Espécies de Croton são fonte abundante de metabólitos secundários, com ampla diversidade de atividades farmacológicas, muitas delas conhecidas e utilizadas popularmente. O presente projeto teve como objetivos ampliar o conhecimento sobre a química do gênero pela da prospecção de flavonoides e componentes de óleos voláteis das especies C. dichrous, C. erythroxyloides, C. myrianthus e C. splendidus, além de realizar um estudo antiproliferativo, gerando conhecimento potencial para a ampliação do emprego do gênero para a medicina de compostos naturais. Como principais compostos identificados destacam-se 1,8 cineol, α-bisabolol, ledol e linanol, nos óleos voláteis; os flavonoides tilirosídeo, rutina e vitexina e o triperpeno lupeol. Atividades antiproliferativas contra as linhagens U251 glioma, MCF-7 mama, H460 pulmão, K562 leucemia, PC-3 próstata e OVCAR-3 ovário foram observadas, com destaque para o extrato foliar de C. erythroxyloides, que teve atividade potente contra as duas últimas linhagens. O presente trabalho colaborou para a melhor elucidação da química e atividades biológicas de espécies ainda não estudadas de Croton, gênero com enorme potencial de utilização medicinal e de grande ocorrência no país. / Croton species are a great source of secondary metabolites, with a wide variety of pharmacological activities, many of these known and popularly used. This project aimed to increase knowledge about the chemistry of the genre through the exploration of flavonoids and essential oil components of the species C. dichrous, C. erythroxyloides, C. myrianthus and C. splendidus, and by antiproliferative tests, generating potential knowledge for extending the use of gender in medicine of natural compounds. The main identified compounds were 1,8 cineol, α-bisabolol, ledol and linanool present at the essential oil, the flavonoids tiliroside, rutin and vitexin and the triterpenoid lupeol. Antiproliferative activity against U251 glioma, MCF-7 mammary, H460 lung, K562 leukemia, PC-3 prostate e OVCAR-3 ovary cell lines were found, and the leaf extract of C. erythroxyloides achieved potent activity against the last two cell lines. This work contributed for the elucidation of chemistry and biological activities of unstudied species of Croton, a genre with great potential for medicinal use and large occurrence in Brazil.

Submitted by Natalie Mendes (nataliermendes@gmail.com) on 2015-07-28T23:56:29Z No. of bitstreams: 1 Disserta??o_?ngara Keisle S?o Paulo Barretto Miranda.pdf: 984548 bytes, checksum: 4e0290fe54977157fb35593ccdb7ef99 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-28T23:56:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disserta??o_?ngara Keisle S?o Paulo Barretto Miranda.pdf: 984548 bytes, checksum: 4e0290fe54977157fb35593ccdb7ef99 (MD5) Previous issue date: 2014-03-25 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado da Bahia - FAPEB / Bromelain is an enzyme complex with great therapeutic importance attributed both to it?s proteolytic activity, as the non-proteolytic components in the extract. Thus, the enzyme was extracted from different parts of Ananas comosus var comosus, from two pineapple with different codes: BGA 771 and BGA 772. The proteolytic and specific activities of bromelain from each part (stem, crown, peel, pulp and leaves) were investigated as well as their kinetic characteristics by measuring the optimum temperature and the optimum pH, and finally was studied it?s effect in vitro on murine melanoma B16F10 cells. In BGA 771, the highest proteolytic activity was found in the stem (81.10 mg/mL/min), while the highest specific activity was found in the pulp and peel (1983.44 and 1822.33 UA/mg of bromelain, respectively). In general, the optimum temperature varied between of 50 to 80 ?C and pH between 6 and 8. Bromelain all parts were effective more than 50% in inhibiting the melanoma B16F10 cells proliferation after 48 hours. The most significant inhibition was find on crown bromelain with 72.86%, and a time-dependent effect was observed on crown bromelain. At BGA 772 the higher activity was find in the pulp (35.58 mg/mL/min and 1446.60 UA/mg bromelain). The optimum temperature in the extracts ranged between 40 and 90 ?C, while the pH 6 was the best for all parties, while the leaf bromelain had two great points: 6 and 8. Only the bromelain peel was able to inhibit the melanoma B16F10 proliferation of, being 66.37% after 48 hours of contact, and a dose-dependent activity was observed. / A bromelina ? um complexo enzim?tico de grande import?ncia terap?utica, atribu?da tanto ? sua atividade proteol?tica, como aos componentes n?o proteol?ticos contidos no extrato. Dessa forma, a enzima foi extra?da de diferentes partes de Ananas comosus var comosus, a partir de dois abacaxizeiros com identifica??es distintas: BGA 771 e BGA 772. Foram investigadas as atividades proteol?tica e espec?fica da bromelina de cada parte (caule, coroa, casca, polpa e folha), bem como suas caracter?sticas cin?ticas atrav?s da medida da temperatura e do pH ?timos, investigando-se, por fim, o seu efeito in vitro sobre c?lulas tumorais de melanoma murino B16F10. No BGA 771, a maior atividade proteol?tica foi