Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-21T21:12:47Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE - Aline Stamford Henrique da Silva Guerra Gatis Carrazzoni.pdf: 1555579 bytes, checksum: f423e63d587310e5d136eb2a68d2c5f0 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-28T23:12:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE - Aline Stamford Henrique da Silva Guerra Gatis Carrazzoni.pdf: 1555579 bytes, checksum: f423e63d587310e5d136eb2a68d2c5f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T23:12:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE - Aline Stamford Henrique da Silva Guerra Gatis Carrazzoni.pdf: 1555579 bytes, checksum: f423e63d587310e5d136eb2a68d2c5f0 (MD5) Previous issue date: 2016-07-01 / FACEPE / As espécies da família Melastomataceae destacam-se por possuírem propriedades antimicrobiana, antitumoral, analgésica e antimalárica. Dentre os gêneros da família Melastomataceae, o gênero Miconia compreende 1/4 das espécies conhecidas. Tendo em vista poucos estudos relatados na literatura sobre espécies de Miconia, este trabalho teve como objetivo avaliar o perfil fitoquímico, toxicidade a atividades farmacológicas dos extratos hexânico, acetato de etil e metanólico das folhas de M. minutiflora. O perfil fitoquímico foi analizado por cromatografia em camada delgada. O teor de fenóis totais e a atividade antioxidante foi determinada através do método do DPPH (2,2-difenil-1- picril-hidrazil). O extrato de metanólico de M. minutiflora (Mm-MeOH) foi submetido à cromatografia líquida de alta eficiência com matriz de detector de diodo (CLAE -DAD) para a identificação dos principais polifenóis bioativos. Para avaliar a segurança de utilização dos extratos, foram feitos testes de citotoxicidade frente a várias linhagens de células e a toxicidade aguda in vivo. Para a realização dos testes in vivo foram utilizados camundongos albinos Swiss e ratos Wistar (n = 06). O potencial anti-inflamatório foi avaliado através dos modelos de bolsão de ar e edema de pata induzidos por carragenina, permeabilidade vascular, edema de orelha induzido por óleo de cróton e pleurisia induzida por carragenina com determinação dos níveis de citocinas (TNF, IL-1β) e óxido nítrico (NO), dos exsudatos inflamatórios. Para a avaliação da atividade cicatrizante, foi utilizado o método de ferida excisional. Na avaliação da atividade antinociceptiva foram utilizados os testes de contorções abdominais induzidas por ácido acético e o teste da formalina. A ação do extrato frente aos receptores adrenérgicos e opióide também foi avaliada. A triagem fitoquímica do Mm-MeOH indicou a presença de compostos fenólicos, derivados antracênicos, esteroides e triterpenos no Mm-MeOH. O CLAE-DAD revelou a presença de ácido gálico, ácido elágico e rutina no Mm-MeOH. Este extrato apresentou maior concentração de fenólicos totais, como também melhor atividade antioxidante e baixa citotoxicidade frente à linhagem J774.A1 (inibição de 8,8%). No teste de toxicidade aguda, não foi observada nenhuma variação significativa no peso, consumo de ração e água e no peso dos órgãos em relação aos animais do grupo controle, cujo valor da DL50 foi superior a 2.000 mg/kg. Mm-MeOH (100 mg/kg) inibiu a resposta inflamatória, reduzindo amigração leucocitária no teste do bolsão de ar (70%), a formação do edema de pata na terceira hora de observação (40%), como também reduziu a produção da MPO. O Mm-MeOH também reduziu a permeabilidade vascular (56%) e o edema de orelha. Houve redução da migração leucocitária no teste da pleurisia, como também diminuição dos níveis de TNF e IL-1β no exudato pleural. A formulação a base de Mm-Meoh 10% (FSSMm) apresentou atividade cicatrizante significativa, principalmente no 14º dia após a incisão, com aumento do percentual de contração da ferida (90 ± 4 %) e progressos na remodelação do tecido danificado, incluindo a formação de anexos cutâneos, quando comparado ao grupo controle. Mm-MeOH apresentou atividade antinociceptiva com a redução do número de contorções abdominais (58,9%) e aumentou a limiar da dor no teste da formalina. Este extrato reverteu à ação antinociceptiva quando os animais foram pré-tratados com um antagonista α2-adrenérgicos, entretanto não reverteu a a ação antinociceptiva quando os animais foram pré-tratados com naloxona. Podemos concluir que Mm-MeOH possui ação anti-inflamatória, antinociceptiva, cicatrizantes e baixa toxicidade. A atividade anti-inflamatória está associada à inibição da migração leucocitária, da liberação de aminas vasoativas e citocinas pró-inflamatórias (TNF e IL-1β). Em relação à atividade antinociceptiva, o Mm-MeOH atua na dor inflamatória, pelo menos em parte, ativando os receptores α2-adrenérgicos. / The Brazilian ecosystems have a variety of native species with potential application in the pharmaceutical field and which are targets of research for the production of phytotherapycs/phytochemicals. The species of Melastomataceae family stand out for having antimicrobial, antitumor, analgesic and anti-malarial properties. Miconia is the largest family genre and comprises 1/4 of the known species. This study aimed to evaluate the phytochemical profile and antioxidant, cytotoxic, acute toxicididade, anti- inflammatory, healing and antinociceptive activities in organic extracts of Miconia minutiflora. Were prepared hexane, ethyl acetate and methanol extracts of M. minutiflora leaves. The phytochemical profile was analyzed by thin layer chromatography. It was determined the total phenolic content and antioxidant activity by DPPH method (2,2-diphenyl -1 - picryl hydrazyl). The methanol extract of M. minutiflora (Mm-MeOH) was subjected to high-performance liquid chromatography with detector diode array (HPLC-DAD) for the identification of the major bioactive polyphenols.To evaluate the safety of use of crude extracts, they were subjected to in vitro cytotoxicity against several cell lines and acute toxicity in vivo. For the realization of in vivo tests was used albino Swiss mice and Wistar rats, divided into groups of 6 animals. The anti- inflammatory potential of M. minutiflora extracts was assessed through the air pocket and paw edema induced by carrageenan, with determination of myeloperoxidase activity (MPO) in the plantar tissue, vascular permeability, ear edema induced by croton oil, and pleurisy induced by carrageenan with determination of cytokine levels ( TNF, IL-1β) and nitric oxide (NO) in inflammatory exudates. To evaluate the antinociceptive activity the writhing test induced by acetic acid and formalin test were used. The action of the extract front of the adrenergic receptors and opioid were also evaluated. The phytochemical screening indicated the presence of phenolic compounds, antracenics derivatives, triterpenes and steroids. The HPLC-DAD revealed the presence of gallic acid, ellagic acid and rutin. The methanol extract of M. minutiflora (Mm- MeOH) showed the highest concentration of total phenolics, as well as better antioxidant activity and low cytotoxicity against the J774.A1 cells (8.8%). In the acute toxicity test, we observed no significant change in weight, feed intake and water and the weight of bodies in relation to the control group animals, whose DL50 value was more than 2,000 mg/kg. Mm-MeOH (100 mg/kg) inhibited leukocyte migration by 70% in the air pocket test, inhibited the paw edema formation at the third hour of observation (40 %), but also reduced the production of MPO. The Mm-MeOH extract also reduced vascular permeability (56%) and the ear edema. A reduction of leukocyte migration in pleurisy test, as well as reduction of TNF and IL-1β. Mm- MeOH presented evidenced healing activity mainly from the 14th day after the incision, increasing the percentage of wound contraction (90 ± 4%) and progress in the damaged tissue remodeling, including the formation of skin appendages, when compared to the control group. Mm MeOH (100 m/kg) showed antinociceptive activity by reducing the number of writhes 58,9 %, action as an agonist of the α2-adrenergic receptors and increased the pain threshold in the formalin test. We suggest that the pharmacological potential of Mm-MeOH is associated with phenolic compounds synergism, the release inhibition amines, prostaglandins and inhibiting the release of pro-inflammatory cytokines. On antinociceptive activity, Mm-MeOH acts by peripheral mechanisms, in inflammatory pain and as an agonist of α2 -adrenergic.