O objetivo do presente estudo foi avaliar as respostas nociceptivas de animais tratados com glutamato monossódico (MSG) e os efeitos produzidos pelo exercício físico crônico [21-60 dias de vida (grupo I) ou de 60 a 90 dias de vida (grupo II)]. As respostas nociceptivas foram testadas após 60 dias de vida (grupo I) ou 90 dias de vida (grupo II), em todos os grupos de ratos usando Von Frey, Placa Quente, Retirada da Cauda. No final do experimento, os ratos foram sacrificados e adiposidade em animais tratados com MSG foi evidenciada a partir do peso da gordura epidídimal e intercostal. Os resultados foram apresentados como média ± erro padrão e analisados pela análise de variância de duas vias seguido pelo pós - teste de Newman Kells. Ao avaliar o estímulo mecânico pelo método Von Frey pode-se observar: Grupo I-animais MSG sedentários apresentaram uma maior resistência quando comparados aos animais controle sedentários (17,258 ± 1,302 g vs 31,132± 1,829 g). Animais MSG submetidos ao exercício físico houve uma recuperação em sua função nociceptiva, quando comparados aos animais MSG sedentários (31,957± 0,972g vs 17,258±1,302g). O Grupo II nota-se uma parcial recuperação da atividade nociceptiva de animais MSG treinados quando comparados animais MSG sedendários (22,128 ±1,186 vs 16,287± 1,205 g ). Os ratos MSG sedentários apresentaram maior resposta de latência para o teste de retirada da cauda e placa quente quando comparados animais controle sedentários.: Retirada de cauda - Grupo I (16.770± 2.283 s vs 12.390± 1.722 s), Grupo II (22,120± 4,976 s vs 14,360± 2,175 s) . Placa quente: Grupo I (18.240± 1.915 s vs 8.535± 2.316 s), Grupo II (16,930± 1,848 s vs 9,532± 2,442 s ) . No entanto, latência retornou aos níveis normais apenas em ratos MSG treinados do grupo I: Retirada de cauda (12,490± 1,405 s), Placa quente (9,603± 1,410s). Os resultados demonstram que a administração de MSG modifica as respostas nociceptivas e parte destas são recuperadas com um treinamento físico na fase juvenil podendo haver uma reativação simpática e proporcionar uma reativação neroanatômica de áreas com atividades parcialmente comprometidas. / The aim of this study was to evaluate the nociceptive responses of animals treated with monosodium glutamate (MSG) and the effects produced by chronic physical exercise [21-60 days of life (Group I) or 60-90 days of life (Group II)]. The nociceptive responses were tested after 60 days of life (Group I) as well as 90 days of life (Group II) in all groups of rats using Von Frey, hot plate and tail flick. In the conclusion of the experiment, the rats were sacrificed and the adiposity in animals treated with MSG was evidenced after to weigh epididimal and intercostal fat. The results were presented as mean ±standard error of the mean and subjected to two-way analysis of variance (ANOVA) followed by Newman Kells. When assessing the mechanic stimulation by Von Frey method it is possible to observe: Group I MSG sedentary animals showed a higher resistance when compared with animals of sedentary control ( 17,258 ± 1,302 g vs 31,132 ± 1, 829 g). MSG animals submitted to physician exercises had recovered the nociceptive function when compared with the MSG sedentary (31,957± 0,972 g vs 17,258± 1,302 g ). In the group II it is possible to notice a partial recuperation of the nociceptive activity of MSG trained animals when compared with MSG sedentary animals (22,128± 1,186 g vs 16,287±1,205g ) but this partial recuperation is explained because the control sedentary animals presents 29,043 ± 1,423 g) p< 0,01. The MSG sedentary rats present higher latency response in the tail flick test: Group I (18.240± 1.915 s vs 8.535± 2.316 s) and Group II(16,930± 1,848 s vs 9,532± 2,442 s ). Hot plate: Group I (18.240± 1.915 s vs 8.535± 2.316 s), Group II(16,930± 1,848 s vs 9,532± 2,442s) when compared with control sedentary animals. However, latency has returned to the normal levels only in the MSG trained rats of group I: tail flick (12,490± 1,405 s), hot plate (9,603± 1,410s). The results have demonstrated that the MSG`s administration can modify the nociceptive responses and part of this responses are recover. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A ativação de receptores adrenérgicos alfa2 do núcleo parabraquial lateral (NPBL) com injeções bilaterais de moxonidina (agonista de receptores adrenérgicos alfa2/imidazólicos) induz um potente aumento da ingestão de NaCl 0,3 M e água induzidos pelo protocolo de desidratação extracelular FURO/CAP [diurético furosemida (10 mg/kg) combinado a uma baixa dose do inibidor da enzima conversora de angiotensina captopril (5 mg/Kg)]. Estudos prévios demonstraram também que o NPBL está envolvido na modulação das respostas renais e hormonais em situações de hiperosmolaridade e expansão isotônica de volume. Entretanto, os efeitos da moxonidina no NPBL sobre as respostas renais e hormonais e os parâmetros cardiovasculares ainda não haviam sido estudados em ratos submetidos à desidratação extracelular, com e sem acesso a ingestão de água e de sódio. Ratos Wistar (290- 320g) com cânulas implantadas bilateralmente em direção ao NPBL foram submetidos ao tratamento FURO/CAP 45 minutos antes da administração de injeções bilaterais de moxonidina (0,5 nmol/0,2 μl) ou veículo no NPBL. Após 15 min iniciou-se a coleta de urina para avaliar a excreção de sódio e volume urinário durante 2 horas. Em outro experimento, os ratos foram mantidos com livre acesso à água e NaCl 0,3 M durante o período de coleta de urina. Outro grupo de ratos tratados com FURO+CAP sc recebeu sobrecargas intragástricas de soluções de concentrações semelhantes a da mistura de água e de NaCl 0,3 M ingerida pelos ratos tratados com moxonidina no NPBL (6 ml de NaCl 0,17 M cada sobrecarga aos 20 e 35 min e 9 ml de NaCl 0,13 M aos 45 min após as injeções no NPBL, respectivamente), ao invés do livre acesso a água e sódio durante a coleta de urina. Injeções bilaterais de moxonidina no NPBL não alteraram a excreção de sódio (488 ± 135, vs. veículo: 376 ± 75 μEq/1 h) ou o volume urinário (2,5 ± 0,7, vs. veículo: 2,5 ± 0,3 ml/1 h) em animais desidratados sem acesso aos líquidos. Quando os ratos tiveram livre acesso à água e sódio, a moxonidina no NPBL promoveu um aumento da ingestão de NaCl 0,3 M (18,83 ± 2,69, vs. veículo 1,68 ± 0,79 ml/2 h) e de água (17,47 ± 1,33 vs. veículo 8,63 ± 1,68 ml/2 h) e um aumento do volume urinário (7,38 ± 1,06 vs. veículo 3,13 ± 0,56 