Made available in DSpace on 2014-06-12T15:05:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1786_1.pdf: 526222 bytes, checksum: 5599d18a827bb30bc96d8ea3f01bb99c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / A produção dos cistos de Artemia sp. nem sempre atende a demanda das aqüiculturas. Deste modo, dietas alternativas precisam ser testadas. Os objetivos desse trabalho foram em primeiro lugar estimar o efeito de diferentes concentrações da prole do copépodo Tisbe biminiensis na taxa de ingestão das larvas de Litopenaeus vannamei e estimar a concentração ótima desta prole para alimentar estas larvas. Em segundo lugar foram compararados a sobrevivência e o crescimento das larvas de L. vannamei nutridas com a prole do copépodo Tisbe biminiensis e com os náuplios de Artemia. Os experimentos foram realizados com água do mar na salinidade 31-33, temperatura de 25-30ºC e fotoperíodo de 13h luz/11 h escuro. Nos experimentos de taxa de ingestão, larvas nos estágios de misis (M) 2 e 3 e pós-larvas (PL) 1, 3, 5 e 7 foram consideradas. Quatro diferentes concentrações da prole do copépodo foram testadas para cada estágio como também controles sem larvas. Além disso, controles com náuplios de Artemia também foram usados para avaliar o estado fisiológico das larvas testadas. Dois testes de desempenho foram realizados, no primeiro larvas no estágio M 1 foram cultivadas em frascos com fundo cônicos com aeração contendo de 5 l de água e a densidade inicial de 60 l-1. No segundo teste, as larvas no estágio de PL 2 foram cultivadas em frascos com fundo plano com aeração contendo 1 l de água e densidade inicial de 65 l-1. O nível de substituição de náuplios de Artemia pela prole do copépodo foi: 0% (controle), 50% (T1) e 100% (T2). Nos experimentos de taxa de ingestão, a melhor concentração de prole de copépodo foi 5 copépodo ml-1 para M 2 e 3. Nos estágios de pós-larva, a melhor concentração de copépodo foi cerca de 10 copépodo ml -1 para PL 1 a 3 e 20 copépodo ml-1 para PL 5 a 7. No primeiro teste de desempenho, a sobrevivência não foi significativamente diferente entre os tratamentos, embora tenha ocorrido alta mortalidade nas primeiras 24 h. No segundo teste, a sobrevivência não foi significativamente diferente em T2 e T1, mas foi significativamente menor no controle. O crescimento das larvas não foi significativamente diferente entre os tratamentos em ambos os testes. Deste modo, conclui-se que a prole de T. biminiensis copépodo é um alimento potencial para ser usado na larvicultura de L. vannamei embora mais testes de desempenho devam ser realizados

Submitted by Caroline Falcao (caroline.rfalcao@ufpe.br) on 2017-05-22T17:27:10Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_BeatrizLavoranteFinal_BC.pdf: 2045652 bytes, checksum: 19f106b93f6d316fc93419a636ca837a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-22T17:27:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_BeatrizLavoranteFinal_BC.pdf: 2045652 bytes, checksum: 19f106b93f6d316fc93419a636ca837a (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / O Complexo Industrial Portuário-SUAPE, localizado no complexo estuarino de Suape (Pernambuco, Brasil), conta com grandes empresas das mais diversas atividades produtivas. A região possui grande importância ecológica e econômica e estudos relatam a ocorrência de modificações fisiográficas, hidrológicas e ecológicas desde a implantação de SUAPE. Segundo estudos ecotoxicológicos realizados, a área apresenta contaminação moderada e variável. Contudo, ainda não foi possível indicar quais substâncias poderiam estar relacionadas com a toxicidade das amostras ambientais. Neste sentido, o teste de Avaliação e Identificação da Toxicidade – AIT surge como uma importante ferramenta, pois permite a identificação de contaminantes potencialmente causadores da toxicidade. O emprego de um ensaio ecotoxicológico rápido com um organismo-teste sensível antes e após as manipulações de AIT é necessário para este tipo de análise. Os náuplios de copépodos, dentre estes o da espécie Tisbe biminiensis, têm sido indicados para avaliação de amostras de água marinha devido a maior sensibilidade dos estágios larvais, porém o teste normalmente é realizado em microplacas o que o torna bastante laborioso. Este trabalho teve como objetivos aprimorar um protocolo para realização de