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-21T21:42:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO George Ewerton da Silva.pdf: 1111557 bytes, checksum: dbbe714a1e300ff41edea46d557cc3a5 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-24T17:22:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO George Ewerton da Silva.pdf: 1111557 bytes, checksum: dbbe714a1e300ff41edea46d557cc3a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-24T17:22:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO George Ewerton da Silva.pdf: 1111557 bytes, checksum: dbbe714a1e300ff41edea46d557cc3a5 (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / FACEPE / Rynchospora nervosa, monocotiledônea, pertencente a família Cyperaceae encontrada em áreas tropicais e subtropical. No Brasil os representantes deste grupo são utilizados por possuírem algumas atividades biológicas, como por exemplo a atividade hipoglicemiante, e bactericida. De acordo com a literatura espécie utilizada, também conhecida popularmente como capim estrela, não possui estudos anteriores. Desse modo, o mesmo contribui para a elucidação dos compostos presentes na planta bem como para o conhecimento das atividades microbiológicas e farmacológicas testadas. No trabalho foi realizado um estudo fitoquímico onde foram investigados e identificados os componentes químicos da raiz e da parte aérea da planta, através do método de cromatografia em camada delgada. Foram identificados flavonoides, taninos, triterpenos e esteroides, e proantocianidinas. A atividade antimicrobiana foi realizada com o extrato bruto e com os extratos particionados através do grau de polaridade dos solventes de extração. Confirmando atividade antibacteriana para os extratos oriundos de solventes apolares: hexano, clorofórmio e dicloro metano. Também foi realizado o teste de citotoxicidade utilizando, se linhagens específicas de cédulas tumorais. Foi realizado também a extração dos óleos essenciais da parte aérea e raiz da planta, e posteriormente foi identificado alguns compostos existentes através do CGMS. / Rhynchospora nervosa, monocot, also known colloquially as star grass, belongs to the Cyperaceae family. It is found in tropical and subtropical areas. In Brazil, representatives of this group are used as they possess a number of biological activities, such as hypoglycemic activity, and as a bactericide. According to the literature, this species has not been previously studied. Thus, a study of it contributes to the elucidation of the compounds present in the plant as well as futhering knowledge of the microbiological and pharmacological activities tested. Phytochemical studies investigated and identified the chemical components of the plant root and shoot using the chromatographic method in thin layers. The following were identified: flavonoids, tannins, triterpenes and steroids, as well as proanthocyanidins. The antimicrobial activity was performed using crude extract and with extracts differentiated by the degree of polarity of solvent extraction. Antibacterial activity for extracts derived from non-polar solvents was confirmed for the following: hexane, chloroform and dichloromethane. A cytotoxicity test was applied to identify specific strains of tumor cells. Essential oils from the shoot and root of the plant were extracted and some CGMS compounds were identified.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-13T21:02:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Danielle Rocha do Val.pdf: 2561298 bytes, checksum: 87a6411a7d7f0d8d8a4e52ec8cebcd8e (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-18T14:59:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Danielle Rocha do Val.pdf: 2561298 bytes, checksum: 87a6411a7d7f0d8d8a4e52ec8cebcd8e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-18T14:59:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Danielle Rocha do Val.pdf: 2561298 bytes, checksum: 87a6411a7d7f0d8d8a4e52ec8cebcd8e (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / FACEPE / As disfunções temporomandibulares (DTM) abrangem uma série de problemas clínicos que envolvem os músculos mastigatórios e/ou articulação temporomandibular (ATM) e estruturas associadas, sendo a segunda fonte mais comum de dor orofacial. Apesar da farmacoterapia diversa para tratamento das DTMs, nenhuma das intervenções terapêuticas disponíveis na atualidade é curativa, limitando-se, portanto a aliviar os sinais e sintomas da doença. Avaliar a segurança e a atividade antinociceptiva e anti-inflamatória de um composto semissintético derivado de Tephrosia toxicaria Pers. Realizou-se processo de hidrogenação da 5- hidroxi-6”,6”-dimetilcromeno-[2”,3”:7,8]-flavanona para obtenção 5-hidroxi-6”,6”-dimetilcromano-[2”,3”:7,8]-flavanona (PHO). Para avaliar os efeitos sistêmicos da administração subaguda, camundongos machos e fêmeas receberam diariamente PHO (10 μg/kg; per.os ou i.p.) durante 14 dias. O grupo controle recebeu solução salina durante o mesmo período. No 15º dia foi realizada eutanásia para avaliação de parâmetros bioquímicos e posterior análise histopatológica dos órgãos. Na toxicidade aguda camundongos machos e fêmeas em jejum receberam PHO (1, 10 e 100 mg/kg; per.os ou i.p.) ou solução salina, e foram observados por um período de 48 h. Para avaliação se o efeito farmacológico da PHO (10 μg/kg; per.os) interferia na atividade motora dos animais foi realizado o teste do rota rod em ratos. Avaliou-se ainda o efeito anti-inflamatório e antinociceptivo de PHO no modelo de hipernocicepção inflamatória induzida por formalina na ATM. Ratos foram pré-tratados (per.os.) com PHO (0,1, 1 ou 10 μg/kg) 60 min antes da injeção de formalina (1,5%) intraarticular (i.art.). O grupo Sham recebeu solução salina (i.art.) e o grupo Formalina recebeu formalina (1,5%) (i.art.). A resposta comportamental nociceptiva foi avaliada durante um período de observação de 45 min. Os tecidos periarticulares foram coletados para dosagem de TNF-α, IL-1β, IL-8, IL-10 pelo método ELISA e avaliação da expressão de ICAM-1 e CD55. Além disso, foram realizados os ensaios da análise da permeabilidade vascular. Em outra série de experimentos investigamos o envolvimento da via HO-1 e NO/GMPc/PKG/K+ATP no efeito antinoceceptivo de PHO. A partir do processo de hidrogenação, obteve-se 5-hidroxi-6”,6”-dimetilcromano-[2”,3”:7,8]-flavanona (PHO) que gerou o depósito de patente do nosso grupo sob número de registro: BR1020130287938 no INPI. PHO 10 μg/kg durante 14 dias não alterou a variação ponderal, o peso úmido dos órgãos e parâmetros bioquímicos em relação ao grupo salina. No teste de toxicidade aguda não ocorreu nenhuma morte em todas as doses administradas.No teste do Rota-rod não houve alteração motora nos grupos tratados com o composto. PHO 10 μg/kg) reduziu (p <0,05) a hipernocicepção inflamatória, quando comparado ao grupo formalina. Reduziu o extravasamento plasmático, os níveis TNF-α, IL-1β, IL-8 e aumentou IL-10 nos tecidos periarticulares quando comparado ao grupo formalina (p <0,05). A expressão de ICAM-1 e CD55 foi reduzida após a administração de PHO quando comparado ao grupo não tratado (p <0,05). O efeito antinociceptivo de PHO é multimodal, não atuando pela via do HO-1/GMPc/PKG, porém dependendo da integridade das vias do NO e canais K⁺ sensíveis a ATP. PHO posssui atividade antinociceptiva e anti-inflamatória, Não apresentando toxicidade, com valor biotecnológico para o tratamento de dor orofacial. / Temporomandibular disorders (TMD) encompass clinical conditions involving masticatory muscles and/or the temporomandibular joint (TMJ) as well as the associated structures. Even with the drug therapy available for the TMD treatment, none of the interventions are definitive since the treatments only relieve the symptoms