ml/2 h) e excreção urinária de sódio (1277,3 ± 237,85 vs. veículo 462,88 ± 84,27 μEq/ 2 h). Esse aumento da ingestão de água e de sódio não foi compensado pelo aumento da diurese e natriurese, resultando assim num balanço positivo de sódio e de água. Contudo, no grupo de animais tratados com FURO+CAP que receberam a reidratação através das sobrecargas intragástricas, moxonidina injetada no NPBL diminuiu a excreção de sódio (462 ± 127, vs. veículo: 888 ± 122 μEq/1 h) e o volume urinário (2,5 ± 0,5 vs. veículo: 4,5 ± 0,5 ml/1 h) em comparação aos ratos que receberam veiculo no NPBL. Para estudar se a moxonidina poderia alterar os níveis plasmáticos de vasopressina (AVP) e ocitocina (OT) durante a desidratação extracelular, ratos Wistar com cânulas implantadas bilateralmente em direção ao NPBL foram submetidos ao tratamento FURO/CAP 45 minutos antes da administração de injeções bilaterais de moxonidina (0,5 nmol/0,2 μl) ou veículo no NPBL. Após 15 min, foram oferecidos a um grupo de animais água e NaCl 0,3 M por 30 min, enquanto outro grupo permaneceu sem acesso aos mesmos. Os animais foram decapitados 45 min após o tratamento no NPBL. Foi verificado um aumento nos níveis plasmáticos de AVP nos animais tratados com FURO/CAP com injeções de moxonidina no NPBL que não tiveram acesso aos líquidos, enquanto que esse aumento de AVP não foi mais observado quando os ratos tiveram livre acesso ao sódio e água. Não foram observadas alterações nos níveis plasmáticos de OT entre os diferentes tratamentos estudados. Análise dos parâmetros cardiovasculares em protocolos semelhantes aos realizados nos experimentos anteriores mostrou que a moxonidina não alterou a pressão arterial nos ratos desidratados sem acesso a água e NaCl 0,3 M, enquanto que em ratos com livre acesso a água e sódio ocorreu um aumento da pressão arterial média (PAM) em relação ao basal. Esses resultados sugerem que a grande ingestão de sódio observada pelos ratos desidratados tratados com moxonidina não é devido a grandes alterações na PAM, mas que o comportamento ingestivo aumentado pode influenciar os níveis de PAM. Em suma, os presentes resultados mostram que a injeção de moxonidina do NPBL promove um aumento da ingestão e diminuição da excreção de água e de sódio, sugerindo que os receptores adrenérgicos alfa2/imidazólicos deste núcleo ativariam mecanismos que facilitariam a retenção de sódio e água e a expansão de volume dos líquidos corporais durante uma desidratação extracelular. / Alpha2 adrenergic receptor activation with bilateral injections of moxonidine into the lateral parabrachial nucleus (LPBN) strongly increases 0.3 M NaCl intake by rats treated with the diuretic furosemide (FURO, 10 mg/kg b.w.) combined with low dose of the angiotensin converting enzyme inhibitor captopril (CAP, 5 mg/kg b.w.) injected subcutaneously (sc). Previous studies have shown that the LPBN participates in the modulation of renal and hormonal responses during increased plasma osmolarity and isotonic volume expansion. However, the effects of LPBN moxonidine injection on urinary volume and sodium excretion, hormonal responses and cardiovascular changes were not yet evaluated in fluid depleted rats, with or without free access to fluids. Male Wistar rats (290-310 g) with bilateral stainless steel guide-cannulas implanted into the LPBN were treated with sc FURO + CAP 45 min before bilateral injections of vehicle or moxonidine (0.5 nmol/0.2 ìl) into the LPBN. Urine collection started 15 min after LPBN injections and sodium excretion and urinary volume were evaluated for 2 hours, with or without free access to water and sodium during this period. Another group of FURO + CAP-treated rats received intragastric loads of NaCl solutions at concentrations similar to the mix of water and 0.3 M NaCl ingested by rats treated with FURO + CAP and moxonidine into the LPBN (6 ml of 0.17 M NaCl each load at 20 and 35 min and 9 ml of 0.13 M NaCl at 45 min after LPBN injections), instead of free access to water and sodium during urine collection. Bilateral injections of moxonidine into the LPBN did not change sodium excretion (488 ± 135, vs. vehicle: 376 ± 75 ìEq/1 h) or urinary volume (2.5 ± 0.7, vs. vehicle: 2.5 ± 0.3 ml/1 h) in fluid depleted rats without access to fluids. When rats had available water and sodium, moxonidine into the LPBN increased sodium (18.83 ± 2.69, vs. vehicle 1.68 ± 0,79 ml/2 h) and water intake (17.47 ± 1.33 vs. vehicle 8.63 ± 1.68 ml/2 h) and also sodium excretion (1277.3 ± 237.85 vs. vehicle 462.88 ± 84.27 ìEq/2 h) and urinary volume (7.38 ± 1.06 vs. vehicle 3.13 ± 0.56 ml/2 h). This increase in ingestion was not counterbalanced by the excretion, thus resulting in a positive sodium and water balance. However, moxonidine injected into the LPBN decreased sodium excretion (462 ± 127, vs. vehicle: 888 ± 122 ìEq/1 h) and urinary volume (2.5 ± 0.5, vs. vehicle: 4.5 ± 0.5 ml/1 h) in fluid depleted rats that received fluid loads. In order to evaluate if moxonidine into the LPBN could change arginine vasopressin (AVP) and oxytocin (OT) plasma levels, male Wistar rats were treated with sc FURO + CAP 45 min before bilateral injections of vehicle or moxonidine (0.5 nmol/0.2 ìl) into the LPBN. Fifteen minutes later, some rats had 30 min-period free access to water and 0.3M NaCl while others were maintained without access to fluids during the same period. Blood samples were collected 45 min after LPBN treatment. The results show that plasma levels of AVP are increased in FURO+CAP- treated rats with moxonidine into LPBN and no access to fluids, but not when the rats had access to fluids. There are no changes in OT plasma levels among the different treatments. Analysis of the cardiovascular parameters in similar protocols shows that moxonidine did not change mean arterial pressure (MAP) in rats without access to fluids, while in rats with free access to water and sodium, moxonidine increased MAP when compared to basal levels. This result suggests that the increase in water and sodium intake is not due to important changes in MAP in rats treated with moxonidine, but that the increased ingestive behavior may affect MAP. Therefore, present results suggest that moxonidine injected into the LPBN in fluid depleted rats produces strong 0.3 M NaCl and water intake and decreases renal sodium excretion and urinary volume, suggesting that moxonidine into this area activates mechanisms that facilitate sodium/water retention and body fluid volume expansion during extracellular dehydration. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Embora a obesidade possa levar a mudanças no limiar de dor, o mecanismo pelo qual isto ocorre não é bem compreendido. Com as recentes descobertas das propriedades do tecido adiposo branco de secretar substâncias com relevantes efeitos biológicos, seu papel endócrino assumiu grande importância. A ocorrência e a magnitude da dor e do quadro inflamatório podem estar relacionadas a mudanças endócrinas causadas pela obesidade, entre as quais se destacam as alterações nos níveis de citocinas inflamatórias, leptina, grelina e opióides endógenos, entre outros. Por esta razão, o objetivo deste estudo foi avaliar, através de testes de nocicepção aguda, como Placa Quente, Retirada de Cauda, teste Von Frey eletrônico e avaliação do Edema de Pata por Pletismometria, as diferenças no limiar nociceptivo e perfil inflamatório, entre os animais que tiveram obesidade induzida por dieta hipercalórica (grupo HD) e os animais alimentados com dieta controle (grupo CD) a partir da quarta semana de vida, durante 16 semanas. Além destes, foram realizados também testes de comportamento, como Labirinto em Cruz Elevado e teste de Campo Aberto, para avaliação de ansiedade e movimentações no aparato, entre os grupos. Parâmetros metabólicos, como Índice de Lee, glicemia de jejum, triglicerídeos e proteínas séricas foram avaliados e as gorduras perigonadal e retroperitoneal foram excisadas e pesadas para caracterização da obesidade experimental, em ambos os grupos. Nossos resultados demonstram que os parâmetros metabólicos e o peso das gorduras perigonadal e retroperitoneal foram maiores no grupo HD que no grupo CD, mostrando que a dieta hipercalórica foi efetiva em induzir obesidade no grupo HD. Nos testes de nocicepção aguda, a Retirada de Cauda não mostrou diferença entre os grupos, enquanto que, no teste de Placa Quente, o grupo HD mostrou menor período de latência em segundos para reação que o grupo CD, após aplicação intraplantar de carragenina em comparação ao grupo controle (salina). Também foi demonstrado que os animais do grupo HD tiveram maior hipernocicepção mecânica e maior edema de pata, após aplicação de carragenina. Na avaliação dos testes de comportamento não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos. Os experimentos foram desenvolvidos no Instituto de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Alfenas. / Although obesity can lead to changes in pain threshold, the mechanism by which this occurs is not well understood. With the recent discoveries of the properties of white adipose tissue to secrete substances with important biological effects, endocrine role has assumed greater importance. The occurrence and magnitude of pain and inflammation may be related to endocrine changes caused by obesity, among which we highlight the changes in the levels of inflammatory cytokines, leptin, ghrelin and endogenous opioids, among others. For this reason, the objective of this study was to evaluate, through tests of acute nociception, such as Hot Plate, Tail Withdrawal, electronic Von Frey test and evaluation of Paw Edema by Pletismometry, differences in nociceptive threshold and inflammatory profile, between animals that had high-calorie diet-induced obesity (HD group) and animals fed a control diet (CD) from the fourth week of life, for 16 weeks. In addition, behavioral tests were also performed, such as Elevated Plus Maze and Open Field test to evaluate anxiety and movement in the apparatus, between the groups. Metabolic parameters, such as Lee Index, fasting glucose, triglycerides and serum proteins were evaluated and perigonadal and retroperitoneal fat were excised and weighed to the characterization of experimental obesity in both groups. Our results demonstrate that metabolic parameters and weight of perigonadal and retroperitoneal fat were higher in HD than in group CD, showing that high calorie diet was effective in inducing obesity in the HD group. In tests of acute nociception, the Tail Withdrawal showed no difference between groups, while in the Hot Plate test, the HD group showed a shorter latency period in seconds for the CD group reaction after application intraplantar carrageenan compared the control group (saline). It was also shown that animals of the HD group had a greater mechanical hypernociception and a grea paw edema after carrageenan application. In the assessment of behavioral tests were not significant differences between groups. The experiments were conducted at the Institute of Biological Sciences, Federal University of Alfenas. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Comportamento doentio (sickness behavior) é a expressão usada para definir o conjunto das alterações comportamentais que são desencadeadas durante um processo infeccioso. Além disso, estas alterações são consideradas como respostas adaptativas do animal com a finalidade de combater a infecção, propiciando desta forma, um ambiente apropriado ao estabelecimento de uma resposta imune eficaz e desfavorável ao patógeno. Diversos estudos tem abordado os efeitos pleiotrópicos da sinvastatina, isto é, efeitos que estão além de sua função hipocolesterolêmica. Dentre estes efeitos, podemos citar sua ação antioxidante, anti-inflamatória, imunomoduladora e antitrombogênica. Partindo dessas assertivas, o intuito deste trabalho foi investigar a influência da sinvastatina sobre o comportamento doentio. Inicialmente, testamos as doses de 100, 200 e 500 µg/Kg de lipopolissacarídeo (LPS), 2, 6 e 24 horas após a aplicação. Feito isso, os camundongos Swiss foram pré-tratados durante sete dias com veículo ou Sinvastatina 10 mg/Kg ou Sinvastatina 40 mg/Kg através de gavagem (p.o.) e no oitavo dia, receberam a dose de 200 µg/kg de LPS ou solução salina (i.p.) e as respostas comportamentais foram avaliadas após 2 horas. Nos camundongos pré-tratados com a sinvastatina 10 mg/Kg, não observamos diferença significativa em relação ao grupo veículo+LPS em nenhum dos aparatos e parâmetros analisados. Contudo, nos animais pré-tratados com a sinvastatina 40 mg/Kg observou-se redução do tempo de latência e aumento no número de cruzamentos e do tempo de permanência no lado claro no Teste Claro-Escuro, diminuição do número de floatings no Nado Forçado e do tempo de imobilidade no Teste de Suspensão pela Cauda e aumento do número de cruzamentos centrais, periféricos e totais e