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Efeito imunomodulador de diferentes extratos de Angiostrongylus cantonensis no desenvolvimento de resposta pulmonar al?rgica em um modelo murino

Pascoal, Vanessa Fey 31 March 2017 (has links)
Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T18:01:01Z No. of bitstreams: 1 DIS_VANESSA_FEY_PASCOAL_PARCIAL.pdf: 876481 bytes, checksum: 0b2728fa712aaf8f7a7a02a0d8066035 (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T18:01:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DIS_VANESSA_FEY_PASCOAL_PARCIAL.pdf: 876481 bytes, checksum: 0b2728fa712aaf8f7a7a02a0d8066035 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-30T18:01:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_VANESSA_FEY_PASCOAL_PARCIAL.pdf: 876481 bytes, checksum: 0b2728fa712aaf8f7a7a02a0d8066035 (MD5) Previous issue date: 2017-03-31 / Asthma is a chronic inflammatory disease of the airways, associated with genetic and environmental factors. Exposure to helminths appears to exert a protective effect on some chronic diseases, such as asthma. The objective of this study was to evaluate the immunomodulatory effect of different extracts of Angiostrongylus cantonensis (A. cantonensis) on the development of allergic pulmonary response by ovalbumin (OVA) in mice. The animals were divided into 6 groups: negative control (PBS), positive control (OVA), animals with asthma immunized with total soluble extract of A. cantonensis (Ac/OVA), animals with proteins from the digestive tract (AcD/OVA), animals with proteins from the reproductive tract (AcR /OVA), and animals with proteins from the cuticle (AcC / OVA). At the end of the OVA protocol, the animals were euthanized for blood collection, bronchoalveolar lavage and lung tissue. OVA-specific IgE was analyzed in blood, and cell counts, IL-4, IL-5, IL-10, INF- ? and eotaxin in bronchoalveolar lavage. Histological analysis of the lung was also performed. A significant reduction in the total cell count was observed in the groups that were immunized with the total soluble extract (TE) and with the soluble extract of the systems (SE) of A. cantonensis, compared to the OVA group (p <0.001). We found a significant reduction of eosinophils, macrophages and lymphocytes in the group immunized with TE, as in the SE groups, in relation to the OVA group. However, intraperitoneal immunization with TE and SE did not alter the levels of OVA-specific IgE and cytokines, except for an increase in IL-10 and IFN-? (p <0.01) in the group immunized with TE. In conclusion, the different worm extracts from A. cantonensis, especially TE, when administered early intraperitoneally, result in a modulation of the OVA-induced allergic lung response in mice, with a distinct response of IL-10 and e INF-? in the TE group. / A asma ? uma doen?a inflamat?ria cr?nica das vias a?reas, associada ? fatores gen?ticos e ambientais. A exposi??o a helmintos parece exercer um efeito protetor sobre algumas doen?as cr?nicas, como a asma. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito imunomodulador de diferentes extratos de Angiostrongylus cantonensis (A. cantonensis) no desenvolvimento da resposta pulmonar al?rgica por ovalbumina (OVA) em camundongos. Os animais foram divididos em 6 grupos: controle negativo (PBS), controle positivo (OVA), animais com asma imunizados com extrato total sol?vel de A. cantonensis (Ac/OVA), com prote?nas do aparelho digestivo (AcD/OVA), com prote?nas do aparelho reprodutor (AcR/OVA), e de prote?nas da cut?cula (AcC/OVA). No final do protocolo de OVA, os animais foram eutanasiados para coleta de sangue, lavado broncoalveolar e tecido pulmonar. Foram dosados IgE espec?fica para OVA no sangue, e contagem de c?lulas, IL-4, IL-5, IL-10, INF- ? e eotaxina (no lavado broncoalveolar) e realizada an?lise histol?gica do pulm?o. Foi observada significativa redu??o na contagem total de c?lulas nos grupos que foram imunizados com o extrato total sol?vel (ET) e com o extrato sol?vel dos sistemas (ES) de A. cantonensis, em rela??o ao grupo OVA (p<0,001). Verificamos uma redu??o significativa de eosin?filos, macr?fagos e linf?citos no grupo imunizado com ET, bem como nos grupos com ES, em rela??o ao grupo OVA. No entanto, a imuniza??o por via intraperitoneal com ET e ES n?o promoveu altera??o significativa nos n?veis de IgE espec?fica para OVA e citocinas avaliadas, exceto aumento de IL-10 e IFN- ? (p<0,01) no grupo imunizado com o ET. Concluindo, os diferentes extratos de vermes de A. cantonensis, em especial o ET, quando administrado precocemente por via intraperitoneal, resulta em uma modula??o na resposta pulmonar al?rgica induzida por OVA em camundongos, com uma resposta distinta de IL-10 e INF- ? no grupo ET.