associated with these disorders. To evaluate the safety, antinociceptive and anti-inflammatory activities of a semi-synthetic molecule derived from Tephrosia toxicaria Pers. 5-hydroxy-6”,6”-dimethyl chroman-[2”,3”:7,8]-flavone underwent hydrogenation, producing 5-hydroxy-6”,6”-dimethyl chromone - [2”,3”:7,8]-flavone (PHO). To evaluate systemic effects, male and female mice received daily PHO (10 μg/kg; per.os or i.p.) for 14 days. Negative control groups received saline solution. Animals were euthanised on day 15 to assess biochemical parameters and histopathological analysis of the organs. In the acute toxicity assay, male and female received PHO (10 μg/kg; per.os or i.p.) or saline solution, and were observed for 48 hours. PHO (10 μg/kg; per.os) was also assayed for motor impairment in the rota-rod test in rats. The anti-inflammatory and antinociceptive effects of PHO were assayed in the formalin-induced TMJ inflammatory hypernociception. Rats were pre-treated (per.os.) with PHO (0.1, 1 or 10 μg/kg) 60 min before intra-articular formalin (1.5%) injection. Sham groups received saline solution intra-articular injection. Nociceptive responses were evaluated during 45 minutes. Periarticular tissues were excised for TNF-α, IL-1β, IL-8, IL-10 levels (ELISA) and ICAM-1/CD55 expression. Further, the Evans blue vascular permeability assay was carried out. In another series of experiments, we investigated the involvement of the HO-1 and NO/GMPc/PKG/K+ATP pathways in the PHO nociceptive effects. 5-hydroxy-6”,6”-dimethyl chromone - [2”,3”:7,8]-flavone was patented under the registration number (BR1020130287938) at INPI. PHO 10 μg/kg did not alter body mass, wet organ weight, and biochemical parameters after 14 days. In the acute toxicity test, no death episode occurred at the tested doses. The rota-rod test showed no motor impairment. PHO (10 μg/kg) reduced (p<0.05) inflammatory hypernociception, vascular permeability, TNF-α, IL-1β, IL-8 levels, and promoted IL-10 level increase in the periarticular tissues. ICAM-1/CD55 expression was reduced after PHO administration. The PHO antinociceptive effect is polymodal, not acting via the HO-1/GMPc/PKG pathway, but depending on the NO and ATP-sensitive K⁺ channels integrity. PHO possesses antinociceptive and anti-inflammatory activities as well as it is not toxic in animals. This product, thus, presents biotechnological relevance in the treatment of orofacial pain.

Macrófitas são formas macroscópicas de vegetação aquática, importantes produtoras primárias, indispensáveis a homeostase dos ambientes em que estão inseridas. No entanto, a ocorrência de superpopulações dessas plantas em reservatórios vem se tornando um problema relevante no Brasil, especialmente em relação ao comprometimento dos usos econômicos desses ambientes, como pelos desequilíbrios ocasionados em decorrência do aumento de suas populações. Aguapé [Eichhornia crassipes (Mart.) Solms] uma macrófita aquática flutuante apresenta alta capacidade de colonização de novos ambientes e facilidade na formação de superpopulações, e esta vantagem pode estar relacionada ao fato de esta espécie apresentar compostos alelopáticos, capazes de influenciar negativamente no desenvolvimento de plantas e microorganismos do ambiente vizinho. O objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial alelopático de extratos aquosos e etanólicos de folhas e rizomas/raízes de Aguapé, ocorrente no Reservatório de Furnas, região de Alfenas-MG. Para tanto, foram coletadas plantas de duas populações com diferentes condições de adensamento que foram divididas entre folhas e rizomas/raizes. Foram preparados extratos aquosos e etanólicos a 5% (p/v), que foram diluídos em 2,5% e 1,25%, para realização dos bioensaios de germinação e crescimento inicial, durante sete dias, utilizando-se como biotestes, sementes de alface (Lactuca sativa L.). Foram avaliados: porcentagem de germinação, índice de velocidade de germinação, número de plântulas normais, alongamento de raiz, biomassa fresca e biomassa seca. O efeito dos extratos sobre o índice mitótico e presença de anormalidades no material genético induzidas pelos extratos nos biotestes, foram analisados em bioensaios de 48 h. Foram observadas as fases de divisão celular, bem como anormalidades cromossômicas. A partir dos extratos etanólicos, foi realizada análise cromatográfica com o intuito de identificar compostos, que possam estar relacionados ao sucesso na colonização da espécie. Os resultados demonstraram que ambos os extratos apresentam efeito inibitório sobre germinação, crescimento inicial e proliferação celular e esse efeito foi dependente da concentração para a maioria dos parâmetros avaliados. Populações consideradas muito adensadas e rizomas/raizes de ambas as populações apresentaram maior efeito inibitório para o extrato etanólico. A análise cromatográfica identificou compostos como ácido alfalinoleico, ácido margárico, ácido adípico, entre outros, reconhecidos na literatura por apresentar efeito alelopático contra o fitoplâncton. Diferenças entre estruturas vegetais e populações foram encontradas, sendo a maior quantidade de compostos identificados em rizomas/raízes e na população considerada adensada. Os resultados sugerem a existência do efeito alelopático em Aguapé e este efeito pode ocorrer também na natureza e estar relacionado as condições de adensamento. / Macrophytes are the macroscopic forms of aquatic vegetation, important primary producers, and essential for homeostasis of the environments where they are inserted. However, the occurrence of overpopulations of these plants in reservoirs is becoming an important problem in Brazil, especially in relation to impairment of economic uses of these environments, as caused by imbalances due to the increase of their populations. Water hyacinth [Eichhornia crassipes (Mart.) Solms] a floating macrophyte has high ability to colonize new habitats and ease overpopulations in training, and this benefit may be related to the fact that this species present allelopathic compounds capable of negatively influencing the development plants and microorganisms from the surrounding environment. The aim of this study was to evaluate the allelopathic potential of aqueous and ethanol extracts of leaves and rhizomes / roots Aguapé, occurring in Furnas Reservoir, Alfenas, Minas Gerais State. For this purpose, plants of two populations with different density conditions were divided between leaves and roots / rhizomes were collected. Aqueous and ethanolic extracts were prepared at 5% (w / v), which were diluted in 2.5% and 1.25%, for the realization of germination bioassays and initial growth for seven days, using bioassays as seeds lettuce (Lactuca sativa L.). The germination percentage, germination velocity index, number of normal seedlings, root elongation, fresh weight and dry weight were evaluated. The effect of the extracts on the mitotic index and the presence of abnormalities in the genetic material induced by the extracts in bioassays, bioassays were analyzed in 48 h. Phases of cell division were observed, as well as chromosomal abnormalities. From the ethanol extracts, chromatographic analysis was performed in order to identify compounds that may be related to success in colonizing species. The results showed that both extracts have inhibitory effect on germination, early growth and cell proliferation and this effect was concentration dependent for most of the parameters evaluated. Populations considered very densely packed and rhizomes/roots of both populations showed greater inhibitory effect on the ethanol extract. Chromatographic analysis identified the compounds as alpha-linolenic acid, margaric acid, adipic acid, among others, known in the literature for presenting allelopathic effect against phytoplankton. Differences between plant populations and structures were found, the largest amount of compounds identified in rhizomes / roots and densely population considered. The results suggest the existence of allelopathic effect on water hyacinth and this effect may also occur in nature and is related conditions density.

