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Sistematica de flebotomineos (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) neotropicais com ênfase nas espécies que ocorrem no Brasil

Pinto, Israel de Souza January 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-05-02T13:06:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 israel_pinto_ioc_dout_2014.pdf: 27021076 bytes, checksum: 0a7309dd5b71a7affe0ce2fcbdb33b08 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os flebotomíneos (Diptera, Psychodidae) são uma das maiores preocupações para a saúde pública como tranmissores dos parasitos que causam leishmanioses. Assim, estudos integrativos envolvendo a distribuição geográfica, os aspectos ecológicos e a sistemática desses insetos são necessários para a confecção de ferramentas acuradas de combate a esses insetos e, consequentemente, para o controle das leishmanioses. Aqui utilizamos o fragmento de 658-pb do gene mitocondrial citocromo c oxidase subunidade I (COI), conhecido como código de barras de DNA, para identificar diversas espécies de flebotomíneos obtidas durante levantamentos de fauna de diversas regiões brasileiras. Além do COI, utilizamos também fragmentos do gene period para estudar as espécies do complexo Lutzomyia longipalpis. Ao todo, 576 espécimes pertencentes a 47 espécies foram identificados morfologicamente e tiveram seu DNA genômico extraído e o fragmento do COI amplificado e sequenciado. Também foram amplificados e sequenciados um fragmentos de 266-pb do gene period para oito populações de Lu. longipalpis ainda não amostradas e um fragmento de 446-pb para outras onze populações ineditamente estudadas. O uso do gene COI se mostrou útil para identificação de aproximadamente 90 % das espécies analisadas. As análises do COI sugeriram a presença de diversidade críptica para quatro espécies: Evandromyia edwardsi, Pintomyia monticola, Psathyromyia bigeniculata e Sciopemyia microps. As análises também salientaram a necessidade de revisão morfológica do gênero Sciopemyia devido a alta divergência genética entre suas espécies. Ainda, foi possível estabelecer a associação entre machos e suas respectivas fêmeas para os gêneros Brumptomyia, Evandromyia e Pressatia cujas fêmeas são muito semelhantes Também permitiu corrigir uma identificação morfológica errônea de uma espécie do gênero Brumptomyia. Porém, o código de barras de DNA não foi útil para diferenciar espécies com fortes indícios de introgressão como as do complexo Lu. longipalpis. Por outro lado, as análises de um fragmento de 266-pb do gene period para populações da espécie de Lu. longipalpis com som do tipo burst permitiram aumentar o conhecimento sobre a distribuição geográfica dessa espécie, apontar possíveis fatores históricos que modelaram essa distribuição e corroborar dados previamente publicados com respeito à homogeneidade genética dessa espécie. Já as análises de outras onze novas populações utilizando um fragmento de 446-pb permitiram discriminar populações sem som de cópula gravado pertencentes a espécie com som de cópula do tipo burst das com sons de cópula do tipo pulsado. Ainda, dentro das espécies com sons de cópula do tipo pulsado, essas análises sugeriram uma discriminação entre a espécie com som de cópula pulsado do tipo 1 e as demais. Os resultados reforçaram a necessidade da identificação molecular para complementar aqueles obtidos com a identificação morfológica e também a utilidade da identificação molecular em descobrir diversidade críptica dentro de algumas espécies de flebotomíneos / Sand flies (Diptera, Psychodidae) are of greatest public health concern as the main vectors of parasites that cause leishmaniasis. Therefore, integrative approaches encompassing sand flies geographic distribution, ecological aspects and systematics are required to produce accurate combat tools against these insects and, consequently, for leishmaniasis control. Here we used a 658-bp fragment of the mitochondrial gene cytochrome c oxidase subunit I (COI), known as DNA barcode, to identify sand flies species collected during fauna surveys in several Brazilian regions. Furthermore, we also used period gene fragments to study sibling species within the Lutzomyia longipalpis complex. A total of 576 specimens belonging to 47 species were morphologically identified and their genomic DNA was extracted and a COI gene fragment was amplified and sequenced. Also were amplified and sequenced 266-bp fragments of the period gene for eight Lu. longipalpis populations not analyzed so far and 446-bp fragments for eleven recently collected Lu. longipalpis populations. The COI gene was useful to discriminate approximately 90 % of the analyzed species. The DNA barcode analyses suggested cryptic diversity within four species: Evandromyia edwardsi, Pintomyia monticola, Psathyromyia bigeniculata and Sciopemyia microps. The analyses also highlighted the necessity of morphological revision for the Sciopemyia genus due to high genetic divergence among its species. Therefore it was possible to establish association between males and it their females within the genera Brumptomyia, Evandromyia and Pressatia which are very similar. Also, it allowed to correct a morphological misidentification of one species belonging to the Brumptomyia genus. However, the DNA barcode was not useful to discriminate among species with strong evidence of introgression such as the Lu. longipalpis sibling species. On the other hand, the analyses of the 266-bp fragment of the gene period for the populations of the sibling species producing burst-type copulations songs revealed possible historical factors that shaped this geographic distribution and corroborated previous data regarding the genetic homogeneity of this sibling species. The analyses of eleven recently collected populations using a 446-bp fragment of the period gene discriminated between populations with no recorded copulation song belonging to the burst-type sibling species from populations belonging to the pulse-types sibling species. Also, within the sibling species with pulse-types copulation songs, it was possible to discriminate between the sibling species with pulse-type 1 copulation song from the others. The results reinforced the necessity of molecular identification to complement results obtained by morphological identification and showed the utility of the molecular identification to discover cryptic diversity within some sand fly species. / 2019-04-17
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Síntese de Copolímeros anfifílicos: relação entre estrutura molecular e agregação em solução aquosa

