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Desenvolvimento e validação de metodologia analítica e estudo de estabilidade de tigeciclina em produto farmacêutico /

Silva, Lucélia Magalhães da. January 2012 (has links)
Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Edison Luís Santana Carvalho / Banca: Clarice Madalena Bueno Rolim / Banca: Marlus Chorilli / Banca: Rosângela Gonçalves Peccinini / Resumo: As glicilciclinas são uma nova classe de antibacterianos, análogos sintéticos das tetraciclinas, com atividade bacteriostática contra ampla variedade de bactérias e também contra micro-organismos resistentes às tetraciclinas. A tigeciclina é a primeira glicilciclina aprovada, distribuída comercialmente como Tygacil® pelo laboratório Wyeth, na forma farmacêutica pó liofilizado, com registro no Ministério da Saúde concedido em 2005. Este fármaco apresenta amplo espectro de ação contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, aeróbicas e anaeróbicas, incluindo Staphylococcus aureus resistentes à meticilina e Enterococcus spp. resistentes à vancomicina, sendo indicada para o tratamento de infecções complicadas da pele, tecidos moles e intra-abdominais. A tigeciclina age na inibição da síntese proteica através da ligação à subunidade 30S do ribossomo bacteriano. Por ser um medicamento recente, existem poucos estudos relacionados às características físico-químicas, desenvolvimento de métodos analíticos e estudo de estabilidade, aplicados à tigeciclina. Assim, os objetivos desse trabalho foram desenvolver métodos para análise qualitativa e quantitativa de tigeciclina em pó liofilizado, bem como estudos de estabilidade. Para análise qualitativa estudaram-se os métodos por análise térmica, espectrofotometria nas regiões do infravermelho, ultravioleta e visível, cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), possibilitando a identificação da amostra. Para quantificação do fármaco validaram-se métodos por CLAE, microbiológicos e espectrofotométricos. O método por CLAE utilizou comprimento de onda de detecção de 280 nm, fase móvel composta por tampão fosfato de sódio monobásico (0,015 M) e ácido... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The glycylcyclines are a new class of antibacterials, sinthetic analogs of tetracyclines, with bacteriostatic activity against broad spectrum of bacterias and tetracyclines resistant organisms. The tigecycline is the first approved glycylcycline, commercially distributed in lyophilized powder pharmaceutical product as TygacilTM, by the Wyeth Pharmaceutical Laboratory, with register in the Brazilian Ministry of Healthy granted in 2005. This drug presents broad spectrum action, with activity against Gram-positive, Gram-negative, aerobic and anaerobic bacterias, including methicillin-resistant Staphylococcus aureus and vancomycin-resistant Enterococcus spp., indicated to treatment of complicated skin and skin structure infections and complicated intra-abdominal infections. Tigecycline binds to the bacterial 30S ribosome, preventing the bacterial protein synthesis. Take into account that tigecycline is a new product, there are few studies related to physicochemical characteristics, analytical methods development and stability studies, apllied to this drug. Thus, the aims of this work were to develop methods to qualitative and quantitative analysis of tigecycline in lyophilized powder as well as stability studies. To qualitative analysis, thermal analysis, infra-red, ultraviolet and visible spectrophotometry, thin layer chromatography and high performance liquid chromatography methods were studied, allowing the identification of samples. To drug quantification high performance liquid chromatography (HPLC), spectrophotometric and microbiological methods were validated. The HPLC method employed detection wavelength at 280 nm, mobile phase consisted of buffer containing sodium phosphate monobasic (0.015 M) and oxalic... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Avaliação de fungos endofíticos de Crocomia aculeata (macaúba) JACQ. Lood ex Mart e Saccharum spp L. (cana de açúcar) para atividade antimicrobiana, citotóxica, anti trypanosoma cruzi e produção de enzimas

FERNANDES, Diego Leandro Reis da Silva 30 March 2016 (has links)
Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2018-01-31T19:41:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Aline Dantas de Oliveira.pdf: 7187935 bytes, checksum: 2f865a50020bf3264c45bd86c0acd251 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-31T19:41:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Aline Dantas de Oliveira.pdf: 7187935 bytes, checksum: 2f865a50020bf3264c45bd86c0acd251 (MD5) Previous issue date: 2016-03-30 / CAPES / Fungos endofíticos são uma fonte ainda pouco explorada de metabólitos biologicamente ativos com as diversas atividades biotecnológica, incluindo atividade terapêutica na saúde e produção de enzimas de importância comercial, como as proteases e lipases. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo principal avaliar o potencial biotecnológico de extratos e líquidos metabólitos de fungos endofíticos de macaúba e cana-de-açúcar, testando os mesmos para produção de enzimas, atividade antimicrobiana, bem como atividade citotóxica e antiTrypanosoma. Foram estudados 23 fungos endofíticos de semente de macaúba e gomos de cana de açúcar. Dentre os 23 isolados, dois pertencentes aos gêneros Aspergillus e Fusarium produziram liquido metabólico com atividade bacteriostática ou bactericida frente a várias bactérias patogênicas ao homem, a saber: Escherichia coli, Acinetobacter baumannii, Shigella flexneri, Kocuria rhizophila, Staphylococcus aureus meticilina resistente, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus oxacilina resistente, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus epidermidis. Os mesmos líquidos metabólicos não apresentaram atividade antifúngica frente as quatro espécies de Candida sp. testadas. Além dos líquidos foram testados os extratos metanólicos extraídos dos micélios fúngicos quanto à ação antiproliferativa de Trypanosoma cruzi e citotoxicidade celular de macrófagos da linhagem J774, não apresentando efeito de inibição do crescimento de T. cruzi, e apresentando citotoxicidade maior que a droga controle. Quanto a produção de enzimas, os fungos não apresentaram produção significativa de proteases, lipases, amilases e celulases. Desta forma, os resultados mostram a necessidade de ampliar as pesquisas sobre o potencial químico presente no líquido metabólito produzido por esses fungos endofíticos para testar, bem como apresenta potencial atividade antibacteriana dos fungos estudados. / Endophytic fungi are an unexplored source of biologically active metabolites with diverse biotechnological activities, including therapeutic activity in health and the production of enzymes of commercial importance, such as proteases and lipases. Thus, the present study had as main objective to evaluate the biotechnological potential of extracts and liquid metabolites of endophytic fungi of macaúba and sugarcane, testing them for the production of enzymes, antimicrobial activity, as well as cytotoxic and anti- Trypanosoma. Twenty - three endophytic fungi from macaúba seed and sugar cane buds were studied. Among the 23 isolates, two belonging to the genus Aspergillus and Fusarium produced metabolic liquid with bacteriostatic or bactericidal activity against bacteria pathogenic to man: Escherichia coli, Acinetobacter baumannii, Shigella flexneri, Kocuria rhizophila, Staphylococcus aureus resistant methicillin, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus resistant oxacillin, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus epidermidis. The same metabolic liquids do not present antifungal activity as four species of Candida sp. Tested. In addition to the fluids extracted from fungal mycelia, the antiproliferative action of Trypanosoma cruzi and cellular cytotoxicity of J774 macrophages showed no inhibitory effect on T. cruzi growth and showed a higher cytotoxicity than a drug control. As for the production of enzymes, fungi did not present significant production of proteases, lipases, amylases and cellulases. Thus, the results show a need to expand as research on the chemical potential present in the liquid metabolite produced by these endophytic fungi to test, as well as to present antibacterial activity of the fungi studied.
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Degradação de antibióticos sulfonamidas por processo foto-Feton : identificação de intermediários /

Batista, Ana Paula dos Santos. January 2012 (has links)
Orientador: Raquel Fernandes Pupo Nogueira / Banca: Angela Regina Araujo / Banca: José Roberto Guimarães / Banca: Luiz Antonio Daniel / Banca: Maria Aparecida Carvalho de Medeiros / Resumo: A degradação foto-Fenton dos antibióticos sulfonamidas sulfadiazina (SDZ) e sulfatiazol (STZ) mediados por Fe(III)-oxalato foi estudada nesse trabalho. A influência da complexação de íons ferro, a concentração de H2O2 e o pH na velocidade inicial de degradação dos antibióticos foi avaliada. A degradação de SDZ e STZ foi melhorada na presença de Fe(III)-oxalato em comparação a Fe(NO3)3, alcançando completa degradação após 8 minutos de irradiação em pH 2,5 na presença de 5 mM H2O2 (equivalente a [H2O2]/[antibiótico] = 50). Também foi possível estender a faixa de pH do processo foto-Fenton na presença de Fe(III)-oxalato alcançando mais de 69% de degradação em pH 6, embora sem significante mineralização. A comparação da cinética de degradação dos antibióticos indicou que a STZ é mais recalcitrante provavelmente devido à baixa densidade eletrônica do seu anel tiazol em relação ao anel pirimidínico na SDZ. Experimentos de fotodegradação das sulfonamidas por irradiação gama da água na presença de N2O foram executados e seus produtos de degradação, identificados por análise LC/MS, foram comparados àqueles formados por processo foto-Fenton. Os intermediários de degradação formados são compostos hidroxilados após entrada de grupos hidroxilas no anel benzênico assim como no anel pirimidínico na molécula da SDZ e no anel tiazol na molécula da STZ, seguido por abertura dos anéis durante processo de descarbonilação / Abstract: The photo-Fenton degradation of the sulfonamide antibiotics sulfadiazine (SDZ) and sulfathiazole (STZ) mediated by Fe(III)-oxalate was studied in this work. The influence of iron complexation, H2O2 concentration and pH on the initial SDZ and STZ degradation rate was evaluated. Degradation of both