ALMADA, C. N. Atividade antioxidante do extrato etanólico de folhas de azeitona da terra (Syzygium Cumini L.) e seu efeito contra estresse induzido por paracetamol. 2013. 88 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-11-04T22:19:32Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_cnalmada.pdf: 1573148 bytes, checksum: 6019f5584f8cdc304f3f5f46bb44f5a4 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-19T20:55:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_cnalmada.pdf: 1573148 bytes, checksum: 6019f5584f8cdc304f3f5f46bb44f5a4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-19T20:55:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_cnalmada.pdf: 1573148 bytes, checksum: 6019f5584f8cdc304f3f5f46bb44f5a4 (MD5) Previous issue date: 2013 / Syzygium cumini is a plant originated from India and adapted in Brazil, popularly known as black plum, jambolan and jamun. In this study, the antioxidant and protective activities of ethanolic leaves extract of Syzygium cumini (EE) were evaluated on paracetamol-induced liver damage in mice. The total antioxidant activity was determined by ABTS and DPPH methods and the content of vitamin C, extractable polyphenols, anthocyanins, yellows flavonoids and carotenoids were evaluated by different methods. The toxicity of EE was evaluated with different doses up to 1200 mg/kg administered orally for eight consecutive days. Subsequently, doses of the EE (150, 300 and 600 mg/kg weight) were administered by gavage for 7 consecutive days before treatment with single dose of paracetamol (500 mg/kg, orally) and its hepatoprotective effect has been studied by monitoring biochemical parameters. The extract presented high antioxidant activity in ABTS (2148.88 ± 140.26 mM Trolox/g of sample) and DPPH (87.11 ± 1.58 g of sample/g DPPH) assays. The extractable polyphenols prevailed among determined phytochemicals. Regarding toxicity, EE showed no toxic effects at the doses evaluated. EE (600 mg/kg) presented hepatoprotective effect that was evidenced by the decrease in the activities of alanine aminotransferase (56.94%), aspartate aminotransferase (30.14%) and alkaline phosphatase (32.68%) in the serum of animals treated with EE (600 mg/kg) and subjected to ingestion of paracetamol (EE600+ P group) compared with the group paracetamol. In liver tissue, there was a decrease of 25.68%, 31.67% and 31.97% of the malondialdehyde levels and elevation of 60.03%, 63.67% and 69.12% of the dismutase superoxide activity in EE150+ P EE300+ P and EE600+ P groups, respectively, when compared with the paracetamol group. Furthermore, non-protein sulfhydryls groups in the liver increased 56.74% and 63.61% in EE300+P and EE600 + P groups when compared with the paracetamol group. The ethanolic leaves extract of Syzygium cumini conferred hepatoprotection against stress by paracetamol, this effect may be associated to its high antioxidant activity. / Syzygium cumini é uma planta originária da Índia e adaptada ao Brasil, popularmente conhecida como azeitona da terra, ameixa preta, jambolão e jamun. Neste estudo, as atividades antioxidantes e protetoras do extrato etanólico (EE) de folhas de azeitona da terra foram avaliadas contra danos induzidos por paracetamol no fígado de camundongos. A atividade antioxidante total foi determinada através dos métodos ABTS e DPPH e os teores de vitamina C, polifenois extraíveis, antocianinas, flavonoides amarelos e carotenoides foram avaliados por diferentes métodos. A toxicidade do EE foi avaliada com diferentes doses até 1200 mg/Kg administradas por via oral durante oito dias consecutivos. Posteriormente, doses do EE (150, 300 e 600 mg/Kg de peso) foram administradas por gavage durante 7 dias consecutivos antes do tratamento com dose única de paracetamol (500 mg/Kg, por via oral) e o seu efeito hepatoprotetor foi estudado através do monitoramento de parâmetros bioquímicos. O extrato apresentou elevada atividade antioxidante nos ensaios de ABTS (2.148,88 ± 140,26 µM Trolox/g de amostra) e DPPH (87,11 ± 1,58 g de amostra/g DPPH). Os polifenois extraíveis predominaram entre os fitoquímicos determinados. Em relação à toxicidade, EE não apresentou efeitos tóxicos nas doses avaliadas. EE (600 mg/kg) apresentou efeito hepatoprotetor que foi evidenciado pela diminuição nas atividades de alanina aminotransferase (56,94%), aspartato aminotransferase (30,14%) e fosfatase alcalina (32,68%) no soro de animais tratados com EE (600 mg/kg) e submetidos a ingestão de paracetamol (grupo EE600+P) em comparação com o grupo paracetamol. No tecido hepático, houve diminuição de 25,68%, 31,67% e 31,97% dos teores de malondialdeído e elevação de 60,03%, 63,67% e 69,12% da atividade da superóxido dismutase nos grupos EE150+P, EE300+P e EE600+P, respectivamente, quando comparados com o grupo paracetamol. Ademais, os grupos sulfidrilas não proteicos no fígado aumentaram 56,74% e 63,61% nos grupos EE300+P e EE600+P quando comparados com o grupo paracetamol. O extrato etanólico de folhas de azeitona da terra conferiu hepatoproteção contra estresse por paracetamol, podendo esse efeito estar associado à sua elevada atividade antioxidante.