de rearings no Teste de Campo Aberto. Quanto aos níveis séricos das citocinas dosadas, notamos que o pré-tratamento com a sinvastatina nas doses de 10 e 40 mg/Kg, não foi capaz de atenuar o aumento de TNF-α induzido pelo LPS, todavia, as concentrações plasmáticas de IL-1β, apresentaram-se aumentadas com o pré-tratamento com a sinvastatina 10 mg/Kg e reduzidas quando os animais foram pré-tratados com a sinvastatina 40 mg/Kg. Na telemetria, pudemos notar uma hipotermia branda seguida de febre em animais que receberam veículo+LPS e sinvastatina 10+LPS. Já em animais que receberam sinvastatina 40+LPS, observamos a hipotermia, porém não seguida de quadro febril. Estes resultados demonstram que o pré-tratamento com a sinvastatina 40 mg/Kg (durante 7 dias), antes de aplicação i.p. de LPS, é capaz de modificar as respostas comportamentais ao desafio imunológico, sugerindo que este fármaco influencia a manifestação do comportamento doentio durante a endotoxemia. / Sickness behavior is the term used to define the set of behavioral changes that are triggered during an infectious process. Furthermore, these changes are considered the animal's adaptive responses in order to fight the infection, providing thereby an environment suitable for the establishment of an effective and unfavorable immune response to the pathogen. Several studies have addressed the pleiotropic effects of simvastatin, ie, effects that are beyond their hypocholesterolemic function. Among these effects, we can mention its antioxidant, anti-inflammatory, immunomodulatory and anti-thrombogenic action. Based on these assertions, the aim of this study was to investigate the influence of simvastatin on the sickness behavior. Initially, we tested doses of 100, 200 and 500 ug / kg of lipopolysaccharide (LPS), 2, 6 and 24 hours after application. Then, the Swiss mice were pre-treated for seven days with vehicle or Simvastatin 10 mg/kg or Simvastatin 40 mg/kg via gavage (p.o.) and on the eighth day, they received a dose of 200 µg/kg LPS or solution saline (i.p.) and behavioral responses were evaluated after 2 hours. In mice pretreated with simvastatin 10 mg/kg, no significant difference from the vehicle+LPS group in any of the apparatuses and analyzed parameters. However, in animals pretreated with simvastatin 40mg/kg there was a reduction of latency and increase in the number of crossings and the time spent in the light side in Bright-Dark Test, decreased floatings number in Forced Swimming and the immobility time in Tail Suspense Test and increased number of central, peripheral and total crossings and rearings in Open Field Test. The serum levels of the measured cytokines, we note that pre-treatment with simvastatin at doses of 10 and 40 mg/kg, was not able to attenuate the increase in TNF-α induced by LPS, however, the plasma concentrations of IL- 1β showed increased up to the pre-treatment with simvastatin 10 mg/kg and reduced when animals were pre-treated with simvastatin 40 mg/kg. In telemetry, we noticed a mild fever followed by hypothermia in animals that received LPS+vehicle and simvastatin 10+ LPS. Already in animals that received simvastatin 40+LPS, hypothermia observed but is not followed by fever. These results demonstrate that pre-treatment with simvastatin 40mg/kg (for 7 days) before application i.p. LPS is able to modify the behavioral responses to immune challenge, suggesting that this drug influences the manifestation of sickness behavior during endotoxemy. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O câncer de mama é o tipo mais frequente de neoplasia entre mulheres em todo o mundo e a taxa de mortalidade no Brasil ainda é alta. Os fármacos utilizados nos tratamentos convencionais, em geral, são tóxicos e, muitas vezes, induzem resistência nas células tumorais. Dessa forma, é extremamente importante identificar compostos com atividade antitumoral que possam melhorar as propostas terapêuticas contra o câncer de mama. A 7-epiclusianona é uma benzofenona tetraprenilada isolada a partir da fração hexânica do extrato bruto de Garcinia brasiliensis. Estudos mostraram que 7-epiclusianona apresenta diferentes propriedades biológicas, as quais incluem atividade antimicrobiana, anti-espasmódica, leishmanicida, anti-inflamatória e analgésica. Além disso, estudo prévio mostrou que o referido composto inibe a taxa de proliferação de linhagens celulares derivadas de cânceres humanos. Assim sendo, o objetivo do presente estudo foi analisar os efeitos citotóxicos e/ou antiproliferativo da 7-epiclusianona sobre linhagens celulares derivadas de carcinomas de mama humana. Os resultados mostraram que a 7-epiclusianona reduz a viabilidade celular nas linhagens MCF-7 e Hs 578T, sendo esse efeito dependente da concentração usada e do tempo de tratamento. A atividade antiproliferativa do composto sobre as linhagens estudadas está relacionada à sua capacidade de bloquear o ciclo celular na transição G1/S, enquanto a atividade citotóxica está relacionada ao seu potencial pró-apoptótico. 7-epiclusianona reduziu os níveis de RNA mensageiro para as ciclinas D1 e E na linhagem MCF-7, enquanto que, na Hs 578T, houve redução apenas nos níveis de expressão de ciclina E. Em conjunto, os dados obtidos consistentemente mostraram que 7-epiclusianona apresenta importante atividade antitumoral in vitro contra células derivadas de mama e abrem perpectivas para o uso desse composto em estudos in vivo que possam comprovar sua atividade antineoplásica para o câncer de mama. / Breast cancer is the most common type of cancer among women worldwide and its mortality rate is still high in Brazil. The drugs used in conventional treatments are generally toxic and often induce to tumor cells resistance. Thus, it is extremely important to identify compounds with antitumor activity that can improve the therapeutic approaches against breast cancer. 7-epiclusianone is a tetraprenyladed benzophenone isolated from the hexane extract of Garcinia brasiliensis. Studies have shown that 7-epiclusianone has different biological properties, which include antimicrobial, anti-spasmodic, leishmanicide, anti-inflammatory and analgesic activities. Futhermore, a previous study showed that this compound inhibits the proliferation rate of cell lines derived from human cancers. Therefore, the aim of this study was to analyze the cytotoxic and/or antiproliferative effects of 7-epiclusianone on human breast carcinoma cell lines. Results showed that 7-epiclusianone reduces the cell viability of MCF-7 and Hs 578T lines in a time and concentration dependent manner. Antiproliferative activity of this compound on studied cell lines are relates to its ability to inducing cell cycle arrest in G1/S transition, while the cytotoxic activity was attributed, at least in part, to its pro-apoptotic potential. 7-epiclusianone reduced the mRNA levels of both cyclins D1 and E in MCF-7, but only cyclin E expression was downregulated in Hs 578T. Taken toghether, the data consistently showed that 7- epiclusianone has an important antitumor activity against human breast carcinoma cell lines and open up the prospect of using this compound in further anticancer in vivo studies to confirm its antineoplastic activity against breast cancer.

