Made available in DSpace on 2014-06-12T15:50:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Inibidores de protease são moléculas que têm a capacidade de controlar proteases por bloqueio da atividade catalítica. As proteases participam de importantes eventos fisiológicos tais como a digestão dos alimentos, coagulação sangüínea, e apoptose. A ação dos inibidores é essencial para garantir a homeostase. Artrópodes como insetos e aracnídeos são ricas fontes desses inibidores. O objetivo desse trabalho foi isolar inibidores de proteases presentes na hemolinfa da aranha Lasiodora sp. Hemolinfa foi coletada através de punção cardíaca na presença de anticoagulante. Após centrifugação (800g) o plasma foi separado e utilizado para a detecção de inibidor de tripsina, trombina, fator Xa e XIIa. Cromatografia de afinidade em tripsina-Sepharose resultou no inibidor purificado, porém sem atividade inibitória. Isolamento do inibidor de tripsina foi realizado por cromatografia em coluna de Sephadex G-100 e a preparação contendo atividade inibitória de tripsina foi denominada: inibidor de tripsina bruto. Cromatografia em Mono Q isolou a partir do inibidor de tripsina bruto, o inibidor de tripsina LPTI (do inglês Lasiodora plasma trypsin inhibitor) e uma proteína anticoagulante LPA (do inglês Lasiodora plasma anti-coagulant). Eletroforese em gel de poliacrilamida em presença de sulfato sódico de dodecila revelou massa molecular de 72 kDa para LPTI e LPA. Avaliação de atividade inibitória sobre proteases e do efeito na coagulação através de determinação do tempo de recalcificação, tempo de protrombina (TP) e tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) revelou que LPTI não interfere na coagulação e LPA, sem atividade inibitória de tripsina, interfere no TTPA. De acordo com nosso conhecimento LPTI e LPA correspondem ao primeiro inibidor de tripsina e a primeira proteína anticoagulante isolados da hemolinfa de aranha. LPTI e LPA podem participar no mecanismo de coagulação da hemolinfa através do controle da produção da protease fenoloxidase, que dispara a cascata, e do controle da atividade de proteases da cascata de coagulação

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Laura Maia Mairink Nassau.pdf: 2613768 bytes, checksum: d2e4321ca6a3e7930e1a7f57b3099a11 (MD5) Previous issue date: 2010-09-15 / Thromboembolic disorders produce the majority of diseases affecting the heart, and are the third leading cause of death worldwide. Venous thromboembolism is a thromboembolic disorder that occurs in the venous circulation, is a disease of high prevalence and remains a major cause of morbidity and mortality in hospitalized patients undergoing major surgery, the fact that affect patients from the very young, disease free prior to the more elderly mean that it is a problem with major socioeconomic burden by as much as by absenteeism in hospital patients in productive age. This describes the planning and synthesis of intermediates for the collection of new derivatives guanidine drawn from the infestina-4, protein extracted from the stomach Barber Triatoma infestans, with potent inhibitory activity of factor XII. Factor XII acts of direct and indirect enzymatic cascades in four of our body and has an important contribution to the formation of pathological vascular thrombi. The previous study of molecular modeling justified based planning in the structural and the electrostatic infestin. Thus it is concluded that the synthesis of intermediates 25-28, were getting adequate yields of 88.0 and 92.0% for compounds 25 and 26 and 71.4 and 65.0% for compounds 27 and 28 respectively. / As desordens tromboembólicas geram a maioria das doenças que acometem o coração, e são a terceira causa de morte mundial. O tromboembolismo venoso é uma desordem tromboembólica que ocorre na circulação venosa, é uma enfermidade de alta prevalência e continua sendo uma causa importante de morbimortalidade em pacientes hospitalizados e submetidos a cirurgias de grande porte, o fato de afetar pacientes desde os mais jovens, sem doenças prévias, até os mais idosos fazem com que ela constitua um problema sócio-econômico com grandes ônus tanto pelas internações quanto pelo absenteísmo em pacientes em idade produtiva. Este trabalho descreve o planejamento e a síntese de intermediários para obtenção de novos derivados guanidínicos desenhados a partir da infestina-4, proteína extraída do estômago do barbeiro Triatoma infestans, com potente atividade inibitória do fator XII. O fator XII atua de forma direta e indireta em quatro cascatas enzimáticas do nosso organismo e possui importante contribuição na formação patológica de trombos vasculares. O estudo prévio de modelagem molecular justificou o planejamento baseado nas características estruturais e eletrostáticas da infestina. Desta forma, conclui-se que a síntese dos intermediários 25-28 foram adequadas obtendo rendimentos de 88,0 e 92,0% para os compostos 25 e 26 e de 71,4 e 65,0% para os compostos 27 e 28, respectivamente.