antibiotics is improved in the presence of Fe(III)-oxalate in comparison to free iron, achieving complete degradation after 8 min irradiation at pH 2.5 in the presence of 5 mM H2O2 (equivalent to H2O2/antibiotic = 50). It was also possible to extend pH range of the photo-Fenton reaction by the use of Fe(III)-oxalate reaching more the 69% degradation at pH 6, however without significant mineralization. Comparison of the degradation kinetics of both sulfonamides indicated higher recalcitrance of STZ due to the lower electron density of its thiazol ring in relation to pyrimidine ring in SDZ. The sulfonamides photodegradation experiments by water gamma-irradiation in presence of N2O were also executed and their by-products, identified by LC/MS analysis, were compared to that formed from photo-Fenton process. The intermediates of degradation formed are hydroxylated compounds with entrance of hydroxyl group in the benzenic ring as well as in both pyrimidine ring in the SDZ molecule and thiazole group in the STZ ring, followed by rings opening during decarbonylation process / Doutor
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Remoção de antibióticos da água por meio do processo de adsorção em carvão ativado /

Silva, Niléia Cristina da. January 2012 (has links)
Orientador: Newton Luiz Dias Filho / Coorientador: Alessandro Minillo / Banca: Mirian Cristina dos Santos / Banca: Marcio José Tiera / Resumo: Este trabalho trata da remoção de fármacos da água por meio do processo de adsorção, utili- zando como adsorvente o carvão ativado obtido da casca de coco da baía. Os fármacos utili- zados foram os antibióticos Amoxicilina, Ampicilina, Cefalexina e Ciprofloxacina. O adsor- vente de carvão ativado foi caracterizado por análise textural, determinação dos grupos funci- onais da superfície pelo método de titulação de Boehm e por FTIR e determinação do pH de ponto de carga zero (pHPCZ). Foi observado que o carvão apresenta uma área superficial de 745,38 m2/g , é constituído principalmente por microporos, é levemente alcalino (pHPCZ: 7,58) e possui tanto grupos funcionais ácidos como básicos em sua superfície. Os resultados mos- traram que a eficiência de remoção não sofre influência significativa do pH na faixa de 2 a 10. Os experimentos de adsorção foram realizados pelo processo de batelada, onde soluções aquosas de cada antibiótico foram colocadas em contato com diferentes dosagens de carvão ativado (0,05 a 2 g) a temperatura ambiente. As concentrações dos fármacos foram determi- nadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), usando como fases móveis água e metanol em sistema de bombeamento gradiente. Os resultados de exatidão (repetibilidade), dos limites de detecção e de quantificação da técnica analítica demonstraram a aplicabilidade do método. A eficiência de remoção foi superior a 90% para todos os antibióticos. O equilí- brio de adsorção dos antibióticos foi alcançado após 4h e foi expresso por meio de isotermas de adsorção de acordo com os modelos de Langmuir, Freundlich, Temkin e D-R. A isoterma de Langmuir foi a que melhor representou os dados experimentais da adsorção dos antibióti- cos em carvão ativado. A cinética de adsorção dos fármacos foi discutida... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This report is about medicine removal from water by using adsorption process, employing activated carbon as absorvent obtained from baía coconut nutshell. The medicines used were the antibiotics Amoxillin, Ampicillin, Cephalexin and Ciprofloxacin. The activated carbon adsorbent was characterized by textural analysis, surface functional group determination by Boehm and FTIR titration method and the pH of point of zero charge (pHpzc) determination. It was observed that carbon presents a 745,38 m2/g superficial area, its essentially composed by micropores, its slightly alkaline (pHpzc: 7,58) and owns either acidy or basic functional groups on its surface. The results showed that removal performance does not suffered signifi- cant influence from pH on a group from 2 to 10. The adsorption experiments were accom- plished by batch process, where watery solutions from each antibiotic were in touch with dif- ferent activated carbon doses (0,05 to 2 g) and environmental temperature. The medicine con- centrations were determined by high performance liquid chromatgraphy (HPLC), employing water as moving phases and gradient methanol pump system. The accuracy results (repeata- bily), detection limits and quantification of analytic technique presented the aplicability of the method. The removal performance was higher thn 90% to all antibiotic. The adsorption bal- ance of antibiotics was reached after 4 hours and it was expressed by adsorption isotherms according to Langmuir, Freundlich, Temkin and D-R models. Langmuir isotherm best repre- sented experimental data of antibiotic adsorption on activated carbon. The adsorption kinec- tics of medicines was discussed employing pseudo first and second order kinetic models, by Elovich and intraparticle difussion. The kinectic model of pseudo second order can better de- scribe medicine... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Efecto de fructooligosacáridos de Cynara scolymus L. “alcachofa” en la producción de bacteriocinas por Lactobacillus spp.