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Extra??o, caracteriza??o e prospec??o de atividades farmacol?gicas de polissacar?deos sulfatados da macroalga verde Caulerpa prolifera

C?mara, Rafael Barros Gomes da 20 August 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-05-31T00:26:34Z No. of bitstreams: 1 RafaelBarrosGomesDaCamara_TESE.pdf: 5185586 bytes, checksum: ac9f52b2d0105b2f8e729ae0d148ebaa (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-06-02T23:03:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RafaelBarrosGomesDaCamara_TESE.pdf: 5185586 bytes, checksum: ac9f52b2d0105b2f8e729ae0d148ebaa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T23:03:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RafaelBarrosGomesDaCamara_TESE.pdf: 5185586 bytes, checksum: ac9f52b2d0105b2f8e729ae0d148ebaa (MD5) Previous issue date: 2015-08-20 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O presente estudo teve como objetivo extrair, caracterizar e realizar uma an?lise prospectiva de atividades farmacol?gicas de polissacar?deos sulfatados da macroalga verde Caulerpa prolifera. Sete fra??es (CP-0.3/CP-0.5/CP-0.7/CP-0.9/CP-1.1/CP-1.5/CP-2.0) foram obtidas de C. prolifera por prote?lise alcalina seguida de precipita??o sequencial em acetona. As an?lises f?sico-qu?micas indicaram que C. prolifera sintetiza diferentes popula??es de heteropolissacar?deos sulfatados. Na an?lise da atividade anticoagulante, todas as fra??es, exceto CP-0.3, apresentaram influ?ncia sobre a via intr?nseca da coagula??o. Todas as fra??es apresentaram atividade antioxidante em 6 ensaios diferentes, sendo mais pronunciadas no teste de sequestro de per?xido de hidrog?nio, com destaque para CP-0.3, CP-0.7 e CP-0.9 (quando se obteve at? 61% de sequestro), no teste de quela??o f?rrica (com destaque para CP-0.9, com 56% de quela??o) e no teste de quela??o c?prica (com destaque para CP-2.0, com quela??o de 78%). Com rela??o a a??o imunomoduladora, a presen?a de CP-0.3, CP-0.7 e CP-0.9 promoveu aumento da produ??o de ?xido n?trico (ON) em macr?fagos em at? 48, 142 e 163 vezes, respectivamente. De maneira oposta, a s?ntese de ON caiu em 73% quando macr?fagos ativados por LPS foram incubados concomitantemente com CP-2. A atividade anti-adipog?nica das fra??es tamb?m foi avaliada e o destaque ficou com CP-1.5, na presen?a desta fra??o (0,2 mg/mL) a diferencia??o de pr?-adip?citos (3T3-L1) em adip?citos foi reduzida em 60%. Vale salientar, que a viabilidade das c?lulas 3T3-L1 n?o foi afetada pela presen?a de CP-1.5. O que n?o ocorreu com c?lulas de c?ncer cervical humano (HeLa) e de adenocarcinoma renal humano (786-0), j? que a viabilidade dessas c?lulas caiu quando elas foram expostas as fra??es, o destaque foi para a redu??o da viabilidade em torno de 55% quando as c?lulas HeLa foram incubadas com CP-0.3, CP-0.5 e CP-0.9. J? com 786-0, o melhor resultado encontrado foi com o uso da fra??o CP-1.5, quando se obteve uma redu??o de ~75% da viabilidade celular. N?o se identificou atividade leishmanicida ou microbicida contra a Klebsiella pneumoniae Carbapenemase (KPC) com ao se testar as fra??es contra estes organismos. No entanto, a prolifera??o de Staphylococcus epidermidis foi diminu?da em 30% na presen?a de CP-1.5. Outro resultado relevante, foi a observa??o de que a forma??o de cristais de oxalato c?lcio na presen?a das fra??es era alterada. Destaca-se CP-0.3, CP-0.5 e CP-1.1, j? que na presen?a dessas fra??es identificou-se apenas a forma??o de cristais dihidratados e de tamanho m?dio 80% menor do que aquele verificado no grupo controle. Dados oriundos da avalia??o do potencial zeta dos cristais formados na presen?a