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Previous issue date: 2013-10-31 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Tuberculosis (TB), an infectious disease that occurs in 90% of cases in the lungs, is caused by Mycobacterium tuberculosis. Although TB has been described since antiquity, being diagnosed about 100 years and has treatment from the 40s, is currently still considered a serious public health problem, being reported annually 1.1 million deaths worldwide. Knowing that the cycle of transmission of tuberculosis involving almost exclusively the human, being one of the targets for global TB control is the diagnosis, this being vital to break the chain of transmission. The Global Tuberculosis Control Programmes use bascilloscopies (microscopic detection of bacilli)as their first choice in the diagnosis of pulmonary tuberculosis. However, carbolfucsina, the dye solution used in this method is a toxic carcinogenic compound which contaminates water and endagers human health. In order to verify the potential of coloured substances produced by fungi endophytic filamentous to replace carbolfucsina, endophytes derived from vegetables H. sucuuba , C. multijuga , P. aduncum and S. reticulata were analyized. From 75 isolates, 30 were selected with capacity to produce coloured diffusible substances in solid medium. The culture filtrates were tested in for their ability to stain smears prepared from the standard strain of Mycobacterium tuberculosis H37Rv. Analysis of the staining was performed by bright field and fluorescence microscopy. Fluorescence substances identified as proteins by the Bradford technique, present in 78% of the culture filtrates, enabled the visualization of M. tuberculosis H37Rv. When the culture filtrates were tested with other microorganisms (E. coli ATCC 25922, S. aureus ATCC 25923 and C. albicans ATCC 36232) they were found to be nonspecific for M. tuberculosis. Despite the negative result of the proposed objective, there is potential for fluorescent proteins to be used in monitoring cell, tissue and protein interactions. / A tuberculose (TB), doença infecciosa que acomete em 90% dos casos os pulmões, é causada principalmente pelo Mycobacterium tuberculosis. Embora a TB tenha sido descrita desde a antiguidade, ser diagnosticada a mais de 100 anos e possuir tratamento desde a década de 40, atualmente ainda é considerada um grave problema de saúde pública, sendo registrados anualmente 1,1 milhões de óbitos no mundo. Sabendo-se que o ciclo de transmissão da tuberculose envolve quase que exclusivamente o ser humano, um dos alvos para o controle global da doença é o diagnóstico, sendo esse vital para a quebra da cadeia de transmissão. Os Programas Mundiais de Controle da Tuberculose consideram a baciloscopia como a primeira opção para diagnóstico da Tuberculose pulmonar. No entanto, a solução corante de carbolfucsina utilizada na técnica é um composto tóxico, carcinogênico, combustível e contaminante da água. Com o objetivo de verificar o potencial de substâncias coloridas produzidas por fungos endofíticos filamentosos em substituição à carbolfucsina, foram analisados endofíticos oriundos dos vegetais Himatanthus sucuuba, Copaifera multijuga, Piper aduncum e Senna reticulata. A partir de 75 isolados, foram selecionados 30 com capacidade de produzir substâncias coloridas difusíveis em meio sólido. Os filtrados do cultivo em caldo foram testados quanto à capacidade de coloração em esfregaços preparados a partir da cepa padrão de Mycobacterium tuberculosis H37Rv. A análise da coloração foi realizada por microscopia em campo claro e em fluorescência. Constatou-se a existência de capacidade de fluorescência em 78% dos filtrados de cultivo sobre as unidades bacilares de M. tuberculosis. No entanto, quando os filtrados foram submetidos a testes de coloração em outros microrganismos, Escherichia coli ATCC 25922; S. aureus ATCC 25923 e Candida albicans ATCC 36232, constatou-se serem inespecíficos para M. tuberculosis. Em análise de caracterização química a substância responsável pela fluorescência apresentou características compatíveis com proteínas. Nesse sentido, apesar do resultado negativo ao objetivo proposto, tem-se a possibilidade da descoberta de proteínas fluorescentes que vêm sendo utilizadas como reveladores na monitoração de células, tecidos e na interação entre proteínas.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/3104 |
| Date | 31 October 2013 |
| Creators | Lima, Alita Moura de |
| Contributors | Salem, Julia Ignez do Nascimento, Souza, João Vicente Braga de |
| Publisher | Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFAM, BR, Instituto de Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 32215883775770440, 600 |
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