Delao Lizardo, Nicky Rider January 2016 (has links)
Evalúa el efecto de los fructooligosacáridos (FOS) extraídos de Cynara scolymus “alcachofa” sobre la población de Lactobacillus plantarum y el efecto sobre la producción de bacteriocinas. La extracción de FOS de Cynara scolymus es mayor a 80 °C durante 60 minutos. Se observa que al 2 % el fructooligosacáridos (FOS) de Cynara scolymus “alcachofa” tiene un efecto positivo sobre el crecimiento de la población de Lactobacillus plantarum, y la producción de bacteriocinas. Las bacteriocinas de Lactobacillus plantarum presentan actividad antimicrobiana frente a Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa, asimismo presentan estabilidad frente a la temperatura de 60°C, 80°C y 90°C y frente a la prueba de catalasa.
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Peptídeos inibidores de topoisomerases bacterianas : síntese e estudos de transporte através da membrana celular empregando moléculas peptídicas carreadoras /

Barros, Ronaldo Souza de. January 2009 (has links)
Orientador: Reinaldo Marchetto / Banca: Wilson Rogerio Lustri / Banca: Antonio de Miranda / Resumo: CcdB é uma proteína de 11,7 kDa, com 101 resíduos de aminoácidos, produzida pelo plasmídeo F, como parte de um sistema de morte programada, de dois componentes, para a manutenção do número de cópias do plasmídeo. Neste sistema, CcdB age como uma toxina e o CcdA como um antídoto. Na ausência do CcdA, devido à perda do plasmídeo durante a replicação celular, CcdB pode matar bactéria pela inibição das enzimas DNA-girase e topoisomerase IV (topo IV). Girase e a topo IV são topoisomerases, ATP dependentes, responsáveis pelos processos de replicação e transcrição do DNA bacteriano, de modo que exercem papel fundamental na viabilidade dos microrganismos procariotos. Peptídeos derivados do CcdB têm demonstrado grande capacidade de inibição enzimática in vitro, porém a baixa permeabilidade da membrana celular bacteriana a estes derivados tem prejudicado a atividade in vivo. No intuito de criar um meio para facilitar a inserção de derivados sintéticos do CcdB em células bacterianas, uma série de peptídeos, constituídos de quatros seqüências carreadoras fundidas ao derivado peptídico CcdB1, foi sintetizada pela metodologia da fase sólida. Estes peptídeos foram testados quanto à inibição da girase e topo IV em solução. Dois peptídeos apresentaram inibição, com valores de IC100 abaixo de 100 μM, para ambas as enzimas. Estudos de dicroísmo circular associado aos ensaios de inibição evidenciaram forte dependência da atividade com a presença da hélice C-terminal. O derivado CPP1-CcdB1 apresentou atividade antimicrobiana contra Bacillus subtilis, a uma concentração de 50 μM, mostrando que a inserção de uma seqüência carreadora, pode facilitar o transporte de derivados do CcdB através da membrana celular. Além disso, a molécula de CcdB1 pode servir como um bom modelo para o desenvolvimento de novos CPPs. / Abstract: CcdB is an 11.7 kDa protein with 101 amino acid residues, produced by the F plasmid as part of a two-component system of programmed cell death for maintaining plasmid copy number. In this system, CcdB acts as a toxin and CcdA as an antidote. In the absence of the CcdA, due to loss of plasmid during cell replication, CcdB can kill bacteria by inhibition of the DNA gyrase and topoisomerase IV (topo IV) enzymes. Gyrase and topo IV are ATP dependent topoisomerases, responsible for the transcription and replication processes in bacterial DNA, so that carries key role in the viability of prokaryotes microorganisms. Peptides derived from CcdB have shown great capacity for in vitro enzyme inhibition, but the low permeability of the bacterial cell membrane to these derivatives has damaged the activity in vivo. In order to create a form to facilitate the insertion of synthetic derivatives of CcdB in bacterial cells, a series of peptides, consisting of four carrier peptide sequences fused to the derived CcdB1, was synthesized by the solid phase methodology. These peptides were tested about inhibition of Gyrase and topo IV activities, in solution. Two peptides showed inhibition, with values of IC100 below 100 mM for both enzymes. Circular dicroism studies associated with inhibition tests showed strong dependence of activity with the presence of the C-terminal helix. The CPP1-CcdB1 derivative showed antimicrobial activity against Bacillus subtilis at a concentration of 50 mM, showing that the insertion of a carrier sequence can facilitate the transport of derivatives of CcdB through the cell membrane. In addition, the CcdB1 molecule is a good model to develop new CPPs. / Mestre
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Atividade antimicrobiana de metabólitos secundários obtidos de leveduras ambientais do bioma cearense frente a cepas de bactérias patogênicas, incluindo Staphylococcus aureus resistentes à meticilina : atividade antibacteriana e investigação do mecanismo de ação / Metabolites antimicrobial activity secondary yeasts obtained the environmental biome cearense front of strains pathogenic bacteria including Staphylococcus aureus resistant to methicillin : antibacterial activity and mode of action of investigation

Andrade Neto, João Batista de January 2015 (has links)
