Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Oxidative stress has been linked to some neurodegenerative disorders. Current
therapies are limited to attenuate the symptoms, however some studies have shown that
antioxidant compounds may be able to prevent or delay neuronal oxidative damage, including
those present in plant extracts. For these reasons, this study investigated the possible
antioxidant activity of the ethanolic extract of Luehea divaricata leaves in brain of rats in
vitro and the possible antioxidant mechanisms involved. The extract was evaluated against
basal and sodium nitroprusside (SNP) 5 μM induced lipid peroxidation in brain of rats
through measurements of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) production. Slices
of brain areas were treated with SNP 100 M and extract to determine cellular viability by
MTT reduction assay. Scavenger activity was evaluated against NO, DPPH and OH through
Griess reagent, DPPH and deoxyribose oxidation assays, respectively. The chelating and
reducing capacity for iron were determined by the orto-phenantroline method. The extract was
screened by HPLC for the presence of gallic, chlorogenic, and caffeic acids, quercetin, rutin,
and kaempferol. Only rutin was detected and then was used, in the same concentrations of the
extract, as standard in all assays. L. divaricata extract (1-10 μg/ml) protected against induced
lipid peroxidation, decreased basal levels of TBARS (about 50%) and maintained the cells
viable. The extract was not able to protect deoxyribose against OH and to chelate iron,
however it inhibited NO and DPPH in 33.14% at 20 μg/ml and 53.93% at 50 μg/ml
respectively, and showed a reducing power in a concentration and time dependent manner.
Therefore, L. divaricata ethanolic leaf extract showed antioxidant properties in vitro at low
concentrations. The antioxidant mechanisms were related to scavenger activity on reactive
oxygen and nitrogen species and metal reducing property. These effects were similar or more
powerful than rutin in same concentrations in all assays, except in NO scavenger activity, and,
thus, other unidentified compounds present in the extract appear to be associated with the
effects observed in this study. More studies are needed regarding the identification of these
compounds and the neuroprotective activity of the extract. / O estresse oxidativo tem sido relacionado a algumas desordens neurodegenerativas.
As terapias atuais para essas doenças estão limitadas a atenuar os sintomas apresentados,
entretanto alguns estudos têm mostrado que compostos antioxidantes podem ser capazes de
prevenir ou retardar o dano oxidativo neuronal, incluindo aqueles presentes em extratos
vegetais. Por esses motivos, neste trabalho foi investigada a possível atividade antioxidante do
extrato etanólico das folhas de Luehea divaricata em cérebro de ratos in vitro e os possíveis
mecanismos antioxidantes envolvidos. O extrato foi avaliado contra a peroxidação lipídica
basal e induzida por nitroprussiato de sódio (NPS) 5 μM em cérebro de ratos através da
quantificação da produção de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Fatias de
áreas do cérebro foram tratadas com NPS 100 M e extrato para determinar a viabilidade
celular através do ensaio da redução do MTT. A atividade scavenger do extrato foi testada
contra ON, DPPH e OH através do reagente de Griess e dos ensaios de DPPH e de oxidação
da desoxirribose, respectivamente. A capacidade quelante e redutora frente ao ferro foram
determinadas através do método da orto-fenantrolina. O extrato foi analisado por HPLC
quanto à presença dos ácidos gálico, clorogênico e cafeico, quercetina, rutina e kaempferol.
Somente a rutina foi detectada e então usada como padrão, nas mesmas concentrações do
extrato, em todos os testes. O extrato de L. divaricata (1-10 μg/ml) protegeu o cérebro contra
peroxidação lipídica induzida, diminuiu os níveis basais de TBARS (± 50%) e manteve as
células viáveis. O extrato não foi capaz de proteger a desoxirribose contra OH e de quelar o
ferro, entretanto inibiu ON e DPPH em 33,14% a 20 μg/ml e 53,93% a 50 μg/ml
respectivamente, e mostrou poder redutor de maneira concentração e tempo dependentes.
Assim, o extrato etanólico das folhas de L. divaricata demonstrou propriedade antioxidante in
vitro em baixas concentrações. Os mecanismos antioxidantes foram relacionados ao efeito
scavenger de espécies reativas de oxigênio e de nitrogênio e à atividade redutora de metais.
Esses efeitos foram similares ou superiores em comparação às mesmas concentrações de
rutina, exceto na capacidade scavenger de ON e, portanto, outros compostos ainda não
determinados no extrato parecem estar associados às atividades observadas neste trabalho.
Mais estudos devem ser realizados em relação à identificação desses compostos e à atividade
neuroprotetora do extrato.
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/11195 |
Date | 16 March 2012 |
Creators | Arantes, Leticia Priscilla |
Contributors | Soares, Félix Alexandre Antunes, Cruz, Ivana Beatrice Mânica da, Puntel, Robson Luiz |
Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas: Bioquímica Toxicológica, UFSM, BR, Bioquímica |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Portuguese |
Detected Language | Portuguese |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Format | application/pdf |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Relation | 200800000002, 400, 500, 300, 500, 500, 3aef53b7-b173-4c56-a944-bed2de5e5dda, ea486526-3e57-4f9d-9ed9-3763094c5dfe, 4e7261e6-29cc-44cf-9359-5a68868ed11d, 8e59b59c-ede5-4961-849a-262aa1a21a6f |
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