Os progestagênios isolados são contraceptivos indicados que em trombofílicas e/ou com passado de tromboembolismo venoso (TEV). Algumas dessas mulheres, também utilizam anticoagulantes orais (ATCO) o que pode implicar em alterações no padrão de sangramento menstrual associado ao uso de progestagênios isolados. Objetivo: avaliar os efeitos do uso de ATCO no padrão de sangramento associado ao sistema intrauterino liberador de levonorgestrel (SIU-LNG) em mulheres trombofílicas e/ou com passado de TEV . Métodos: Trata-se de um estudo de coorte prospectiva que dividiu as mulheres trombofílicas e/ou com passado de TEV em dois grupos, usuárias de ATCO e não-usuárias de ATCO. Padrão de sangramento, peso, índice de massa corpórea (IMC) e circunferência abdominal foram comparados entre os grupos antes, 6 e 12 meses após a inserção do SIU-LNG. Resultados: Foram incluídas 33 mulheres, entre 18 e 45 anos, 16 usuárias de ATCO e 17 não-usuárias. Houve aumento de 3,9% do peso e 3,8% do IMC em das usuárias de ATCO após 12 meses da inserção do SIU-LNG (p<0,01). Houve aumento de hemoglobina e hematócrito em ambos os grupos. Não se observou diferença entre o padrão de sangramento de ambos os grupos, sendo a amenorréia o padrão mais frequente nos dois grupos (41,2% em ambos) 12 meses após a inserção do SIU-LNG. Utilizar ATCO não aumentou a freqüência e a duranção de sangramento genital. Conclusão: As usuárias e não-usuárias de ATCO tiveram padrão de sangramento semelhante após a inserção do SIU-LNG. Os níveis de hemoglobina e hematócrito aumentaram em ambos os grupos / Background: Progestogen-only contraceptives (POCs) are suitable for women with thrombophilia and/or a history of venous thromboembolism (VTE). Several of these women, however, use oral anticoagulant therapy (OAT), which can impair the bleeding pattern associated with POC use. We evaluated the effects of OAT use on the bleeding pattern associated with the levonorgestrel-releasing intrauterine system (LNG-IUS) in women with thrombophilia and/or a history of VTE. Study Design: This prospective cohort study followed 2 groups of women, all of whom were thrombophilic and/or had a history of VTE: OAT users and non-users. Bleeding patterns, blood pressure, body mass index (BMI), weight, complete blood count and waist circumference were compared between the 2 groups before and 6 and 12 months after LNG-IUS insertion. Results: The patient cohort consisted of 33 women aged 18 to 45 years old, including 16 OAT users and 17 non-users. Body weight increased by 3.9% and BMI by 3.8% in OAT users 12 months after LNG-IUS insertion (p< 0,01). Hemoglobin and hematocrit levels increased by approximately 10% in both groups. There was no difference between the groups in bleeding patterns, with amenorrhea being the most frequent pattern in both groups (41.2% each) 12 months after LNG-IUS insertion. OAT did not increase the frequency of prolonged and/or frequent bleeding. Conclusion: OAT users and non-users had similar bleeding patterns after insertion of the LNG-IUS. Hemoglobin and hematocrit levels increased in both groups

Orientador: Antônio José Maria Cataneo / Resumo: Introdução: O risco de sangramento em cirurgias realizadas na vigência de antitrombóticos preocupa o cirurgião, em contrapartida, a suspensão do agente antitrombótico aumenta o risco de trombose. Esse dilema levou a realização desta revisão. Objetivo: avaliar, por meio de revisão sistemática e metanálise, se há ou não necessidade de suspender medicamentos antitrombóticos orais (varfarina, fluindiona, acenocumarol, AAS e clopidogrel) para a realização de procedimentos eletivos de cirurgia do punho e da mão. Métodos: revisão sistemática de estudos experimentais ou observacionais que tenham avaliado cirurgias de mão e punho na vigência do agente antitrombótico. Foram pesquisadas as bases de dados LILACS, Pubmed, Embase, Cochrane e Scopus, sendo selecionados series com cinco ou mais cirurgias . Os desfechos avaliados foram: complicações graves (necessidade de tratamento cirúrgico) e leves (sem necessidade de tratamento cirúrgico). Resultados : foram selecionados 10 estudos observacionais para análise qualitativa envolvendo 2971 cirurgias. Seis desses estudos foram selecionados para análise quantitativa, envolvendo 319 cirurgias do punho e da mão realizadas na vigência de varfarina, fluindiona, acenocumarol, AAS e clopidogrel e 629 cirurgias realizadas em pacientes sem uso dos antitrombóticos. O risco de complicações leves foi maior nos pacientes que estavam recebendo antitrombóticos ( RR 1,55, IC 95% 1,02 a 2,35; I 2 = 23%, 948 cirurgias), e o risco de complicações graves foi sem... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction : The risks of bleeding in surgeries performed during the antithrombotic period are of concern to the surgeon, and on the other hand, the suspension of the antithrombotic agent increases the risk of thrombosis. This dilemma led to this review. Objective: to evaluate, through a systematic review, whether or not there is a need to suspend antithrombotic drugs (warfarin, fluindione, acenocumarol, ASA and clopidogrel) to perform elective procedures for wrist and hand surgery. Methods: systematic review of experimental or observational studies that have evaluated hand and wrist surgeries during the antithrombotic agent. The databases LILACS, Pubmed, Embase, Cochrane and Scopus were searched, being selected series with five or more surgeries. The outcomes evaluated were: severe complications (need for surgical treatment) and mild complications (no need for surgical treatment). Results: 10 observational studies were selected for qualitative analysis involving 2971 surgeries. Six of these studies were selected for quantitative analysis, involving 319 wrist and hand surgeries performed during warfarin, fluindione, acenocumarol, ASA and clopidogrel and 629 surgeries performed in patients without antithrombotic drugs. The risk of mild complications was greater in patients receiving antithrombotic drugs (RR 1.55, 95% CI 1.02 to 2.35, I 2 = 23%, 948 surgeries), and the risk of severe complications was similar in both groups (RR 1.83, 95% CI 0.32 to 10.29, I 2 = 0%, 948 surger... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by FRANCISCO SIMOES DEIENNO (frandeienno@hotmail.com) on 2018-08-14T12:57:37Z No. of bitstreams: 1 Tese Final para Repositorio.pdf: 614767 bytes, checksum: 0f22aeef2c688aa8f97eb3c2d7bc5223 (MD5) / Approved for entry into archive by Sulamita Selma C Colnago null (sulamita@btu.unesp.br) on 2018-08-14T17:14:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 deienno_fs_me_bot.pdf: 614767 bytes, checksum: 0f22aeef2c688aa8f97eb3c2d7bc5223 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-14T17:14:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 deienno_fs_me_bot.pdf: 614767 bytes, checksum: 0f22aeef2c688aa8f97eb3c2d7bc5223 (MD5) Previous issue date: 2018-07-19 / Introdução: O risco de sangramento em cirurgias realizadas na vigência de antitrombóticos preocupa o cirurgião, em contrapartida, a suspensão do agente antitrombótico aumenta o risco de trombose. Esse dilema levou a realização desta revisão. Objetivo: avaliar, por meio de revisão sistemática e metanálise, se há ou não necessidade de suspender medicamentos antitrombóticos orais (varfarina, fluindiona, acenocumarol, AAS e clopidogrel) para a realização de procedimentos eletivos de cirurgia do punho e da mão. Métodos: revisão sistemática de estudos experimentais ou observacionais que tenham avaliado cirurgias de mão e punho na vigência do agente antitrombótico. Foram pesquisadas as bases de dados LILACS, Pubmed, Embase, Cochrane e Scopus, sendo selecionados series com cinco ou mais cirurgias . Os desfechos avaliados foram: complicações graves (necessidade de tratamento cirúrgico) e leves (sem necessidade de tratamento cirúrgico). Resultados : foram selecionados 10 estudos observacionais para análise qualitativa envolvendo 2971 cirurgias. Seis desses estudos foram selecionados para análise quantitativa, envolvendo 319 cirurgias do punho e da mão realizadas na vigência de varfarina, fluindiona, acenocumarol, AAS e clopidogrel e 629 cirurgias realizadas em pacientes sem uso dos antitrombóticos. O risco de complicações leves foi maior nos pacientes que estavam recebendo antitrombóticos ( RR 1,55, IC 95% 1,02 a 2,35; I 2 = 23%, 948 cirurgias), e o risco de complicações graves foi semelhante nos dois grupos (RR 1,83, IC 95% 0,32 a 10,29; I 2 = 0%, 948 cirurgias). Conclusões: Pacientes em uso de anticoagulantes orais ou antiplaquetários orais tem um risco maior de desenvolver complicações leves, isto é aquelas que não necessitam de reintervenção cirúrgica , quando submetidos a cirurgias do punho e da mão na vigência de tratamento antitrombótico. / Introduction : The risks of bleeding in surgeries performed during the antithrombotic period are of concern to the surgeon, and on the other hand, the suspension of the antithrombotic agent increases the risk of thrombosis. This dilemma led to this review. Objective: to evaluate, through a systematic review, whether or not there is a need to suspend antithrombotic drugs (warfarin, fluindione, acenocumarol, ASA and clopidogrel) to perform elective procedures for wrist and hand surgery. Methods: systematic review of experimental or observational studies that have evaluated hand and wrist surgeries during the antithrombotic agent. The databases LILACS, Pubmed, Embase, Cochrane and Scopus were searched, being selected series with five or more surgeries. The outcomes evaluated were: severe complications (need for surgical treatment) and mild complications (no need for surgical treatment). Results: 10 observational studies were selected for qualitative analysis involving 2971 surgeries. Six of these studies were selected for quantitative analysis, involving 319 wrist and hand surgeries performed during warfarin, fluindione, acenocumarol, ASA and clopidogrel and 629 surgeries performed in patients without antithrombotic drugs. The risk of mild complications was greater in patients receiving antithrombotic drugs (RR 1.55, 95% CI 1.02 to 2.35, I 2 = 23%, 948 surgeries), and the risk of severe complications was similar in both groups (RR 1.83, 95% CI 0.32 to 10.29, I 2 = 0%, 948 surgeries). Conclusions: Patients taking oral anticoagulants or oral antiplatelet agents may be at increased risk of developing mild complications , that is, those that do not require surgical reintervention, when undergoing hand and wrist surgeries during antithrombotic treatment