das fra??es e da avalia??o de imagens de microscopia confocal de cristais formados na presen?a das fra??es marcadas fluorescentemente levaram a hip?tese de que os polissacar?deos presentes nas fra??es interagem com o c?lcio da rede cristalina e isso afeta o crescimento e a morfologia dos cristais formados. Os resultados aqui descritos levam a sugest?o de os principais agentes respons?veis pelas atividades observadas com as fra??es seriam os polissacar?deos sulfatados, portanto passos posteriores de purifica??o desses pol?meros, bem como a investiga??o de seus mecanismos de a??o devem ser investigados. Por fim, os dados aqui obtidos levam a observa??o de que as fra??es ricas em polissacar?deos obtidas da alga C. prolifera apresentam um potencial multiterap?utico por serem anticoagulantes, antioxidantes, imunomoduladores, citot?xicas contra c?lulas tumorais, anti-adipogenicos, antibacterianas e alterarem a forma??o de cristais de oxalato de c?lcio. / This study aimed to extract, characterize and conduct a prospective analysis of pharmacological activities of sulfated polysaccharides from green seaweed Caulerpa prolifera. Seven fractions (CP-0.3/CP-0.5/CP-0.7/CP-0.9/CP-1.1/CP-1.5/CP-2.0) were obtained from C. prolifera by alkaline proteolysis followed by sequential precipitation in acetone. The physicochemical analyzes indicated that C. prolifera synthesizes a homogalactan (CP-0.9) and different populations of sulfated heteropolysaccharides. In the analysis of anticoagulant activity, all fractions except CP-0.3, influenced the intrinsic coagulation pathway. All fractions showed antioxidant activity in six different assays being more pronounced in hydrogen peroxide scavenging assay, especially CP-0.3, CP-0.7 and CP-0.9 (which obtained 61% of hydrogen peroxide scavenging), in ferric chelation assay (especially CP-0.9 with 56% chelation) and cupric chelation assay (especially CP-2.0 with 78% chelation). With respect to immunomodulatory activity, the presence of CP-0.3, CP-0.7 and CP-0.9 showed an immunogenic potential, increasing the production of nitric oxide (NO) by 48, 142 and 163 times, respectively. Conversely, the NO synthesis fell 73% after the activation of macrophages by LPS, incubated concurrently with CP-2.0. The anti-adipogenic activity of the fractions was also evaluated and CP-1.5 was able to reduce the differentiation of pre-adipocytes (3T3-L1) into adipocytes by 60%, without affecting the cell viability. The fractions CP-0.3, CP-0.5 and CP-0.9 reduced the viability of the HeLa cells (human cervical adenocarcinoma) by 55% and CP-1.5 reduced the viability of the 786-0 cells (human renal adenocarcinoma) by 75%. Leishmanicidal activity and microbicide effect against Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae (KPC) have not been identified. However, the viability of Staphylococcus epidermidis was reduced by 23.8% in the presence of CP -1.5. All fractions were able to change the formation of calcium oxalate crystals. CP-0.3, CP-0.5 and CP-1.1 only promoted the formation of COD type crystals with a very small size (1 ?m). Confocal microscopy and zeta potential data of crystals formed in the presence of the samples showed that the polysaccharides present in the fractions must interact with calcium ions present throughout the crystal lattice, affecting the growth and morphology of crystals The results described herein indicate that the fractions rich in polysaccharides obtained from the green seaweed C. prolifera present a multi therapeutic potential, and subsequent purification steps, as well as research on the mechanisms of action by which these polymers act should be investigated.
