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Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os flebotomíneos (Diptera, Psychodidae) são uma das maiores preocupações para a saúde pública como tranmissores dos parasitos que causam leishmanioses. Assim, estudos integrativos envolvendo a distribuição geográfica, os aspectos ecológicos e a sistemática desses insetos são necessários para a confecção de ferramentas acuradas de combate a esses insetos e, consequentemente, para o controle das leishmanioses. Aqui utilizamos o fragmento de 658-pb do gene mitocondrial citocromo c oxidase subunidade I (COI), conhecido como código de barras de DNA, para identificar diversas espécies de flebotomíneos obtidas durante levantamentos de fauna de diversas regiões brasileiras. Além do COI, utilizamos também fragmentos do gene period para estudar as espécies do complexo Lutzomyia longipalpis. Ao todo, 576 espécimes pertencentes a 47 espécies foram identificados morfologicamente e tiveram seu DNA genômico extraído e o fragmento do COI amplificado e sequenciado. Também foram amplificados e sequenciados um fragmentos de 266-pb do gene period para oito populações de Lu. longipalpis ainda não amostradas e um fragmento de 446-pb para outras onze populações ineditamente estudadas. O uso do gene COI se mostrou útil para identificação de aproximadamente 90 % das espécies analisadas. As análises do COI sugeriram a presença de diversidade críptica para quatro espécies: Evandromyia edwardsi, Pintomyia monticola, Psathyromyia bigeniculata e Sciopemyia microps. As análises também salientaram a necessidade de revisão morfológica do gênero Sciopemyia devido a alta divergência genética entre suas espécies. Ainda, foi possível estabelecer a associação entre machos e suas respectivas fêmeas para os gêneros Brumptomyia, Evandromyia e Pressatia cujas fêmeas são muito semelhantes
Também permitiu corrigir uma identificação morfológica errônea de uma espécie do gênero Brumptomyia. Porém, o código de barras de DNA não foi útil para diferenciar espécies com fortes indícios de introgressão como as do complexo Lu. longipalpis. Por outro lado, as análises de um fragmento de 266-pb do gene period para populações da espécie de Lu. longipalpis com som do tipo burst permitiram aumentar o conhecimento sobre a distribuição geográfica dessa espécie, apontar possíveis fatores históricos que modelaram essa distribuição e corroborar dados previamente publicados com respeito à homogeneidade genética dessa espécie. Já as análises de outras onze novas populações utilizando um fragmento de 446-pb permitiram discriminar populações sem som de cópula gravado pertencentes a espécie com som de cópula do tipo burst das com sons de cópula do tipo pulsado. Ainda, dentro das espécies com sons de cópula do tipo pulsado, essas análises sugeriram uma discriminação entre a espécie com som de cópula pulsado do tipo 1 e as demais. Os resultados reforçaram a necessidade da identificação molecular para complementar aqueles obtidos com a identificação morfológica e também a utilidade da identificação molecular em descobrir diversidade críptica dentro de algumas espécies de flebotomíneos / Sand flies (Diptera, Psychodidae) are of greatest public health concern as the main vectors of
parasites that cause leishmaniasis. Therefore, integrative approaches encompassing sand flies
geographic distribution, ecological aspects and systematics are required to produce accurate combat
tools against these insects and, consequently, for leishmaniasis control. Here we used a 658-bp
fragment of the mitochondrial gene cytochrome c oxidase subunit I (COI), known as DNA barcode, to
identify sand flies species collected during fauna surveys in several Brazilian regions. Furthermore, we
also used period gene fragments to study sibling species within the Lutzomyia longipalpis complex. A
total of 576 specimens belonging to 47 species were morphologically identified and their genomic
DNA was extracted and a COI gene fragment was amplified and sequenced. Also were amplified and
sequenced 266-bp fragments of the period gene for eight Lu. longipalpis populations not analyzed so
far and 446-bp fragments for eleven recently collected Lu. longipalpis populations. The COI gene was
useful to discriminate approximately 90 % of the analyzed species. The DNA barcode analyses
suggested cryptic diversity within four species: Evandromyia edwardsi, Pintomyia monticola,
Psathyromyia bigeniculata and Sciopemyia microps. The analyses also highlighted the necessity of
morphological revision for the Sciopemyia genus due to high genetic divergence among its species.
Therefore it was possible to establish association between males and it their females within the
genera Brumptomyia, Evandromyia and Pressatia which are very similar. Also, it allowed to correct a
morphological misidentification of one species belonging to the Brumptomyia genus. However, the
DNA barcode was not useful to discriminate among species with strong evidence of introgression such
as the Lu. longipalpis sibling species. On the other hand, the analyses of the 266-bp fragment of the
gene period for the populations of the sibling species producing burst-type copulations songs revealed
possible historical factors that shaped this geographic distribution and corroborated previous data
regarding the genetic homogeneity of this sibling species. The analyses of eleven recently collected
populations using a 446-bp fragment of the period gene discriminated between populations with no
recorded copulation song belonging to the burst-type sibling species from populations belonging to the
pulse-types sibling species. Also, within the sibling species with pulse-types copulation songs, it was
possible to discriminate between the sibling species with pulse-type 1 copulation song from the others.
The results reinforced the necessity of molecular identification to complement results obtained by
morphological identification and showed the utility of the molecular identification to discover cryptic
diversity within some sand fly species. / 2019-04-17
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/14067 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Pinto, Israel de Souza |
| Contributors | Monteiro, Fernando Araújo, Mazzoni, Camila Junqueira, Ribolla, Paulo Eduardo Martins, Cupolillo, Elisa, Lelis, Renata Schama, Peixoto, Alexandre Afrânio |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | Restricted Acess, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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