Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Eosinophils are commonly described as cells from innate immunity that act on parasitic
infections and lung diseases. However, in recent years, new functions are being added to
these cells, among them, the maintenance of reproductive homeostasis. In addition,
since the 1960s, studies have shown the estrogen relationship and the selective
eosinophils migration to the uterus of castrated rats. The elucidation of the mechanism
for the migration of these cells appears to be based on findings showing that the CCR3
receptor and its CCL11 chemokine are expressed in the human endometrium.
Objective: The objective of this study was to evaluate the CCR3 participation in the
eosinophils migration to the uterus of castrated mice, induced by 17-β-estradiol (E2).
Methods: C57/BL6 mice, which received subcutaneous E2 injection, were used to
determine the time and dose response of E2 (times 6, 12, 24 and 48 hours and doses of
0.1, 1, 3, 10, 30, 100 and 300 μg/kg) that promotes uterine weight gain and eosinophil
migration. Subsequently, using the air bubble model, we sought to standardize CCL11-
induced eosinophil recruitment, and the dose of the CCR3 antagonist (SB 328437 at
doses of 1, 3 and 10 mg/kg) which promotes reduction in eosinophils migration. In
addition, in the same model, the effect of the uterine extract with and without the
administration of E2 (at the times of 6, 12 and 24 h) on the leukocyte migration was
evaluated. Finally, an investigation was carried out on the effect of SB 328437 on
uterine weight and eosinophil recruitment. The eosinophil peroxidase (EPO) absorbance
and histology were used to evaluate the eosinophil migration, in which the uterus was
stained with orcein specific for eosinophils. Results: The results demonstrated that the
dose of 100 μg/kg E2 in the 24 hour period promoted a 40% increase in uterine weight,
accompanied by eosinophil migration. In the air bubble model, it was observed that
CCL11 recruited eosinophils, and SB 328437 promoted a 55% reduction in migration of
these cells. The extract of the uterus caused the migration of total and eosinophilic
leukocytes, but there was no difference between the groups with and without the
administration of E2. Corroborating the results of SB 328437 in the air bubble
experiment, the evaluation of its effect on uterine weight and eosinophils recruitment
demonstrated that dose of 3 mg/kg reduced both parameters (approximately 45% and
56%, respectively) when stimulated with E2. The results were analyzed using ANOVA
with Tukey post-test (more than two groups), and t test (two groups). Conclusion:
Based on the results, it was possible to confirm the hypothesis that the CCR3 receptor
participates in the eosinophils migration to the uterus of C57/BL6 mice after E2
induction. Furthermore, it represents an important pathway to be considered in studies
aimed at elucidating mechanisms in in physiological and pathological processes
involving the eosinophils recruitment. / Os eosinófilos são comumente descritos como células pertencentes à imunidade inata
que agem em infecções parasitárias e nas doenças pulmonares. Porém, nos últimos anos,
novas funções estão sendo acrescidas a essas células, dentre as quais, de manutenção da
homeostase reprodutiva. Além disso, desde a década de 60, estudos demonstraram a
relação do estrogênio com a migração seletiva de eosinófilos para o útero de ratas
castradas. A elucidação do mecanismo para a migração dessas células baseia-se em
achados evidenciando que o receptor CCR3 e sua quimiocina CCL11 estão expressos
no endométrio humano. Objetivo: Diante do exposto, o estudo objetivou avaliar a
participação do CCR3 na migração de eosinófilos para o útero de camundongos
castrados, induzida por 17-β-estradiol (E2). Metodologia: Camundongos C57/BL6
receberam a injeção de E2 subcutânea, objetivando determinar o tempo e a dose
resposta do E2 (tempos de 6, 12, 24 e 48 horas e doses de 0,1, 1, 3, 10, 30, 100 e 300
μg/kg) que promove aumento do peso do útero e migração de eosinófilos.
Posteriormente, utilizando o modelo de bolha de ar, buscou-se padronizar o
recrutamento de eosinófilos induzido por CCL11, e a dose do antagonista do CCR3 (SB
328437, nas doses de 1, 3 e 10 mg/kg) que promove redução da migração de
eosinófilos. Ademais, no mesmo modelo, avaliou-se o efeito do extrato do útero com e
sem a administração de E2 (nos tempos de 6, 12 e 24 h), na migração de leucócitos. Por
último, foi realizada uma investigação sobre o efeito do SB 328437 no peso do útero e
no recrutamento de eosinófilos. Para avaliação da migração de eosinófilos foi utilizada a
absorbância da Peroxidase de Eosinófilos (EPO) e a histologia, no qual, os úteros foram
corados com orceína, específico para eosinófilos. Resultados: Os resultados
demonstraram que a dose de 100 μg/kg de E2 no tempo de 24 horas promoveu aumento
de 40% no peso do útero, acompanhado da migração de eosinófilos. No modelo de
bolha de ar, observou-se que a CCL11 recrutou os eosinófilos, e o SB 328437
promoveu redução de 55% na migração dessas células. O extrato do útero provocou a
migração de leucócitos totais e de eosinófilos, porém não houve diferença entre os
grupos com ou sem a administração de E2. Corroborando os resultados do SB 328437
no experimento da bolha de ar, a avaliação do efeito do antagonista no peso do útero e
no recrutamento de eosinófilos, demonstrou que a dose de 3 mg/kg reduziu ambos os
parâmetros (aproximadamente em 45% e 56%, respectivamente) quando estimulados
com E2. Os resultados foram analisados utilizando o ANOVA com pós- teste de Tukey
(mais de dois grupos), e o teste t (em dois grupos). Conclusão: Perante os resultados
encontrados, foi possível confirmar a hipótese de que o receptor CCR3 participa da
migração de eosinófilos para o útero de camundongos C57/BL6, após indução com E2.
Outrossim, representa uma importante via a ser considerada em estudos que visam a
elucidação de mecanismos em processos fisiológicos e patológicos envolvendo o
recrutamento de eosinófilos. / São Cristóvão, SE
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:ri.ufs.br:riufs/6889 |
| Date | 04 August 2017 |
| Creators | Araújo, Jéssica Maria Dantas |
| Contributors | Grespan, Renata |
| Publisher | Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Universidade Federal de Sergipe |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFS, instname:Universidade Federal de Sergipe, instacron:UFS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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