NORONHA, Maria Luiza de Carvalho 29 May 2015 (has links)
Nas últimas décadas os materiais poliméricos anfifílicos têm gerado interesse na comunidade científica devido à sua capacidade de formação de partículas micelares em meio aquoso, podendo ser usados nas mais diversas áreas como na de biomateriais, na estabilização de emulsões farmacêuticas, incorporação de substâncias tóxicas ou poluidoras, carreamento e liberação controlada de fármacos e diversas outras aplicações. Vários tipos de polímeros podem ser empregados, estando entre eles os derivados de metacrilato de 2-dimetilaminoetila (DMAEMA) que apresenta propriedades como resposta à temperatura e ao pH. Copolímeros de PDMAEMA com monômeros apolares como o acrilato de n-butila (nBA) formam materiais anfifílicos que tendem a agregar-se em solução aquosa, formando partículas capazes de incorporar substâncias relativamente hidrofóbicas (contaminantes, por exemplo), íons, entre outras propriedades de interesse. Neste trabalho foram sintetizados copolímeros em bloco baseados em DMAEMA e nBA, com diferentes massas molares médias e proporções entre os blocos para o estudo sistemático da influência da estrutura molecular em propriedades como o tamanho e forma dos agregados em solução, resposta à temperatura e pH, entre outras. Para a síntese dos polímeros foi utilizada a técnica RAFT (sigla inglesa para Reversible Addition-Fragmentation chain Transfer) que permite o controle da massa molar do polímero e facilita a construção de copolímeros em bloco. Os polímeros sintetizados foram caracterizados por diferentes técnicas tais como a Ressonância Magnética Nuclear de Próton (RMN 1H); Cromatografia de Permeação em Gel (GPC); Espectroscopia na Região do Infravermelho com Transformada de Fourier e Refletância Total Atenuada (FTIR-ATR) e Espectroscopia UV/VIS. Os agregados formados em solução aquosa tiveram seu tamanho determinado por Espalhamento de Luz Dinâmico (DLS). Os materiais foram sintetizados para formar agregados em soluções aquosas. Mesmo o homopolímero de PDMAEMA, em todas as condições estudadas, embora os agregados dos copolímeros apresentaram tamanhos maiores. Não foi possível chegar a qualquer relação com o tamanho e pH ou mesmo conteúdo de PnBA, no copolímero dibloco. No entanto, em quase todas as condições estudadas, os agregados tem uma correlação direta com sua concentração, fazendo desses sistemas muito diferentes de micelas regulares na mesma gama de condições. Esse esforço se enquadra no objetivo mais amplo de criar relações confiáveis entre a estrutura de polímeros e suas propriedades, no intuito de aumentar a eficiência do processo de síntese de materiais para aplicações específicas. / In recent decades amphiphilic polymer materials have generated interest in the scientific community due to its ability to form micellar particles in medium aqueous condition and it can be used in several areas such as in biomaterials, in stabilizing pharmaceutical emulsions, incorporation of toxic or polluting , entrainment and controlled release of drugs and various other applications. Various types of polymers can be appointed, among them being those derived from 2-dimetylamynoethyl methacrylate (DMAEMA) having properties in response to temperature and pH. Copolymers of PDMAEMA with non-polar monomers such as acrylate of n-butyl (nBA) form amphiphilic materials which tend to aggregate in aqueous solution, forming particles able to incorporate relatively hydrophobic substances (contaminants, for example), ion and other properties of interest. In this work copolymers were synthesized in blocks based on DMAEMA and nBA with different molecular weight average and ratios between the blocks for the study of systematic influence of the molecular structure on properties such as size and shape of the aggregates in solution, the response to temperature and pH, among others. For the synthesis of polymers were used the RAFT technique (English acronym for Reversible Addition-Fragmentation chain Transfer) that allows control of the weight in the molecular of the polymer and facilitates the construction of copolymers in block. The synthesized polymers were characterized by different techniques such as Nuclear Magnetic Resonance Proton (1H NMR); Gel Permeation Chromatography (GPC); spectroscopy in the region of the infrared with Fourier Transform Attenuated and Total Reflectance and (FTIR-ATR) spectroscopy and UV/VIS. The aggregates formed in an aqueous solution had its size determined by the Dynamic Light Scattering (DLS). The materials were synthesized to form aggregates in aqueous solutions. Even homopolymer of PDMAEMA , in all conditions studied, although the aggregate of the copolymers showed greater size. It was not possible to reach any relation to the size and pH or even content PNBA in the diblock copolymer. However, in almost all conditions studied, the aggregate has a direct correlation with its concentration, making these systems very different from regular micelles in the same range of conditions. This effort fits into a wide objective to create trusting relationships between polymer structure and their properties in order to increase the efficiency of the process in synthesis of materials for specific applications. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

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