encontrada no caule (81,10 ?g/mL/min), enquanto a maior atividade espec?fica foi encontrada na polpa e na casca (1983,44 e 1822,33 UA/mg de bromelina, respectivamente). De um modo geral, a temperatura ?tima variou entre as partes de 50 a 80 ?C e o pH ?timo entre 6 e 8. A bromelina de todas as partes foi eficaz em inibir a prolifera??o das c?lulas de melanoma B16F10 ap?s 48 horas em mais de 50%, sendo a da coroa a mais significativa, com 72,86% de inibi??o, tendo sido observada uma atividade tempo-dependente. No BGA 772, as maiores atividade foram encontradas na polpa (35,58 ?g/mL/min e 1446,60 UA/mg de bromelina). A temperatura ?tima nos extratos variou entre 40 e 90?C, enquanto o pH 6 foi o melhor para todas as partes, exceto para a folha que teve dois pontos ?timos: 6 e 8. Somente a bromelina da casca foi capaz de inibir a prolifera??o do melanoma B16F10, sendo de 66,37% ap?s 48 horas de contato, tendo sido observada uma atividade dose-dependente.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-05-31T00:26:34Z No. of bitstreams: 1 RafaelBarrosGomesDaCamara_TESE.pdf: 5185586 bytes, checksum: ac9f52b2d0105b2f8e729ae0d148ebaa (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-06-02T23:03:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RafaelBarrosGomesDaCamara_TESE.pdf: 5185586 bytes, checksum: ac9f52b2d0105b2f8e729ae0d148ebaa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T23:03:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RafaelBarrosGomesDaCamara_TESE.pdf: 5185586 bytes, checksum: ac9f52b2d0105b2f8e729ae0d148ebaa (MD5) Previous issue date: 2015-08-20 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O presente estudo teve como objetivo extrair, caracterizar e realizar uma an?lise prospectiva de atividades farmacol?gicas de polissacar?deos sulfatados da macroalga verde Caulerpa prolifera. Sete fra??es (CP-0.3/CP-0.5/CP-0.7/CP-0.9/CP-1.1/CP-1.5/CP-2.0) foram obtidas de C. prolifera por prote?lise alcalina seguida de precipita??o sequencial em acetona. As an?lises f?sico-qu?micas indicaram que C. prolifera sintetiza diferentes popula??es de heteropolissacar?deos sulfatados. Na an?lise da atividade anticoagulante, todas as fra??es, exceto CP-0.3, apresentaram influ?ncia sobre a via intr?nseca da coagula??o. Todas as fra??es apresentaram atividade antioxidante em 6 ensaios diferentes, sendo mais pronunciadas no teste de sequestro de per?xido de hidrog?nio, com destaque para CP-0.3, CP-0.7 e CP-0.9 (quando se obteve at? 61% de sequestro), no teste de quela??o f?rrica (com destaque para CP-0.9, com 56% de quela??o) e no teste de quela??o c?prica (com destaque para CP-2.0, com quela??o de 78%). Com rela??o a a??o imunomoduladora, a presen?a de CP-0.3, CP-0.7 e CP-0.9 promoveu aumento da produ??o de ?xido n?trico (ON) em macr?fagos em at? 48, 142 e 163 vezes, respectivamente. De maneira oposta, a s?ntese de ON caiu em 73% quando macr?fagos ativados por LPS foram incubados concomitantemente com CP-2. A atividade anti-adipog?nica das fra??es tamb?m foi avaliada e o destaque ficou com CP-1.5, na presen?a desta fra??o (0,2 mg/mL) a diferencia??o de pr?-adip?citos (3T3-L1) em adip?citos foi reduzida em 60%. Vale salientar, que a viabilidade das c?lulas 3T3-L1 n?o foi afetada pela presen?a de CP-1.5. O que n?o ocorreu com c?lulas de c?ncer cervical humano (HeLa) e de adenocarcinoma renal humano (786-0), j? que a viabilidade dessas c?lulas caiu quando elas foram expostas as fra??es, o destaque foi para a redu??o da viabilidade em torno de 55% quando as c?lulas HeLa foram incubadas com CP-0.3, CP-0.5 e CP-0.9. J? com 786-0, o melhor resultado encontrado foi com o uso da fra??o CP-1.5, quando se obteve uma redu??o de ~75% da viabilidade celular. N?o se identificou atividade leishmanicida ou microbicida contra a Klebsiella pneumoniae Carbapenemase (KPC) com ao se testar as fra??es contra estes organismos. No entanto, a prolifera??o de Staphylococcus epidermidis foi diminu?da em 30% na presen?a de CP-1.5. Outro resultado relevante, foi a observa??o de que a forma??o de cristais de oxalato c?lcio na presen?a das fra??es era alterada. Destaca-se CP-0.3, CP-0.5 e CP-1.1, j? que na presen?a dessas fra??es identificou-se apenas a forma??o de cristais dihidratados e de tamanho m?dio 80% menor do que aquele verificado no grupo controle. Dados oriundos da avalia??o do potencial zeta dos cristais formados na presen?a das fra??es e da avalia??o de imagens de microscopia confocal de cristais formados na presen?a das fra??es marcadas fluorescentemente levaram a hip?tese de que os polissacar?deos presentes nas fra??es interagem com o c?lcio da rede cristalina e isso afeta o crescimento e a morfologia dos cristais formados. Os resultados aqui descritos levam a sugest?o de os principais agentes respons?veis pelas atividades observadas com as fra??es seriam os polissacar?deos sulfatados, portanto passos posteriores de purifica??o desses pol?meros, bem como a investiga??o de seus mecanismos de a??o devem ser investigados. Por fim, os dados aqui obtidos levam a observa??o de que as fra??es ricas em polissacar?deos obtidas da alga C. prolifera apresentam um potencial multiterap?utico por serem