bioensaios com náuplios de T. biminiensis e avaliar sua sensibilidade usando uma substância de referência, no caso o sulfato de zinco. Posteriormente, o teste foi empregado na avaliação da toxicidade de amostras de água superficial coletadas em diferentes pontos de Suape entre os anos de 2011 e 2013. Visando aumentar a sensibilidade do método, além dos parâmetros de mortalidade, desenvolvimento e inibição, também foram avaliados tamanho e estágio de desenvolvimento dos copepoditos. Para AIT foram estudadas amostras de água superficial coletadas em Abril e Setembro de 2013, sendo realizadas análises químicas de metais, amônia, hidrocarbonetos e agrotóxicos neste último mês. O tempo de duração do teste foi definido em 72 horas. Os testes de alimentação utilizando as microalgas Chaetoceros gracilis e Thalassiosira fluviatilis com e sem adição de ração para peixe demonstraram o pior desempenho de T. fluviatilis sem adição de ração como alimento. Foi verificado que o desenvolvimento nas concentrações de C. gracilis superiores a 2,5 x 105 células mL-1 foram estatisticamente maiores do que controle (água do mar sem adição de alimento) quando na temperatura de 28°C após 72 h. Entretanto a 25°C após 72 horas, apenas a partir da concentração de 5,5 x 105 células mL-1 de C. gracilis, o desenvolvimento dos náuplios para copepoditos foi superior ao controle, indicando que a temperatura de 28°C promove maior desenvolvimento. Logo, foram definidas as seguintes condições para o teste: concentração de C. gracilis de 2,5 x 105 células mL-1 , temperatura de 28°C e um tempo de 72 h. Após os sete testes de sensibilidade foram estimadas as CE50/72h, CL50/72h e a CENO em 3,25 ± 0.59; 3,46 ± 0.72 e 2,0 mg L- 1 para o ZnSO4.7H2O, indicando que os náuplios de T. biminiensis são tão sensíveis quanto outros copépodos frequentemente empregados em estudos ecotoxicológicos. Avaliando-se amostras de água superficial coletadas na região de Suape verificou-se a presença de toxicidade sub-letal para os náuplios de T. biminiensis, mais associada ao mês de Setembro, início do período seco. Dentre os parâmetros avaliados, a inibição foi o que mais indicou toxicidade, seguido pelo desenvolvimento. Apesar da obtenção das medidas dos comprimentos total e da cabeça (geral e por estágio de copepoditos) e da frequência de estágios reduzirem a praticidade do método, em um dos pontos de coleta elas aumentaram a detecção de efeitos tóxicos. O estudo de AIT indicou que os compostos orgânicos, os metais e a amônia seriam os principais agentes causadores da toxicidade das águas de Suape, sendo os resultados da caracterização da fase I do AIT considerados bastante complexos. Nas análises químicas, os Hidrocarbonetos Aromáticos de Petróleo Dissolvidos ou Dispersos estavam em níveis subletais, os agrotóxicos não foram detectados e houve diminuição das concentrações de Fe após a macroalga Ulva sp. A adição de novos parâmetros no teste com náuplios T. biminiensis foi importante para confirmação dos resultados obtidos. A variedade de agentes tóxicos indicados pode ser atribuída à diversidade de atividades realizadas na área, às diferentes influências sofridas pelos pontos estudados e ao regime de chuvas, marés e correntes, indicando a necessidade de monitoramento e avaliação constantes das condições ambientais da região. / The Suape estuarine complex (Pernambuco, Brazil) is located close to the industrial port complex-SUAPE which includes major companies from various productive activities. The region has great ecological and economic importance, and studies have reported the occurrence of physiographic, hydrological and ecological changes since the implementation of SUAPE. According ecotoxicological studies, the area has moderate and variable contamination. However, has not yet been possible to indicate which substances could be related to the toxicity of environmental samples. In this sense, the test for Toxicity Identification and Evaluation - TIE emerges as an important tool because it allows the identification of possible toxic agents. The use of a fast ecotoxicological test with a sensitive test organism before and after the manipulations of TIE is required for this type of analysis. The copepod nauplii, among these the species Tisbe biminiensis, have been indicated for evaluation of samples of estuarine and sea water