Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-05-02T17:44:50Z
No. of bitstreams: 1
carolinamirandagasparetto.pdf: 2045445 bytes, checksum: b796bec99aa751194ab9ed2ad03867e6 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-03T15:35:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1
carolinamirandagasparetto.pdf: 2045445 bytes, checksum: b796bec99aa751194ab9ed2ad03867e6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-03T15:35:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1
carolinamirandagasparetto.pdf: 2045445 bytes, checksum: b796bec99aa751194ab9ed2ad03867e6 (MD5)
Previous issue date: 2014-07-28 / Bauhinia forficata Link (Fabaceae), conhecida como pata-de-vaca, é uma planta medicinal
nativa da América do Sul, tradicionalmente usada como hipoglicemiante, diurética,
hipocolesterolêmica e no tratamento de cistite, parasitoses intestinais, elefantíase e outros
distúrbios orgânicos. Essas disfunções estão associadas ao estresse oxidativo e dano celular. Os
principais metabólitos especiais presentes nesta espécie são as substâncias fenólicas, em
particular os flavonoides. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar as atividades
antioxidante, antibacteriana e genotóxica das folhas de B. forficata, bem como determinar o
conteúdo de fenóis e flavonoides totais. O material vegetal seco e pulverizado foi submetido à
maceração estática em etanol, seguido de partição líquido/líquido para obtenção do extrato
etanólico (EE) e das frações em hexano (FH), diclorometano (FD), acetato de etila (FA) e
butanol (FB). Os teores de fenóis e flavonoides totais foram determinados por
espectrofotometria utilizando as curvas de calibração do ácido gálico e da rutina,
respectivamente. A atividade antioxidante foi avaliada pelos ensaios do sequestro do radical
livre 2,2-difenil-1-picril-hicrazila (DPPH•), poder de redução do ferro e cooxidação do β-
caroteno/ácido linoleico. A atividade antibacteriana foi investigada por meio da determinação
da Concentração Inibitória Mínima 100% (CIM100) pelo método de microdiluição em caldo
segundo recomendações do Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) frente a sete
amostras de referência ATCC. Em seguida, procedeu-se ao estabelecimento do efeito
farmacológico bactericida ou bacteriostático e à determinação da Concentração Bactericida
Mínima (CBM). O potencial genotóxico foi avaliado pelo ensaio do cometa utilizando células
HepG2. As análises foram realizadas em triplicata e os resultados apresentados como média ±
desvio-padrão, quando pertinente. Os dados foram submetidos à Análise de Variância seguida
do pós-teste de Tukey (p < 0,05). Os teores de fenóis e flavonoides totais variaram de 9,20 ±
0,87 a 87,35 ± 0,92 mg/g em equivalentes de ácido gálico e de 2,51 ± 0,06 a 56,76 ± 0,81 mg/g
em equivalentes de rutina, respectivamente. Os valores das Concentrações Efetivas 50%
obtidos nos ensaios do DPPH• e poder de redução do ferro foram de 27,95 ± 0,33 a 193,62 ±
1,12 μg/mL e de 21,12 ± 0,52 a 328,45 ± 3,23 μg/mL, respectivamente. A porcentagem de
inibição da peroxidação lipídica obtida pelo ensaio do β-caroteno/ácido linoleico variou de
26,80 ± 2,26 a 67,07 ± 1,48, de 36,30 ± 5,38 a 73,66 ± 3,91 e de 48,70 ± 5,08 a 81,93 ± 3,45
nas concentrações de 250, 500 e 1000 μg/mL, nessa ordem. A FA foi ativa frente à
Staphylococcus aureus ATCC 29213 e ATCC 6538 testadas, com valores de CIM100 e CBM de
2,5 mg/mL e 5 mg/mL, e de 5 mg/mL e > 5 mg/mL, respectivamente, revelando efeito
bacteriostático. O EE induziu dano genético significativo às células HepG2 pelo ensaio do
cometa nas concentrações de 125 e 250 μg/mL. Os resultados desse estudo indicam que B.
