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Previous issue date: 2014-03-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The resistance acquired by some tumor cell lines retricts the use of drugs made of
platinum because of Ruthenium compounds have been objects of great attention for
presenting antimetastatic properties and low toxicity. Ruthenium compounds form
compounds with the most different chemical binders, presenting good behavior and
expanding the possibilities offor biological applications. A wide variety of coordination
has enabled studies on ruthenium complexes, andseveral oxidation stages (Ru (II),
Ru (III), and Ru (IV)) under physiological conditions and the rate of binder
substitution. This study ranges the citotoxic activity of ruthenium (III) compound cis-
Tetraammine(oxalato)Ruthenium(III) Dithionate - {Cis-[Ru(C2O4)(NH3)4]2(S2O6)} to
treat human erythroleukemia (K562) tumor cell lineand the complex of ruthenium (II)
coordinated a phosphine ligand and nitrile front tumor lineage S180 through the
techniques of assay cell viability, assay kinetics of cell cycle phases, annexin V
assay/ propidium iodide, test of mitochondrial membrane potential, test comet and
gene expression through real time PCR. Both antiproliferative and cytotoxic activity
revealed that K562 cells cultured with ruthenium (III) compound showed meaningful
decrease in proliferation. Ruthenium(III) compound induced the IC50 value was of
18.28 μM set againts the cell cycle profiles cells not treated. Flow cytometric analysis
indicated a sub-G1 arresting effect of ruthenium compound on K562 cells. Through
the cell viability assay through MTT reduction technique, it was found that the
complex of ruthenium (II) phosphine coordinated and nitrile presented cytotoxic
activity when facing the tumor strain S180 with IC50 17.02±8.21μM and IC50 de 53.73
± 5.71 μM for lymphocyte. When analyzing the cell cycle of tumor cells S180 treated
with complex of ruthenium (II) caused increase in cells in G0/G1 and in S phase
decreased. We observed an increase G2 / M. In the analysis of apoptosis assays, the
results pointed that the complex ruthenium (II) induced cell death via apoptosis in
tumor strain S180 as proved the increase in annexin cells V positive, depolarization
of the mitochondrial membrane potential, activation of caspase 3 (Casp3) and 8
(Casp8) and increased expression levels of caspase-3 (Casp3) (mRNA), Bax
(mRNA) and Tp53. The results lead to the conclusion that both complexes of
ruthenium (II) and (III) induce cytotoxic activity against cell models tested, and that this activity correlates with alterations in cell cycle phases and induction of cell death
via apoptosis. / Fármacos à base de cisplatina ainda são os anticancerígenos mais utilizados no
mundo. Os compostos de rutênio têm sido objetos de grande atenção devido as
suas propriedades antimetastática, baixa toxicidade e vários estados de oxidação
(Ru (II), Ru (III) e Ru (IIV)) em condições fisiológicas. O presente trabalho teve como
objetivo investigar in vitro os efeitos citotóxico e mecanismo de morte do complexo
Ditionato de cis-Tetraamino(oxalato)rutênio(III) na linhagem tumoral de leucemia
mielóide crônica (K562) e do complexo de rutênio (II) coordenado a ligante fosfina e
nitrila [RuCl(bcn)(bipy)(dppe)]PF6, em linhagem tumoral S180 a partir das técnicas de
ensaio de viabilidade celular, ensaio de cinética das fases do ciclo celular, ensaio
anexina V/Iodeto de Propídeo, ensaio de potencial de membrana mitocondrial e
expressão gênica por PCR em tempo real. Os resultados mostraram que o complexo
de rutênio (III) provoca uma significativa redução na proliferação de células K562. O
complexo de rutênio (III) induziu uma IC50 =18,28 μM. A análise por citometria de
fluxo indicou um efeito sub-G1 dos complexos de rutênio sobre células de K562. O
composto provocou um aumento de dano significativo nas células em todas as
concentrações testadas em comparação ao controle negativo, o que pode ser
associado à citotoxicidade com efeito direto sobre o DNA das células de K562. A
partir do ensaio de viabilidade celular pela técnica de redução do MTT, verificou-se
que o complexo de rutênio (II) coordenado a fosfina e nitrila apresentou atividade
citotóxica frente à linhagem tumoral S180 com IC50 17,02±8,21μM e IC50 de 53,73 ±
5,71 para linfócito. Na análise do ciclo celular de células tumorais S180 tratadas com
o complexo de rutênio (II), casou indução de G0/G1, fase S e G2/M. Na análise dos
ensaios de apoptose, os resultados demonstraram que o complexo de rutênio (II)
induziu morte celular via apoptose na linhagem tumoral S180, como evidenciado
pelo aumento no número de células anexina V positivo, despolarização do potencial
de membrana mitocondrial, ativação das caspase 3 (Casp3) e 8 (Casp8) e aumento
dos níveis de expressão de caspase-3 (Casp3) (mRNA), Bax (mRNA) e Tp53 . A
partir dos resultados conclui-se que ambos os complexos de rutênio (II) e (III)
induzem atividade citotóxica frente aos modelos de células testadas, sendo que a
atividade está correlacionada às alterações nas fases do ciclo celular e indução de
morte celular via apoptose.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/4787 |
| Date | 19 March 2014 |
| Creators | Pereira, Flavia de Castro |
| Contributors | Lacerda, Elisangela de Paula Silveira, Lacerda, Elisangela de Paula Silveira, Gouvea, Wagner dos Santos, Menck, Carlos Frederico Martins, Lobato, Yandra, Silva, Claudio Carlos da |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Biologia (ICB), UFG, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas - ICB (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 6883982777473437920, 600, 600, 600, 600, 600, -3872772117827373404, 3962143990328052072, -2321034096481322512, 2075167498588264571 |
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