ANDRADE NETO, João Batista de. Atividade antimicrobiana de metabólitos secundários obtidos de leveduras ambientais do bioma cearense frente a cepas de bactérias patogênicas, incluindo Staphylococcus aureus resistentes à meticilina: atividade antibacteriana e investigação do mecanismo de ação. 2015. 79 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-26T13:52:40Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_jbandradeneto.pdf: 1779572 bytes, checksum: 7b7551fddf440a7b2eaf793a8f5dbdda (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2015-10-26T13:54:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_jbandradeneto.pdf: 1779572 bytes, checksum: 7b7551fddf440a7b2eaf793a8f5dbdda (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-26T13:54:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_jbandradeneto.pdf: 1779572 bytes, checksum: 7b7551fddf440a7b2eaf793a8f5dbdda (MD5) Previous issue date: 2015 / The consequent and continuous use of antimicrobials led to the emergence of potentially lethal pathogens. ESKAPE (Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumanii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter sp.) microorganisms group stands towards others, in which Staphylococcus aureus infections stand out as the leading cause of systemic infections, with SARM being a major responsible for these infections in Brazil. Thus, the emergence of strains with reduced sensitivity accompanied by a limited antimicrobial therapy makes the search for new therapeutic options necessary. In this study, isolate yeasts from the northeaster region of Brazil, more specifically in Ceará state, were analysed in order to find antimicrobial metabolites with anti-SARM activity, as well as to find a description of a possible mechanism of action. In this paper, 13 yeasts were isolated and conditioned in different growing conditions, in order to optimize the growth of the isolates. In addition, it was explored whether extracts from yeast produced new secondary metabolites with antimicrobial properties. 59% (11) of the obtained extracts were active against Gram positive bacteria and 32% (7) were active against Gram positive and Gram negative bacteria. These more active extracts showed activity against SARM and had MIC ranging between 34-192 µg/mL. Analysis by flow cytometer showed that these extracts were capable of causing damage to the plasma membrane and of promoting bacterial DNA fragmentation, leading the cell to cell death by apoptosis. In cytotoxic tests using the MTT test with human leukocyte cells, the secondary metabolites showed low cytotoxicity. Chemical analysis revealed structurally different secondary metabolites, including the compounds pyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione, Hexahydro-3- (phenyl methyl) Laurie acid and, as described in the literature for their properties against MSSA and SARM as well as other known metabolites were identified in the remaining extracts, suggesting that these strains can produce new molecules. Within this context, the antimicrobial activity and the low cytotoxic potential demonstrated by these extracts reveal a class of promising chemical compounds to the development of new antibiotics. However, more pharmacological studies will be done to confirm these data. / O uso consequente e contínuo dos antimicrobianos levaram ao surgimento de patógenos potencialmente letais. O grupo de micro-organismos ESKAPE (Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumanii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter sp.) se destaca perante os demais, onde as infecções por Staphylococcus aureus se sobressaem como a principal causa de infecções sistêmicas, sendo o Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (SARM) um dos principais responsáveis por estas infecções no Brasil. Dessa forma, a emergência de cepas com sensibilidade reduzida acompanhada de uma terapia antimicrobiana limitada faz com que seja necessária uma busca por novas opções terapêuticas. No presente trabalho, foram analisadas leveduras isoladas da região nordeste do Brasil, mais especificamente no estado do Ceará, com o objetivo de buscar metabólitos antimicrobianos com atividade anti-SARM, bem como a descrição de um eventual mecanismo de ação. Foram isoladas 13 leveduras as quais foram acondicionadas em condições de cultivo distintas, a fim de otimizar o crescimento dos isolados de leveduras. Em seguida os extratos acetoetílicos obtidos a partir das leveduras, foram exploradas afim de verificar se produziam metabólitos secundários com propriedades antimicrobianas. 59% (11) dos extratos obtidos foram ativos contra bactérias Gram positivas e 32% (7) contra bactérias Gram positivas e Gram negativas. Os extratos mais ativos apresentaram atividade contra SARM e tiveram CIM que variaram de 34-192 µg/mL. A análise por citometria de fluxo revelou que esses extratos foram capazes de causar danos a membrana plasmática e promover fragmentação do DNA bacteriano, levando a célula à morte celular por apoptose. Nos ensaios citotóxicos, utilizando o teste do MTT com células de leucócitos humanos, os extratos mostraram baixa citotoxicidade. As análises químicas revelaram estruturalmente diversos metabólitos secundários, incluindo os compostos hexahidro-3-(fenilmetil)-pirrolo[1,2-a] pirazina-1,4-dione e o ácido láurico, já descritos na literatura por suas propriedades contra Staphylococcus aureus sensíveis à meticilina (MSSA) e SARM, bem como outros metabólitos conhecidos foram identificados nos extratos restantes, sugerindo que estas leveduras podem produzir moléculas promissoras. Dentro deste contexto, a atividade antimicrobiana e o baixo potencial citotóxico demonstrado por esses extratos revelaram uma classe de compostos químicos promissores para desenvolvimento de novos antibioticos. No entanto, mais estudos farmacológicos serão feitos para confirmar estes dados.
