto no aspecto olfativo quanto no gustativo. Já a Pinot Noir, maior nota vegetal, levedura e pão tostado. Na avaliação final os degustadores não fizeram distinção entre os espumantes Pinot Noir e os Chardonnay, preferindo estes aos de Riesling Itálico, nas duas safras estudadas. Na safra 2007 os degustadores preferiram os espumantes das uvas da primeira época de colheita, enquanto na safra 2006 não foi observada diferença entre as épocas de colheita. O presente trabalho contribuiu para a identificação dos principais constituintes e descritores que determinam a distinção e a tipicidade dos vinhos espumantes da Serra Gaúcha. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-05T16:36:15Z No. of bitstreams: 1 Tese Julio Meneguzzo.pdf: 2072769 bytes, checksum: 3d08ddab08ef5d3acf5e35ed8d16ab59 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-05T16:36:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Julio Meneguzzo.pdf: 2072769 bytes, checksum: 3d08ddab08ef5d3acf5e35ed8d16ab59 (MD5) / The influence of cultivar and harvest date on physico chemical composition and sensory quality of sparkling wines from Serra Gaúcha, Rio Grande do Sul, produced by the Champenoise method for crop years 2006 and 2007 were evaluated. The cultivars were Riesling Italico, Chardonnay and Pinot Noir. The grapes were harvested at two different times: one related to the harvesting point defined as ideal (season 1) and another eight days after (time 2). Musts, base wines and sparkling wines were analyzed based on the basic composition as the official Brazilian methodology. In addition, the base wines and sparkling wines were analysed the mineral elements were analyzed and aromatic compounds by atomic absorption and gas chromatography, respectively. Sparkling wines have been evaluated by a team of qualified tasters. The results of the classical analysis of musts and base wines differentiated cultivars and harvest times in the two seasons studied. The Chardonnay must showed higher brix value and potential alcohol. The Pinot Noir has distinguished by higher acidity, while the Riesling Italico had lower Brix and total acidity. The musts of grapes harvested in the second season showed higher levels of sugar, potential alcohol, pH and the realation Brix/total acidity and lower acidity. In the base wine, the varieties Chardonnay and Riesling Itálico were respectively higher and lower alcohol content and wine grapes harvested later showed lower acidity. However, in the sparkling wines the classic analysis showed no significant differences in different cultivars and harvest times. Among the mineral elements of the base wines and sparkling wines corresponding Zn was the only element that showed a significant difference among cultivars is that Chardonnay wines had the highest levels. The base wine from grapes with a higher degree of maturity showed, regardless of cultivar, higher levels of K, Ca, Mg, Mn, Fe, Rb, Li and P and lower concentrations of Cu and Zn. As for the volatile compounds, larger amounts of 2-phenyl ethanol and diethyl succinate differentiated the wines of the cultivar Chardonnay, and higher concentrations of ethyl hexanoate and isoamyl acetate differentiated the wines of the cultivar Riesling Italico. Already Pinot Noir wines showed levels of 2-methyl-1-propanol and 2-methyl-1-butanol significantly higher than other varieties. The wines made from grapes harvested in the second period had lower levels of butyric acid, differentiating the two harvest seasons. As for the sensory evaluation, the variety Riesling Itálico showed higher floral notes and the Chardonnay with highest score on fruity in both the olfactory and the gustatory aspect. As for the Pinot Noir, highest notes aromatic for vegetable, yeast and toasted bread. In the final evaluation the panelists made no distinction between the sparkling wines Pinot Noir and Chardonnay, preferring these to Riesling Itálico, in the two harvests studied. In the season 2007 the tasters preferred the sparkling wines from the grapes of the first harvest season, while the harvest in 2006 there was no difference between harvest seasons. This work helped identify the main components and characteristics that determine the distinguish and tipicity of sparkling wines from the Serra Gaúcha.