anticoagulantes, antioxidantes, imunomoduladores, citot?xicas contra c?lulas tumorais, anti-adipogenicos, antibacterianas e alterarem a forma??o de cristais de oxalato de c?lcio. / This study aimed to extract, characterize and conduct a prospective analysis of pharmacological activities of sulfated polysaccharides from green seaweed Caulerpa prolifera. Seven fractions (CP-0.3/CP-0.5/CP-0.7/CP-0.9/CP-1.1/CP-1.5/CP-2.0) were obtained from C. prolifera by alkaline proteolysis followed by sequential precipitation in acetone. The physicochemical analyzes indicated that C. prolifera synthesizes a homogalactan (CP-0.9) and different populations of sulfated heteropolysaccharides. In the analysis of anticoagulant activity, all fractions except CP-0.3, influenced the intrinsic coagulation pathway. All fractions showed antioxidant activity in six different assays being more pronounced in hydrogen peroxide scavenging assay, especially CP-0.3, CP-0.7 and CP-0.9 (which obtained 61% of hydrogen peroxide scavenging), in ferric chelation assay (especially CP-0.9 with 56% chelation) and cupric chelation assay (especially CP-2.0 with 78% chelation). With respect to immunomodulatory activity, the presence of CP-0.3, CP-0.7 and CP-0.9 showed an immunogenic potential, increasing the production of nitric oxide (NO) by 48, 142 and 163 times, respectively. Conversely, the NO synthesis fell 73% after the activation of macrophages by LPS, incubated concurrently with CP-2.0. The anti-adipogenic activity of the fractions was also evaluated and CP-1.5 was able to reduce the differentiation of pre-adipocytes (3T3-L1) into adipocytes by 60%, without affecting the cell viability. The fractions CP-0.3, CP-0.5 and CP-0.9 reduced the viability of the HeLa cells (human cervical adenocarcinoma) by 55% and CP-1.5 reduced the viability of the 786-0 cells (human renal adenocarcinoma) by 75%. Leishmanicidal activity and microbicide effect against Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae (KPC) have not been identified. However, the viability of Staphylococcus epidermidis was reduced by 23.8% in the presence of CP -1.5. All fractions were able to change the formation of calcium oxalate crystals. CP-0.3, CP-0.5 and CP-1.1 only promoted the formation of COD type crystals with a very small size (1 ?m). Confocal microscopy and zeta potential data of crystals formed in the presence of the samples showed that the polysaccharides present in the fractions must interact with calcium ions present throughout the crystal lattice, affecting the growth and morphology of crystals The results described herein indicate that the fractions rich in polysaccharides obtained from the green seaweed C. prolifera present a multi therapeutic potential, and subsequent purification steps, as well as research on the mechanisms of action by which these polymers act should be investigated.

Espécies de Croton são fonte abundante de metabólitos secundários, com ampla diversidade de atividades farmacológicas, muitas delas conhecidas e utilizadas popularmente. O presente projeto teve como objetivos ampliar o conhecimento sobre a química do gênero pela da prospecção de flavonoides e componentes de óleos voláteis das especies C. dichrous, C. erythroxyloides, C. myrianthus e C. splendidus, além de realizar um estudo antiproliferativo, gerando conhecimento potencial para a ampliação do emprego do gênero para a medicina de compostos naturais. Como principais compostos identificados destacam-se 1,8 cineol, α-bisabolol, ledol e linanol, nos óleos voláteis; os flavonoides tilirosídeo, rutina e vitexina e o triperpeno lupeol. Atividades antiproliferativas contra as linhagens U251 glioma, MCF-7 mama, H460 pulmão, K562 leucemia, PC-3 próstata e OVCAR-3 ovário foram observadas, com destaque para o extrato foliar de C. erythroxyloides, que teve atividade potente contra as duas últimas linhagens. O presente trabalho colaborou para a melhor elucidação da química e atividades biológicas de espécies ainda não estudadas de Croton, gênero com enorme potencial de utilização medicinal e de grande ocorrência no país. / Croton species are a great source of secondary metabolites, with a wide variety of pharmacological activities, many of these known and popularly used. This project aimed to increase knowledge about the chemistry of the genre through the exploration of flavonoids and essential oil components of the species C. dichrous, C. erythroxyloides, C. myrianthus and C. splendidus, and by antiproliferative tests, generating potential knowledge for extending the use of gender in medicine of natural compounds. The main identified compounds were 1,8 cineol, α-bisabolol, ledol and linanool present at the essential oil, the flavonoids tiliroside, rutin and vitexin and the triterpenoid lupeol. Antiproliferative activity against U251 glioma, MCF-7 mammary, H460 lung, K562 leukemia, PC-3 prostate e OVCAR-3 ovary cell lines were found, and the leaf extract of C. erythroxyloides achieved potent activity against the last two cell lines. This work contributed for the elucidation of chemistry and biological activities of unstudied species of Croton, a genre with great potential for medicinal use and large occurrence in Brazil.