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Eficácia antimicrobiana do digluconato de clorexidina sobre dentina humana infectada por bactérias cariogênicas : estudo in vitro e in situ / Antimicrobial efficacy of 2% chlorhexidine digluconate against cariogenic bacteria in human dentine : an in vitro and in situ study

Borges, Fátima Maria Cavalcante January 2009 (has links)
BORGES, Fátima Maria Cavalcante. Eficácia antimicrobiana do digluconato de clorexidina sobre dentina humana infectada por bactérias cariogênicas : estudo in vitro e in situ. 2009. 54 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-08T13:09:55Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_fmcborges.pdf: 872076 bytes, checksum: 19f3140d403b52bbd3ba300f05a10f62 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T12:59:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_fmcborges.pdf: 872076 bytes, checksum: 19f3140d403b52bbd3ba300f05a10f62 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T12:59:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_fmcborges.pdf: 872076 bytes, checksum: 19f3140d403b52bbd3ba300f05a10f62 (MD5) Previous issue date: 2009 / O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro e in situ os efeitos de um agente de limpeza cavitária a base de digluconato de clorexidina a 2% (CHX) na desinfecção de dentina cariada, bem como determinar a susceptibilidade de diferentes espécies a este agente antimicrobiano. Setenta blocos de dentina humana foram distribuídos de forma aleatória e submetidos a desafio cariogênico por um método microbiológico in vitro (n=15), bem como um in situ (n=20). No estudo in vitro, 30 blocos de dentina foram imersos por 5 dias, em caldo BHI inoculado com Streptococcus mutans, para indução de cárie. No estudo in situ, 20 voluntários usaram dispositivos palatinos contendo dois blocos de dentina, que foram gotejados com solução de sacarose 40%, 10 vezes ao dia, durante 14 dias. Ao final de cada período experimental, os blocos de dentina foram divididos aleatoriamente em dois grupos: Controle (solução de NaCl a 0,9%) e CHX. Amostras de dentina infectada foram coletadas antes e 5 min após cada tratamento, em seguida, as bactérias foram cultivadas e os microorganismos contados. Foram avaliados os seguintes microorganismos: estreptococos mutans in vitro e in situ, estreptococos totais, microorganismos viáveis totais e lactobacilos, in situ. A redução microbiana promovida por cada tratamento foi calculada e comparada entre os grupos pelo teste t, a susceptibilidade dos microorganismos isolados in situ foi comparada pela análise de variância ANOVA (= 5%). A redução microbiana promovida pela CHX foi significativamente maior quando comparada ao grupo controle para todos os microorganismos avaliados tanto in vitro quanto in situ. No entanto, não houve diferença na susceptibilidade dos vários microorganismos avaliados. Desta forma, a CHX foi capaz de reduzir a população microbiana em dentina infectada, sugerindo que esta abordagem pode ser uma ferramenta auxiliar para desinfecção de dentina cariada residual suprimindo o crescimento de microorganismos associados ao desenvolvimento de cárie.