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Efeito imunomodulador e atividade antimicrobiana de heterofucanas de Sargassum filipendula

Telles, Cinthia Beatrice da Silva 26 June 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-05-30T20:01:31Z No. of bitstreams: 1 CinthiaBeatriceDaSilvaTelles_TESE.pdf: 1798517 bytes, checksum: 1ec7c34c6f828ce70bd877620c9ebb47 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-05-31T22:29:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CinthiaBeatriceDaSilvaTelles_TESE.pdf: 1798517 bytes, checksum: 1ec7c34c6f828ce70bd877620c9ebb47 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-31T22:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CinthiaBeatriceDaSilvaTelles_TESE.pdf: 1798517 bytes, checksum: 1ec7c34c6f828ce70bd877620c9ebb47 (MD5) Previous issue date: 2015-06-26 / Macroalgas marinhas constituem uma fonte extremamente rica de compostos bioativos, dentre eles, polissacar?deos sulfatados. Sargassum filipendula (SF), alga pertencente ? ordem Phaeophycea, ? fonte de heterofucanas conhecidas pela capacidade de modular uma s?rie de fun??es biol?gicas. Considerando a necessidade de encontrar f?rmacos mais eficientes no combate a infec??es microbianas, as heterofucanas de SF foram avaliadas como agentes imunomoduladores e antimicrobianos. As heterofucanas SF0.5V, SF0.7V e SF1.0V apresentaram uma forte atividade imunomoduladora intensificando a libera??o de ?xido n?trico (NO) por macr?fagos murinos (RAW 264.7), bem como, por macr?fagos originados de mon?citos prim?rios humanos. Al?m disso, quando macr?fagos humanos foram infectados por Leishmania infantum e tratados com SF0.5V, SF0.7V e SF1.0V ocorreu um aumento significativo na libera??o extracelular de NO. Como a citotoxicidadede de macrof?gos contra a forma intracelular de leishmanias ? mediada pela produ??o de NO, avaliamos a atividade leishmanicida sobre a forma amastigota intracelular de L. infantum e observamos que macr?fagos infectados e tratados com SF0.5V, SF0.7V e SF1.0V se tornaram menos suscept?veis ? infec??o. As heterofucanas que se mostraram com capacidade de induzir a atividade anti-leishmania tamb?m apresentaram melhor taxa de produ??o de NO, por?m os dados de correla??o levaram a observa??o que este n?o ? o principal mecanismo de a??o das fucanas de SF no combate a esse protozo?rio. A heterofucana SF0.5V tamb?m apresentou atividade inibit?ria da forma??o de biofilme (~ 50%) frente a bact?ria Staphylococcus epidermidis. J? SF0.7V e 1.0V inibiram quase que totalmente a replica??o do protozo?rio Trichomonas vaginalis. Resultados como esse refletem o espectro de a??o desses polissacar?deos sulfatados obtidos de SF e mostram o seu potencial como agentes imunomoduladores e microbicidas. / Fucans, sulphated polysaccharides that contain L-fucose in its constitution, obtained from species of Phaeophyceae of the Sargassum kind, display several biological activities. Heterofucans from Sargassum filipendula are bioactive molecules that contain strong antiproliferative and antioxidant activity. However, their immunomodulatory and antimicrobial activities have not yet been examined. In this context, the aim of this research was to evaluate the heterofucans as for their immunomodulatory capacity and antimicrobial action against Leishmania infantum, Trichomonas vaginalis, Staphylococcus epidermidis and Klebsiella pneumonia (KPC). The five heterofucans obtained from S. filipendula show activities that are distant as stimulants of the immune system and microbial agent. The SF0.5V, SF0.7V amd SF1.0V heterofucans were capable of acting in the activation of murine and human macrophages. In addition to that, SF0.5V has shown antibiofilm activity of S. epidermides and SF0.7V and 1.0V almost completely inhibited the survival of the protozoan T. vaginalis. Results such as this one, reflect the broad range of action of the sulphated polysaccharides obtained from seaweeds, especially from the species S.filipendula
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Detec??o in vitro de citocinas intracitoplasm?ticas (interferon gama, fator de necrose tumoral, interleucina 4 e interleucina 10) em leuc?citos humanos tratados com extrato bruto dilu?do de euphorbia tirucalli

Avelar, Beth?nia Alves de 13 August 2010 (has links)
Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-20T12:56:36Z No. of bitstreams: 0 / Rejected by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br), reason: n?o da para inserir licen?a on 2015-01-20T16:55:25Z (GMT) / Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-20T11:32:34Z No. of bitstreams: 2 bethania_alves_avelar1.pdf: 1374426 bytes, checksum: 09450a40db624b58e0a45e591d96b5d9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-20T11:33:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 bethania_alves_avelar1.pdf: 1374426 bytes, checksum: 09450a40db624b58e0a45e591d96b5d9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-20T11:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 bethania_alves_avelar1.pdf: 1374426 bytes, checksum: 09450a40db624b58e0a45e591d96b5d9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2010 / O uso de plantas da fam?lia Euphorbiaceae, principalmente do g?nero Euphorbia, tem sido popularmente difundido para o tratamento de uma variedade de doen?as de natureza infecciosa, tumoral e inflamat?ria. Entre as esp?cies desse g?nero, a Euphorbia tirucalli ? uma planta de uso difundido no Brasil e em algumas regi?es, tal como a do Vale do Jequitinhonha. H? ind?cios de que o l?tex de E. tirucalli tenha atividade antitumoral e antiviral, por?m, pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos nessa a??o. ? prov?vel que o mecanismo de a??o para tais atividades envolva a ativa??o de leuc?citos e a produ??o de citocinas para o direcionamento de uma resposta antiviral e antitumoral efetivas. Diante disso, o presente trabalho avaliou a produ??o de citocinas TNF-?, IFN-?, IL-4 e IL-10 nas popula??es e subpopula??es leuc?cit?rias do sangue perif?rico estimulados com o l?tex bruto da referida planta. Para tal, leuc?citos do sangue perif?rico de vinte indiv?duos h?gidos foram incubados por 4 horas com o l?tex bruto de E. tirucalli dilu?do em Dimetilsulfoxido (DMSO) e constituiu o grupo l?tex (Lt). Culturas celulares incubadas com salina e DMSO, utilizando-se o mesmo per?odo de incuba??o, constitu?ram as culturas controle n?o estimuladas (CC) e controle de solvente (DMSO), respectivamente. Ap?s o per?odo de incuba??o, as c?lulas foram marcadas com anticorpos monoclonais espec?ficos para receptores de superf?cie celular CD4, CD8 e CD14, bem como para as citocinas intracitoplasm?ticas TNF-?, IFN-?, IL-4 e IL-10. A aquisi??o e an?lise dos dados foram realizadas por citometria de fluxo. Os resultados demonstraram um aumento significativo (p < 0,05) no percentual de linf?citos T e sua subpopula??o T CD4 positivos para as citocinas do tipo 1, TNF-? e IFN-?. Essas citocinas s?o respons?veis por ativar o sistema imune para respostas imunoprotetoras frente ?s infec??es virais e processos tumorais. J? os neutr?filos e linf?citos T CD8, nas culturas estimuladas com o l?tex da planta, apresentaram um perfil misto de produ??o de citocinas do tipo 1 e 2. Esses resultados evidenciaram uma resposta do tipo 1 predominante, in vitro, e uma prov?vel ativa??o de mecanismos moduladores, mediados por linf?citos T CD8 e neutr?filos. Este estudo sugere que a utiliza??o popular da planta em infec??es virais e processos tumorais pode ter algum fundamento, tendo em vista a produ??o preferencial de citocinas do tipo 1 em c?lulas estrat?gicas da resposta imune celular, fundamental no combate ?s patologias mencionadas. No entanto, os estudos in vitro aqui realizados n?o s?o suficientes para garantir que a utiliza??o da planta no contexto in vivo possa, de fato, apresentar tais propriedades. Assim, estudos adicionais, incluindo outros ensaios in vitro, bem como ensaios pr?-cl?nicos, s?o fundamentais para o avan?o das pesquisas envolvendo a utiliza??o de E. tirucalli para fins terap?uticos. / ABSTRACT The use of plants in the family Euphorbiaceae, especially of the genus Euphorbia, has been popularly circulated for the treatment of a variety of infectious, tumoral and inflammatory illnesses. Among the species of this genus, Euphorbia tirucalli is a the plant with widespread use in Brasil and in some regions, such as the Vale do Jequitinhonha. There is evidence that the latex of E. tirucalli has antiviral and antitumor activity, but little is known about the mechanisms involved in this action. It is likely that the mechanism of action for such activities involves leukocyte