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Aprimoramento de método com náuplios de Tisbe biminiensis (Copepoda: Hartacticoida) e sua utilização no estudo de Avaliação e Identificação da Toxicidade das águas do complexo estuarino de Suape

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Previous issue date: 2014-08-29 / O Complexo Industrial Portuário-SUAPE, localizado no complexo estuarino de Suape

(Pernambuco, Brasil), conta com grandes empresas das mais diversas atividades produtivas. A região

possui grande importância ecológica e econômica e estudos relatam a ocorrência de modificações

fisiográficas, hidrológicas e ecológicas desde a implantação de SUAPE. Segundo estudos

ecotoxicológicos realizados, a área apresenta contaminação moderada e variável. Contudo, ainda não

foi possível indicar quais substâncias poderiam estar relacionadas com a toxicidade das amostras

ambientais. Neste sentido, o teste de Avaliação e Identificação da Toxicidade – AIT surge como uma

importante ferramenta, pois permite a identificação de contaminantes potencialmente causadores da

toxicidade. O emprego de um ensaio ecotoxicológico rápido com um organismo-teste sensível antes e

após as manipulações de AIT é necessário para este tipo de análise. Os náuplios de copépodos, dentre

estes o da espécie Tisbe biminiensis, têm sido indicados para avaliação de amostras de água marinha

devido a maior sensibilidade dos estágios larvais, porém o teste normalmente é realizado em

microplacas o que o torna bastante laborioso. Este trabalho teve como objetivos aprimorar um

protocolo para realização de bioensaios com náuplios de T. biminiensis e avaliar sua sensibilidade

usando uma substância de referência, no caso o sulfato de zinco. Posteriormente, o teste foi empregado

na avaliação da toxicidade de amostras de água superficial coletadas em diferentes pontos de Suape

entre os anos de 2011 e 2013. Visando aumentar a sensibilidade do método, além dos parâmetros de

mortalidade, desenvolvimento e inibição, também foram avaliados tamanho e estágio de

desenvolvimento dos copepoditos. Para AIT foram estudadas amostras de água superficial coletadas

em Abril e Setembro de 2013, sendo realizadas análises químicas de metais, amônia, hidrocarbonetos

e agrotóxicos neste último mês. O tempo de duração do teste foi definido em 72 horas. Os testes de

alimentação utilizando as microalgas Chaetoceros gracilis e Thalassiosira fluviatilis com e sem adição

de ração para peixe demonstraram o pior desempenho de T. fluviatilis sem adição de ração como

alimento. Foi verificado que o desenvolvimento nas concentrações de C. gracilis superiores a 2,5 x 105

células mL-1

foram estatisticamente maiores do que controle (água do mar sem adição de alimento)

quando na temperatura de 28°C após 72 h. Entretanto a 25°C após 72 horas, apenas a partir da

concentração de 5,5 x 105

células mL-1

de C. gracilis, o desenvolvimento dos náuplios para

copepoditos foi superior ao controle, indicando que a temperatura de 28°C promove maior

desenvolvimento. Logo, foram definidas as seguintes condições para o teste: concentração de C.

gracilis de 2,5 x 105

células mL-1

, temperatura de 28°C e um tempo de 72 h. Após os sete testes de

sensibilidade foram estimadas as CE50/72h, CL50/72h e a CENO em 3,25 ± 0.59; 3,46 ± 0.72 e 2,0 mg L-

1

para o ZnSO4.7H2O, indicando que os náuplios de T. biminiensis são tão sensíveis quanto outros

copépodos frequentemente empregados em estudos ecotoxicológicos. Avaliando-se amostras de água

superficial coletadas na região de Suape verificou-se a presença de toxicidade sub-letal para os

náuplios de T. biminiensis, mais associada ao mês de Setembro, início do período seco. Dentre os

parâmetros avaliados, a inibição foi o que mais indicou toxicidade, seguido pelo desenvolvimento.