PEREIRA, M. L. Aspectos estruturais, farmacológicos e toxicológicos de Mo-CBP4, uma proteína ligante à quitina de Moringa oleifera com atividade anti-inflamatória e antinociceptiva via oral. 2014. 211 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-22T17:51:51Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_mlpereira.pdf: 5385701 bytes, checksum: bf5a77dbe6d55bd0fb09e766abc43303 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-01-26T22:44:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_mlpereira.pdf: 5385701 bytes, checksum: bf5a77dbe6d55bd0fb09e766abc43303 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-26T22:44:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_mlpereira.pdf: 5385701 bytes, checksum: bf5a77dbe6d55bd0fb09e766abc43303 (MD5) Previous issue date: 2014 / Mo-CBP4 is a chitin-binding protein that is associated with the antinociceptive and anti-inflammatory effects of Moringa oleifera seeds, a tree known for its medicinal value. The aim of this study was the structural, pharmacological and toxicological characterization of Mo-CBP4, focusing on its use as a therapeutic agent. Mo-CBP4 is a 11.8 kDa heterodimer, composed by 3.9 kDa and 8.4 kDa chains. Mo-CBP4 sequencing by Edman degradation and mass spectrometry showed the presence of many basic amino acid residues and high similarity with other proteins from M. oleifera seeds. Circular dichroism spectroscopy showed that the Mo-CBP4 contains 36% α-helix, 15% β-sheet, 19% turn and 30% unordered and high structural stability to temperature and pH variations. Mo-CBP4 (0.1, 1.0 and 10 mg/kg) by intravenous administration showed anti-inflammatory activity on the model of carrageenan-induced peritonitis in rats, with inhibition (79%) of neutrophil migration already at the lowest dose. Mo-CBP4 (40 mg/kg), when administered by oral route on mice, using the same mentioned model, also presented anti-inflammatory activity, causing a significant inhibition (48%) of neutrophil migration. Mo-CBP4 retained this activity even after heating at 100 °C or pre-incubation with 0.1 M N-acetyl-D-glucosamine, both for 1 hour. Serum levels of IL-1β and IL-10 after peritonitis induction changed in Mo-CBP4-pretreated mice. In addition, Mo-CBP4 (10 mg/kg), administered intraperitoneally, also showed antinociceptive activity by using the formalin (2.5%) test in mice model, inhibiting just the peripheral pain. In the carrageenan-induced mechanical hypernociception model, animals pretreated with oral Mo-CBP4 (20, 40 and 80 mg/kg), 1 hour prior to inflammatory agent use, proved to be more resistant to sensitization after 1, 3 and 5 hours, with maximal inhibition at a dose of 40 mg/kg, being this activity correlated with the reduction of neutrophil migration. Direct hypernociception caused by epinephrine or PGE2 was not affected with Mo-CBP4 pretreatment. Mo-CBP4 did not impair the locomotor activity of animals in the open field test. In general, no toxic signs or adverse effects were seen after oral administration of Mo-CBP4 at a single dose (2000 mg/kg) or after repeated doses (10, 40 and 100 mg/kg). Similarly, cytotoxicity and genotoxicity tests with Mo-CBP4, using tumour or normal cells, showed no toxicity. The results suggest that due to anti-inflammatory and antinociceptive properties, high stability and apparent lack of toxicity, Mo-CBP4 has great potential as a future biopharmaceutical drug. / Mo-CBP4 é uma proteína ligante à quitina, com atividade anti-inflamatória e antinociceptiva, isolada de sementes de Moringa oleifera Lamarck, uma árvore conhecida pelo seu valor medicinal. Este trabalho teve como objetivo a caracterização estrutural, farmacológica e toxicológica de Mo-CBP4, com foco na sua utilização como agente terapêutico. Mo-CBP4 é um heterodímero de 11,8 kDa, composto por cadeias de 3,9 kDa e 8,4 kDa. O sequenciamento de Mo-CBP4 por degradação de Edman e espectrometria de massas mostrou a presença de muitos resíduos de aminoácidos básicos e alta similaridade com proteínas isoladas de sementes de M. oleifera. Análises espectroscópicas utilizando dicroísmo circular demonstraram que Mo-CBP4 é composta por α-hélices (36%), folhas-β (15%), voltas (19%) e estruturas ao acaso (30%), com alta estabilidade estrutural frente a variações de temperatura e pH. Mo-CBP4 (0,1, 1,0 e 10 mg/kg), por via endovenosa, mostrou atividade anti-inflamatória no modelo de peritonite induzida por carragenina em ratos, com inibição (79%) da migração de neutrófilos já na menor dose. Atividade anti-inflamatória de Mo-CBP4 (40 mg/kg) também ocorreu por via oral em camundongos, usando o mesmo modelo citado, com significativa inibição (48%) da migração de neutrófilos. Tal atividade permaneceu mesmo após aquecimento da proteína a 100 °C por 1 hora, porém, a pré-incubação com N-acetil-D-glucosamina 0,1 M foi capaz de reverter sua ação. Os níveis séricos de IL-1β e IL-10, após indução de peritonite, sofreram alteração com o pré-tratamento da proteína. Adicionalmente, Mo-CBP4 (10 mg/kg) mostrou atividade antinociceptiva, verificada através do teste da formalina (2,5%), quando administrada via intraperitoneal, inibindo apenas a dor periférica. No modelo de hipernocicepção mecânica induzida por carragenina, animais tratados via oral com a proteína (20, 40 e 80 mg/kg), 1 hora antes do agente inflamatório, mostraram-se mais resistentes à sensibilização após 1, 3 e 5 horas, apresentando inibição máxima na dose de 40 mg/kg, estando essa atividade relacionada com a redução da migração de neutrófilos. A hipernocicepção direta causada por PGE2 ou epinefrina não sofreu alteração com o pré-tratamento de Mo-CBP4. A proteína também não causou comprometimento na atividade locomotora dos animais, quando submetidos ao teste do campo aberto. A administração oral de Mo-CBP4 em dose única (2000 mg/kg) ou em doses repetidas (10, 40 e 100 mg/kg) não resultou em efeitos tóxicos ou adversos. Similarmente, avaliação da citotoxicidade e genotoxicidade de Mo-CBP4, utilizando células tumorais ou normais, mostrou ausência de toxicidade. Os resultados obtidos sugerem que devido às propriedades anti-inflamatória e antinociceptiva, alta estabilidade e aparente ausência de toxicidade, Mo-CBP4 possui grande potencial como um futuro biofármaco.

