Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The prevalence of Candida spp. as commensal of the oral cavity can reach 70%. However, oral
cavity colonization not always culminates in oral candidiasis, however it can be considered a
preliminary condition for the development of it. Oral candidiasis is the most common fungal
infection among individuals with HIV, due the result of immune deficiency. Considering the
importance of this type of infection in HIV-positive, we proposed to carry out this work with the
following objectives: determine the frequency of HIV positive individuals colonized by Candida
spp., Candida species isolated; determine the main predisposing factors for oral colonization by
Candida spp., to relate the microbial load of colonization with the count of lymphocytes TCD4+,
viral load and antiretroviral therapy used at the time of collection; determine the sensitivity of
isolates of Candida spp. antifungal fluconazole, itraconazole, voriconazole, amphotericin B and
nystatin, by the methodology of disk diffusion and search for the exoenzymes proteinases,
phospholipases, hemolysin and DNase in isolates of Candida spp. From May to October 2012
saliva samples from HIV patients attended at Clinical Hospital - Federal University of Uberlândia
and HIV negative individuals were collected, which were seeded onto plates containing Sabouraud
Dextrose Agar and CHROMagar Candida plates and incubated in a bacteriological incubator at
30ºC for 72 hours. The identification of the isolates was done by classical methodology, using
chromogenic agar and assimilation of carbon sources and nitrogen, the differentiation between C.
dubliniensis and C. albicans was made by PCR. Candida spp. were isolated from 89 of the 147
patients studied, a total of 111 isolates, C. albicans the most common species among the isolates
(67.6%). The average colony count was 8.8x10³ CFU/mL. In the control group 51 of the 150 saliva
samples were positive for Candida, obtained 57 isolates, of which 77.2% were C. albicans. The
average of CFU/mL was 9.8x10². The predisposing factors for oral colonization were use of
antibiotics and oral prosthesis and a low CD4 + cells count and high viral load. The combined use
of antiretroviral class of reverse transcriptase inhibitors had a greater protective effect on the
colonization than the use of these drugs associated with protease inhibitors. The nystatin antifungal,
voriconazole and amphotericin B showed the highest number of samples of Candida spp. sensitive
in both groups followed by fluconazole and itraconazole. The phospholipase production was
observed in 69.3% and 72.6% of the isolates from the group of patients and HIV negative,
respectively. The production of haemolysin by isolates of HIV positive and non-positive patients,
respectively, was to 98.2% and 96.5%, DNAse was produced by 27% and 21% of the isolates from
patients and non-patients of HIV. Finally, with the exception of DNAse, there was no statistically
significant difference between isolates from the two study groups in the characters studied. / A prevalência de Candida spp. como comensal da cavidade oral pode chegar a 70%. Entretanto, a
colonização da cavidade oral nem sempre culmina na candidíase bucal, porém pode ser considerada
uma condição preliminar para o desenvolvimento da mesma. A candidiase bucal é a infecção
fúngica mais comum entre os indivíduos portadores do HIV, resultado do comprometimento
imunológico dos mesmos. Considerando a importância desse tipo de infecção em HIV positivos,
propusemos a realização do presente trabalho com os seguintes objetivos: determinar a frequência
de indivíduos HIV positivos colonizados por Candida spp., bem como as espécies de Candida
isoladas; determinar os principais fatores predisponentes para a colonização oral por Candida spp.,
relacionar a carga microbiana de colonização com a contagem de linfócitos T CD4+, carga viral e
terapia antirretroviral utilizada no momento da coleta; determinar a sensibilidade dos isolados de
Candida spp. aos antifúngicos fluconazol, itraconazol, voriconazol, anfotericina B e nistatina, pela
metodologia de difusão de disco e pesquisar as exoenzimas proteinases, fosfolipases, DNAse e
hemolisina nos isolados de Candida spp. No período de maio a outubro de 2012 foram coletadas
amostras de saliva de portadores do HIV atendidos no HC-UFU e de indivíduos HIV negativos, as
quais foram semeadas em placas contendo Ágar Sabouraud Dextrose e em placas com CHROMágar
Candida e incubadas em estufa bacteriológica à 30ºC por 72 horas. A identificação dos isolados foi
feita pela metodologia clássica, utilização de ágar cromogênico e assimilação de fontes de carbono
e nitrogênio, sendo a diferenciação de C. albicans e C. dubliniensis feita através de PCR. Os testes
de sensibilidade e pesquisa de fatores de virulência foram feitos conforme descrito no documento da
CLSI (2009) e na literatura. Candida spp. foram isoladas de 89 dos 147 pacientes estudados,
totalizando 111 isolados, sendo C. albicans a espécie mais freqüente entre os isolados (67,6%). A
contagem média de colônias foi de 8,8x103 UFC/mL. Já no grupo controle 51 das 150 amostras de
saliva foram positivas para gênero Candida, obtendo 57 isolados, dos quais 77,2% eram C.
albicans. A média de UFC/mL foi de 9,8x10². Os fatores predisponentes para colonização bucal
foram uso de antibióticos e prótese oral, bem como uma baixa contagem de CD4+ e alta carga viral.
O uso combinado de antirretrovirais da classe dos inibidores de trancriptase reversa apresentou um
maior efeito protetor para a colonização do que o uso desses medicamentos associados com
inibidores de protease. Os antifúngicos nistatina, voriconazol e anfotericina B apresentaram o maior
número de amostras de Candida spp. sensíveis em ambos os grupos, seguidos pelo fluconazol e
itraconazol. A produção de fosfolipase foi observada em 69,3% e 72,6% dos isolados provenientes
do grupo de pacientes e de HIV negativos, respectivamente. Proteinase foi produzida por 77,5% e
90,7% das espécies de Candida obtidas do grupo de pacientes e de HIV negativos, respectivamente. A produção de hemolisina pelos isolados do grupo de HIV positivos e não portadores,
respectivamente, foi igual a 98,2% e 96,5%. DNAse foi produzida por 27% e 21% dos isolados
proveniente dos pacientes e dos não HIV. Por fim, com exceção da DNAse, não houve diferença
estatisticamente significativa entre os isolados dos dois grupos de estudo em relação às
características estudadas. / Mestre em Ciências da Saúde
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/urn:repox.ist.utl.pt:RI_UFU:oai:repositorio.ufu.br:123456789/12798 |
| Date | 28 February 2014 |
| Creators | Menezes, Ralciane de Paula |
| Contributors | Brito, Denise Von Dolinger de, Naves, Karinne Spirandelli Carvalho, Martinez, Roberto |
| Publisher | Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde, UFU, BR, Ciências da Saúde |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFU, instname:Universidade Federal de Uberlândia, instacron:UFU |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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