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Dissertação_ICS_Rafael Short Ferreira.pdf: 1518060 bytes, checksum: cccc6bd7647121b1ae8a81b5c9c1943a (MD5) / Rutina é um flavonoide glicosilado que apresenta diversas atividades biológicas
incluindo anti-inflamatória, antitumoral e efeitos farmacológicos promissores no
sistema nervoso central (SNC). A morte neuronal induzida por excitotoxicidade
glutamatérgica está presente em diversas doenças e envolve diversas alterações
celulares, incluindo danos mitocondriais. Para prevenir a excitotoxicidade, o
glutamato é removido pelos astrócitos e convertido em L-glutamina, através da ação
da glutamina sintetase (GS). O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos
neuroprotetores da rutina com vistas na proteção mitocondrial e modulação de
proteínas envolvidas na detoxificação do excedente de glutamato pelos astrócitos..
Estudos de efeitos neuroprotetores foram realizados em dois modelos de estudo do
SNC: culturas organotípicas de cérebro de ratos Wistar neonatos (P8) expostas ao
glutamato (60 mM) por 24 h, concomitantemente a tratamento com rutina (0.5 – 1
μM) e culturas primárias mistas de células isoladas do cerebelo de ratos Wistar (P8)
expostas ao glutamato (10 mM) por 24 h e iniciado 4 h antes do tratamento com
rutina (0,5 μM). A viabilidade celular e os níveis de expressão de GS, de GLAST e
de GLT1 em cultura organotípica cortical foram avaliados por captação de Iodeto de
Propídio (IP) e Western blotting, respectivamente. A viabilidade neuronal em culturas
primárias de cerebelo foi avaliada por coloração com Fluoro-Jade B. Além disso, a
proteção mitocondrial pela rutina foi avaliada através do potencial de membrana e
análise de produção ERO, usando safranina O e Amplex Red como sondas,
respectivamente, em mitocôndrias isoladas a partir do encéfalo de ratos Wistar
adultos expostas à rotenona. Na cultura organotípica, os nossos resultados
mostraram que o glutamato (60 mM) induziu o aumento da intensidade de
fluorescência relativa ao IP incorporado, que foram reduzidos em tratamentos com
0,5 μM e 1 μM de rutina. Ainda, foi demonstrado que rutina induziu aumento na
expressão de GS e GLAST em tratamentos concomitantes com glutamato. Em
culturas primárias de cerebelo, os nossos resultados mostraram que o glutamato (10
mM) induziu o aumento no número de células Fluoro-Jade B positivas, que não foi
reduzido por pós-tratamento com rutina (0,5 μM). Em mitocôndrias isoladas
observamos que a rutina (10 μM) reduziu a dissipação do potencial de membrana e
reduziu a produção de ERO. Conclui-se que a rutina é um agente neuroprotetor com
potencial para prevenir a excitotoxicidade induzida por glutamato e sugere-se que
esse efeito envolve proteção mitocondrial e regulação do metabolismo do glutamato
por astrócitos. No entanto, mais estudos são cruciais, a fim de elucidar o mecanismo
molecular de neuroproteção induzida por rutina contra danos causados por
glutamato e compreender o papel das células gliais, especialmente astrócitos na
bioatividade de rutina.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/22600 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Ferreira, Rafael Short |
| Contributors | da Silva, Victor Diogenes Amaral, Moreira, José Cláudio Fonseca, da Silva, Victor Diogenes Amaral, Salbego, Christianne Gazzana, Botura, Mariana Borges |
| Publisher | Instituto de Ciências da Saúde, Multicêntrico em Bioquímica e Biologia Molecular, UFBA, brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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