forficata possui substâncias fenólicas, incluindo flavonoides, demonstrando atividades
antioxidante e antibacteriana. O dano genético revelado pelo EE requer estudos adicionais para
a confirmação de seu potencial genotóxico. / Bauhinia forficata Link (Fabaceae), known as "pata-de-vaca", is a medicinal plant native in
South America, traditionally used as hypoglycemic, diuretic, hypocholesterolemic, and in the
treatment of cystitis, intestinal parasites, elephantiasis and other organic disturbs. These
disorders are associated with oxidative stress and cellular damage. The major secondary
metabolites present in this species are phenolic compounds, particularly flavonoids. In this
context, the aims of this study were to evaluate the antioxidant, antibacterial and genotoxic
activities of B. forficata leaves and to determine the total phenols and flavonoids contents. Dried
and powdered plant material was subjected to static maceration in ethanol followed by
liquid/liquid partition to obtain the ethanol extract (EE) and the hexane (HF), dichloromethane
(DF), ethyl acetate (EF) and butanol (BF) fractions. The total phenols and flavonoids contents
were determined by spectrophotometry using gallic acid and rutin calibration curves,
respectively. The antioxidant activity was evaluated by the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl
(DPPH) free radical scavenging, the ferric reducing power and the β-carotene bleaching assays.
The antibacterial activity was investigated by determining the 100% Minimal Inhibitory
Concentration (MIC100) using the broth microdilution according to Clinical Laboratory
Standards Institute (CLSI) recommendations against seven ATCC reference strains. After that,
the bactericidal or bacteriostatic pharmacological effect was established and the Minimal
Bactericidal Concentration (MBC) was also determined. The genotoxic potential was assessed
by the comet assay using HepG2 cells. Analyses were performed in triplicate and the results
presented as mean ± standard deviation, when appropriate. Data were statistically analyzed by
one-way ANOVA followed by Tukey’s post-test (p < 0.05). The total phenolic and flavonoid
contents ranged from 9.20 ± 0.87 to 87.35 ± 0.92 mg/g gallic acid equivalents, and from 2.51 ±
0.06 to 56.76 ± 0.81 mg/g rutin equivalents, respectively. The Effective Concentration 50%
values in the DPPH and ferric reducing power assays were 27.95 ± 0.33 to 193.62 ± 1.12 μg/mL,
and 21.12 ± 0.52 to 328.45 ± 3.23 μg/mL, respectively. The percentage inhibition of lipid
peroxidation obtained by β-carotene bleaching method ranged from 26.80 ± 2.26 to 67.07 ±
1.48, 36.30 ± 5.38 to 73.66 ± 3.91 and 48.70 ± 5.08 to 81.93 ± 3.45 at 250, 500 and 1000 μg/mL
concentrations, in that order. The EF was active against Staphylococcus aureus ATCC 29213
and ATCC 6538, with MIC100 and MBC values of 2.5 mg/mL and 5 mg/mL, and 5 mg/mL and
> 5 mg/mL, respectively, showing bacteriostatic effect. The EE induced significant genetic
damage to HepG2 cells by the comet assay at concentrations of 125 and 250 μg/mL. The results
of this study indicate that B. forficata contains phenolic compounds, including flavonoids,
possessing antioxidant and antibacterial effects. The genetic damage revealed by EE requires
additional studies to confirm its genotoxic potential.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:hermes.cpd.ufjf.br:ufjf/1355 |
| Date | 28 July 2014 |
| Creators | Gasparetto, Carolina Miranda |
| Contributors | Alves, Maria Silvana, Sousa, Orlando Vieira de, Mendonça, Leonardo Meneghin, Salvador, Marcos José, Fontes, Elita Scio |
| Publisher | Universidade Federal de Juiz de Fora, Programa de Pós-graduação em Ciências Farmacêuticas, UFJF, Brasil, Faculdade de Farmácia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFJF, instname:Universidade Federal de Juiz de Fora, instacron:UFJF |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0029 seconds