A influência da cultivar e da época de colheita na composição físico-química e na qualidade sensorial dos espumantes da Serra Gaúcha, Rio Grande do Sul, elaborados pelo método Champenoise nas safras 2006 e 2007, foi avaliada. As cultivares utilizadas foram Riesling Itálico, Chardonnay e Pinot Noir. As uvas foram colhidas em duas épocas distintas: uma referente ao ponto de colheita definido como ideal (época 1) e outra oito dias após (época 2). Os mostos, os vinhos base e espumantes foram analisados quanto à composição básica conforme a metodologia oficial brasileira. Além disso, nos vinhos base e espumantes foram analisados os elementos minerais e compostos aromáticos, através de absorção atômica e cromatografia gasosa, respectivamente. Os espumantes foram avaliados sensorialmente, por uma equipe de degustadores qualificados. Os resultados das análises clássicas dos mostos e vinhos base diferenciaram cultivares e épocas de colheita, nas duas safras estudadas. O mosto de Chardonnay apresentou maior valor de grau º Brix e de álcool potencial. O Pinot Noir se diferenciou pela acidez mais elevada, enquanto que o Riesling Itálico apresentou menores grau Brix e acidez total. Os mostos das uvas colhidas na segunda época apresentaram maiores teores de açúcar, álcool potencial, pH e relação brix/acidez total, e menor acidez. Nos vinhos base, as cultivares Chardonnay e Riesling Itálico apresentaram, respectivamente, maior e menor teor alcoólico e os vinhos das uvas de colheita mais tardia apresentaram menor acidez total. Entretanto, nos vinhos espumantes as análises clássicas não apresentaram diferenças significativas em relação às cultivares e épocas de colheita. Entre os elementos minerais dos vinhos base e dos espumantes correspondentes, o Zn foi único elemento que apresentou diferença significativa entre as cultivares sendo que os vinhos Chardonnay obtiveram os maiores teores. Os vinhos base provenientes das uvas com maior grau de maturação apresentaram, independente da cultivar, maiores níveis de K, Ca, Mg, Mn, Fe, Rb, Li e P e concentrações mais baixas em Cu e Zn. Quanto aos compostos voláteis, maiores quantidades de 2-fenil etanol e dietil succinato diferenciaram os vinhos da cultivar Chardonnay e maiores concentrações de hexanoato de etila e de acetato de isoamila diferenciaram os vinhos da cultivar Riesling Itálico. Já os vinhos Pinot Noir apresentaram teores de 2-metil-1-propanol e 2-metil-1-butanol significativamente superiores às outras variedades. Os vinhos obtidos de uvas colhidas na segunda época apresentaram menores teores de ácido butírico, diferenciando as duas épocas de colheita. Quanto à avaliação sensorial, a variedade Riesling Itálico apresentou maiores notas florais e a Chardonnay maior nota no frutado, tanto no aspecto olfativo quanto no gustativo. Já a Pinot Noir, maior nota vegetal, levedura e pão tostado. Na avaliação final os degustadores não fizeram distinção entre os espumantes Pinot Noir e os Chardonnay, preferindo estes aos de Riesling Itálico, nas duas safras estudadas. Na safra 2007 os degustadores preferiram os espumantes das uvas da primeira época de colheita, enquanto na safra 2006 não foi observada diferença entre as épocas de colheita. O presente trabalho contribuiu para a identificação dos principais constituintes e descritores que determinam a distinção e a tipicidade dos vinhos espumantes da Serra Gaúcha. / The influence of cultivar and harvest date on physico chemical composition and sensory quality of sparkling wines from Serra Gaúcha, Rio Grande do Sul, produced by the Champenoise method for crop years 2006 and 2007 were evaluated. The cultivars were Riesling Italico, Chardonnay and Pinot Noir. The grapes were harvested at two different times: one related to the harvesting point defined as ideal (season 1) and another eight days after (time 2). Musts, base wines and sparkling wines were analyzed based on the basic composition as the official Brazilian methodology. In addition, the base wines and sparkling wines were analysed the mineral elements were analyzed and aromatic compounds by atomic absorption and gas chromatography, respectively. Sparkling wines have been evaluated by a team of qualified tasters. The results of the classical analysis of musts and base wines differentiated cultivars and harvest times in the two seasons studied. The Chardonnay must showed higher brix value and potential alcohol. The Pinot Noir has distinguished by higher acidity, while the Riesling Italico had lower Brix and total acidity. The musts of grapes harvested in the second season showed higher levels of sugar, potential alcohol, pH and the realation Brix/total acidity and lower acidity. In the base wine, the varieties Chardonnay and Riesling Itálico were respectively higher and lower alcohol content and wine grapes harvested later showed lower acidity. However, in the sparkling wines the classic analysis showed no significant differences in different cultivars and harvest times. Among the mineral elements of the base wines and sparkling wines corresponding Zn was the only element that showed a significant difference among cultivars is that Chardonnay wines had the highest levels. The base wine from grapes with a higher degree of maturity showed, regardless of cultivar, higher levels of K, Ca, Mg, Mn, Fe, Rb, Li and P and lower concentrations of Cu and Zn. As for the volatile compounds, larger amounts of 2-phenyl ethanol and diethyl succinate differentiated the wines of the cultivar Chardonnay, and higher concentrations of ethyl hexanoate and isoamyl acetate differentiated the wines of the cultivar Riesling Italico. Already Pinot Noir wines showed levels of 2-methyl-1-propanol and 2-methyl-1-butanol significantly higher than other varieties. The wines made from grapes harvested in the second period had lower levels of butyric acid, differentiating the two harvest seasons. As for the sensory evaluation, the variety Riesling Itálico showed higher floral notes and the Chardonnay with highest score on fruity in both the olfactory and the gustatory aspect. As for the Pinot Noir, highest notes aromatic for vegetable, yeast and toasted bread. In the final evaluation the panelists made no distinction between the sparkling wines Pinot Noir and Chardonnay, preferring these to Riesling Itálico, in the two harvests studied. In the season 2007 the tasters preferred the sparkling wines from the grapes of the first harvest season, while the harvest in 2006 there was no difference between harvest seasons. This work helped identify the main components and characteristics that determine the distinguish and tipicity of sparkling wines from the Serra Gaúcha.