Apesar da obtenção das medidas dos comprimentos total e da cabeça (geral e por estágio de

copepoditos) e da frequência de estágios reduzirem a praticidade do método, em um dos pontos de

coleta elas aumentaram a detecção de efeitos tóxicos. O estudo de AIT indicou que os compostos

orgânicos, os metais e a amônia seriam os principais agentes causadores da toxicidade das águas de

Suape, sendo os resultados da caracterização da fase I do AIT considerados bastante complexos. Nas

análises químicas, os Hidrocarbonetos Aromáticos de Petróleo Dissolvidos ou Dispersos estavam em

níveis subletais, os agrotóxicos não foram detectados e houve diminuição das concentrações de Fe

após a macroalga Ulva sp. A adição de novos parâmetros no teste com náuplios T. biminiensis foi

importante para confirmação dos resultados obtidos. A variedade de agentes tóxicos indicados pode

ser atribuída à diversidade de atividades realizadas na área, às diferentes influências sofridas pelos

pontos estudados e ao regime de chuvas, marés e correntes, indicando a necessidade de monitoramento

e avaliação constantes das condições ambientais da região. / The Suape estuarine complex (Pernambuco, Brazil) is located close to the industrial port

complex-SUAPE which includes major companies from various productive activities. The region has

great ecological and economic importance, and studies have reported the occurrence of physiographic,

hydrological and ecological changes since the implementation of SUAPE. According ecotoxicological

studies, the area has moderate and variable contamination. However, has not yet been possible to

indicate which substances could be related to the toxicity of environmental samples. In this sense, the

test for Toxicity Identification and Evaluation - TIE emerges as an important tool because it allows the

identification of possible toxic agents. The use of a fast ecotoxicological test with a sensitive test

organism before and after the manipulations of TIE is required for this type of analysis. The copepod

nauplii, among these the species Tisbe biminiensis, have been indicated for evaluation of samples of

estuarine and sea water due to increased sensitivity of the larval stages, but the test is usually

performed in microplates which makes it very laborious. This study aimed to improve a protocol for

conducting bioassays with nauplii of T. biminiensis and evaluate their sensitivity to zinc sulphate, a

reference substance. Subsequently, the test was used to evaluate the toxicity of surface water samples

collected at different points of Suape between the years 2011 and 2013. Aiming to increase the

sensitivity of the method, beyond the parameters of mortality, development and inhibition, size and

stage of development of copepodites were also evaluated. For AIT were studied samples collected in

April and September 2013, chemical analysis of metals, ammonia, hydrocarbons and pesticides were

performed in the last month. The duration of the test was 72 h. The feeding test using microalgae

Chaetoceros gracilis and Thalassiosira fluviatilis with and without addition of fish ration showed the

worst performance of T. fluviatilis as food. It was observed that the development C. gracilis

concentrations above 2.5 x 105

cells mL-1

were significantly higher than control (sea water without the

addition of food) when the temperature of 28 °C after 72 h. However, at 25 °C after 72 h, only at

concentrations of 5.5 x 105

cells mL-1 C. gracilis, the development nauplii to copepodites were higher

than the control, indicating that the temperature of 28 °C promotes further development. Then, the

following conditions were established for the protocol: C. gracilis at 2.5 x 105

cells mL-1 as food,

incubation at 28 °C and 72h duration. After the seven sensitivity tests were estimated CE50/72h, CL50/72h

and NOEC of 3.25 ± 0:59; 3.46 ± 0.72 and 2.0 mg L

-1

for ZnSO4.7H2O, indicating that the nauplii of

T. biminiensis are as sensitive as other copepods employed in ecotoxicological studies. Was detected

sub-lethal toxicity of surface water samples for the nauplii of T. biminiensis, more associated to

September, early dry season. Among the parameters evaluated, inhibition was the most indicated

toxicity, followed by the development. Despite obtaining measurements of the total length and head

(general and by stage of copepodites) and the frequency of stages reduce the practicality of the

method, one of the points, they increased the detection of toxic effects. The TIE study indicated that

mainly organic compounds, metals and ammonia would be the toxicity agents of Suape waters, this

characterization is considered complex. In chemical analysis, the HAPDDs were at sublethal levels,

the pesticides were not detected and concentrations of Fe decreased after Ulva sp. The addition of new

parameters in the test Nauplii T. biminiensis was important to confirm the results obtained. The variety

of toxic agents can be attributed to the diversity of activities in the area, the different influences

suffered by points studied and rainfall, tides and currents, indicating the need for constant monitoring

and evaluation of environmental conditions in the region.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/18858
Date29 August 2014
CreatorsLAVORANTE, Beatriz Regina Brito de Oliveira
ContributorsSANTOS, Lília Pereira de Souza
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Oceanografia, UFPE, Brasil
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguageBreton
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
RightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess

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