JUCÁ, T. L. Prospecção molecular e análise funcional de short-peptides vegetais. 2014. 173 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-22T18:02:32Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_tljuca.pdf: 7534508 bytes, checksum: 1ab832abd85ba27070b7ce083f40fe2d (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-03-18T22:49:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_tljuca.pdf: 7534508 bytes, checksum: 1ab832abd85ba27070b7ce083f40fe2d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-18T22:49:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_tljuca.pdf: 7534508 bytes, checksum: 1ab832abd85ba27070b7ce083f40fe2d (MD5) Previous issue date: 2014 / An increasing number of peptides isolated from a range of tissue plants have highlighted these molecules as a potential study target. Those peptides demonstrate a large functional variety and, therefore, have been frequently described in the scientific literature of the last years. The present work reports a molecular prospecting and functional characterization of plant "short-peptides". Initially, the Calotropis procera latex was partitioned into five fractions: hexane (49.4%), dichloromethane (5.2%), ethyl acetate (2.0%), butanol (2.1%) and aqueous (41.1%) (Chapter 1). The phytochemical profile and the spectroscopic analysis showed that the dichloromethane fraction was chemically the most heterogeneous. The dichloromethane and ethyl acetate fractions showed in vitro cytotoxicity against tumor cell lines (LD50 ranging from 0.05 to 3.9 mg/mL) and in vivo citotoxity against the crustacean Artemia salina (LD50 ranging from 10.9 to 65.7 mg/mL). These same fractions showed anti-inflammatory activity in carrageenan-induced peritonitis model in rats, associated to an inhibition of neutrophil migration for the dichloromethane (67%) and ethyl acetate (56%) fractions. A positive reaction with tolidine and ninhydrin suggests the presence of cyclopeptides in the bioactive ethyl acetate fraction. In Chapter 2, twenty primary sequences of peptides derived from the 1 fraction of Jatropha curcas seeds were deduced by de novo sequencing and confirmed by searches against genomic Jatropha database. The comparison of MS/MS fragmentation patterns between the doubly charged ion (671.79 m/z) found in fractions 1 and PII-C and its analogue synthetic peptide has shown that the use of additional analytical steps for the identification and characterization of these peptides would be not necessary. The BlastP search tool showed that the sequence APTLSGGSVPRDAD is homologous to and it is inserted into the conserved domain of the late embryogenesis protein (LEA_6). In Chapter 3, the two analogues synthetic peptides, linear (1342.44 g/mol) and cyclic (1324.44 g/mol), obtained by solid phase synthesis, showed differences that characterize their arrangement when compared to the pattern fragmentation by MS/MS and ion mobility. The net charge and the retention time had similar physicochemical parameters in both peptides. Dichroism circular studies showed the presence of a disordered state to both peptides. The biological assays of peptides showed no apparent signs of functional activity, however this fact do not exclude the possibility to test additional biological models. The results arising from this study generate new prospects and provide a basis for further work aiming the isolation and characterization of peptides in C. procera and J. curcas species. / Um número crescente de peptídeos isolados a partir dos mais diversos tecidos vegetais tem destacado essas moléculas como alvo potencial de estudo. Estes peptídeos apresentam uma grande diversidade funcional e, por isso, vem sendo descritos frequentemente na literatura científica dos últimos anos. No presente trabalho são relatadas a prospecção molecular e caracterização funcional de “short-peptides” vegetais. Inicialmente, o látex de Calotropis procera foi particionado, gerando cinco frações: hexânica (49,4%), diclorometano (5,2%), acetato de etila (2,0%), butanólica (2,1%) e aquosa (41,1%) (Capítulo 1). O perfil fitoquímico e as análises espectroscópicas mostraram que a fração diclorometano foi quimicamente a mais heterogênea. As frações diclorometano e acetato de etila apresentaram toxicidade in vitro contra linhagens de células tumorais (DL50 variando de 0,05 a 3,9 µg/mL) e, in vivo, contra o crustáceo Artemia salina (DL50 variando de 10,9 a 65,7 µg/mL). Estas mesmas frações apresentaram atividade antiinflamatória no modelo de peritonite induzida por carragenana em ratos, associadas a uma inibição da migração de neutrófilos de 67% (diclorometano) e 56% (acetato de etila). A reação positiva com tolidina e ninidrina sugere a presença de ciclopeptídeos na fração bioativa acetato de etila. No Capítulo 2, vinte e uma sequências primárias de peptídeos, oriundas da fração 1 de sementes de Jatropha curcas, foram deduzidas por meio de sequenciamento de novo e confirmadas através de buscas contra um banco de dados genômico de Jatropha. A comparação do padrão de fragmentação por MS/MS entre o íon duplamente carregado de m/z de 671,79, presente nas frações 1 e PII-C, e um peptídeo sintético, análogo àquele, mostrou que o uso de passos analíticos adicionais para a identificação e caracterização destes peptídeos não seria necessário. A ferramenta de busca BlastP mostrou que a sequência APTLSGGSVPRDAD apresenta homologia e está inserida no domínio conservado das proteínas de embriogênese tardia (LEA_6). No Capítulo 3, os dois peptídeos sintéticos análogos, linear (1342,44 g/mol) e cíclico (1324,44 g/mol), obtidos por síntese química em fase sólida, mostraram diferenças que caracterizam seus arranjos, quando comparados pelo padrão de fragmentação por MS/MS e mobilidade iônica. O estado de carga e o tempo de retenção foram similares, do ponto de vista físico-químico. Os estudos de dicroísmo circular mostraram a presença de um estado desordenado para os peptídeos. Os ensaios biológicos com os peptídeos não revelam sinais aparentes de atividade funcional, porém não se pode descartar a possibilidade de que modelos biológicos adicionais sejam testados. Os resultados advindos deste estudo geram novas perspectivas e servem de base para a realização de trabalhos subsequentes que tratem do isolamento e caracterização de peptídeos nas espécies Calotropis procera e Jatropha curcas.

LOPES, Mônica Maria de Almeida. Efeitos da luz pulsada no metabolismo e nas características físico-químicas de frutos de manga “Tommy Atkins” durante o armazenamento. 2015. 144 f. Tese (doutorado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-04-26T23:30:57Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_mmalopes.pdf: 1743596 bytes, checksum: 82637d9cbdf53218bda8c20c93b7e67a (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-27T21:03:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_mmalopes.pdf: 1743596 bytes, checksum: 82637d9cbdf53218bda8c20c93b7e67a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-27T21:03:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_mmalopes.pdf: 1743596 bytes, checksum: 82637d9cbdf53218bda8c20c93b7e67a (MD5) Previous issue date: 2015 / The pulsed light (PL) is a technology emergent used as abiotic stressor to increase the content of phytochemicals of fruits and vegetables. However, their effects vary depending on the cultivar, the dose hormetic, the mode of application of dose and the maturation stage of fruits. In this work, we start from the main hypothesis that changes in the metabolism of the fruits of mangoes treated with low doses of pulsed light would trigger responses that result in a positive impact on the content of phytochemicals, without any negative effect on the fruit quality parameters. This work was divided into three chapters. Chapter I is a literature review and state of the art of the main topics covered throughout the study. In the second chapter (experiment I), mangoes mature physiologically (maturation stage 3) were subjected to a