O ambiente perinatal é crucial para a programação metabólica e hormonal e a qualidade deste ambiente em roedores tem consequências fisiológicas e comportamentais em longo prazo. Condições desfavoráveis no período perinatal, época em que ocorre o desenvolvimento do sistema regulador do balanço energético podem reprogramar o metabolismo e ajustá-lo nesta condição por toda a vida. Um dos modelos experimentais de programação neonatal é obtido por meio da redução de ninhada, em que ninhadas são padronizadas para três ou quatro filhotes por mãe. O maior aporte nutricional em períodos precoces de desenvolvimento promove uma programação metabólica e os efeitos desta programação podem se estender durante toda a vida, com a sobrenutrição pós-natal levando à obesidade na vida adulta. Uma vez que os tecidos adiposos subcutâneo e abdominal são descritos como tecidos ativos na regulação de processos fisiológicos e patológicos, incluindo imunidade e inflamação torna-se importante avaliar se a sobrealimentação e o sobrepeso advindos da redução do tamanho da ninhada levam a alterações nas respostas comportamentais e inflamatórias em filhotes adultos. Em resposta ao lipopolissacarídeo, ratos machos adultos com sobrepeso de nosso estudo exibiram uma exacerbação das respostas comportamentais e aumento da febre, além de aumento nos níveis plasmáticos de corticosterona e de citocina pró-inflamatória IL-1β. Em conclusão, nossos resultados demonstram que o sobrepeso e suas consequências interferem na capacidade destes animais de reagirem ao desafio imunológico. Os experimentos foram desenvolvidos no Laboratório de Ciências Biomédicas da Universidade Federal de Alfenas. / The perinatal environment is crucial for metabolic and hormonal programming and the quality of the environment in rodents have physiological and behavioral consequences in long-term. Adverse conditions in the perinatal period, a time when there is the development of the regulatory system of energy balance can reprogram metabolism and adjust it in this condition for life. One of the experimental models of neonatal programming is obtained by reducing litter, where litters are standardized for three or four pups per mother. The largest nutritional supply in early periods of development promotes a metabolic programming and the effects of this program can extend throughout life, with the postnatal overnutrition leading to obesity in adulthood. Since subcutaneous and abdominal adipose tissues are described as active tissues in the regulation of physiological and pathological processes including immunity and inflammation it becomes important to evaluate if the overfeeding and overweight arising from reduction in litter size lead to changes in the behavioral and inflammatory responses in adult offspring. In response to lipopolysaccharide, overweight adult male rats of this study exhibited an exacerbation of behavioral responses and increase of fever besides an increased plasma levels of corticosterone and IL-1β proinflammatory cytokine. In conclusion, our results show that overweight and its consequences interfere with the ability of these animals to respond to immune challenge. The experiments were developed in the Biomedical Sciences Laboratory of the Federal University of Alfenas. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Submitted by Maria Cristina (library@lncc.br) on 2015-10-06T18:17:45Z No. of bitstreams: 1 Tese_Fernanda_Guedes.pdf: 14236831 bytes, checksum: f93e5c5d35139d93616f11dfb65f05f6 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Cristina (library@lncc.br) on 2015-10-06T18:18:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_Fernanda_Guedes.pdf: 14236831 bytes, checksum: f93e5c5d35139d93616f11dfb65f05f6 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-06T18:18:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Fernanda_Guedes.pdf: 14236831 bytes, checksum: f93e5c5d35139d93616f11dfb65f05f6 (MD5) Previous issue date: 2015-05-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Plants are frequently attacked by herbivores and pathogens. Plant defense response against pathogens aims to block their proliferation and colonization, and also impart long-term resistence. Rubber tree (Hevea spp), which is an outstanding latex productor, is strongly affected by the fungus Pseudocercospora ulei, that causes South American Leaf Blight (SALB), a disease that affects young leaves and is the main threat to rubber tree plantations. Some rubber tree genotypes are resistant while others are susceptible to SALB. So, the main goals of this work were increase our knowledge about Hevea response to fungal attack and find genes potencially involved with resistance. These were achieved by analysis of leaf transcriptome and interactome of different Hevea genotypes. NGS Sequencing and leaf transcriptome assembly of three resistant genotypes (F4542 - H.benthamiana, PA31 - H.pauciflora, MDF180 - H.brasiliensis) and one susceptible (PB314 -H.brasiliensis) at inoculated and non-inoculated conditions generated 50.239 contigs. Approximately 75% (33.988) of rubber tree contigs had some functional annotation. Similarity percentual found among the inoculated transcriptomes of the four genotypes (37% of contigs) suggests that rubber tree resistance to SALB is caused mainly by regulation of gene expression. Analysis of transcripts levels in inoculated and non-inoculated conditions of resistant genotypes indicates changes induced by fungal pathogen in expression profile of F4542 and PA31 are smaller than MDF180, a result compatible with observed lesions. Differencial expression analysis showed 1.795 differentially expressed contigs. Despite