Submitted by Haroudo Xavier Filho (haroudo.xavierfo@ufpe.br) on 2016-04-05T17:59:08Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_SINARA MONICA VITALINO DE ALMEIDA_FINAL UNIFICADO BIBLIOTECA.pdf: 9803056 bytes, checksum: 68bd08234fdac2b45bf400b3ebd62957 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-05T17:59:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_SINARA MONICA VITALINO DE ALMEIDA_FINAL UNIFICADO BIBLIOTECA.pdf: 9803056 bytes, checksum: 68bd08234fdac2b45bf400b3ebd62957 (MD5) Previous issue date: 2015-07-23 / CAPES, CNPq / O câncer é, sem sombra de dúvidas, a doença mais temida pela população, em razão da sua alta incidência e elevadas taxas de mortalidade para determinados tipos da doença. Nas últimas décadas, os pesquisadores têm obtido avanços significativos no entendimento da patogênese, nas características e nas terapias do câncer. A quimioterapia é frequentemente o tratamento escolhido para muitos tipos de câncer e por este motivo a pesquisa por novos agentes quimioterápicos constitui um dos alicerces na luta contra o câncer. Os intercaladores orgânicos são compostos poliaromáticos que podem se inserir entre pares de bases adjacentes da dupla fita de DNA e inibir a síntese de ácido nucléico in vivo, essa propriedade é comumente observada em drogas anticâncer usadas na terapia clínica. Por isto, a descoberta de novos intercaladores do DNA tem sido considerada uma abordagem prática e um número expressivo de moléculas tem sido avaliado quanto às suas propriedades intercaladoras. Neste trabalho foram sintetizados novos agentes anticâncer tendo como molécula de partida o anel acridina. Foram sintetizados e caracterizados oito novos derivados da série 2-acridin-9-il-metileno-N-fenil-hidrazina-carbotioamida (3a-3h) com diferentes substituintes na porção fenil (não substituídos ou com substituintes elétrondoadores ou elétron-retiradores) e dois novos derivados da série 3-(acridin-9-il)-n-benzilideno-2- cianoacrilohidrazidas (AMTAC-01 e AMTAC-02). Os compostos foram avaliados quanto às suas propriedades intercaladoras ao ctDNA in vitro e atividades antiproliferativas contra linhagens de células tumorais de mama (MCF-7), ovário resistente a múltiplas drogas (NCI-ADR/RES), pulmão (NCI-H460), próstata (PC-3), cólon (HT29), ovário (OVCAR-03), rim (786-0), leucemia (K562) e glioma (U251). Foram investigadas alterações morfológicas induzidas por tratamento de células MCF-7 com o composto mais ativo da série 2-acridin-9-il-metileno-N-fenil-hidrazinacarbotioamida (3a) através de microscopias eletrônicas de transmissão, varredura e da análise de exposição de fosfatidilserina e fragmentação de DNA. Além disso, a atividade de inibição da topoisomerase IIa dos derivados 3-(acridin-9-il)-n-benzilideno-2-cianoacrilohidrazidas foi verificada e a ligação com ctDNA foi estudada por meio de espectroscopia de absorção em fluorescência. Todos os derivados produzidos das duas séries apresentaram interação com o DNA. Após o contato com DNA foram verificados efeitos hipercrômicos e hipocrômicos, bem como mudanças para o vermelho ou azul nos espectros de absorbância. Essas modificações são preditivas de formação de complexo entre DNA e derivado. As constantes de ligação calculadas estão entre 1.74 x 104 e 1.0 x 106 M-1 para os derivados 3a-3h e entre 2.3-2.5 x 106 M-1 para os AMTAC’s. Estes valores indicam alta afinidade pelos pares de base do DNA. Da série 2-acridin- 9-il-metileno-N-fenil-hidrazina-carbotioamida o composto mais eficiente para ligação in vitro com o DNA foi o derivado cloro-substituído (3f), enquanto o composto mais ativo no teste antiproliferativo foi o derivado não substituído na porção tiossemicarbazona (3a). Os valores de concentração letal para 50 % do número inicial de células para o derivado 3a contra as linhagens NCI-H460, MCF-7, U251, NCI-ADR/RES, HT-29 e PC-3 foram 43.41, 60.26, 68.93, 70.2, 70.24 e 72.95 μM, respectivamente. As análises por microscopias eletrônicas de varredura e transmissão de células MCF-7 tratadas com 60 μM do derivado 3a demonstraram alterações ultramorfológicas indicativas de autofagia: vacúolos com dupla membrana. Além disso, os derivados AMTAC-01 e AMTAC-02 foram mais ativos contra as linhagens tumorais de próstata e melanoma, respectivamente. Ambos os derivados apresentaram atividade inibidora topoisomerase IIa na concentração de 50 μM. Os resultados indicam que uma ligação eficiente ao DNA é uma condição necessária para atividade antitumoral e que os novos derivados híbridos de acridina apresentaram promissoras atividades antiproliferativa, ligadora do DNA e inibição da topoisomerase. / People fear cancer more than any other serious illness which can be explained by the high incidence and mortality rates for some types of cancer. In the last decades, significant advances were obtained regarding cancer pathogenesis, features and therapies. Chemotherapy is often the treatment of choice for many types of cancer and the search for new chemotherapeutic agents still plays a major role in the fight against cancer. Organic intercalators are poliaromatic compounds that are able to insert into DNA double strands and inhibit in vivo acid nucleic synthesis. This characteristic is, in general, observed in anticancer drugs, hence the discovery and development of new DNA intercalators has been considered a practical approach and a number of intercalators have been recently reported. In this work, new