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-30T20:49:07Z No. of bitstreams: 1 MarianaSantanaSantosPereiraDaCosta_TESE.pdf: 2604285 bytes, checksum: 563b33c5f5f7b6ae4ce07fe8a3655789 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-07-30T20:58:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MarianaSantanaSantosPereiraDaCosta_TESE.pdf: 2604285 bytes, checksum: 563b33c5f5f7b6ae4ce07fe8a3655789 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-30T20:58:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarianaSantanaSantosPereiraDaCosta_TESE.pdf: 2604285 bytes, checksum: 563b33c5f5f7b6ae4ce07fe8a3655789 (MD5) Previous issue date: 2016-04-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Polissacarídeos de algas podem ter sua síntese, sua estrutura e propriedades farmacológicas modificadas devido a alterações de fatores ambientais. Contudo, poucas algas já foram analisadas com essa ótica. A alga verde C. cupressoides var. flabellata Børgesen é uma alga abundante na costa do Rio Grande do Norte e já foi demostrado que esta alga coletada na mesma época, mas em praias com grau de salinidade diferentes, sintetizava polissacarídeos sulfatados (PS) com propriedades diferentes, inclusive atividade anticoagulante. Dessa forma, o objetivo do presente foi avaliar a influência do período de coleta e de parâmetros ambientais na composição química e atividade anticoagulante de PS obtidos de algas verdes do litoral potiguar, bem como obter e avaliar o potencial anticoagulante de PS purificados da alga C. cupressoides. Inicialmente, foram obtidos extratos ricos em polissacarídeos sulfatados (ERPS), por proteólise seguido por precipitação com metanol, da alga C. cupressoides coletada mensalmente, durante um ano na praia de Búzios, Nísia Floresta/RN. Observou-se que havia variações no rendimento da extração, composição química e atividade anticoagulante dos ERPS da C. cupressoides de acordo com o mês de coleta, sendo o mês de março aquele em que se obteve ERPS com maior potencial anticoagulante, vale salientar que esta atividade foi maior que a do Clexane®, uma heparina de baixo peso molecular comercial. Ao se analisar a influência de fatores ambientais do local de coleta no rendimento, composição química e atividade anticoagulante observou-se que existe uma correlação positiva significativa (p < 0,05) entre o rendimento da extração dos ERPS e a salinidade da água do mar e a insolação; para a quantidade de sulfato observou-se uma correlação negativa significativa (p < 0,05) com a salinidade da água do mar. Já a quantidade de açúcares totais teve uma correlação negativa significativa (p < 0,05) com: sólidos totais, sódio, cloreto e insolação. Como o mês de março foi o mês com ERPS com maior potencial anticoagulante, resolveu-se purificar, caracterizar e avaliar o potencial anticoagulante de PS extraídos neste mês. Após proteólise e fracionamento com volumes crescentes de acetona obteve-se quatro frações polissacarídicas da C. cupressoides (CCB-0.3, CCB-0.5, CCB-1.0 e CCB-2.0), como a CCB-0.5 apresentou maior atividade anticoagulante, esta foi submetida a cromatografia de troca-iônica e eluída em duas novas frações (FI e FII), após eletroforese em gel de agarose, coloração da lâmina com azul de toluidina e descoloração, observou-se o aparecimento de uma única banda em ambas as subfrações, o que indica a presença de uma única população de PS, o que permite inferir que estes PS foram purificados. Análises por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) indicam que os PS FI e FII tratam-se de glucogalactanas. Estas glucogalactnas sulfatadas exibiram atividade anticoagulante pela via intrínseca (teste de aPTT), pela via extrínseca (teste PT) e pela via comum (teste TT) da cascata de coagulação. Um resultado interessante foi que a atividade no teste de aPTT das glucogalactanas sulfatadas foi similiar a atividade do Clexane®. Além disso, estes PS foram capazes de inibir parcialmente a trombina. Isto é indicativo que os PS da C. cupressoides podem estar agindo em diversas proteases da cascata de coagulação. Entretanto, mais estudos são necessários para explicar detalhadamente quais os alvos de ação destes polímeros. Por fim, analisou-se a influência do período de coleta e de fatores ambientais em ERPS de outras algas verdes do litoral do RN (Caulerpa prolifera, Caulerpa racemosa var. occidentalis, Caulerpa sertularioides e Codium isthmocladum) coletadas também mensalmente, durante um ano na praia de Búzios, Nísia Floresta/RN; e observou-se que, da mesma forma da C. cupressoides, houve variações no rendimento, composição química e atividade anticoagulante para os ERPS algas verdes C. prolifera, C. racemosa, C. sertularioides e C. isthmocladum. No entanto, um fato interessante é que cada alga responde de forma diferente as condições ambientais do local de coleta. Estes dados indicam que dependendo do período do ano que a alga é coletada, os PS extraídos destas espécies de algas podem ter suas estruturas químicas afetadas e, consequentemente, suas atividades