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Previous issue date: 2007-03-26 / Angiostrongil?ase abdominal ? uma infec??o zoon?tica causada por Angiostrongylus costaricensis, um nemat?deo com uma localiza??o intra-vascular no mesent?rio. O diagn?stico ? realizado somente com exame patol?gico de fragmentos do tecido ressecado, durante o tratamento cir?rgico de curso cl?nico complicado (perfura??o intestinal e/ou obstru??o). M?todos de imunodiagn?stico mostram muitas dificuldades com rea??o cruzada de anticorpos e a diversidade de resposta humoral. Esfor?os t?m sido direcionados para uma contribui??o na identifica??o e purifica??o de ant?genos espec?ficos de parasitos no desenvolvimento de m?todos sorodiagn?sticos. No presente estudo, foi analisado o uso de uma prote?na recombinante de A. costaricensis, a prote?na de choque t?rmico (HSP 20), em ELISA como sorodiagn?stico. Um dos clones de cDNA, obtido e expresso como uma pequena prote?na de choque t?rmico HSP 20 com 147 amino?cidos, apresentou identidade com seq??ncias de pequenas prote?nas de choque t?rmico de outros nemat?deos. A seq??ncia correspondente foi sub-clonada no vetor de express?o pET-23a-d (+), utilizando a t?cnica de PCR para a constru??o da prote?na recombinante HSP 20. O alto n?vel de express?o de HSP 20 em Escherichia coli BL 21 (DE3), clonado no vetor de express?o, foi observado ap?s indu??o com 1 mM de IPTG a 37 ?C. A etapa da purifica??o do recombinante HSP 20 foi realizada com a resina de Ni-NTA. An?lise do Western blot utilizando soro de um paciente com diagn?stico confirmado para angiostrongil?ase abdominal, indicou que o produto de express?o purificado foi imunog?nico. A sensibilidade da HSP 20 foi de 33%. Entretanto, 100% de especificidade da prote?na recombinante sugere o uso de um painel de ant?genos, na tentativa de m?ltiplos testes de varredura, para um sorodiagn?stico melhor e preciso da angiostrongil?ase abdominal
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/276 |
| Date | 26 March 2007 |
| Creators | Silva, Ana Cristina Ar?mburu da |
| Contributors | Graeff-teixeira, Carlos |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Zoologia, PUCRS, BR, Faculdade de Bioci?ncias |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 2008925231902741151, 500, 600, 36528317262667714 |
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