activation and cytokine production for directing an effective antitumor and antiviral response. Thus, the present study evaluated the production of cytokines TNF-?, IFN-?, IL-4 and IL-10 in the populations and subpopulations in peripheral blood leukocytes stimulated with crude latex of this plant. For such, peripheral blood leukocytes of twenty healthy subjects were incubated for 4 hours with crude latex of E. tirucalli diluted in dimethyl sulfoxide (DMSO) and was the latex group (Lt). Cell cultures incubated with saline and DMSO, using the same incubation period, represent the control cultures that were not stimulated (CC) and solvent control (DMSO), respectively. After the incubation period, cells were stained with monoclonal antibodies specific to cell surface receptors CD4, CD8 and CD14, as well as for TNF-? intracytoplasmic cytokines, IFN-?, IL-4 and IL-10. The acquisition and analysis were performed by flow cytometry. The results showed a significant increase (p <0.05) in the percentage of T lymphocytes and their subpopulation T CD4 positive for type 1 cytokines, TNF-? and IFN-?. These cytokines are responsible for activating the immune system to immunoprotective responses against viral infections and tumor processes. However the neutrophils and T CD8 lymphocytes, in cultures stimulated with the latex of the plant, showed a mixed profile of cytokine production of type 1 and 2.These results showed a response of the type 1 predominant, in vitro, and a probable activation of modulatory mechanisms mediated by T CD8 lymphocytes and neutrophils.This study suggests that the popular use of plant in viral infections and tumor processes may have some foundation, in order to preferential production of type 1cytokines in strategic cells of the cellular immune response, that is essential in combating the diseases mentioned. However, in vitro studies conducted here are not sufficient to ensure that the use of the plant in vivo context may, in fact, possesses such properties. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2010.
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Avalia??o das atividades farmacol?gicas de fucoidans obtidos do extrato bruto de fucoidan comercial de Fucus vesiculosus

Oliveira, Ruth Medeiros de 18 December 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-08-09T23:35:50Z No. of bitstreams: 1 RuthMedeirosDeOliveira_TESE.pdf: 4171784 bytes, checksum: 9097e00661c5b8a82a6f4a4f71850657 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-08-15T22:18:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RuthMedeirosDeOliveira_TESE.pdf: 4171784 bytes, checksum: 9097e00661c5b8a82a6f4a4f71850657 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-15T22:18:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RuthMedeirosDeOliveira_TESE.pdf: 4171784 bytes, checksum: 9097e00661c5b8a82a6f4a4f71850657 (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Fucoidan ? um termo usado para definir polissacar?deos pertencentes ao grupo das heterofucanas que apresentam na sua constitui??o menos de 90% de L-fucose. Uma exce??o a esta regra ? o fucoidan obtido da alga Fucus vesiculosus. Este fucoidan ? comercializado pela empresa SIGMA-ALDRICH Co. e tem sido utilizado em v?rias pesquisas para avalia??o de suas atividades farmacol?gicas. No entanto, este produto n?o ? uma mol?cula pura, sendo na verdade uma mistura de diferentes fucoidans. Neste trabalho foram obtidos, a partir de precipita??o com acetona, quatro fucoidans a partir do extrato bruto do fucoidan de F. vesiculosus comercializado pela SIGMA-ALDRICH Co. para avalia??o de suas atividades anticoagulante, antioxidante, antiadipog?nica, imunomodulat?ria e antiurol?tica. Na atividade anticoagulante, avaliada pelo teste de TTPa, destacaram-se os fucoidans F0.9, F1.1 e F2.0 que induziram um aumento de oito vezes no tempo de coagula??o, quando comparado ao controle, quando uma massa de 10 ?g foi aplicada. J? para o teste de TP, apenas o fucoidan F0.9 foi capaz de aumentar o tempo de coagula??o em compara??o ao controle. Na capacidade antioxidante total (CAT), a atividade do fucoidan F2.0 correspondeu a aproximadamente 400 equivalentes de ?cido asc?rbico, enquanto que o fucoidan F0.5 foi o menos efetivo, com atividade referente a aproximadamente 38 equivalentes. Com rela??o ao efeito sobre a adipog?nese de c?lulas pr?