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DETERMINAÇÃO QUIMILUMINESCENTE DE IgA SECRETORA EM LEITE MATERNO

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Previous issue date: 2012-08 / CNPQ; CAPES / O aumento na concentração de IgA Secretora em secreções externas é uma importante
ferramenta de diagnóstico para infecções que acometem as mucosas. O uso de metodologia de
imunoquimiluminescência para realizar tal diagnóstico permite uma maior sensibilidade que
os métodos espectrofotométricos tradicionalmente utilizados. Neste trabalho, um ensaio Dotimunoquimiluminescente
(Dot-CLIA) foi proposto para a determinação de IgA Secretora. Os
anticorpos anti-IgAS e anti-IgG-peroxidase foram previamente conjugados com éster de
acridina (AE). Dot-ELISA e Dot-CLIA foram então realizadas aplicando amostras de IgAS
em discos de membranas de nitrocelulose (0,45 μm de diâmetro de poro) e foi medida a
atividade da peroxidase e a quimiluminescência (expressa em unidade relativa de luz; URL),
respectivamente. O complexo ternário formado por IgAS/anti- IgAS-AE/anti-IgG-peroxidase-
AE e o controle (PBS em substituição a IgAS) forneceram valores de 302.255 ± 28.736 RLU
e 8.247 ± 3.479 RLU, respectivamente. Dot-ELISA simultaneamente realizada forneceu cor
marrom pelo complexo ternário e ausência de cor foi observada para o controle. A relação
entre RLU versus quantidade de IgAS utilizando o método proposto mostrou uma curva
hiperbólica. O leite materno sem lipídios e caseína purificado por HPLC apresentou três picos
de proteína e os que correspondiam a IgAS e ao componente secretor livre apresentaram
valores de cerca de 50.000 RLU e 30.000 RLU, respectivamente. Portanto, pode-se concluir
que o ensaio Dot-CLIA é capaz de avaliar quantitativamente e especificamente IgAS em
fluidos biológicos.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/12603
Date08 1900
CreatorsBEZERRA, Ana Katarina Moraes Monteiro
ContributorsCARVALHO JÚNIOR, Luiz Bezerra de
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguageBreton
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
RightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess

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