only 22% (10.138) of Hevea contigs had orthologs with Arabidopsis thaliana sequences, the first Hevea interactome was constructed based on interologs. Rubber tree protein-protein network, formed by 5.382 proteins and 72.702 interactions, shows features commonly observed in other biological networks like power law degree distribution and small-world-ness, also presenting some particularities. Modularity was also observed in Hevea interactome and funcional modules identified were involved with different biological process like metabolism, transcription and translation, signal transduction, response to hormone and stress. Multiple-criteria selection based in protein function, presence in resistant genotypes, expression profile and topological features resulted in 30 sequences potencially involved to defense response and resistance of Hevea spp to pathogenic fungus P.ulei. These sequences are target to experimental validation and to create resistant rubber tree cultivars. / Plantas são alvos frequentes de herbívoros e patógenos. As diferentes estratégias vegetais de defesa contra patógenos visam impedir sua proliferação e a colonização, além de conferir resistência de longa duração. A seringueira (Hevea spp), que se destaca por sua produção de borracha natural, é bastante afetada pelo fungo Pseudocercospora ulei, causador do Mal-das-folhas, uma doença que atinge folhas jovens e representa a principal ameaça a plantações de seringueira. Existem alguns genótipos de seringueira resistentes e outros suscetíveis ao Mal-das-folhas. Assim, os objetivos principais deste trabalho são ampliar o conhecimento sobre a resposta da seringueira ao ataque do fungo causador do Mal-das-folhas e buscar genes potencialmente envolvidos com sua resistência através da análise do transcriptoma e do interatoma de folhas de diferentes genótipos de Hevea spp. O sequenciamento NGS e montagem do transcriptoma da folha de três genótipos resistentes (F4542 - H.benthamiana, PA31 - H.pauciflora, MDF180 - H.brasiliensis) e um suscetível (PB314 - H.brasiliensis), nas condições inoculado e não-inoculado com Pseudocercospora ulei, geraram um total de 50.239 contigs. Cerca de 75% (33.988) dos contigs de seringueira tiveram alguma anotação funcional. O percentual de similaridade encontrado na composição do transcriptoma inoculado dos quatro genótipos (37% dos contigs) sugere que a resistência da seringueira ao Mal-das-Folhas é causada principalmente pela regulação dos níveis de expressão gênica. A análise dos níveis dos transcritos nas condições inoculada e não-inoculada dos genótipos resistentes indicam também que as mudanças induzidas pelo patógeno no perfil de expressão do transcriptoma de F4542 e PA31 são menos pronunciadas do que em MDF180, um resultado compatível com as lesões observadas. A análise de expressão diferencial revelou um total de 1.795 contigs diferencialmente expressos nos genótipos estudados. Apesar de apenas 22% (10.138) dos contigs de seringueira terem ortólogo com sequências de Arabidopsis thaliana, foi construído o primeiro interatoma de seringueira a partir dos interólogos desta espécie modelo. A rede proteína-proteína de seringueira, formada por 5.382 proteínas e 72.702 interações entre elas, apresenta características comumente encontradas em outras redes biológicas como a distribuição de conectividade segundo lei de potência e rede do tipo ``mundo pequeno'', apresentando também algumas particularidades. Foi observada a modularidade no interatoma de Hevea, com a detecção de módulos funcionais envolvidos em diferentes processos biológicos como metabolismo, transcrição e tradução, transdução de sinais, respostas a hormônios e estresse. A associação de critérios como a função da proteína, sua presença nos genótipos resistentes, seu perfil de expressão e posicionamento nas redes de seringueira permitiu a seleção de 30 sequências potencialmente envolvidas com a resposta de defesa e resistência da seringueira ao patógeno P.ulei, que constituem alvos de comprovação experimental e melhoramento para criar cultivares resistentes.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseJFBM.pdf: 437107 bytes, checksum: 08c2de3a2538fc51bd31b85f9438b7cb (MD5) Previous issue date: 2004-03-29 / Universidade Federal de Minas Gerais / This work was done at the Laboratório de Bioquímica Adaptativa, Departamento de Genética e Evolução, UFSCar, and at the Laboratório de Bioquímica e Biologia Molecular da Universidade de Barcelona. We proposed studying digestive and metabolic features of fasted juveniles jundia Rhamdia quelen and fed on 20, 27 34 and 41% of protein in isocaloric diets. It was studied the hematological parameters, the immune system, the weight gain, the metabolic intermediates (glucose, lactate, pyruvate, free fatty acids, free amino acids, glycogen, protein, ammonia and urea), the digestive enzymes (unspecific proteases, trypsin, chymotrypsin, amylase and lipase), the enzymes of protein metabolism and excretion (Alanine aminotransferase ALT, Aspartate aminotransferase AST, Glutamate dehydrogenase GDH e Arginase), and the enzymes of the sugar metabolism (Glucokinase GK, 6-phosphofructo 1-kinase PFK1, Pyruvate kinase PK, FBP1, 6-phosphogluconte dehydrogenase 6GPDH and Glucose-6-phosphate dehydrogenase G6PDH). We observed that the immune system of jundia was unaltered by the nutritional changes. The digestive enzymes were responsive to the feed protein. The activities of the protein metabolism enzymes increased with the dietary protein likely to the protein synthesis demanded by growth. Excretion of nitrogenous compounds as consequence of amino acids surplus was observed. The activity of some of sugar metabolism enzymes was changed and the concentration of metabolic intermediates was altered with the availability of protein. We concluded that the digestive enzymes of jundia are inductive, responsive to the dietary protein. The increase of protein in diets leaded to weight gain, higher production of nitrogen wastes, and gluconeogenesis for the metabolical demands. / Este trabalho foi realizado no Laboratório de Bioquímica Adaptativa do Departamento de Genética e Evolução da UFSCar e no Laboratório de Bioquímica e Biologia Molecular da Universidade de Barcelona. No presente trabalho, propusemo-nos estudar aspectos digestivos e metabólicos de juvenis de jundiá Rhamdia quelen, em jejum e alimentado com quatro níveis de proteína (20, 27, 34 e 41 %) em dietas isocalóricas. Foram