-adipocit?rias (3T3-L1), foi observado que alguns fucoidans causaram uma redu??o da adipog?nese, como foi o caso de F1.1 e F2.0 e este efeito foi associado ? redu??o na express?o das prote?nas reguladoras C/EBP?, C/EBP? e PPAR?. Por outro lado, os fucoidans F0.5 e F0.9 induziram a adipog?nese pelo aumento da express?o desses reguladores proteicos. Al?m disso, o fucoidan F2.0 foi capaz de induzir a hidr?lise de triglicer?deos presentes no interior dos adip?citos. O efeito imunomodulador foi avaliado e foi observado que a presen?a dos fucoidans F0.5, F1.1 e F2.0 reduziram significativamente a produ??o de ?xido n?trico por macr?fagos ativados com LPS, com destaque para o fucoidan F2.0 que, na concentra??o de 100 ?g/mL, conseguiu reduzir, em aproximadamente, 55% o efeito causado pelo LPS. J? com rela??o ao efeito dos fucoidans sobre a forma??o de cristais de oxalato de c?lcio, foi observado que o fucoidan F0.5 interferiu, mais efetivamente, sobre a agrega??o desses cristais e tal efeito n?o foi significativamente diferente com rela??o ao efeito causado pelo extrato bruto. Al?m disso, o fucoidan F0.5 promoveu a forma??o apenas de cristais do tipo dihidratados (COD), enquanto que os fucoidans F1.1 e F2.0 n?o interferiram significativamente sobre a forma??o dos cristais, quando comparados ao controle. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que o extrato bruto do fucoidan de Fucus vesiculosus comercializado ?, na verdade, uma mistura de diferentes fucoidans que, por sua vez, possuem composi??es qu?micas diferentes al?m de possu?rem atividades farmacol?gicas diferenciadas e que o uso desses fucoidans ? indicado de acordo com a atividade farmacol?gica a ser avaliada. / Fucoidan is a term used to define heteropolysaccharides that are composed of less than 90% L-fucose. The exception to this rule is the homofucoidan obtained from the seaweed Fucus vesiculosus. This fucoidan can be purchased from SIGMA Co. and have been used in various research for evaluation of their pharmacological activities. However, it is not a pure molecule. In fact, it is a mix of several fucoidan molecules. In this work, were obtained, from acetone precipitation, and biochemically characterized, four fucoidan molecules from SIGMA-ALDRICH Co. fucoidan to evaluate their anticoagulant, antioxidant, antiadipogenic, immunomodulatory and antiurolithiatic activities. In anticoagulant activity, evaluated by aPTT assay, fucoidans F0.9, F1.1 and F2.0 increased eightfold the coagulation time, compared to the control, when a mass of 10 ?g was used. To PT test, only fucoidan F0.9 was capable of increase the coagulation time, compared to control. In the total antioxidant capacity assay (TAC), the fucoidan F2.0 showed 400 ascorbic acid equivalents, while fucoidan F0.5, the lest effective, 38 equivalents. In respect to the effect on pre-adipocyte cell lines (3T3-L1) adipogenesis, was observed that fucoidan F1.1 and F2.0 reduced the adipogenesis and this effect was associated to the reduction in the expression of regulatoy proteins C/EBP?, C/EBP? and PPAR?. On the other hand, fucoidans F0.5 and F0.9 induced increased expression of these regulatory proteins. Furthermore, fucoidan F2.0 induced hydrolysis of triglycerides present in the interior of adipocytes. The immunomodulatory effect was evaluated and observed that the presence of fucoidans F0.5 , F1.1 and F2.0 significantly reduced the production of nitric oxide by activated macrophages with LPS specially fucoidan F2.0 that in 100 ?g/mL, reduced about 55% the effect caused by LPS. Relative to the effect upon the formation of calcium oxalate crystals, fucoidan F0.5 was more effective in reduce the aggregation of the crystals and this effect it was not significantly different regarding the effect caused by the crude. Besides, fucoidan F0.5 only promoted the formation of COD type crystals, while fucoidans F1.1 and F2.0 did not influence the formation of crystals compared with the control. The results described in this study indicate that the commercial crude fucoidan of Fucus vesiculosus it?s a mix of several fucoidan which, in turn, have different chemical compositions besides having different pharmacological activities. The use of these fucoidans it?s indicated according the pharmacological activity to be evaluated.
