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Previous issue date: 2018-02-28 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Introduction:Vulvovaginal candidiasis (VVC) is characterized as the second most common
infection among infections affecting this region. Candida yeasts, such as C. albicans, C.
parapsilosis, C. topicalis, C. glabrata, C. krusei and C. guilliermondii, are the main causes of
this pathology and can be identified by phenotypic and molecular methods. Objectives:This
study determines the predictive value (PPV) of the clinical diagnosis of VVC in comparison to
the culture, characterizes Candida species isolated from the vaginal mucosa through
phenotypic and molecular methods, and verifies the production of hydrolytic enzymes and the
susceptibility profile in vitro to antifungal agents used in VVC therapy. Methods: the
phenotypic methods used were based on morphological and biochemical aspects, while
molecular tests were performed using the polymerase chain reaction with primes specific for
each species. In order to verify the activity of the enzymes protease, phospholipase and
hemolysin, yeast growth was carried out in media containing bovine albumin, egg yolk and
blood, and the reading was determined by the precipitation zone (PZ). Adherence of Candida
to epithelial cells was determined by light microscopy by counting the number of cells adhered
to 100 epithelial cells. In vitro susceptibility of Candida isolates to fluconazole, itraconazole,
voriconazole, nystatin, and amphotericin B was performed using the broth dilution assay to
determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the antifungal. Results: the VPP of
clinical diagnosis against the gold standard of 61.8% (34/55). Among the 55 samples
collected, 36 isolates identified as C. albicans(27), C. glabrata (5) and C. topicalis (4) were
obtained. All isolates were enzyme producers with average adherence to 100 oral epithelial
cells for the C. albicans, C. glabrata and C. tropicalis species were respectively 402.5, 236.2
and 58. High resistance to fluconazole (38.8%), high susceptibility to amphotericin B (94.4%)
and low MIC values for nystatin (8 μg / mL at > 16 μg/mL) were observed for the isolates.
Conclusions: the culture is essential for the diagnosis of CVV and confirm that C. albicans
continues the predominant species as CVV agent. All species presented a high pathogenic
power. Hydrolytic enzymes were produced by all the isolates. This study allow suggest to the
clinician that the in vitro susceptibility tests prior to antifungal prescription would bring higher
therapeutic success. / Introdução: a candidíase vulvovaginal (CVV) é caracterizada como a segunda infecção mais
comum entre as infecções que acometem esta região. As leveduras do gênero Candida, como
C. albicans, C. parapsilosis, C. topicalis, C. glabrata, C. krusei e C. guilliermondii são as
principais causadoras desta patologia, podendo ser identificadas por métodos fenotípicos e
moleculares. Objetivos: determinar o valor preditivo (VPP), do diagnóstico clínico de CVV em
comparação à cultura, realiza a caracterização das espécies de Candida isoladas da mucosa
vaginal através de métodos fenotípicos e moleculares, verifica a produção de enzimas
hidrolíticas e o perfil de suscetibilidade in vitro aos antifúngicos usados na terapia da CVV.
Metódos: Os métodos fenotípicos usados foram baseados em aspectos morfológicos e
bioquímicos, enquanto os testes moleculares foram realizados usando–se a reação em cadeia
da polimerase com oligonucleotídeos específicos para cada espécie. Para a verificação da
atividade das enzimas proteinase, fosfolipase e hemolisina, foi realizado respectivamente, o
crescimento das leveduras em meios contendo albumina bovina, gema de ovo e sangue,
sendo a leitura determinada pela zona de precipitação (PZ). A aderência de Candida às células
epiteliais foi determinada por microscopia óptica pela contagem do número de células
aderidas a 100 células epiteliais. A suscetibilidade in vitro dos isolados de Candida para
fluconazol, itraconazol, voriconazol, nistatina e anfotericina B foi realizada usando-se o teste
de diluição em caldo visando á determinação da concentração inibitória mínima (CIM) do
antifúngico. Resultados: o VPP do diagnóstico clínico frente ao padrão-ouro de 61,8%
(34/55). Dentre as 55 amostras coletadas foram obtidos 36 isolados identificados como C.
albicans (27), C. glabrata (5) e C. tropicalis (4). Todos os isolados foram produtores de
enzimas, a média de aderência à 100 células epiteliais bucais para as espécies de C. albicans,
C. glabrata e C. tropicalis foi respectivamente de 402,5, 236,2 e 58. Alta resistência ao
fluconazol (38,8%), elevada suscetibilidade a anfotericina B (94,4%) e baixos valores de MIC
para nistatina (8 μg/mL a > 16 μg/mL) foram observados para os isolados.Conclusões: a
cultura é fundamental para o diagnóstico de CVV e confirmam que C. albicans continua a
espécie predominante como agente de CVV. Todas as espécies apresentam um alto poder
patogênico visto a liberação de enzimas por todos os isolados. Este estudo permite sugerir ao
clínico que a realização de testes de suscetibilidade in vitro anterior a prescrição do
antifúngico traria maior êxito terapêutico.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/8214 |
| Date | 28 February 2018 |
| Creators | Santos, Andressa Santana |
| Contributors | Silva, Maria do Rosário Rodrigues, Silva, Maria do Rosário Rodrigues, Ataídes, Fabio Silvestre, Jesuíno, Rosália Santos Amorim |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Medicina Tropical e Saúde Publica (IPTSP), UFG, Brasil, Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública - IPTSP (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 6085308344741430434, 600, 600, 600, 600, -7769011444564556288, -3854583469976220812, -2555911436985713659 |
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