biológicas poderão ser distintas. Estes tipos de estudos levam ao esclarecimento de quais seriam as melhores condições para se obter o PS com as características estruturais e biológicas de interesse, o que é fundamental para o uso destes polímeros na indústria. / Polysaccharides of seaweeds can have their synthesis, structure and pharmacological properties modified due to changes in environmental factors. But few algae have been analyzed in this light. The green seaweed C. cupressoides var. flabellata Børgesen is an abundant alga in the coast of Rio Grande do Norte and it was already shown that this seaweed collected at the same time in beaches with different degree of salinity synthesized sulfated polysaccharides (PS) with different properties, including anticoagulant activity. Therefore the objective of this study was to obtain and characterize PS of green seaweed of the coast of Rio Grande do Norte evaluating the influence of the collection period and environmental parameters in the chemical composition and anticoagulant activity of PS as well as purify, characterize and evaluate the anticoagulant potential of at least one PS of the seaweed C. cupressoides. Initially, extracts rich in sulfated polysaccharides (ERPS) were obtained by proteolysis followed by precipitation with methanol of the seaweed C. cupressoides collected monthly for one year on the beach in Búzios, Nísia Floresta/RN. It was noted that there were variations in performance of extraction, chemical composition and anticoagulant activity of ERPS C. cupressoides according to the month of collection, with the month of March being the one in which they obtained more anticoagulant potential of ERPS. It is worth noting that this activity was greater than that of Clexane®, a low molecular weight commercial heparin. When analyzing the influence of environmental factors in the collection site in regards to performance, chemical composition and anticoagulant activity it has been observed that there is a significant positive correlation (p < 0.05) between the performance of the extraction of ERPS and salinity of sea water and insolation; for the amount of sulfate it was observed a significant negative correlation (p < 0.05) with the salinity of the seawater. The amount of total sugars had a significant negative correlation (p < 0.05) with: total solids, sodium, chloride and insolation. Since the month of March was the month with ERPS with more anticoagulant potential, it was decided to purify, characterize and evaluate the PS anticoagulant potential extracted on that month. After proteolysis and fractionation with increasing volumes of acetone four fractions of polysaccharide C. cupressoides (CCB-0.3, CCB-0.5, CCB-1.0 e CCB2.0) were obtained. Since the CCB-0.5 had higher anticoagulant activity, it was submitted to a chromatography ion-exchange column and eluted in two new fractions (FI and FII) after agarose gel electrophoresis, slide staining with toluidine blue and discoloration it was observed the appearance of a single band on both SP which indicates the presence of a single population of PS, which allows inferring that these PS were purified. Analysis by high-performance liquid chromatography (HPLC) indicate that SP FI and FII are glucogalactanas. These sulfated glucogalactans exhibited by the intrinsic pathway anticoagulant activity (APTT assay) the extrinsic pathway (PT test) and common pathway (TT test) of the coagulation cascade. An interesting result was that activity in the aPTT test of sulfated glucogalactans was similiar activity of Clexane®. In addition, these PS were able to partially inhibit thrombin. This is an indicative that the PS C. cupressoides may be acting on various proteases of the coagulation cascade. But more studies are needed to explain in detail which are the targets of action of these polymers. Finally, we analyzed the influence of the period of collection and environmental factors in ERPS of other green seaweeds RN coast (Caulerpa prolifera, Caulerpa racemosa var. occidentalis, Caulerpa sertularioides and Codium isthmocladum) also collected monthly for one year on the beach of Búzios, Nísia Floresta/RN; and it was observed that, like the C. cupressoides, there were variations in the performance, chemical composition and anticoagulant activity for ERPs green seaweeds C. prolifera, C. racemosa, C. sertularioides and C. isthmocladum. However, an interesting fact is that each alga responds differently to environmental conditions of the collection site. These data indicate that depending on the time of the year that the algae are collected, the PS extracted from these species of algae may have their chemical structures affected hence its biological activity may be different. These types of studies lead to the clarification of which would be the best conditions to obtain the PS with the structural and biological characteristics of interest, which is essential for the use of these polymers in the industry.