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Atividade do carvacrol e timol in vivo na inibição de streptococcus mutans e experiência de cárie em crianças livres de cárie: um estudo longitudinal / Activity of carvacrol and thymol in vivo against streptococcus mutans and caries experience in caries-free children : a longitudinal study

Barroso, Jorgeana Abrahão January 2010 (has links)
BARROSO, Jorgeana Abrahão. Atividade do carvacrol e timol in vivo na inibição de streptococcus mutans e experiência de cárie em crianças livres de cárie : um estudo longitudinal. 2010. 206 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-13T16:45:43Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_jabarroso.pdf: 1602789 bytes, checksum: 054c7f44378b62a2fdd259329e00007d (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T14:22:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_jabarroso.pdf: 1602789 bytes, checksum: 054c7f44378b62a2fdd259329e00007d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T14:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_jabarroso.pdf: 1602789 bytes, checksum: 054c7f44378b62a2fdd259329e00007d (MD5) Previous issue date: 2010 / This study aimed to compare the anticaries and antimicrobial efficacy of four different substances: 20% carvacrol (CAR), 10% carvacrol in association with 10% thymol (CAR+THY), 20% chlorhexidine (CHX) and 5% sodium fluoride (NaF), in high-risk, caries-free children. One hundred and twenty children, between 36 and 71-months age, were selected from public preschools from a neighborhood in Fortaleza (Ceará). Children were classified as a high caries-risk group according to the American Academy of Pediatric Dentistry Guidelines. These children were randomly allocated into four different treatment groups. Antimicrobial agents were made as varnishes and applied every 3 months, during one year. Patients were monitored every 3 months for new caries lesions. Saliva was collected before treatment initiation (B) and after 7 (D7), 30 (D30), 90 (D90), 180 (D180) and 360 (D360) days post-treatment for MS detection. For microbiological analysis, samples were cultivated on MSB agar media and incubated at 37o C under microaerofilic conditions, during 48 hours. Bacterial colonies were confirmed as being MS through biochemical tests. MS counts were expressed in colony forming units (CFU/mL). Data was considered significant when p<0.02. When comparing MS levels between B and D7, no difference was observed between groups (p=0,032). Comparisons of the percentage MS reduction between groups (D30-D90) demonstrated a significant difference (p=0,002), with a difference between CAR versus CAR+THY (p=0.003), CAR+THY versus CHX (p=0.004), and CHX versus NaF (p=0.014). CAR+THY presented the smallest percentage reduction, while CHX presented the greatest. We observed an increase in MS in the groups treated with CHX and NaF at D360. With the exception of the NaF group, comparisons between dmfs within each group, demonstrated a significant difference between the initial dmfs and the dmfs measured 9 months after treatment initiation. A significant positive correlation between the total dental surfaces and the patient’s age was observed in all groups. No significant difference was found between caries density of the different age groups within and between groups. The dmfs scores did not differ between groups (p=0,746). In conclusion, all treatments produced significant MS reduction with great variations within and between groups, associated with low caries experience. / Este trabalho buscou comparar a eficácia anti-cárie e antimicrobiana de quatro diferentes substâncias: carvacrol 20% (CAR), carvacrol 10% em associação com o timol a 10% (CAR+THY), clorexidina a 20% (CHX) e fluoreto de sódio a 5% (NaF), em crianças de alto risco e livres de cárie. Cento e vinte crianças, entre 36 a 71 meses, foram selecionadas de pré-escolas públicas de um bairro do Município de Fortaleza (Ceará), caracterizando-as segundo os critérios de risco à carie da Academia Americana de Odontologia Pediátrica como crianças de alto risco. Essas crianças foram randomicamente distribuídas nos quatro grupos de tratamento. Os antimicrobianos foram manipulados na forma de verniz e aplicados trimestralmente durante um ano. Pacientes foram monitorados trimestralmente, através de exames clínicos periódicos para avaliação do surgimento de lesões de cárie. Foram coletadas salivas antes do início do tratamento (B), após 7 (D7), 30 (D30), 90 (D90), 180 (D180) e 360 (D360) dias de tratamento para detecção de EGM. Na análise microbiológica as amostras foram cultivadas sobre Agar MSB, incubadas em estufa a 37° C, com atmosfera de microaerofilia, durante 48 horas. As colônias foram confirmadas como sendo EGM a partir de provas bioquímicas. A contagem bacteriana foi expressa em unidades formadoras de colônias (UFC/mL). Dados foram considerados significativos quando p<0.02. Ao comparar os níveis de EGM entre B e D7 não observou-se diferença entre os tratamentos (p=0,032). Comparações dos percentuais de redução de EGM entre os grupos (D30-D90) e demonstrou uma diferença estatisticamente significativa (p=0,002) , havendo diferença entre o CAR versus CAR+THY (p=0,003); CAR +THY versus CHX (p=0,004) e CHX versus NaF, (p=0,014). O CAR+THY apresentou o menor percentual de redução e a CHX o maior. Observamos um aumento de EGM nos grupos tratados com CHX e NaF em D360. Comparações entre o ceo-s dentro de cada grupo, demonstrou uma diferença significativa entre o ceo-s inicial e o ceo-s do exame realizado 9 meses após o início dos tratamentos, com exceção do grupo NaF. Observou-se uma correlação positiva significante entre o total de superfícies e a idade em todos os tratamentos estudados. Não houve diferença significante da densidade de cárie entre as várias faixas etárias dentro e entre os grupos. Não houve diferença no ceo-s entre os grupos (p=0,746). Em conclusão, todos os tratamentos produziram significante redução de EGM com grandes variações dentro e entre os grupos, associada a baixa experiência de cárie.
