Os tióis são importantes para manter as funções celulares. A glutationa (GSH) é um
importante peptídeo redutor que repara biomoléculas oxidadas envolvidas na
sinalização celular e atua como “scavenger” de bioradicais, quando, neste último caso,
forma-se o radical glutationila (GS•). Para investigar o papel dos radicais tiila (RS•)
durante o “burst” respiratório de macrófagos, foi usado o nitróxido 4-9((-
acridinecarbonil)-amino)-2,2,6,6-tetrametilpiperidina-1-oxil (Ac-Tempo) o qual reage com
radicais, particularmente tiila e radicais centrados no carbono, apagando o sinal de
EPR, enquanto ocorre aumento de fluorescência da acridina (lex 361 nm, lem 440 nm)
(Borisenko et al. JACS 126, 9221, 2004). Macrófagos de focos inflamatórios peritoneais
não estimuladas mostraram um baixo sinal de fluorescência acompanhado pela
manutenção do sinal de EPR característico do Ac-Tempo. Estímulo celular com PMA,
na presença de Ac-Tempo, elicitou sinal de fluorescência dose-dependente, em
sincronia com a redução do sinal de EPR e com consumo de O2. Mudanças na
intensidade do sinal de fluorescência e de EPR foram dependentes dos níveis celulares
de GSH, demonstrado pelo pré-tratamento das células com butionina sulfoximina (BSO)
e N-etilmaleimida (NEM ). O tratamento celular com o nitróxdio determinou diminuição
do processo de S-glutationação protéica associado à atividade do complexo NADPH
oxidase. Os resultados sugerem um papel central de radicais tiila, provavelmente GS•,
na manutenção do “burst” respiratório de macrófagos e apontam os nitróxidos como
protótipos de antiinflamatórios. / Thiols are required to maintain cellular functions. For instance, glutathione (GSH) is an
important reductant to repair oxidized biomolecules, to cycle proteins involved in cell
signaling and to scavenge bioradicals, although the relatively reactive glutathionyl
radical (GS•) is produced in the latter case. To investigate GS• participation in
macrophage respiratory burst, we employed the nitroxide 4-9((-acridinecarbonil)-amino)-
2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxil (Ac-Tempo) whose interaction with GS• and carbon
centered radicals switches off Ac-Tempo EPR signal while switching on acridine moiety
fluorescence (ëexc 361 nm, ëemi 440 nm) (Borisenko et al JACS 126, 9221,2004).
Inflammatory macrophages unstimulated displayed low fluorescence accompanied by
maintenance of Ac-Tempo EPR signal. Cells stimulated with PMA in the presence of Ac-
Tempo elicited a dose-dependent fluorescence in synchrony with EPR signal decay and
O2 consumption. Changes in fluorescence and EPR signal intensity were dependent on
GSH levels as demonstrated by pre-treatment of cells with buthionine sulfoximine and
N-ethylmaleimide. The macrophage protein S-glutathionylation process due to NADPH
oxidase activation was significantly decreased under Ac-Tempo cellular treatment.
These results suggest a role of thiyl radicals in the maintenance of the macrophages
respiratory burst and may provide a therapeutic target for inflammation management. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/312 |
| Date | 06 February 2009 |
| Creators | LAIGNIER, Emiliane Pereira |
| Contributors | BRIGAGÃO, Maísa Ribeiro Pereira Lima, http://lattes.cnpq.br/0963588859777460, CAMPA, Ana, RODRIGUES, Maria Rita |
| Publisher | Universidade Federal de Alfenas, Instituto de Ciências Exatas, Brasil, UNIFAL-MG, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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