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RicheleJAM_DISSERT.pdf: 3022782 bytes, checksum: 46556132e4939175f840346baa8ae21f (MD5) Previous issue date: 2012-10-24 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / A sepse ? uma doen?a complexa, de alta gravidade e durante o seu desenvolvimento pode ocorrer eventos inflamat?rios graves, que podem levar o paciente ao ?bito. Inibidores de peptidases isolados de sementes de leguminosas est?o sendo estudados devido suas variadas atividades biom?dicas ou farmacol?gicas. Nesse sentido, o presente estudo consistiu na avalia??o das atividades multifuncionais do inibidor de tripsina presente nas sementes de Erythrina velutina (EvTIb). Dois inibidores de tripsina foram purificados por fracionamento com sulfato de am?nio (30-60%), cromatografia de afinidade em tripsina-sepharose e cromatografia de fase reversa. Os inibidores purificados foram denominados de EvTIa e EvTIb e suas massas moleculares determinadas por espectrometria de massa por electrospray (ESI) foram: 19.228,16 Da e 19.210,48 Da, respectivamente. Dentre eles, o EvTIb apresentou maior atividade espec?fica para tripsina e maior percentual de rendimento de extra??o, sendo, portanto, o escolhido para as an?lises adicionais. Os fragmentos desse inibidor gerados por tratamento enzim?tico com tripsina e pepsina foram analisados por espectrometria de massa MALDI-ToF-ToF, permitindo elucidar sua estrutura prim?ria parcial. O EvTIb exibiu uma atividade de inibi??o do tipo n?o-competitiva para a tripsina com IC50 de 22 nmol.L-1 e constante de inibi??o (Ki) de 10 nmol.L-1. Al?m da atividade de inibi??o para tripsina, EvTIb tamb?m inibiu o fator Xa e a elastase neutrof?lica, por?m n?o inibiu trombina, quimotripsina ou peptidase 3. EvTIb se manteve est?vel a varia??o de pH e temperatura. EvTIb n?o foi citot?xico e n?o inibiu o crescimento bacteriano de Escherichia coli e Staphylococcus aureus. EvTIb foi capaz de prolongar o tempo de coagula??o de maneira dose-dependente. Finalmente, observou-se que EvTIb foi capaz de restabelecer os n?veis hemost?ticos, inibir a migra??o leucocit?ria em camundongos s?pticos e diminuir a secre??o de TNF-&#945; e n?o teve a??o sobre a libera??o de IL-6. Por outro lado, EvTIb promoveu um aumento na libera??o de IFN- &#945; e IL-12. Esses dados sugerem que EvTIb pode constituir em uma nova mol?cula com potencial de uso no tratamento da sepse e doen?as relacionadas ? coagula??o

Os progestagênios isolados são contraceptivos indicados que em trombofílicas e/ou com passado de tromboembolismo venoso (TEV). Algumas dessas mulheres, também utilizam anticoagulantes orais (ATCO) o que pode implicar em alterações no padrão de sangramento menstrual associado ao uso de progestagênios isolados. Objetivo: avaliar os efeitos do uso de ATCO no padrão de sangramento associado ao sistema intrauterino liberador de levonorgestrel (SIU-LNG) em mulheres trombofílicas e/ou com passado de TEV . Métodos: Trata-se de um estudo de coorte prospectiva que dividiu as mulheres trombofílicas e/ou com passado de TEV em dois grupos, usuárias de ATCO e não-usuárias de ATCO. Padrão de sangramento, peso, índice de massa corpórea (IMC) e circunferência abdominal foram comparados entre os grupos antes, 6 e 12 meses após a inserção do SIU-LNG. Resultados: Foram incluídas 33 mulheres, entre 18 e 45 anos, 16 usuárias de ATCO e 17 não-usuárias. Houve aumento de 3,9% do peso e 3,8% do IMC em das usuárias de ATCO após 12 meses da inserção do SIU-LNG (p<0,01). Houve aumento de hemoglobina e hematócrito em ambos os grupos. Não se observou diferença entre o padrão de sangramento de ambos os grupos, sendo a amenorréia o padrão mais frequente nos dois grupos (41,2% em ambos) 12 meses após a inserção do SIU-LNG. Utilizar ATCO não aumentou a freqüência e a duranção de sangramento genital. Conclusão: As usuárias e não-usuárias de ATCO tiveram padrão de sangramento semelhante após a inserção do SIU-LNG. Os níveis de hemoglobina e hematócrito aumentaram em ambos os grupos / Background: Progestogen-only contraceptives (POCs) are suitable for women with thrombophilia and/or a history of venous thromboembolism (VTE). Several of these women, however, use oral anticoagulant therapy (OAT), which can impair the bleeding pattern associated with POC use. We evaluated the effects of OAT use on the bleeding pattern associated with the levonorgestrel-releasing intrauterine system (LNG-IUS) in women with thrombophilia and/or a history of VTE. Study Design: This prospective cohort study followed 2 groups of women, all of whom were thrombophilic and/or had a history of VTE: OAT users and non-users. Bleeding patterns, blood pressure, body mass index (BMI), weight, complete blood count and waist circumference were compared between the 2 groups before and 6 and 12 months after LNG-IUS insertion. Results: The patient cohort consisted of 33 women aged 18 to 45 years old, including 16 OAT users and 17 non-users. Body weight increased by 3.9% and BMI by 3.8% in OAT users 12 months after LNG-IUS insertion (p< 0,01). Hemoglobin and hematocrit levels increased by approximately 10% in both groups. There was no difference between the groups in bleeding patterns, with amenorrhea being the most frequent pattern in both groups (41.2% each) 12 months after LNG-IUS insertion. OAT did not increase the frequency of prolonged and/or frequent bleeding. Conclusion: OAT users and non-users had similar bleeding patterns after insertion of the LNG-IUS. Hemoglobin and hematocrit levels increased in both groups