analisados os parâmetros hematológicos e sistema imune, o ganho médio de peso, intermediários metabólicos (glicose, lactato, piruvato, ácidos graxos livres, aminoácidos livres, glicogênio, proteína, amônia e uréia), enzimas digestivas (proteases inespecíficas, tripsina, quimiotripsina, amilase e lípase), enzimas do metabolismo protéico e excreção (Alanina aminotransferase ALAT, Aspartato aminotransferase ASAT, Glutamato desidorgenase GDH e Arginase) e enzimas do metabolismo de carboidratos (Glicoquinase GK, Fosfofrutoquinase1 PFK1, Piruvato quinase PK, Furtose 1,6-bifosfatase 1 FBP1, 6 Fosfogluconato desidrogenase 6GPDH e Glicose 6 fosfato desidrogenase G6PDH). O resultados obtidos indicaram que o sistema imune de jundiá não sofreu alterações em função dos regimes alimentares. As enzimas digestivas foram responsivas à concentração de proteína na ração. As enzimas do metabolismo protéico aumentaram sua atividade em relação ao aumento de proteína para possível manutenção de síntese protéica e do crescimento. Houve aumento de excreção de compostos nitrogenados pela disponibilidade de aminoácidos livres. Algumas enzimas relacionadas com o metabolismo de carboidratos sofreram alterações nas atividades, e as concentrações dos intermediários metabólicos variaram em função da disponibilidade de proteína. Neste trabalho concluímos que as enzimas digestivas de jundiá são indutivas pela concentração de proteína da dieta, o aumento de proteína da dieta aumenta o ganho de peso, a produção e excreção de nitrogenados, e a preferência metabólica nas condições ensaiadas para manutenção dos processos de produção de energia foi gliconeogênica.

Submitted by Alison Vanceto (alison-vanceto@hotmail.com) on 2017-02-21T14:02:56Z No. of bitstreams: 1 TeseSAE.pdf: 2944434 bytes, checksum: c48c547f6e06b2382c67e21bb3af8401 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-03-14T13:40:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseSAE.pdf: 2944434 bytes, checksum: c48c547f6e06b2382c67e21bb3af8401 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-03-14T13:40:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseSAE.pdf: 2944434 bytes, checksum: c48c547f6e06b2382c67e21bb3af8401 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-14T13:52:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseSAE.pdf: 2944434 bytes, checksum: c48c547f6e06b2382c67e21bb3af8401 (MD5) Previous issue date: 2016-09-26 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Alcohol abuse is a worldwide problem with concomitant medical, social and economic costs. In Brazil, epidemiological data show an increase in the abuse of illicit and licit drugs, such as ethanol and steroids. Studies indicate that physical exercise influences ethanol consumption and preference and is positively correlated with steroids abuse. Despite many evidences, there is no study about the association between ethanol consumption, physical exercise and steroids abuse. In the present study, we investigated 1) the effects of physical exercise associated to testosterone treatment in ethanol intermittent access drinking; 2) consequences of the association between physical exercise, ethanol intermittent access and chronic testosterone treatment upon the cardiovascular system of rats. Many studies suggest that the mTORC1- mammalian target of rapamycin complex participates in the mechanisms related to ethanol abuse. In this way, we investigated the mTORC1 role in the ethanol intermittent access consumption maintenance. Our results showed that a) physical exercise improved treadmill performance in rats and did not change ethanol consumption; b) ethanol voluntary consumption was not affected either by physical exercise or by testosterone treatment; c) ethanol voluntary intermittent access did not change basal arterial pressure and heart rate; d) testosterone treatment caused rest bradycardia; e) ethanol consumption and testosterone treatment altered vascular reactivity to vasoactive agents, that was also altered by physical exercise. These results show the first evidence of ethanol intermittent access and testosterone treatment on cardiovascular functions in trained rats. Our results also suggest that the downstream mTORC1 pathway is related to excessive and abusive ethanol consumption. / O abuso de drogas é considerado um problema de saúde pública mundial. No Brasil, dados epidemiológicos têm mostrado um crescimento no consumo de drogas ilícitas e lícitas, dentre elas destacam-se o etanol e os esteroides anabólicos. Vários estudos demonstram que exercício físico pode influenciar o consumo e a preferência por etanol, além disso, a prática de exercício físico é positivamente relacionada ao uso abusivo de esteroides anabolizantes. Contudo nenhum estudo investigou as consequências da associação desses três fatores. No presente estudo investigamos: 1) os efeitos da prática diária de exercício físico associada ao tratamento com testosterona no consumo intermitente livre de etanol; 2) as consequências da associação entre prática de exercício físico moderado de esteira, consumo crônico intermitente livre de etanol e tratamento crônico de testosterona sobre o sistema cardiovascular de ratos. Vários estudos sugerem que o complexo 1 da proteína alvo da rapamicina de mamíferos (mTORC1- “mammalian target of rapamycin complex”) participa dos mecanismos associados ao uso de etanol. Assim, adicionalmente, investigamos o papel da mTORC1 na manutenção do consumo de etanol de livre escolha. Nossos resultados demonstraram que a) o exercício físico melhorou a performance de corrida em esteira e não modificou o consumo de etanol; b) o consumo voluntário de etanol não foi afetado nem pelo treinamento físico e nem pelo tratamento com testosterona; c) consumo voluntário intermitente de etanol não afetou os parâmetros basais de pressão arterial média e frequência cardíaca; d) o tratamento com testosterona causou bradicardia de repouso; e) consumo de etanol e tratamento com testosterona alteraram a reatividade vascular a agentes vasoativos, que também foi influenciada pelo treinamento físico. Esses resultados mostram a primeira evidência do efeito do consumo voluntário de etanol combinado com o tratamento de testosterona nas funções cardiovasculares de ratos treinados. Para finalizar, nossos resultados sugerem que a cascata “downstream” da mTORC1 parece estar relacionada com o consumo excessivo e abusivo de etanol. / FAPESP: 2012/14723-1 / FAPESP: 2014/23231-0