anticancer agents were synthetized based on acridine nucleus for structural modification using substituted thiosemicarbazide moieties. It were synthetized eight new (Z)-2-(acridin-9- ylmethylene)-N-phenylhydrazinecarbothioamide derivatives (3a-3h) presenting different substituents on phenyl ring (non-substituted and electron-donating or -withdrawing) and two new 3-(acridin-9-yl)-N-benzylidene-2-cyanoacrilohydrazide derivatives (AMTAC-01 and AMTAC-02). In vitro ctDNA interaction was assayed and antiproliferative activity was evaluated against cancer cell lines of glioma (U251), breast (MCF-7), ovary expressing phenotype multiple drugs resistance (NCI-ADR/RES), kidney (786–0), lung (NCI-H460), prostate, (PC-3), ovary (OVCAR-03), colon adenocarcinoma (HT-29) and chronic myeloid leukemia (K-562). It was investigated ultramorphological changes induced by 3a treatment on MCF-7 cells by transmission and scanning electron microscopies, besides the evaluation of phosphatidylserine externalization and DNA fragmentation. Topoisomerase IIa inhibitory activity of AMTAC’s was evaluated. ctDNA binding properties were performed with calf thymus DNA (ctDNA) by electronic absorption and fluorescence spectroscopies. Both hyperchromic and hypochromic effects, as well as red or blue shifts were demonstrated by addition of ctDNA to the derivatives. These spectroscopic alterations indicated formation of derivative-DNA complex. The calculated binding constants ranged from 1.74 x 104 to 1.0 x 106 M-1 for 3a-3h derivatives and 2.3-2.5 x 106 M-1 for AMTAC’s compounds. These values mean that the new acridine derivatives have high affinity to ctDNA. From (Z)-2-(acridin-9- ylmethylene)-N-phenylhydrazinecarbothioamide serie, the most efficient compound in in vitro binding to ctDNA was 3f, while the most active compound in antiproliferative assay was 3a. Regarding lethal concentration (LC50), compound 3a was lethal to NCI-H460, MCF-7, U251, NCI-ADR/RES, HT-29 and PC-3 cells on the respective concentrations: 43.41, 60.26, 68.93, 70.2, 70.24 and 72.95 μM. Scanning and transmission electron microscopies revealed that treatment with 60 μM of 3a induces morphological changes in MCF-7 cells indicating autophagy, such as vacuole with double membrane. On the other hand, antiproliferative assay demonstrated that AMTAC-01 and AMTAC-02 were most active against prostate and melanoma tumor cell lines, respectively. Both derivatives displayed potent topoisomerase IIα inhibitory activity at 50 μM. Taking together, these results indicates that an efficient binding is a necessary condition for antiproliferative activity. The new acridine hybrid derivatives showed promising DNA binding, antiproliferative against cancer cells and inhibitory topoisomerase activity.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Species of the genus Psychotria L. are used in Brazilian folk medicine as tea, however, their indiscriminate and uncontrolled can cause more harm than good to health. It is important to understand these plants, from their cellular levels to the action on living organisms, and for monitoring toxic substances allelopathic bioassays are widely used with plant species as the target organisms. This study aimed to evaluate the genotoxic, antiproliferative and antimutagenic potential of infusions of Psychotria brachypoda (Muell. Arg.) Briton and Psychotria birotula Smith & Downs on the cell cycle of Allium cepa L., in addition to analyzing the antiproliferative and genotoxic potential on the germination on seeds and cell cycle of Eruca sativa Mill. For this, dried leaves were used to prepare extracts in two concentrations for each species: 5g.L-1 and 20g.L-1, using distilled water as a negative control and glyphosate 3% as a positive control. For the study, antiproliferative on the germination (allelopathic potential) variables were analyzed: total number of germinated seeds, seedling root length, index of germination rate, and germination percentage. To evaluate the genotoxic, antiproliferative and antimutagenic potential, both for the test with A. cepa and with E. sativa were analyzed mitotic index and the number of chromosomal alterations. The extracts of P. brachypoda have no genotoxic potential, though the extracts of P. birotula possess genotoxic potential on the A. cepa cell cycle and the extracts of P. brachypoda and P. birotula showed no antimutagenic potential, no entanto, apresentaram genotoxic, and antiproliferative potential on the germination and cell cycle E. sativa. / Espécies do gênero Psychotria L. são utilizadas na medicina popular brasileira, na forma de chá, porém, o uso indiscriminado e sem controle pode causar mais danos à saúde do que benefícios, sendo importante o conhecimento dessas plantas, desde os níveis celulares bem como a ação sobre os organismos vivos. Para monitorar substâncias tóxicas e alelopáticas são muito utilizados ensaios biológicos com espécies vegetais como organismos alvo. O presente trabalho objetivou avaliar o potencial antiproliferativo, genotóxico e antimutagênico de extratos das folhas de Psychotria brachypoda (Müll. Arg.) Briton e Psychotria birotula Smith & Downs sobre o ciclo celular de Allium cepa L., além do potencial antiproliferativo e genotóxico sobre a germinação de sementes e ciclo celular de Eruca sativa Mill. Para isto, foram utilizadas folhas secas para preparar extratos em duas concentrações para cada espécie: 5g.L-1 e 20g.L-1, sendo