hormetic dose of pulsed light 0.6 J cm-2 and analyzed after 7 days storage at 20 °C, for the physicochemical characteristics [soluble solid (SS), titratable acidity (TA), SS/TA ratio, overall appearance, color and firmness], enzymatic antioxidant metabolism [superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX)] and non-enzymatic [ascorbate, total carotenoids, total anthocyanins, yellow flavonoids, total phenolic, mangiferin content and total antioxidant activity], membrane integrity [lipid peroxidation (MDA), hydrogen peroxide content and electrolyte leakage], phenylalanine ammonia lyase activity (PAL), enzymes of enzymatic browning [polyphenoloxidase (PPO), peroxidase of guaiacol (GPOD) and activity of enzymes wall cell [pectinmethylesterase (PME) and polygalacturonase (PG)] and the influence of treatment on tissue histology. The activity of antioxidant enzymes such as catalase and superoxide dismutase was found to be substantially enhanced in both the epicarp and the mesocarp of fruits exposed to PL after 7 days at 20 ºC. There were no differences in indicators of cell wall and membrane integrity such as MDA content suggesting that the PL-associated oxidative stress was effectively prevented by the enhanced activity of antioxidant enzymes after 7 days. Activities of cell wall enzymes were reduced after 7 days in the PL-treated fruits. Microscopic as well as macroscopic observations confirmed that PL-treated fruits were not damaged. We observed that contents in total carotenoids, in total phenolic, and, to a lesser extent, in vitamin C, were dramatically increased after 7 days, generally in both the epicarp and the mesocarp PL-treated resulting in fruits with high antioxidant capacity. Carotenoids increased 350% in treated-pulp at J7. The higher levels in phenolics in treated-peel (+97%) were associated with enhanced activity of PAL (+98%) and enhanced content in mangiferin (+42%). Although G-POD in the mesocarp and PPO in the epicarp increased 1268% and 22% respectively, after 7 days in the PL-treated fruits, we did not observe increases in browning. Was observed at the end of the experiment I an increase of phytochemicals in mangoes subjected to hormetic dose of 0.6 J cm-2 without negative changes in fruit quality. In the third chapter (experiment II), mangoes minimally processed (maturation stage 4) were subjected to four different treatments: control (not flashed), 1 pulse, 4 pulses, and 1 pulse (4 days) prior to storage at 6 ºC in order to assess whether the mode of application of the different doses used could interfere on physiochemical variables [firmness, color, SS, loss weight and rate respiration] the bioactive compounds [ascorbate (AsA) and carotenoids] and total antioxidant activity by a storage period of 7 days at 6 ºC. Samples flashed with 1 pulse during 4 alternated days (4 x 0.6 J cm-2 = 2.80 J cm-2) increased the total ascorbate (AsA) (~40% more than the control) at time 7 days but the cubes of mangoes are darker than treatment that received the same dose of 4 successive pulses (2.80 J cm-2). At end of storage fresh cut mangoes received 4 successive pulses exhibited a better quality in comparison to the other treatments that was associated a higher content carotenoid (0.894 mg g-1) and antioxidant activity (~145 μmol trolox 100 g-1). In conclusion, our data suggest that a hormetic dose of pulsed light can be used to increase concentrations of phytochemical compounds without negative effects on the quality criteria. / A luz pulsada (LP) é uma tecnologia emergente usada como estressor abiótico para aumentar o teor de fitoquímicos em frutos e vegetais. No entanto, seus efeitos variam dependendo da cultivar, da dose hormética, do modo de aplicação da dose e do estádio de maturação do fruto. Neste trabalho, partimos da hipótese de que alterações no metabolismo dos frutos de mangas tratadas por baixas doses de luz pulsada desencadeariam respostas que resultariam em um impacto positivo sobre o conteúdo de fitoquímicos, sem qualquer efeito negativo sobre os parâmetros de qualidade dos frutos. Este trabalho foi dividido em três capítulos. O capítulo I trata de uma revisão de literatura e estado da arte dos principais tópicos abordados ao longo do estudo. No segundo capítulo (experimento I), mangas fisiologicamente maduras (estágio de maturação 3) foram submetidas a uma dose de luz pulsada de 0,6 J cm-2 e analisadas decorridos 7 dias de armazenamento a 20 ºC, quanto às características fisico-químicas [sólidos solúveis (SS), acidez titulável (AT), relação SS/AT, aparência geral cor, firmeza], metabolismo antioxidante enzimático [dismutase do superóxido (SOD), catalase (CAT) e peroxidase do ascorbato (APX)] e não-enzimático [vitamina C, carotenóides totais, antocianinas totais, flavonóides amarelos, polifenóis totais, conteúdo de mangiferina e atividade antioxidante total], integridade de membrana [peroxidação lipídica (MDA), peróxido de hidrogênio e extravasamento de eletrólitos], atividade da fenilalanina amônia liase (PAL), atividade das enzimas de escurecimento [polifenoloxidase (PPO) e peroxidase do guaiacol (G-POD)], atividade das enzimas de parede celular [pectinametilesterase (PME) e poligalacturonase (PG)] e a influência do tratamento na histologia dos tecidos. A atividade das enzimas antioxidantes como a dismutase superóxido e a catalase encontraram-se elevadas tanto na polpa quanto na casca dos frutos expostos à LP após 7 dias a 20 ºC. Não foram encontradas diferenças significativas nos indicadores de parede celular e integridade de membrana como o MDA, sugerindo que o estresse oxidativo associado à LP foi efetivamente prevenido através do aumento da atividade das enzimas antioxidantes após 7 dias. Atividades das enzimas de parede celular foram reduzidas após 7 dias nos frutos tratados. Observações macroscópicas e microscópicas confirmaram que os frutos não foram danificados pela LP. O conteúdo de carotenóides totais, fenólicos, e em menor extensão, a vitamina C, foram dramaticamente aumentados após 7 dias, tanto no epicarpo como mesocarpo tratados pela LP, resultando em frutos com alta capacidade antioxidante. Carotenóides aumentaram 350% na polpa tratada pela LP após 7 dias. Os níveis mais elevados de compostos fenólicos (+97%) na casca tratada foram associados a uma atividade aumentada da PAL (+98%) e conteúdo de mangiferina (+42%). As atividades da G-POD no mesocarpo e da PPO no epicarpo aumentaram 1268% e 22% respectivamente, após 7 dias nos frutos tratados, no entanto, não foi observado escurecimento dos frutos. Observou-se, ao final do primeiro experimento, um aumento dos fitoquímicos em mangas submetidas a dose hormética de 0,6 J cm-2 sem alterações negativas na qualidade dos frutos. No terceiro capítulo (experimento II), mangas minimamente processadas (estágio de maturação 4), foram submetidas a quatro diferentes tratamentos: controle, 1 pulso, 4 pulsos e 1 pulso por dia durante 4 dias, com o objetivo de avaliar se o modo de aplicação da LP poderia interferir nas variáveis fisico-químicas [firmeza, SS, cor, perda de matéria fresca e taxa de respiração], compostos bioativos [carotenóides e vitamina C] e atividade antioxidante total quando armazenamentos durante 7 dias a 6 ºC. Amostras que receberam 4 pulsos alternados (4 x 0,7 J cm-2 = 2,80 J cm-2), aumentaram o conteúdo de ascorbato total (~40%) após 7 dias, no entanto, os cubos apresentaram-se mais escuros do que o tratamento que recebeu a mesma dose de 4 pulsos sucessivos. No final do período de armazenamento, as mangas minimamente processadas que receberam 4 pulsos sucessivos exibiram uma melhor qualidade em comparação com os demais tratamentos, que foi associado ao elevado teor de carotenóides (0,894 mg g-1 MF) e atividade antioxidante (~145 μmol trolox 100 g-1). Como conclusão, nossos dados sugerem que uma dose hormética de luz pulsada pode ser utilizada para aumentar as concentrações de compostos fitoquímicos sem efeitos negativos na qualidade de frutos de mangas “Tommy Atkins”.

