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Previous issue date: 2010-02-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The corn cob is an agricultural by-product still little used, this in part due to the low knowledge of the biotechnological potential of their molecules. Xylan from corn cobs (XSM) is a polysaccharide present in greater quantity in the structure of plant and its biotechnology potential is little known. This study
aimed to the extraction, chemical characterization and evaluation of biological activities of xylan from corn cobs. To this end, corncobs were cleaned, cut, dried and crushed, resulting in flour. This was subjected to a methodology that
combines the use of alkaline conditions with waves of ultrasound. After methanol precipitation, centrifugation and drying was obtained a yield of 40% (g/g flour). Chemical analysis indicated a high percentage of polysaccharides in
the sample (60%) and low contamination by protein (0.4%) and phenolic compounds (> 0.01%). Analysis of monosaccharide composition indicated the presence of xylose:glucose:arabinose:galactose:mannose:glucuronic acid in a molar ratio 50:20:15:10:2.5:2.5. The presence of xylan in the sample was confirmed by nuclear magnetic resonance (?H and ??C) and infrared spectroscopy (IR). Tests were conducted to evaluate the antioxidant potential of XSM. This showed a total antioxidant capacity of 48.45 EAA/g sample. However, did not show scavenging activity of superoxide and hydroxyl radical
and also reducing power. But, showing a high capacity chelating iron ions with 70% with about 2 mg/mL. The ability to XSM to influence cell proliferation in culture was also evaluated. This polymer did not influence the proliferation of normal fibroblast cells (3T3), however, decreased the rate of proliferation of tumor cells (HeLa) in a dose-dependent, reaching an inhibition of about 50% with a concentration around 2 mg/mL. Analyzing proteins related to cell death, by immunoblotting, XSM increases the amount of Bax, Bcl-2 decrease, increase
cytochrome c and AIF, and reduce pro-caspase-3, indicating the induction of cell death induced apoptosis dependent and independent of caspase. XSM did not show anticoagulant activity in the PT test. However, the test of activated partial thromboplastin time (aPTT), XSM increased clotting time at about 5 times with 600 ?g of sample compared with the negative control. The presence of sulfate on the XSM was discarded by agarose gel electrophoresis and IR. After carboxyl-reduction of XSM the anticoagulant activity decreased dramatically. The data of this study demonstrate that XSM has potential as antioxidant, antiproliferative and anticoagulant compound. Future studies to characterize these activities of XSM will help to increase knowledge about this molecule extracted from corn and allow their use in functional foods,
pharmaceuticals and chemical industries. / O sabugo de milho ? um subproduto agr?cola ainda pouco utilizado, isto se deve em parte ao baixo conhecimento do potencial biotecnol?gico de suas biomol?culas. Xilana de sabugo de milho (XSM) ? um polissacar?deo presente em maior quantidade na estrutura do vegetal e seu potencial biotecnol?gico ? pouco conhecido. Este trabalho teve como objetivo a extra??o, caracteriza??o qu?mica e avalia??o de atividades biol?gicas de XSM. Sabugos de milho foram limpos, cortados, desidratados e triturados, dando origem a uma farinha. Esta foi submetida a uma metodologia que combina o uso de meio alcalino com ondas de ultra-som. Ap?s precipita??o metan?lica, centrifuga??o e secagem obteve-se um rendimento de 40% (g/g de farinha). An?lises qu?micas indicaram um alto percentual de polissacar?deos na amostra (60%) e baixa contamina??o por prote?nas (0.4%) e compostos fen?licos (>0.01%). An?lises da composi??o monossacar?dica por cromatografia em papel e por cromatografia l?quida de alta performance (CLAE) indicaram a presen?a de xilose:glicose:arabinose:galactose:manose:?cido glucur?nico em uma propor??o molar de 50:20:15:10:2,5:2,5. A presen?a de xilana na amostra foi confirmada por resson?ncia magn?tica nuclear (13C e 1H) e por espectroscopia de infravermelho (IR). Testes foram realizados para avalia??o do potencial antioxidante de XSM. Esta mostrou uma capacidade antioxidante total de 48.45 EAA/g de amostra. Contudo, a mesma n?o mostrou atividade sequestradora de super?xido, radical hidroxila bem como poder redutor. Em contra partida,
apresentou 70% de atividade quelante de ?ons de ferro na concentra??o de 2 mg/mL. A capacidade de XSM em influenciar a prolifera??o celular em cultura tamb?m foi avaliada. Este polissacar?deo n?o influenciou a prolifera??o de c?lulas fibrobl?sticas normais (3T3), entretanto, diminuiu a taxa de prolifera??o de c?lulas tumorais (HeLa) de maneira dose-dependente, chegando a uma inibi??o de aproximadamente 50% com concentra??o em torno de 2 mg/mL.
Analisando prote?nas relacionadas ? morte celular, atrav?s de immunoblotting, XSM aumenta a quantidade de Bax, citocromo c e AIF e diminui Bcl-2 e procaspase- 3, indicando a indu??o de morte celular por apoptose dependente e independente de caspase. XSM n?o apresentou atividade anticoagulante pelo
teste de PT. Todavia, no teste de tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT), XSM aumentou o tempo de coagula??o em cerca de 5 vezes utilizando 600 ?g de amostra, quando comparadas com o controle negativo. A presen?a de sulfato ligado a XSM foi descartada por eletroforese em gel de agarose e por IR. Ap?s carboxirredu??o de XSM a atividade anticoagulante diminuiu drasticamente. Os dados deste trabalho demonstram que XSM apresenta potencial como composto antioxidante, antiproliferativo e anticoagulante. Estudos futuros de caracteriza??o dessas atividades do XSM contribuir?o para
aumentar o conhecimento sobre esta mol?cula extra?da de milho e permitir?o a sua utiliza??o em alimentos funcionais, produtos farmac?uticos e ind?strias qu?micas.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufrn.br:123456789/12555 |
| Date | 25 February 2010 |
| Creators | Silveira, Raniere Fagundes de Melo |
| Contributors | CPF:76111830449, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4799567J8&dataRevisao=null, Santos, Everaldo Silvino dos, CPF:87510383404, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4799564Y2, Silva, Ana Maria da, CPF:05710606847, SILVA, Ana Maria da, Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira |
| Publisher | Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Programa de P?s-Gradua??o em Bioqu?mica, UFRN, BR, Bioqu?mica; Biologia Molecular |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRN, instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte, instacron:UFRN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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