utilizada água destilada como controle negativo e o glifosato 3% como controle positivo. Para a análise do potencial antiproliferativo sobre a germinação (potencial alelopático) analisou-se as variáveis: número total de sementes germinadas, comprimento das raízes das plântulas, índice da velocidade de germinação e porcentagem de germinação. Para avaliação do potencial genotóxico, antiproliferativo e antimutagênico sobre o ciclo celular, tanto para o teste com A. cepa quanto com E. sativa foram analisados o índice mitótico e o número de alterações cromossômicas. Os extratos de P. brachypoda não apresentaram potencial genotóxico, já os extratos de P. birotula foram genotóxicos sobre o ciclo celular de A. cepa. Os extratos de P. brachypoda e P. birotula não apresentaram potencial antimutagênico, no entanto, demonstraram potencial antiproliferativo genotóxico sobre germinação e ciclo celular de E. sativa.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Brazil has got a great economic potential with regard to native medicinal species. The conservation of the plant genetic diversity available is, therefore, of paramount importance. However, the greater part of these species has not been sufficiently studied, mainly in terms of their cytotoxic and mutagenic potential. Among the Brazilian native medicinal plants that have been little studied is Peltodon longipes Kunth ex Benth. a plant popularly known in Brazil as hortelã-do-campo , which is used as stimulant, emmenagogue, antiseptic and anti-inflammatory. To encourage the use of native medicinal resources of a country are necessary studies of characterization of germplasm of species and also provide that they are included in a breeding program, while optimizing the use in folk medicine through cytotoxicity and genotoxicity studies. Thus, the purpose of this study was to estimate the pollen viability of P. longipes, to evaluate the genotoxicity of the aqueous extracts of this species as well to determine phenolic compounds these extracts using chromatographic analysis. The pollen viability of 15 P. longipes accessions collected in 5 municipalities in the state of Rio Grande do Sul, Brazil, was evaluated by using 3 staining methods: 2% acetic orcein, 2% acetic carmine, and Alexander s stain. The genotoxicity of the aqueous extracts of two accessions, i.e., one collected in Santa Maria and the other one in Tupanciretã, was determined by the Allium cepa L. test, whereas the analysis of the phenolic compounds was carried out by high-performance liquid chromatography. Of the 15 accessions of P. longipes, 13 showed high pollen viability, with values above 75% and the methods using 2% acetic carmine and Alexander reactive were more efficient for technical in species. All extracts presented antiproliferative potential, even though this effect was significantly higher in the extracts of the accession collected in Tupanciretã. This accession also showed a higher amount of rosmarinic acid and kaempferol, which may be linked to the effects observed in these extracts. Only the extracts of the accession collected in Santa Maria showed genotoxic potential. / O Brasil possui um imenso potencial econômico relacionado a espécies medicinais nativas, por isso é de extrema importância a conservação da diversidade genética vegetal disponível. No entanto, a grande maioria dessas espécies não foi suficientemente estudada no que se refere ao seu potencial citotóxico e mutagênico. Dentre as plantas medicinais nativas do Brasil, ainda pouco estudadas, está Peltodon longipes Kunth ex Benth. (hortelã-do-campo) utilizada como estimulante, emenagoga, antiséptica e antinflamatória. Para potencializar a utilização dos recursos medicinais nativos de um país são indispensáveis estudos de caracterização do germoplasma das espécies e também propiciar que as mesmas sejam incluídas em um programa de melhoramento genético, além de otimizar o uso na medicina popular através de estudos de citotoxicidade e genotoxicidade. Dentro desse contexto, o objetivo deste estudo foi estimar a viabilidade polínica de P. longipes, avaliar a genotoxicidade dos extratos aquosos da espécie, bem como determinar os compostos fenólicos desses extratos por meio de análise cromatográfica. Para tanto, a viabilidade polínica de 15 acessos de P. longipes, coletados em cinco municípios do Rio Grande do Sul, Brasil, foi estimada a partir de três métodos colorímetros: orceína acética 2%, carmim acético 2% e reativo de Alexander. A genotoxicidade dos extratos aquosos de dois acessos, um de Santa Maria e outro de Tupanciretã (RS), foi determinada através do teste de Allium cepa L., enquanto a análise dos compostos fenólicos foi realizada por meio de cromatográfica líquida de alta eficiência. Dos 15 acessos de P. longipes, 13 apresentaram alta viabilidade polínica, com valores acima de 75% e os métodos utilizando carmim acético 2% e reativo de Alexander foram mais eficientes para a técnica na espécie. Todos os extratos de P. longipes demonstraram potencial antiproliferativo, embora o efeito tenha sido significativamente maior nos extratos do acesso de Tupanciretã. Esse acesso também apresentou maior quantidade de ácido rosmarínico e canferol, o que pode estar relacionado com os efeitos observados nesses extratos. Somente os extratos do acesso de Santa Maria demonstraram potencial genotóxico.