due to increased sensitivity of the larval stages, but the test is usually performed in microplates which makes it very laborious. This study aimed to improve a protocol for conducting bioassays with nauplii of T. biminiensis and evaluate their sensitivity to zinc sulphate, a reference substance. Subsequently, the test was used to evaluate the toxicity of surface water samples collected at different points of Suape between the years 2011 and 2013. Aiming to increase the sensitivity of the method, beyond the parameters of mortality, development and inhibition, size and stage of development of copepodites were also evaluated. For AIT were studied samples collected in April and September 2013, chemical analysis of metals, ammonia, hydrocarbons and pesticides were performed in the last month. The duration of the test was 72 h. The feeding test using microalgae Chaetoceros gracilis and Thalassiosira fluviatilis with and without addition of fish ration showed the worst performance of T. fluviatilis as food. It was observed that the development C. gracilis concentrations above 2.5 x 105 cells mL-1 were significantly higher than control (sea water without the addition of food) when the temperature of 28 °C after 72 h. However, at 25 °C after 72 h, only at concentrations of 5.5 x 105 cells mL-1 C. gracilis, the development nauplii to copepodites were higher than the control, indicating that the temperature of 28 °C promotes further development. Then, the following conditions were established for the protocol: C. gracilis at 2.5 x 105 cells mL-1 as food, incubation at 28 °C and 72h duration. After the seven sensitivity tests were estimated CE50/72h, CL50/72h and NOEC of 3.25 ± 0:59; 3.46 ± 0.72 and 2.0 mg L -1 for ZnSO4.7H2O, indicating that the nauplii of T. biminiensis are as sensitive as other copepods employed in ecotoxicological studies. Was detected sub-lethal toxicity of surface water samples for the nauplii of T. biminiensis, more associated to September, early dry season. Among the parameters evaluated, inhibition was the most indicated toxicity, followed by the development. Despite obtaining measurements of the total length and head (general and by stage of copepodites) and the frequency of stages reduce the practicality of the method, one of the points, they increased the detection of toxic effects. The TIE study indicated that mainly organic compounds, metals and ammonia would be the toxicity agents of Suape waters, this characterization is considered complex. In chemical analysis, the HAPDDs were at sublethal levels, the pesticides were not detected and concentrations of Fe decreased after Ulva sp. The addition of new parameters in the test Nauplii T. biminiensis was important to confirm the results obtained. The variety of toxic agents can be attributed to the diversity of activities in the area, the different influences suffered by points studied and rainfall, tides and currents, indicating the need for constant monitoring and evaluation of environmental conditions in the region.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-20T11:52:01Z No. of bitstreams: 1 Renata Cristina da Penha Franca.pdf: 1679353 bytes, checksum: 9703d2a013a1d783ae4e0d394ef6d0f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T11:52:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renata Cristina da Penha Franca.pdf: 1679353 bytes, checksum: 9703d2a013a1d783ae4e0d394ef6d0f9 (MD5) Previous issue date: 2007-05-08 / Tisbe biminiensis is a potential live prey for many species of aquatic animals since its nutritional value is better than those found in other feed organisms commonly used in crustacean and fish larvivultures. Live food seems to be a source of exogenous enzymes which eases food digestion of fish and crustacean early life stages. The aim of this work was to study alkaline proteases from the harpacticoida copepod Tisbe biminiensis by evaluating the effects of pH, temperature and specific inhibitors on the proteolytic activity. Proteases were also studied by SDS-PAGE and zymograms. Crude extract from T. biminiensis showed a total proteolytic activity of 0.39 mU/mg of protein and tryptic activity of 2.33 mU/mg. Optima pH and temperature were 9.0 and 55oC, respectively. The enzymes were thermostable at temperature ranging from 25 to 50oC. The enzymatic activity was