Araucarea angustifolia (Bert.) O. Kuntze é uma espécie dioica, isto é, flores masculinas e
femininas originam-se em árvores separadas. As flores femininas apresentam-se como
estróbilo, mais conhecido como pinha. A pinha é constituída por sementes (pinhões) e
brácteas (sementes não desenvolvidas), as quais apresentam elevada concentração de
compostos fenólicos. Esses compostos são conhecidos por reduzir danos oxidativos a lípidos,
proteínas e ácidos nucleicos, contribuindo para minimizar a incidência de doenças
relacionadas com o estresse oxidativo, tais como doenças cardiovasculares, neurológicas e
câncer. O objetivo deste estudo foi caracterizar quimicamente, avaliar a atividade antioxidante
e antigenotóxica do extrato aquoso de brácteas de A. angustifolia. Neste trabalho, os
polifenóis totais do extrato de A. angustifolia foram determinados pelo método de Folin-
Ciocalteu e sua composição química foi confirmada por cromatografia líquida de alta
eficiência (CLAE). O potencial do extrato para neutralizar espécies reativas foi avaliado
através do ensaio com 2,2-difenil 1-picrilhidrazil (DPPH●) e pelas atividades like das enzimas
antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). Em linhagem celular de
fibroblasto de pulmão humano (MRC5), avaliou-se o efeito protetor do extrato na viabilidade
celular através da redução de 3-(4,5-dimetiltiazol 2-il)-2,5difenil brometo de tetrazolina
(MTT), na atividade das enzimas SOD e CAT, nos danos oxidativos a lípidos, proteínas e
ácido desoxirribonucléico (DNA) (ensaio cometa alcalino e enzimático) induzidos pelo
peróxido de hidrogênio (H2O2). O teor de fenólicos totais do extrato de A. angustifolia foi de
670,93 ± 17,79 mg catequina /100 g de brácteas, sendo a catequina, epicatequina, quercetina e
apigenina os principais polifenóis encontrados. O extrato de A. angustifolia foi capaz de
reduzir o radical DPPH● e apresentou atividade SOD e CAT-like. Além disso, o extrato de A.
angustifolia nas concentrações estudadas (25 e 50 μg/mL) reduziu a mortalidade celular,
danos oxidativos a lipídios, proteínas e DNA, e diminuiu a depleção das enzimas
antioxidantes SOD e CAT induzida pelo H2O2 em células MRC5. Apesar de não ter sido
observado correlação entre os polifenois e marcadores de danos oxidativos, verificou-se uma
correlação negativa entre danos a lipídos, proteínas e ácidos nucleicos e a atividade das
enzimas SOD e CAT, sugerindo que essas enzimas desempenham um importante papel na
prevenção de danos ás biomoléculas. Esses resultados mostram que a A. angustifolia
apresenta potencial como fonte de compostos fitoquímicos com atividade biológica
relevante. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-11T13:43:58Z
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Dissertacao Marcia Denize Oliveira de Souza.pdf: 1692835 bytes, checksum: df8d66ab76d9a357820549d73b1c5332 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Araucaria angustifolia (Bert.) O. Kuntze is a dioecious species, with male and female flowers
found on separate trees. The A. angustifolia female cone consists of fully developed edible
seeds and non-developed seeds called bracts. These bracts have high concentration of
phenolic compounds, which have the potential to prevent oxidative damage to lipids, proteins
and nucleic acids, and decreasing the incidence of diseases related to oxidative stress, such as
cardiovascular and neurological diseases, and cancer. The aim of the present study was to
evaluate the chemical characterization and antioxidant and antigenotoxic activities of the
extract of A. angustifolia bracts. In this work the polyphenols total of A. angustifolia extract
was determinate by Folin-Ciocalteu reagent and its chemical composition was confirmed by
high performance liquid chromatography (HPLC). The extract potential to neutralize reactive
species was evaluated by 2,2- diphenyl 1-picrylhydrazyl (DPPH●) method and by the ability
to mimic the activities of superoxide antioxidants like dismutase (SOD) and catalase (CAT).
In human cell line of lung fibroblast (MRC5), we evaluated the protective effect of the extract
on cell viability by reduction of 3 - (4,5 dimethylthiazol - 2 - yl ) -2,5 diphenyl tetrazolina
bromide (MTT), in the activity of SOD and CAT enzymes in oxidative damage to lipids,
proteins and the deoxyribonucleic acid (DNA) (enzymatic and alkaline comet assay) induced
by hydrogen peroxide (H2O2). The total phenolic content of the A. angustifolia extract was
670.93 ± 17.79 mg catechin / 100 g bracts, and catechin, epicatechin, quercetin and apigenin
the main polyphenol found. The A. angustifolia extract was able to reduce DPPH● and
presented like activity of SOD and CAT enzymes. Furthermore, the A. angustifolia extract at
the concentrations studied (25 and 50 mg/mL) reduced cell death , oxidative damage to lipids,
proteins and DNA, and decreased depletion of antioxidant enzymes SOD and CAT induced
by H2O2 in MRC5 cells . Although, no correlation between polyphenols and bookmarks of
oxidative injury have been observed. There was a negative correlation between damage to
lipids, proteins and DNA with enzymes SOD and CAT, suggesting that these enzymes play a
role in the regulation of cellular redox metabolism. These results showed that the A.
angustifolia has potential as a source of phytochemical compounds with relevant bioactivities.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:vkali40.ucs.br:11338/663 |
| Date | 20 December 2013 |
| Creators | Souza, Márcia Denize Oliveira |
| Contributors | Ely, Mariana Roesch, Spada, Patrícia Kelly Wilmsen Dalla Santa, Funchal, Cláudia da Silva, Salvador, Mirian |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UCS, instname:Universidade de Caxias do Sul, instacron:UCS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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