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BarbaraC_DISSERT.pdf: 9281822 bytes, checksum: 18141307d7e5a4c2b984a98c9fdf7225 (MD5) Previous issue date: 2014-03-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Spondias mombin is a fruitful species dispersed in tropical regions of America, Africa and Asia. In Brazil, the species can be found mainly in the northern and northeastern regions. Scarce chemical and pharmacological studies have been reported for S. mombin and until this moment studies about chemical markers were not developed. In this context, the aims of this study were to characterize the chemical markers from S. mombin leaves and evaluate their anti-inflammatory, antioxidant and antiproliferative potentials. The chemical profile of the hydroethanolic extract from S. mombin leaves analyzed by HPLC-DAD, through a validated method, allowed the identification and quantification of ellagic acid and chlorogenic acid. This extract showed anti-inflammatory potential in acute peritonitis model induced by carrageenan. The hydroethanolic extract from S. mombin leaves was subjected to a liquid-liquid partition with the solvents: n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate and n-butanol. Regarding the anti-inflammatory potential of the fractions obtained they were active; however, ethyl acetate fraction at 200 mg/kg showed highlighted results. The compounds ellagic acid and chlorogenic acid also inhibited the leukocyte migration to the site of inflammation at 2.5, 5 and 10 mg/kg. The hydroethanolic extract, fractions and the chemical markers showed significant antioxidant potential when evaluated in different assays: DPPH Free-Radical Scavenging, Superoxide Radical Scavenging, Hydroxyl Radicals Scavenging and Reducing Power. Taken together our results showed that hydroethanolic extract of S. mombin leaves has ellagic acid and chlorogenic acid as bioactive markers and it demonstrated antiinflammatory and antioxidant properties besides no cytotoxicity against 3T3 cells. It enables us to suggest S. mombin as an important species to develop herbal drugs / S. mombin ? uma esp?cie frut?fera que se encontra dispersa em regi?es tropicais da Am?rica, ?frica e ?sia. No Brasil a esp?cie pode ser encontrada em v?rios estados tendo maior preval?ncia nas regi?es norte e nordeste do pa?s. Foram descritos poucos estudos qu?micos e farmacol?gicos para a esp?cie S. mombin e at? o momento n?o foram analisados os marcadores qu?micos da esp?cie. Diante desse contexto, este trabalho buscou caracterizar os marcadores qu?micos para as folhas e frutos de S. mombin e avaliar a atividade anti-inflamat?ria, antioxidante, antiproliferativa e antimicrobiana. O extrato das folhas (EHfl) secas e dos frutos (EHfr) in natura foram preparados por macera??o em meio hidroalco?lico. Para a caracteriza??o dos compostos ativos da esp?cie S. mombin, os extratos hidroetan?licos foram submetidos ? parti??o l?quido-l?quido com solventes de polaridade crescente n- hexano (Hex), diclorometano (Dcm), acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (ButOH). A avalia??o do perfil qu?mico das folhas por CCD e CLAE mostrou que a esp?cie ? rica em compostos fen?licos. Na an?lise por CCD foi observada a presen?a de quercetina, ?cido el?gico e canferol. A an?lise por CLAE permitiu a identifica??o e a quantifica??o de ?cido el?gico e ?cido clorog?nico no EHfl. A metodologia anal?tica foi validada segundo os par?metros estabelecidos pela RDC 899/ 2003 e pela ICH. Na an?lise qualitativa por CLAE do EHfr foram identificados o ?cido clorog?nico e a rutina. Os resultados da avalia??o da atividade antiinflamat?ria mostraram que o EHfl das folhas, nas doses de 100, 200, 300 e 500 mg/kg, apresentou efeito de inibi??o da migra??o de leuc?citos no modelo de peritonite aguda induzida por carragenina. Todas as fra??es foram ativas, no entanto, a fra??o AcOEt na dose de 200 mg/kg apresentou melhor atividade em rela??o ?s outras fra??es testadas.O EHfl e a fra??o AcOEt apresentaram importante perfil de inibi??o bacteriana no teste de difus?o em disco, principalmente frente ? bact?ria S. flexneri. O EHfl e as fra??es (Dcm, AcOEt, ButOH) das folhas assim como o EHfr apresentaram importante atividade antioxidante nos ensaios de DPPH, sequestro de radicais super?xidos, sequestro de radicais hidroxilas e poder redutor. No que se refere ? avalia??o da citotoxicidade do EHfl, das respectivas fra??es e do EHfr frente ? cultura de c?lulas de fibroblastos 3T3 n?o foi observada citotoxidade significativa. Os resultados mostraram que o EHfl possui atividade antiinflamat?ria, antioxidante e antimicrobiana. Verificou-se que o ?cido clorog?nico e o ?cido el?gico podem ser usados como marcadores biativos das folhas de S. mombin. O EHfr apresentou atividade antioxidante e foi observada a presen?a de ?cido clorog?nico e rutina. Al?m disso, n?o foi observada atividade citot?xica para o EHfr e para o EHfl

