FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / O cÃncer oral representa um sÃrio problema de saÃde pÃblica mundial. Entre os tumores deste sÃtio anatÃmico, os carcinomas de cÃlulas escamosas orais (CCEO) respondem por atà 94% do total. Os mecanismos moleculares envolvidos na gÃnese e desenvolvimento tumoral ainda nÃo estÃo completamente elucidados. Algumas evidÃncias tÃm sugerido a participaÃÃo viral neste processo. AlÃm disso, estes tumores ainda carecem de marcadores confiÃveis para determinar o perfil de agressividade. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo avaliar a expressÃo das proteÃnas p53, E-caderina, COX-2, p16, MLH1 e MYC numa sÃrie de CCEO, considerando tambÃm a marcaÃÃo citoplasmÃtica eventualmente observada para as Ãltimas trÃs proteÃnas, confrontando os resultados entre elas e com as caracterÃsticas demogrÃficas e clÃnico-patolÃgicas. AlÃm de avaliar a prevalÃncia do PapilomavÃrus Humano (HPV) e do VÃrus Epstein-Barr (EBV) na amostra e comparÃ-las com a expressÃo das referidas proteÃnas. Materiais e MÃtodos â Cem espÃcimes de CCEO, fixados em formalina e incluÃdos em blocos de parafina, foram submetidos à imunohistoquÃmica para a detecÃÃo das referidas proteÃnas e à hibridaÃÃo in situ para detecaÃà de HPV e EBV. Resultados â Foi observada associaÃÃo referente à perda de expressÃo concomitante de p16 e MLH1 (p=0,029) e na coexpressÃo de p53 e COX-2 (p=0,045). Ademais, foi verificado que a COX-2 e o MYC nuclear estavam relacionados com a marcaÃÃo citoplasmÃtica de MLH1 (p=0,060 e p=0,018; respectivamente). A anÃlise combinada dos marcadores revelou cinco grupos principais de expressÃo alterada que eram constituÃdos, em sua maioria, de tumores mais agressivos, principalmente o grupo MLH1(-)/COX-2(+)/p16(-). Os casos com marcaÃÃo citoplasmÃtica para p16, MLH1 e/ou MYC foram mais frequentes em tumores avanÃados (p=0,009) e naqueles com metÃstases em linfonodos (p=0,001). Trinta e um casos demonstraram marcaÃÃo para HPV em tecido tumoral. O EBV nÃo foi detectado em nenhum dos casos investigados, nem no tecido tumoral nem no epitÃlio nÃo neoplÃsico. O grupo HPV(+) exibiu elevada positividade para o p16 nuclear (p=0,029) e MYC cytoplasmÃtico (p=0,039), tambÃm uma maior perda de expressÃo nuclear de MLH1 (p=0,031). Houve ainda uma tendÃncia referente ao aumento da positividade de COX-2 no grupo infectado (p=0,084). ConclusÃes â As significÃncias verificadas entre p16 e MLH1 sugerem que a ausÃncia do membro do sistema de reparo de encaixe (MMR) tambÃm favoreÃa a ocorrÃncia de mutaÃÃes no gene p16, culminando na inativaÃÃo deste supressor tumoral. As associaÃÃes de COX-2 e MYC com o MLH1 de expressÃo citoplasmÃtica suscitam um mecanismo de bloqueio de entrada de MLH1 no nÃcleo. A anÃlise combinada das proteÃnas, bem como, a marcaÃÃo citoplasmÃtica de p16, MLH1 e MYC, podem representar indicadores Ãteis na avaliaÃÃo do perfil de agressividade e, provavelmente, de prognÃstico em CCEO. Acerca dos vÃrus, nossos achados sugerem que o HPV esteja envolvido em uma importante parcela de casos de CCEO e que possa promover a expressÃo de p16 nuclear, MYC citoplasmÃtico e COX-2, e suprimir a expressÃo nuclear de MLH1. Quanto ao EBV, nÃo foram detectados EBERs (EBV-encoded small RNAs) na amostra. / The oral cancer represents a serious world public health problem. The oral squamous cell carcinomas (OSCC) account for up to 94% of the tumors of this anatomic site. The molecular mechanisms involved in the genesis and progression are still not well elucidated. Some evidences have suggested the involvement of viruses in this process. Also, these tumors still lack of reliable markers to determine the aggressiveness profile. In this context, the aim of the present study was to evaluate the expression of the proteins p53, E-cadherin, COX-2, p16, MLH1 and MYC in a serie of OSCC, including the cytoplasmic staining eventually observed for the latter three proteins, confronting the results between them and with demographic and clinico-pathological features. Besides evaluating the prevalence of Human Papillomavirus (HPV) and Epstein-Barr virus (EBV) in the sample and compare them with the expression of the referred proteins. Materials and Methods â One hundred formalin-fixed paraffin-embedded OSCC specimens were submitted to immunohistochemistry for detection of the referred proteins, and to in situ hybridization for HPV and EBV detection. Results â OSCC was associated with a concomitant lack of expression of p16 and MLH1 (p=0.029) and coexpression of p53 and COX-2 (p=0.045). Additionally, COX-2 and nuclear MYC were found to be related to exclusively cytoplasmic staining of MLH1 (p=0.060 and p=0.018, respectively). The combination analyses of the markers revealed five main groups of altered protein expression, which were mostly of the more aggressive tumors, mainly the MLH1(-)/COX-2(+)/p16(-) group. The cases with cytoplasmic staining for p16, MLH1 and/or MYC were more frequent in advanced tumors (p=0.009) and in those with lymph node metastasis (p=0.001). Thirty-one cases showed staining for HPV in tumor tissue. The EBV was not detected in any case investigated, neither in the tumor tissue nor in the non-neoplastic epithelium. The HPV(+) group demonstrated high positivity for nuclear p16 (p=0,029) and cytoplasmic MYC (p=0,039), and an increase of the lack of MLH1 nuclear expression (p=0,031). There was also a trend related to the increase of the COX-2 positivity in the HPV(+) group (p=0,084). Conclusions â The significance between p16 and MLH1 suggests that the lack of this member of mismatch repair system also favors the occurrence of mutations in the p16 gene, culminating in inactivation of this tumor suppressor. The associations of COX-2 and MYC with cytoplasmic MLH1 suggest a blocking mechanism for the entry of MLH1 into the nucleus. The combined analyses of the proteins investigated, as well as the cytoplasmic staining of p16, MLH1 and MYC, may be useful in the evaluation of the aggressive profile and probably prognosis of OSCC. Regarding the viruses, our findings suggest that the HPV is involved in an important portion of OSCC cases and that may promote the expression of the nuclear p16, cytoplasmic MYC and COX-2, and suppress the nuclear expression of MLH1. About EBV, it was not detected the EBV-encoded small RNAs (EBERs) in the sample.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:6394 |
| Date | 25 February 2013 |
| Creators | Marcos Antonio Pereira de Lima |
| Contributors | Silvia Helena Barem Rabenhorst, Renato Luiz Maia Nogueira, FabrÃcio Bitu Sousa, Roberta Barroso Cavalcante, LÃlia Batista de Souza |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Biotecnologia (Rede Nordeste de Biotecnologia - RENORBIO), UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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