Orientador : Dr. Obdulio Gomes Miguel / Coorientadora : Drª. Sila Mary Rodrigues Ferreira / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Alimentação e Nutrição. Defesa: Curitiba, 29/07/2016 / Inclui referências : f. 37-42;62-67;82-86;88-91 / Resumo: A espécie Pereskia aculeata Mill, popularmente conhecida como ora-pro-nobis (OPN), pertence a um grupo de hortaliças conhecidas como não-convencionais, ou tradicionais, que atualmente tem seu cultivo e consumo diminuído em todas as regiões do país, devido à globalização e ao crescente uso de alimentos industrializados. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar a composição físico-química das folhas e dos frutos da OPN, bem como a atividade antioxidante e biológica das folhas. Para tanto, foram coletadas folhas frescas e frutos em três estádios de maturação (verde, intermediário e maduro) em dois pontos distintos na cidade de Curitiba - PR. Para a caracterização físico-química, foram determinados os valores de umidade, pH, cinzas, teor de sólidos solúveis, acidez titulável, proteínas, lipídeos, carboidratos, fibras e valor energético das folhas e dos frutos da OPN. As análises de antioxidantes das folhas envolveram ensaios de potencial de redução do DPPHo, ensaio do ácido tiobarbitúrico (TBARS), formação do complexo fosfomolibdênio, conteúdo fenólico e flavonoides totais, e carotenoides (?-caroteno e licopeno), enquanto no fruto foram avaliados apenas os carotenoides totais. As atividades biológicas envolveram a atividade hemolítica e a avaliação da toxicidade preliminar in vitro frente à Artemia salina. O estudo revelou quantidades significativas de proteínas e fibras alimentares nas folhas da espécie P. aculeata. A espécie não apresentou toxicidade em ambos os extratos brutos das folhas, sendo que algumas frações apresentaram toxicidade moderada desde as primeiras 24h. Os resultados indicam que as folhas de OPN são boa fonte de proteínas e fibras alimentares. Estudos para identificar os fitoquímicos responsáveis por essa possível toxicidade, além da pesquisa da quantidade segura de ingestão e melhor modo de preparo para seu consumo são necessários. As análises de caracterização físico-química revelaram que os frutos da ora-pro-nobis durante a maturação apresentam aumento significativo dos valores de pH, sólidos solúveis totais, glicose, frutose, sacarose, ?-caroteno e licopeno, e redução significativa nos valores de fibras alimentares e ácidos cítrico e málico. O fruto maduro apresenta um alto teor de carotenoides, destacando o potencial antioxidante da OPN. Palavras-chave: Pereskia aculeata Mill; ora-pro-nobis; hortaliças não- convencionais; caracterização físico-química; atividade antioxidante; atividades biológicas. / Abstract: The Pereskia aculeata Mill species, popularly known as "ora-pro-nobis" (OPN), belongs to a group known as unconventional or traditional vegetables, which currently has its cultivation and consumption decreased in all Brazil's regions due to globalization and the increasing use of processed foods. This study aimed to characterize the physical and chemical composition of leaves and fruits of OPN, as well as the antioxidant and biological activities of the leaves. Therefore, fresh leaves and fruits in three maturity stages (green, intermediate and ripe) were collected at two different sites at the city of Curitiba - PR. For the physicochemical characterization, values of humidity, pH, ashes, amount of soluble solids, titratable acidity, proteins, lipids, carbohydrates, fibers and energetic values were determined for the OPN leaves and fruits. Antioxidant analysis on the leaves involved assays of the reduction potential of the DPPH radical, assay of thiobarbituric acid (TBARS), formation of phosphomolybdic complex, total phenolic content, content of flavonoids, and carotenoids (?-carotene and lycopene), while on the fruit only the carotenoids were evaluated. Biological activities involved the hemolytic activity and the evaluation of preliminary toxicity in vitro front to Artemia salina. The study revealed significant quantities of proteins and dietary fibers on the leaves of the P. aculeata species. The species did not showed toxicity in both raw leaves extracts, with some fractions presenting moderate toxicity since the first 24h. Results point out that OPN leaves are a good source of protein, dietary fibers. Studies for the identification of phytochemicals responsible for this possible toxicity, in addition to a research on the safe amount for ingestion and better preparation for its consumption are necessary. Physicochemical characterization analysis revealed that ora-pro-nobis fruits during ripeness present a significant increase in values of pH, total soluble solids, glucose, fructose, sucrose, ?-carotene and lycopene, and a significant reduction in the values of dietary fibers and citric and malic acids. Ripe fruit presents a high carotenoid amount, highlighting the OPN antioxidant potential. Key-words: Pereskia aculeata Mill; ora-pro-nobis; unconventional vegetables; physicochemical characterization; antioxidant activity; biological activities.

CNPq / O Capim Annoni-2 (Eragrostis plana Nees) é uma poaceae que apresenta potencial alelopático conforme observado em trabalhos anteriores. Neste estudo os extratos, obtidos com solventes em ordem crescente de polaridade (éter de petróleo, acetato de etila e metanol), das folhas de Capim Annoni-2, coletadas no verão e inverno, foram analisados e comparados, levando-se em conta composição e/ou concentração de metabólitos produzidos, utilizando-se técnicas de Infravermelho e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, sendo que, os dados de Infravermelho foram comparados estatisticamente por PCA, em seguida realizou-se o fracionamento dos extratos de acetato de etila verão e inverno, as substâncias isoladas foram identificadas através de métodos espectrométricos e espectroscópicos: RMN de 1H e 13C, experimentos de HSQC e HMBC e CG-EM. Verificou-se que os extratos apresentam riqueza em termos de provável variedade de compostos químicos, além disso, observa-se que os solventes utilizados para a extração resultam, estatisticamente, em maiores diferenças, em termos de composição química, do que a estação do ano em que as folhas foram coletadas. Foram identificadas duas substâncias resultantes do fracionamento do extrato de acetato de etila verão, um triacilglicerol e um rotenóide. A presença de um rotenóide nas folhas de Capim Annoni-2, pode justificar a ação alelopática observada nesta espécie em outros trabalhos. / The Annoni-2 grass (Eragrostis plana Nees) is a poaceae that presents allelophatic potential as observed in other research. In this study, the extracts were obtained from leaves collected during summer and winter. The extraction process was performed using solvents in a increasing order of polarity (petroleum ether, etyl acetate and methanol) and the extracts were analyzed and compared regarding the composition and/or concentration of metabolites produced. The techniques utilized were high performance liquid chromatography and infrared spectroscopy, and, the data obtained from the infrared analisys was compared using PCA, then the fractionation of summer and winter ethyl acetate extracts was carried out and the isolated compounds were identified by spectrometric and spectroscopic methods: NMR 1H and 13C, experiments of HSQC and HMBC and GC-MS. The results show the extracts are rich when it comes to probable variety of chemical compounds. It is also observed that, statistically, the solvents used in the extraction process influence the diversity of chemical compounds more than the season in which the leaves were collected. Triacylglycerol and rotenoid were identified from the fractionation summer ethyl acetate extract, and the presence of a rotenoid in the leaves of Annoni-2 grass, can justify the allelopathic action observed in this species in other works.