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RaniereFMS.pdf: 3115798 bytes, checksum: 664aaedacd292e8b8c2d08a15e193378 (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The corn cob is an agricultural by-product still little used, this in part due to the low knowledge of the biotechnological potential of their molecules. Xylan from corn cobs (XSM) is a polysaccharide present in greater quantity in the structure of plant and its biotechnology potential is little known. This study aimed to the extraction, chemical characterization and evaluation of biological activities of xylan from corn cobs. To this end, corncobs were cleaned, cut, dried and crushed, resulting in flour. This was subjected to a methodology that combines the use of alkaline conditions with waves of ultrasound. After methanol precipitation, centrifugation and drying was obtained a yield of 40% (g/g flour). Chemical analysis indicated a high percentage of polysaccharides in the sample (60%) and low contamination by protein (0.4%) and phenolic compounds (> 0.01%). Analysis of monosaccharide composition indicated the presence of xylose:glucose:arabinose:galactose:mannose:glucuronic acid in a molar ratio 50:20:15:10:2.5:2.5. The presence of xylan in the sample was confirmed by nuclear magnetic resonance (?H and ??C) and infrared spectroscopy (IR). Tests were conducted to evaluate the antioxidant potential of XSM. This showed a total antioxidant capacity of 48.45 EAA/g sample. However, did not show scavenging activity of superoxide and hydroxyl radical and also reducing power. But, showing a high capacity chelating iron ions with 70% with about 2 mg/mL. The ability to XSM to influence cell proliferation in culture was also evaluated. This polymer did not influence the proliferation of normal fibroblast cells (3T3), however, decreased the rate of proliferation of tumor cells (HeLa) in a dose-dependent, reaching an inhibition of about 50% with a concentration around 2 mg/mL. Analyzing proteins related to cell death, by immunoblotting, XSM increases the amount of Bax, Bcl-2 decrease, increase cytochrome c and AIF, and reduce pro-caspase-3, indicating the induction of cell death induced apoptosis dependent and independent of caspase. XSM did not show anticoagulant activity in the PT test. However, the test of activated partial thromboplastin time (aPTT), XSM increased clotting time at about 5 times with 600 ?g of sample compared with the negative control. The presence of sulfate on the XSM was discarded by agarose gel electrophoresis and IR. After carboxyl-reduction of XSM the anticoagulant activity decreased dramatically. The data of this study demonstrate that XSM has potential as antioxidant, antiproliferative and anticoagulant compound. Future studies to characterize these activities of XSM will help to increase knowledge about this molecule extracted from corn and allow their use in functional foods, pharmaceuticals and chemical industries. / O sabugo de milho ? um subproduto agr?cola ainda pouco utilizado, isto se deve em parte ao baixo conhecimento do potencial biotecnol?gico de suas biomol?culas. Xilana de sabugo de milho (XSM) ? um polissacar?deo presente em maior quantidade na estrutura do vegetal e seu potencial biotecnol?gico ? pouco conhecido. Este trabalho teve como objetivo a extra??o, caracteriza??o qu?mica e avalia??o de atividades biol?gicas de XSM. Sabugos de milho foram limpos, cortados, desidratados e triturados, dando origem a uma farinha. Esta foi submetida a uma metodologia que combina o uso de meio alcalino com ondas de ultra-som. Ap?s precipita??o metan?lica, centrifuga??o e secagem obteve-se um rendimento de 40% (g/g de farinha). An?lises qu?micas indicaram um alto percentual de polissacar?deos na amostra (60%) e baixa contamina??o por prote?nas (0.4%) e compostos fen?licos (>0.01%). An?lises da composi??o monossacar?dica por cromatografia em papel e por cromatografia l?quida de alta performance (CLAE) indicaram a presen?a de xilose:glicose:arabinose:galactose:manose:?cido glucur?nico em uma propor??o molar de 50:20:15:10:2,5:2,5. A presen?a de xilana na amostra foi confirmada por resson?ncia magn?tica nuclear (13C e 1H) e por espectroscopia de infravermelho (IR). Testes foram realizados para avalia??o do potencial antioxidante de XSM. Esta mostrou uma capacidade antioxidante total de 48.45 EAA/g de amostra. Contudo, a mesma n?o mostrou atividade sequestradora de super?xido, radical hidroxila bem como poder redutor. Em contra partida, apresentou 70% de atividade quelante de ?ons de ferro na concentra??o de 2 mg/mL. A capacidade de XSM em influenciar a prolifera??o celular em cultura tamb?m foi avaliada. Este polissacar?deo n?o influenciou a prolifera??o de c?lulas fibrobl?sticas normais (3T3), entretanto, diminuiu a taxa de prolifera??o de c?lulas tumorais (HeLa) de maneira dose-dependente, chegando a uma inibi??o de aproximadamente 50% com concentra??o em torno de 2 mg/mL. Analisando prote?nas relacionadas ? morte celular, atrav?s de immunoblotting, XSM aumenta a quantidade de Bax, citocromo c e AIF e diminui Bcl-2 e procaspase- 3, indicando a indu??o de morte celular por apoptose dependente e independente de caspase. XSM n?o apresentou atividade anticoagulante pelo teste de PT. Todavia, no teste de tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT), XSM aumentou o tempo de coagula??o em cerca de 5 vezes utilizando 600 ?g de amostra, quando comparadas com o controle negativo. A presen?a de sulfato ligado a XSM foi descartada por eletroforese em gel de agarose e por IR. Ap?s carboxirredu??o de XSM a atividade anticoagulante diminuiu drasticamente. Os dados deste trabalho demonstram que XSM apresenta potencial como composto antioxidante, antiproliferativo e anticoagulante. Estudos futuros de caracteriza??o dessas atividades do XSM contribuir?o para aumentar o conhecimento sobre esta mol?cula extra?da de milho e permitir?o a sua utiliza??o em alimentos funcionais, produtos farmac?uticos e ind?strias qu?micas.