strongly inhibited by the trypsin specific inhibitors TLCK (100%), SBTI (100%) and benzamidine (91%).However, EDTA, PMSF and b mercaptoethanol caused only a slight inhibition (35, 35 and 7%, respectively). The results show that alkaline proteases are present on crude extract of Tisbe biminiensis. The highest effects of trypsin inhibitors on enzyme activity suggest that this enzyme plays an important role in protein digestion. T. biminiensis is an important source of live prey to fish and crustacean larvae in nature and partially replace others live food commonly used in aquaculture because they contribute with both exogenous enzymes for the digestion processes and other nutrients required during development of aquatic animals and contribute to development of aquaculture. / Os copépodos harpacticóides são microcrustáceos que servem como alimento vivo preferencial na natureza para diversas espécies de larvas de organismos aquáticos sendo nutricionalmente superiores quando comparados a outros alimentos vivos comumente utilizados nas larviculturas. O alimento vivo é uma importante fonte de enzimas exógenas que contribui para o processo digestivo dessas larvas que por não estarem com o sistema digestivo completamente formado, dependem das enzimas provenientes do alimento vivo para um melhor aproveitamento dos ingredientes da dieta,apresentando consequentemente melhores desempenhos na taxa de crescimento e sobrevivência. Este trabalho teve como objetivo caracterizar as proteases alcalinas do copépodo harpacticóide Tisbe biminiensis através de parâmetros cinéticos e físico-químicos como: pH e temperatura ótima, efeito de inibidores, estabilidade térmica, além da caracterização eletroforética por SDS-PAGE e zimograma. O extrato bruto do T. biminiensis apresentou uma atividade proteolítica total de 0,39 U/mg de proteínas sendo a atividade tríptica de 2,33 U/mg. A atividade enzimática apresentou uma temperatura ótima de 55ºC e pH ótimo de 9,0 e mostrou-se estável termicamente no intervalo de 25 a 50ºC. A atividade enzimática foi fortemente inibida por inibidores específicos de tripsina, TLCK (100±1%), SBTI (100±2%), benzamidina (91±10%), e não houve inibição significativa com os inibidores: EDTA (35±1%), PMSF (35±1%), b- mercaptoetanol (7±11%). Estes resultados demonstraram que a principal protease alcalina presente no extrato bruto do T. biminiensis foi a tripsina, exercendo importante papel na digestão protéica destes animais e este copépodo pode contribuir como fonte de enzimas exógenas para o processo digestivo nas larvas de organismos aquáticos.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:05:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1797_1.pdf: 494985 bytes, checksum: 49085c55ca04e2212bd3d03cd5d25893 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / Este trabalho teve como objetivos desenvolver técnicas de cultivo em massa do copépodo Tisbe biminiensis em volumes de 5 litros e avaliar o seu desempenho como substituto da Artemia na larvicultura do camarão Macrobrachium rosenbergii. O cultivo do copépodo foi realizado em caixas plásticas (32 x 47 x 14,5 cm) munidas de aeração, com 5 litros de água do mar filtrada, sob temperatura ambiente e salinidade de 35°/oo. O alimento fornecido diariamente foi ração para peixes de aquário e a cada dois dias, nas trocas de água, 500ml das diatomáceas Phaeodactylum tricornutum ou Thalassiosira fluviatilis. Em todos os experimentos o número de copépodos foi estimado por subamostragem. O teste de desempenho do copépodo na larvicultura do M. rosenbergii foi realizado com quatro réplicas para cada um dos cinco tratamentos: 0, 25, 50, 75 e 100% de introdução de copépodo. Os resultados obtidos demonstraram que a coleta semanal de prole e a presença de sedimento arenoso não afetaram o crescimento dos copépodos. Os testes de sustentabilidade dos cultivos demonstraram que T. biminiensis cresceu bem em laboratório mantendo altas densidades por períodos de até 130 dias. O sistema de cultivo produziu uma média de 28.000indivíduos/l/dia A população de copépodos se recuperou 4 dias após a retirada da prole. A substituição da Artemia pelo T. biminiensis não foi favorável a M. rosenbergii, porém as altas mortalidades observadas no controle indicam algum tipo de problema no sistema de cultivo que pode ter influenciado os resultados