Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2018-07-27T21:51:06Z
No. of bitstreams: 1
DISSERTAÇAO FINAL - Julia Uecker.pdf: 1793822 bytes, checksum: e6a91bc415ec8e15d94438df9730dc76 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-07-31T19:02:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1
DISSERTAÇAO FINAL - Julia Uecker.pdf: 1793822 bytes, checksum: e6a91bc415ec8e15d94438df9730dc76 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-31T19:02:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1
DISSERTAÇAO FINAL - Julia Uecker.pdf: 1793822 bytes, checksum: e6a91bc415ec8e15d94438df9730dc76 (MD5)
Previous issue date: 2018-03-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Bactérias ácido lácticas (BAL) são as principais representantes dos probióticos em
alimentos, proporcionando efeitos benéficos à saúde do hospedeiro. Devido aos
efeitos já relatados na literatura, a procura por novas linhagens com essas
características tem sido relevante. Assim, o objetivo deste estudo foi isolar,
identificar e caracterizar BAL presentes em alimentos de origem láctea com
potencial probiótico, bem como analisar o efeito antimicrobiano, a capacidade
antioxidante e a presença de fatores de virulência e de resistência. Para isso, foram
isolados 40 micro-organismos de diferentes produtos lácteos (yakult®, san bios®,
leite de vaca, Ricota, queijo minas frescal e kefir), escolhidos 17 micro-organismos
de forma aleatória para as analises futuras, como: avaliação das propriedades
probióticas pelos testes de tolerância ao pH, sais biliares e trato gastrointestinal
superior; determinação das propriedades antioxidantes pelos métodos de captura do
radical 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH) e reação ao ácido tiobarbitúrico (TBARS);
atividade antimicrobiana frente à micro-organismos patogênicos pelos métodos
difusão em poços e difusão em discos; susceptibilidade a antimicrobianos; aspectos
de segurança por diversos métodos e detecção de genes com potencial fator de
virulência relacionados à adesão, agregação e resistência à vancomicina, além da
identificação molecular do 16S rDNA pelo método de Sanger. Por meio dos
resultados obtidos observou-se que todos os micro-organismos apresentaram
alguma característica probiótica relacionada; todos apresentaram potencial
antioxidante pelo método DPPH, porém pelo método TBARS apenas três microorganismos
apresentaram inibição da peroxidação lipídica. A análise antimicrobiana
por difusão em poços demonstrou que os micro-organismos R1, F3 e F4
apresentaram inibição frente a Escherichia coli; R1 e R9 frente a Listeria
monocytogenes e K1, K2, R1, R5, e R9 apresentaram ação antimicrobiana frente ao
Staphylococcus aureus. A atividade antimicrobiana por difusão em disco demonstrou
que os micro-organismos Y1, Y2, SB4, SB6, R1, R5, R9, L1, L2, L4, K1 e K2
apresentaram inibição frente a E. coli; SB4, SB6, F1, F2 e L4 frente a Salmonella
Enteretidis; frente a L. monocytogenes SB6 e L4 apresentaram ação inibitória; e em
relação a S. aureus foi observada atividade antimicrobiana quando analisados os
micro-organismos L4 e L5. Os micro-organismos foram classificados como
homofermentativos, gelatinase, lipase e DNAse negativa; α-hemolíticos, não
formadores de biofilme, e não apresentam genes de virulência como agg, asa e
genes de resistência como vanA. Assim, conclui-se que os micro-organismos R9
(Lactococcus lactis subsp. Lactis) e L1 (Leuconostoc citreum), destacaram-se como
micro-organismos promissores com potencial de uso como probiótico, bem como
apresentaram características antimicrobianas e antioxidantes satisfatória. Este
resultado torna-se de suma importância, visto o possível uso destes na produção
futura de alimentos. / Lactic acid bacteria (BAL) are the main representatives of probiotics in foods,
providing beneficial effects to host health. Due to the effects already reported in the
literature, the search for new lineages with these characteristics has been relevant.
Thus, the objective of this study was to isolate, identify and characterize BAL present
in dairy foods with probiotic potential, as well as to analyze the antimicrobial effect,
the antioxidant capacity and the presence of virulence and resistance factors. To that
end, 40 microorganisms from different dairy products (yakult, San Bios, fresh cow's
milk, Ricotta, Frescal cheese and Kefir) were selected, and 17 microorganisms were
randomly chosen for future analyzes, such as: evaluation of the probiotic properties
by pH, bile salts and upper gastrointestinal tolerance tests; determination of the
antioxidant properties by the methods of capture of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl
radical (DPPH) and reaction with thiobarbituric acid (TBARS); antimicrobial activity
against pathogenic microorganisms by well diffusion and disk diffusion methods;
susceptibility to antimicrobials; safety aspects by several methods and detection of
genes with potential virulence factor related to adhesion, aggregation and
vancomycin resistance, as well as the molecular identification of 16S rDNA by the
Sanger method. By means of the obtained results it was observed that all the
microorganisms presented some related probiotic characteristic; all presented
antioxidant potential by the DPPH method, but by the TBARS method only three
microorganisms showed inhibition of lipid peroxidation. Antimicrobial analysis by well
diffusion showed that the microorganisms R1, F3 and F4 showed inhibition against
Escherichia coli; R1 and R9 against Listeria monocytogenes and K1, K2, R1, R5, and
R9 presented antimicrobial action against Staphylococcus aureus. The antimicrobial
activity by disk diffusion showed that the microorganisms Y1, Y2, SB4, SB6, R1, R5,
R9, L1, L2, L4, K1 and K2 showed inhibition against E. coli; SB4, SB6, F1, F2 and L4
against Salmonella Enteretidis; against L. monocytogenes SB6 and L4 presented
inhibitory action; and in relation to S. aureus, antimicrobial activity was observed
when the L4 and L5 microorganisms were analyzed. The microorganisms were
classified as homofermentative, gelatinase, lipase and DNAse negative; α-hemolytic,
non-biofilm forming, and do not show virulence genes such as agg, wing and
resistance genes such as vanA. Thus, it was concluded that the microorganisms R9
(Lactococcus lactis subsp. Lactis) and L1 (Leuconostoc citreum) have been shown to
be promising microorganisms with potential for use as probiotics, as well as
satisfactory antimicrobial and antioxidant properties. This result becomes of
paramount importance, considering the possible use of these in future food
production.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:prefix/4095 |
| Date | 27 March 2018 |
| Creators | Uecker, Julia Neitzel |
| Contributors | 95715649072, http://lattes.cnpq.br/2138644604144089, Padilha, Wladimir, Pieniz, Simone |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos, UFPel, Brasil, Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0158 seconds