Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Gilson Cesar Nobre Franco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:41:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2012 / Resumo: Periodontite é a doença multifatorial que envolvem interações entre algumas espécies bacterianas, como Porphyromonas gingivalis W83 e células do hospedeiro. Levando a uma resposta imuno-inflamatória que causa a destruição do tecido ósseo e gengival Neste contexto, fármacos com a habilidade de modular este processo imuno-inflamatório podem auxiliar no tratamento da doença periodontal (DP). A doxiciclina em dose subantimicrobiana (DDS), apresenta propriedades anti-inflamatórias pela sua atuação em algumas vias da inflamação. No entanto, ainda é discutido o efeito desta terapia dobre a susceptibilidade bacteriana por longo tempo. Assim, o objetivo deste trabalho foi analisar os efeitos da DDS como um modulador da resposta imuno-inflamatória do hospedeiro na DP induzidas em ratos e avaliar a susceptibilidade da P. gingivalis cultivadas com DDS por longo tempo. A DP foi induzida em ratos Wistar machos (SPF) submetidos à colocação de ligadura em torno dos primeiros molares inferiores foram randomizados e divididos em 3 grupos experimentais (n=10 animais/grupo/experimento): 1) grupo controle: ratos sem ligadura e sem tratamento; 2) grupo ligadura: ratos com ligadura e tratados com solução NaCl 0,9 %) e 3) grupo ligadura + DDS: ratos com ligadura e tratados com a DDS (5 mg/kg/dia). No tecido gengival, extraídos de animais tratados por 3 dias, foram avaliadas as expressões gênicas de TNF-'alfa' IL-1' beta', IL-17 e PAR2 através de RTPCR. As mandíbulas dos ratos tratados por 15 dias foram usadas para mensuração da reabsorção óssea alveolar (coradas com Hematoxilina e Eosina) e da quantidade de fibras colágenas (coradas com Picrosirius- Vermelho). Para a análise microbiológica, a P. gingivalis (ATCC BAA-308) foi cultivada por 3 meses (45 gerações) em meio de cultura contendo 0,4 ug/mL de DDS e avaliada por meio de concentração inibitória mínima (CIM) para Amoxiciclina, Doxiciclina e Metronidazol. A DDS inibiu significativamente os níveis de RNAm do tecido gengival para os IL-1' beta', IL-17, TNF-'alfa' e PAR2 (P<0,05, ANOVA, teste Tukey). Além disso, a DDS reduziu a perda óssea quando comparada ao grupo ligadura (P<0,05 ANOVA, teste Tukey) e manteve a porcentagem de fibras colágenas com níveis similares ao grupo controle (P>0,05). Na análise da susceptibilidade de P. gingivalis a DDS não apresentou resistência multi-antibiótica para esta cepa, entretanto, houve uma alteração nos valores de CIM para todos antibióticos testados com a P. gingivalis crescida ao longo do tempo. Em conjunto, os dados demonstram que a DDS diminuiu a resposta inflamatória, a reabsorção óssea e a degradação de colágeno no modelo utilizado de DP, indicando sua atividade como moduladora da resposta do hospedeiro na DP. A alteração microbiana com o uso contínuo e de longo período de DDS modificou a sensibilidade da P. gingivalis, entretanto não desenvolveu resistência antibiótica a doxiciclina / Abstract: Periodontitis is a multifactorial disease involving interactions between some bacterial species, as Porphyromonas gingivalis W83, and host cells. Leading to an immune-inflammatory response that causes the destruction of bone and gingival. In this context, drugs with the ability to modulate immuno-inflammatory process that may aid in the treatment of periodontal disease (PD). Doxycycline dose subantimicrobiana (DDS) has anti-inflammatory properties because of its role in some pathways of inflammation. However, it is still discussed the effect of this therapy fold the bacterial susceptibility for a long time. The objective of this study was to analyze the effects of DDS as a modulator of the immune-inflammatory response in the host DP induced in rats and to evaluate the susceptibility of P. gingivalis grown with DDS for a long time. The DP was induced in male Wistar rats (SPF) submitted of ligature around the first molars and divided into three experimental groups (n = 10 animals/group/experiment): 1) control group: rats without ligature and without treatment; 2) ligature group: rats with ligature and treated with 0.9% NaCl solution and 3) ligature + SDD group: rats with ligature and treated with SDD (5 mg/kg/day). In gingival tissue, extracted from animals treated for 3 days, we assessed the gene expression of TNF-'alpha', IL-1'beta', IL-17 and PAR2 by RT-PCR. The jaws of rats treated for 15 days were used for measurement of alveolar bone resorption (stained with Hematoxylin and Eosin) and collagen fibers (stained with Picrosirius-Red). For microbiological analysis, P. gingivalis was grown for 3 months (45 generations) in culture medium containing 0.4 ug/mL of SDD and evaluated by minimum inhibitory concentration (MIC). SDD significantly inhibited mRNA levels of the gingival tissue for IL-1'beta', IL-17, TNF-'alpha' and PAR2 (p<0.05, ANOVA, Tukey test). In addition, SDD has reduced bone loss when compared to the ligature group (p<0.05 ANOVA, Tukey test) and also maintained the percentage of collagen fibers at levels similar to the control group (p> 0.05). In the analysis of susceptibility to P. gingivalis SDD showed no multi-antibiotic resistance for this strain, however, there was a change in the MIC values for all antibiotics tested with P. gingivalis growth to long-time. Together, these data demonstrate that SDD reduced the inflammatory response, bone resorption and collagen degradation in PD, indicating its activity as a modulator of the host response in PD. Furthermore, SDD affected the sensitivity of P. gingivalis, however not developing antibiotic resistance with 3 months therapy / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Odontologia
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/288517 |
| Date | 20 August 2018 |
| Creators | Castro, Myrella Lessio, 1978- |
| Contributors | UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Franco, Gilson Cesar Nobre, Rosalen, Pedro Luiz, 1960-, Yatsuda, Regiane, Polacow, Maria Luiza Ozores, Motta, Cristiane de Cassia Bergamaschi, Cogo, Karina |
| Publisher | [s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Programa de Pós-Graduação em Odontologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | 45 f. : il., application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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