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2018-10-11T14:26:18Z No. of bitstreams: 1 rafaelguzelladecarvalho.pdf: 5817882 bytes, checksum: 3cecfbefd0364ef85d5c3183dcbdfc47 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-10-16T14:07:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rafaelguzelladecarvalho.pdf: 5817882 bytes, checksum: 3cecfbefd0364ef85d5c3183dcbdfc47 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-16T14:07:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rafaelguzelladecarvalho.pdf: 5817882 bytes, checksum: 3cecfbefd0364ef85d5c3183dcbdfc47 (MD5) Previous issue date: 2015-07-23 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Glicosaminoglicanos (GAGs) são heteropolissacarídeos lineares ligados a um núcleo proteico dos proteoglicanos (PGs). Condroitim sulfato (CS) é GAG sulfatado composto por unidades dissacarídicas repetidas de ácido D-glucurônico e N-acetil-galactosamina, esse composto possui atividades biológicas associadas à interação com diferentes elementos da matriz. Estas ações têm sido relacionadas às suas características estruturais relativas ao elevado teor de grupos sulfato e carboxila que originam domínios estruturais que são conhecidos por participar de funções fisiológicas específicas. O presente trabalho teve por objetivo a identificação e caracterização estrutural dos GAGs extraídos de diferentes tecidos de lula (Doryteuthis plei) bem como a avaliação da atividade anticoagulante destes compostos. Para isso inicialmente determinamos a técnica de extração dos GAGs dos tecidos de manto, nadadeira, tentáculos e pele utilizando degradação com enzimas proteolíticas e purificação utilizando a técnica de cromatografia de troca iônica. Realizamos a identificação dos GAGs com degradações com liases específicas (chases AC e B de F. heparinum), em que ficou evidenciado que CS é o GAG majoritário dos tecidos de D. plei. Os CS encontrados tiveram peso molecular detectados na faixa de 30-50 kDa. A dosagem química de sulfato demonstrou que estes CS possuíam relação superior a 1,2 sulfato/hexosamina o que nos forneceu o indicativo que estas macromoléculas eram supersulfatadas. Este fato foi confirmado pela análise por FACE dos produtos da digestão de CS de manto e nadadeira com chase AC de A. aurescens em que a maior sulfatação foi relacionada à presença de alta proporção de resíduos di-sulfatados, ΔDi4,6S (≈55%). Técnicas espectroscópicas de Raman e RMN permitiram confirmar a maior substituição e sulfatação nas posições 4- e 6- da GalNAc, respectivamente. Os CS de manto e nadadeira ainda demonstraram atividade anticoagulante associada à inibição da via intrínseca da coagulação sendo detectada inibição dos fatores IIa e Xa. Desta forma concluímos que CS-E é o tipo de glicosaminoglicano constituinte nos tecidos de lula e que ele possui características tecido-específica, desempenhando sua atividade anticoagulante de acordo com o padrão de sulfatação. / Glycosaminoglycans (GAGs) are linear heteropolysaccharides attached to a core protein of proteoglycans (PGs). Chondroitin sulfate (CS) is sulfated GAG composed of repeating disaccharide units of D-glucuronic acid and N-acetyl-galactosamine, this compound has biological activities associated to their interaction with different components of the extracellular matrix. These activities have been related to their structural characteristics due to the high content of sulfate and carboxyl groups originating structural domains which are known to participate in specific physiological functions. This aim of this study was the identification and structural characterization of glycosaminoglycans extracted from squid different tissues (Doryteuthis plei) as well as evaluation of the anticoagulant activity of these compounds. Initially, we determined the procedures GAGs extraction in mantle tissue, fin, tentacles and skin using degradation with proteolytic enzymes and purification using ion exchange chromatography. We carried out the identification of GAG to degradation with specific lyases (chases AC and B from F. heparinum), wherein we evidenced that CS is the principal GAG of the D. plei tissues. Molecular weight of CS had a range of 30-50 kDa. Quantification of sulfate groups demonstrated that these CS had higher ratio of sulfate/hexosamine (1.2), a indicative that these macromolecules were oversulfated. This fact was confirmed by FACE analysis of CS from mantle and fin after digestion with chase AC from A. aurescens where most sulfation was related to the presence of high proportion of di-sulfated residues, ΔDi4,6S (≈55%). Raman spectroscopic and NMR techniques confirmed the increased substitution and sulfation in positions 4 and 6 of GalNAc, respectively. CS of the mantle and fin demonstrated anticoagulant activity associated with inhibition of the intrinsic coagulation pathway by inhibition of factors Xa and IIa. Thus, we conclude that CS-E is the kind of glycosaminoglycan constituent in squid tissues and it has tissue-specific characteristics, playing their anticoagulant activity according to the sulfation pattern.

Les prothèses et les endoprothèses vasculaires, une fois implantées dans le corps humain, sont sujettes à un certain nombre de complications. Les infections, les thromboses précoces et les occlusions tardives sont les plus fréquentes, générant des conséquences cliniques très souvent délétères et parfois létales. Les difficultés de prise en charge de ces complications sont à l’origine des efforts déployés dans la recherche de solutions visant à améliorer les matériaux prothétiques. Aucune avancée clinique majeure n’a jusque-là été notée. Des études réalisées antérieurement dans notre laboratoire ont permis de développer des prothèses vasculaires en polyester dotées d’un revêtement de polymère d’hydroxypropyl-&#946;-cyclodextrine capable d’adsorber puis de libérer de manière prolongée divers antibiotiques. Au cours des présents travaux nous avons déterminé les conditions optimales pour une libération effective de trois antibiotiques à partir de ces prothèses revêtues d’hydroxypropyl-&#946;-cyclodextrine. Nous en avons testé l’efficacité dans des modèles in vitro et in vivo d’infections vasculaires. Nous avons eu recours à neuf souches pathogènes parmi les plus fréquemment rencontrées dans ce contexte en pathologie humaine. Nous avons parallèlement évalué in vivo l’innocuité, la tolérance tissulaire et la biocompatibilité de ces prothèses dans la perspective d’une application clinique. Le système développé s’est avéré efficace en libérant in situ sur une huitaine de jours les molécules antibactériennes sélectionnées. Les concentrations requises des solutions ainsi que le temps nécessaire d’imprégnation des prothèses étaient compatibles avec la pratique chirurgicale. Une activité bactéricide par réduction significative de l’adhésion, de la croissance et de la prolifération bactérienne a été observée comparativement aux témoins dans les différents modèles d’infections testés. Nos résultats démontrent aussi la possibilité d’utiliser ces molécules seules ou en association sans qu’il y ait d’antagonisme. Il deviendra ainsi possible de moduler et d’adapter le traitement antibiotique local, délivré in situ, en ciblant les divers pathogènes rencontrés dans le cadre d’infections mono ou polymicrobiennes. Les prothèses revêtues d’hydroxypropyl-&#946;-cyclodextrine ont démontré in vivo une bonne intégration tissulaire et une excellente tolérance locale sans signe de toxicité systémique. [...] / Synthetic vascular prosthesis likewise vascular endoprosthesis are prone to several complications after implantation into the human body. Infections, thromboses and late occlusions are the most challenging and the most common, leading to serious clinical consequences that are sometimes lethal. Management of those complications is still fraught with tremendous difficulties justifying the economic burden and the continuous efforts in research development for improving vascular prosthetic materials. This research investment is, however, yet to yield any great clinical advance. Previous studies conducted in our research laboratory have led to the development of polyester vascular prostheses coated with a polymer of hydroxypropyl-&#946;-cyclodextrin. This was achieved in order to increase the loading and eluting capacities of these vascular prostheses towards several antibiotics. In the current works, we sought to determine the optimal conditions for effective controlled release of three antibiotics from those prosthetic platforms. We have also evaluated their efficacy in both in vitro and in vivo models of vascular infections. This was carried-out against nine different bacteria strains that are among the most common in human vascular infections. Moreover, we have assessed in vivo their safety, their healing properties, their systemic toxicity and their biocompatibility in the prospect of clinical application.The above-mentioned drug delivery system has been proved to be effective in releasing in situ the selected antibacterial agents over a seven-day desorption period in human plasma. Optimal batch concentration and time for prosthetic immersion into the antibiotic solutions were well compatible with current surgical practice standards. A bactericidal activity evidenced by significant reduction of bacterial adhesion, growth and proliferation was revealed when compared to appropriate controls in the various tested vascular infection models. We have also studied antibacterial molecules alone or in combination. In this latter setting, no antagonistic effects were depicted. This provides a unique opportunity to customize local antibiotic treatment delivered in situ from vascular device fabrics and to adapt it to the evolving ecology of both monomicrobial and polymicrobial vascular prosthetic infection. The polyester vascular prostheses coated with a polymer of hydroxypropyl-&#946;-cyclodextrin were proved in vivo safe and demonstrated excellent biocompatibility, healing properties and tissue integration without any signs of systemic toxicity. [...]