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Determinação de parâmentros efetivos e seguros para o uso da terapia fotodinâmica antimicrobiana em dentina cariada : estudo in vitro / Safe and effective parameters for using photodynamic antimicrobial chemotherapy in carious dentin : an in vitro study

Melo, Mary Anne Sampaio de January 2009 (has links)
MELO, Mary Anne Sampaio. determinação de parâmentros efetivos e seguros para o uso da terapia fotodinâmica antimicrobiana em dentina cariada : estudo in vitro. 2009. 56 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-14T16:52:09Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_masmelo.pdf: 1636686 bytes, checksum: b71dcfc877355db2939e51a119a99e11 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T14:31:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_masmelo.pdf: 1636686 bytes, checksum: b71dcfc877355db2939e51a119a99e11 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T14:31:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_masmelo.pdf: 1636686 bytes, checksum: b71dcfc877355db2939e51a119a99e11 (MD5) Previous issue date: 2009 / The elimination of bacteria inside the demineralized dentin layer might contribute for a more conservative approach in the restorative treatment of deep dentin caries lesions. This way, this in vitro study aimed to establish safe and effective parameters for using an LED (λ = 620-660 nm) associated to the photosensitizer toluidine blue O (TBO) in the disinfection of artificially produced dentin caries lesions. For this, slabs with 25 mm2 of flatted occlusal human dentin were immersed for 5 days in BHI broth inoculated with Streptococcus mutans for caries induction. After demineralization, the slabs were randomly allocated to 10 experimental groups (n=15), as follows Control5; Control10; Control15; TBO; LED5; LED10; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15, which were treated with TBO (0.1 mg.ml-1 for 5 min) or 0.9% NaCl solution for 5, 10 or 15 min, and submitted or not to LED irradiation for 5, 10 or 15 min (47, 94, and 187 J/cm2). Dentin samples from caries lesions were collected before and after treatments and bacteria were then cultured for Streptococcus mutans counts. In addition, using a type K thermometer, the temperature inside the pulp and in periodontal area was monitored for the groups PDT5, PDT10 and PDT1510 in 10 teeth with deep occlusal cavities. Paired t test/Wilcoxon matched pairs test (=5%) were used to determine differences between microbial population before and after treatments, and ANOVA followed by Tukey test for comparing data of temperature and log reductions. Statistically significant differences in Streptococcus mutans viability were found for the groups: Control15; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15. The temperature from intrapulpal and periodontal area were lower than 2oC, being higher inside the pulpal chamber for group PDT15 when compared to group PDT5. Thus, it the experimental conditions used in the study, photodynamic therapy may be a safe and effective treatment to be used for disinfecting carious dentin, however the influence of time of irradiation/exposition it the Streptococcus mutans viability should be better investigated. / A eliminação de bactérias presentes na camada de dentina desmineralizada poderia contribuir para uma abordagem mais conservadora no tratamento restaurador de lesões de cárie dentinária profundas. Desta forma, este estudo in vitro objetivou estabelecer parâmetros eficazes e seguros para a utilização de um LED (λ = 620-660 nm) associado ao fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO) na desinfecção de lesões de cárie dentinária produzidas artificialmente. Para tal, blocos com 25 mm2 de dentina oclusal planificada foram imersos por 5 dias em BHI caldo inoculado com Streptococcus mutans para indução de cárie. Depois da desmineralização, os blocos foram aleatoriamente distribuídos em 10 grupos experimentais (n=15), a saber: Controle5; Controle10; Controle15; TBO; LED5; LED10; LED15; TFD5; TFD10 e TFD15, que foram tratados ou não com TBO (0,1 mg.ml-1 por 5 minutos) ou solução de NaCl a 0,9% por 5, 10 ou 15 minutos, e submetidos ou não a irradiação com LED por 5, 10 ou 15 minutos (47, 94, e 187 J/cm2). Amostras de dentina cariada foram coletadas antes e após os tratamentos e as bactérias foram semeadas para contagem de Streptococcus mutans. Adicionalmente, com um termômetro tipo K, a temperatura intra-pulpar e da área periodontal nos grupos TFD5; TFD10 e TFD15 foi monitorada em 10 dentes com cavidades oclusais confeccionadas em dentina profunda. Teste t pareado e ANOVA seguida pelo teste Tukey (=5%) foram usados para verificação da redução microbiana promovida pelos tratamentos, bem como para verificação da alteração na temperatura durante a irradiação. Diferenças significativas estatisticamente na viabilidade do Streptococcus mutans entre contagens foram observadas nos grupos: Controle15; LED15; TFD5; TFD 10 e TFD15. A temperatura intra-pulpar e no periodonto foi inferior a 2oC, sendo a no interior da câmara pulpar maior para o grupo TFD15 quando comparado ao grupo TFD5. Dessa forma, nas condições experimentais atuais, a terapia fotodinâmica pode ser um tratamento eficaz e seguro a ser usado na desinfecção de dentina cariada, contudo a influência do tempo de irradiação ou exposição à solução salina na viabilidade do Streptococcus mutans deve ser melhor investigada.

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