Danazol, um andrógeno sintético, desenvolvido em 1970 para o tratamento da endometriose, tem aplicação controvérsia no pré-tratamento de mulheres com infertilidade sem causa aparente, abortos recorrentes e que seriam submetidas à fertilização com transferência de embrião. O conhecimento sobre a atuação deste medicamento sobre a incidência de células uNK, morfologia uterina e funções cognitivas após sua administração ainda são muito fragmentados e não conclusivos. Os objetivos deste trabalho foram avaliar os efeitos das diferentes concentrações do danazol no comportamento de camundongos prenhes, bem como, as possíveis alterações na implantação, viabilidade, perda embrionára, morfologia do útero e incidência dos subtipos de células uNK reativos para lectina DBA. Foram utilizadas noventa e três fêmeas da linhagem Swiss, obtidas do Biotério da Universidade Federal de Alfenas, tratadas durante 14 dias por meio de gavagem com água destilada + tween 1% (grupo controle) e com água destilada + tween 1% + danazol nas concentrações de 0,75; 7,5; ou 75 mg/kg. O tratamento nos animais foi suspenso por 4 dias e após este prazo as fêmeas foram acasaladas com os machos. O dia em que foi constatada a presença do tampão vaginal foi considerado o 1° dia de gestação. Os testes comportamentais foram realizados e os animais foram sacrificados no 6º, 8º, 10º, 12º e 15º dia de gestação (ddg). Os resultados obtidos mostraram que danazol na dosagem de 0,75 mg/Kg apresentou efeito ansiogênico em camundongos e diminuiu a retenção de memória de curto prazo no 10º ddg. Na concentração de 7,5 mg/Kg provocou aumento da retenção de memória a curto prazo e estado equivalente ao depressivo. A diminuição do tempo de exploração global, à medida que a concentração do hormônio foi aumentada sugere efeito dose dependente de danazol no estabelecimento de estado de sonolência e apatia em camundongos no 10º ddg. Danazol provocou atraso no período para sucesso da cópula, no entanto, aumentou a taxa de prenhez sem reduzir o número de corpus lúteos em todas as dosagens utilizadas. Nos camundongos tratados com a dosagem 7,5 mg/Kg de danazol foram observadas, a partir do 10º ddg, muitas células grandes e de morfologia equivalente às células trofoblásticas gigantes ao redor dos vasos que nutrem a decídua e o embrião, o que sugere que está droga aumenta a invasividade do trofoblasto a partir do período médio da prenhez. Danazol na concentração de 7,5 mg/Kg provocou aumento no número de células uNK, enquanto dosagens menores (0,75 mg/Kg) e maiores (75 mg/Kg) causaram diminuição neste número, demonstrando o efeito dose dependente de danazol no número de células uNK. A análise dos diferentes subtipos de uNK no útero mostrou que danazol aumenta a migração destas células, podendo prejudicar a proliferação celular em doses elevadas e acelerar a diferenciação celular em áreas próximas ao embrião. As maiores alterações relacionadas à ansiedade e memória observadas no 10º ddg, associadas às alterações morfológicas nos sítios de implantação embrionária e aumento na proliferação de células natural killer uterinas também neste período, demonstram a integração entre sistemas nervoso, endócrino e imunológico durante a prenhez e a ação dose-dependente de danazol modulando as respostas destes sistemas. / Danazol, a synthetic androgen, developed in 1970 for the treatment of endometriosis, has a controversial application on the pre-treatment of women with unexplained infertility, recurrent miscarriage, and the ones that would undergo fertilization with embryo transfer. The knowledge about the way this compound works after its administration on the incidence of uNK cells, uterine morphology and cognitive functions is still incomplete and inconclusive. Our objectives were to evaluate the effects of different concentrations of danazol on the behavior of pregnant mice, as well as possible changes in implantation, viability, embryonic loss, morphology of the uterus and the incidence of DBA lectin-reactive uNK cell subtype. Ninety-three Swiss female mice from Universidade Federal de Alfenas vivarium were treated for 14 days by gavage with either distilled water + 1% Tween (control) or distilled water + 1% Tween + 0.75, 7.5 or 75 mg/kg of danazol. Females were mated with males after suspension of treatment during four days. Day 1 of gestation was established as the day when the presence of vaginal plug was detected. Behavioral tests were performed and the animals were sacrificed at 6th, 8th, 10th, 12th and 15th gestation days (gd). The data showed that 0.75 mg/kg of danazol caused an anxiogenic effect on mice and decreased the retention of short-term memory in the 10th gd. 7.5 mg/kg of this drug increased the retention of short-term memory and developed a depression-like state on the animals. The fact that gradual increase on hormone concentration caused gradual decrease on the global exploration time suggests a dose-dependent effect of danazol on establishing a state of somnolence and apathy in mice in the 10th ddg. Danazol caused a delay on time of successful mating, however, it increased the rate of pregnancy without reducing the number of corpus luteum in all dosages used. In mice treated with 7.5 mg/kg of danazol, many large cells with a trophoblast-like morphology were observed around vessels that nourish the decidua and the embryo starting at 10th gd, what suggests that this drug increases the invasiveness of the trophoblast starting in the middle period of pregnancy. 7.5 mg/kg of danazol increased the number of uNK cells, whereas the lowest (0.75 mg/ kg) and the highest (75 mg / kg) doses caused a decrease in this number, demonstrating a dose dependent effect of danazol on the number of uNK cells. The analysis of different subtypes of uNK cells in the uterus showed that danazol increases the migration of these cells and can also impair cell proliferation on higher doses. It also suggests that danazol can stimulate cell differentiation in areas close to the embryo. The major changes related to anxiety and memory observed in the 10th gd, associated with morphological changes in the sites of embryo implantation and increase in proliferation of uterine natural killer cells in this period, demonstrate the integration between the nervous, endocrine and immune systems during pregnancy and the dose-dependent action of danazol in the modulation of these systems. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES