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Previous issue date: 2011-11-22 / Leptin is a multifunctional peptidic hormone, primarily produced by the adipose
tissue, which has receptors (Ob-Rs) in reproductive organs, hypothalamus and
hypophysis, acting in the appetite regulation and energetic expenditure, potentially
influencing the expression of the reproductive function, at puberty and lactation.
Reproductive failure are the main causes for female culling, representing 30% to
40%,of the total female culling. Thus, post-mortem evaluation of the genital organs at
slaughter may have an important diagnostic value, helping on the identification of the
stage of female`s estrous cycle and aiding the interpretation of reproductive
abnormalities. Its long form receptor (OBR-b) performs signal transduction in several
cell types via mitogen- activated protein kinases (MAPK) cascade, such as ERK 1/2
and p38. The first stage of this thesis is aimed to evaluate the presence of leptin and
MPAK in oocites of pubertal sows and prepubertal gilts. Ovaries from 10 pubertal
sows and 10 prepubertal gilts were collected at a slaughterhouse. Slides were
analyzed for the presence of oocites included in primordial/primary (OIPF),
secondary (OISF) and tertiary follicles (OITF). Immunohistochemistry (IHC) was
performed with polyclonal antibodies anti-leptin and anti-phospho-MAPK (ERK 1/2
and p38). The second stage involved 28 pubertal sows and the analyses were
performed in hypothalamic neurons, endometrial glands and oocytes. For IHC, the
antibodies were polyclonal anti-leptin and anti-leptin receptor. Responses were
compared with reproductive data registered for each female. All images in both
stages were analyzed by 16-Bit Histogram application from Image J® software.
Immunolabeling for leptin and activated ERK 1/2 MAPK were more intense in sows
oocytes (p ≤ 0.05), while the immunolabeling for activated p38 MAPK was more
intense in gilts oocytes (p = 0.05). In sows, OIPF were more intensely marked for
leptin and p38 MAPK (p <0.05), on the other hand, for gilts there was no difference in
the marking of follicular oocytes from the analyzed categories. Hypothalamic neurons
were more intensely marked in the sows culled by reproductive problems (p <0.05).
The hypothalamus, uterus and oocytes of luteal or follicular phase sows showed
more intense immunolabeling for leptin and OBR-b than the females with cystic
ovaries. The immunolabeling for leptin was more pronounced in the hypothalamus
and uterus of sows from parity order 2 group (PO 2-4) (p <0.05). These results
demonstrate that leptin may be a marker for oocyte competence. Also, cyclic females
having PO 2-4 presented more intense leptin immunolabeling in the hypothalamus
and uterus and for OBR-b in the oocyte and uterus. The OBR-b immunolabeling was
more pronounced in primiparous and multiparous females than for nulliparous.
Therefore, immunolabeling for leptin and OBR-b can be a marker for reproductive
performance in swine females. / A leptina é um hormônio peptídico multifuncional, produzido primariamente pelo
tecido adiposo, com receptores (Ob-Rs) presentes em órgãos reprodutivos,
hipotálamo e hipófise, que atua na regulação do apetite e no gasto energético, com
potencial influência sobre a expressão da função reprodutiva, na puberdade e após
a lactação. Desordens reprodutivas são as causas mais comuns, atribuídas ao total
dos descartes, entre 30 e 40%. Considerando a alta proporção de descartes por
estes problemas, a avaliação dos órgãos genitais no abate tem importante valor
diagnóstico, auxiliando na identificação do estágio do ciclo estral da fêmea e na
interpretação de possíveis anormalidades reprodutivas. O seu receptor de forma
longa (OBR-b) realiza transdução de sinal em diversos tipos celulares via cascata
das proteínas quinases ativadas por mitógenos (MAPK), tais como ERK 1/2 e p38. A
primeira etapa do trabalho teve por objetivo avaliar a presença da leptina, e das
MAPK nos oócitos de fêmeas suínas púberes e pré-púberes. Envolveu ovários de 10
fêmeas pré-púberes e 10 púberes coletados no abate e lâminas foram analisadas de
oócitos inclusos em folículos primordiais/primários (OIFP), secundários (OIFS) e
terciários (OIFT). Para a técnica de imuno-histoquímica (IHQ) os anticorpos
policlonais instilados foram anti-leptina, anti-phospho- MAPK (ERK 1/2 e p38). A
segunda etapa envolveu 28 porcas púberes descartadas, das quais foram
analisados os neurônios do hipotálamo, glândulas endometriais e oócitos. Para a
IHQ foram utilizados anticorpos policlonais anti-leptina e anti-receptor da leptina e
objetivou comparar as respostas com os dados produtivos e reprodutivos a partir do
registro de cada fêmea. Em ambas as etapas de trabalho foram utilizadas as modas
obtidas pelo aplicativo 16 Bit-Histograma do software Image J®. A imunomarcação
da leptina e a presença de ERK 1/2 ativada MAPK foram mais intensas em oócitos
de porcas (p≤0,05), enquanto que a marcação para p38 MAPK ativada foi mais
intensa em oócitos de leitoas (p=0,05). Em porcas, os OIFP estavam mais
intensamente marcados para a leptina e p38 MAPK (p<0,05), mas para leitoas não
foi observada diferença na marcação dos oócitos independente do estádio folicular.
No hipotálamo a imunomarcação para a leptina foi mais intensa nas porcas
descartadas por problemas reprodutivos (p<0,05). O hipotálamo, útero e oócitos das
porcas que estavam na fase lútea ou fase folicular apresentaram imunomarcação
para leptina e OBR-b mais acentuada que naquelas que possuíam cistos ovarianos.
A imunomarcação para a leptina foi mais acentuada no hipotálamo e útero daquelas
porcas do grupo ordem de parto 2 (OP 2-4) (p<0,05). Estes resultados demonstram
que a leptina pode ser um dos marcadores para competência oocitária. Além disso,
pode também ser observado que fêmeas cíclicas com OP 2-4 partos apresentam
imunomarcação mais intensa para leptina no hipotálamo e útero, e OBR-b nos
oócitos e útero. O OBR-b obteve marcação mais acentuada em fêmeas primíparas e
multíparas, que nulíparas. Portanto, a imunomarcação para leptina e OBR-b podem
ser um marcador de sinalização reprodutivo em fêmeas suínas.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/2579 |
| Date | 22 November 2011 |
| Creators | Moreira, Fabiana |
| Contributors | CPF:43349676049, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4793234U8, Corrêa, Márcio Nunes, Lucia Junior, Thomaz |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Veterinária, UFPel, BR, Veterinária |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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