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A??o da ?-1,3 glucana no sistema imune de camundongos com sepse por Candida albicans

Melchuna, Karina Mendes 28 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KarinaMM_DISSERT.pdf: 2256022 bytes, checksum: e9ccee900e81515e9367adddbe68fd65 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The frequency of disseminated candidiasis caused by yeast has enhancing in intensive care unit. Despite the availability of new antifungal drugs, C. albicans sepsis mortality causes can be as high as 30-40%. So, it has been needed to looking for a new therapeutic medicament that helps in treatment and prevention of this infection. Previous data that demonstrated that particulated ?-glucan stimulates the immune system and experiments of this work were conducted to investigating if ?-glucan extracted from Saccharomices cerevisiae, could modified the evolution of mouse model C. albicans systemic infection. Balb/c mice with sepsis and ?-1,3 glucan treated or not were analyzed the influence of ?-1,3 glucan in survival of the animals, in the fungal burdens in kidney, in the production of urea and TNF even in the histopathology of kidney. The experiments shown that the infected animals a nd glucan treated had great survival (p<0,05), less unit form colony in kidney and normal levels of urea. In the kidney histopathology of not glucan treated animals it has seen more lesions when compared with treated animals. So we conclude that ?-1,3 glucan could stimulate the immune system against disseminated C. albicans / A frequ?ncia de candid?ase invasiva causada por leveduras tem aumentado nas unidades de terapia intensiva. Apesar dos importantes avan?os no desenvolvimento de agentes antif?ngicos, a sepse por Candida ssp tem inaceit?vel atribui??o a mortalidade de 40-50% de pessoas. Existe a necessidade de se identificar novos agentes terap?uticos que auxiliem no tratamento e preven??o dessa infec??o. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar se a ?-1,3 glucana particulada, extra?da do Saccharomyces cerevisiae, seria capaz de modificar a evolu??o da infec??o sist?mica por Candida albicans em modelo experimental. Camundongos Balb/c submetidos ? sepse e tratados ou n?o com ?-1,3 glucana particulada foram avaliados com rela??o ao tempo de sobrevida, quantifica??o das unidades formadoras de col?nia nos rins, dosagem de ur?ia e TNF s?ricos e an?lise histopatol?gica renal para avalia??o de infiltrado inflamat?rio e presen?a do fungo no tecido renal. Os resultados mostraram que os animais infectados por Candida albicans e tratados com glucana apresentaram uma maior sobrevida (p<0,05), uma menor quantidade de unidades formadoras de col?nia nos rins e valores de ur?ia normais. Na an?lise dos resultados da histopatologia foi observado um maior dano no tecido renal dos animais pertencentes ao grupo n?o tratado com glucana, diferentemente do observado nos animais tratados pela glucana os quais apresentaram pequeno dano renal. Assim, podemos concluir que a glucana foi capaz de estimular o sistema imune na defesa contra infec??o disseminada por C. albicans

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