FURTADO, E.F. Análise das propriedades antifouling de fios de sutura revestidos com eugenol sobre a formação de biofilmes de streptococcus mutans atc 25175. 2017. 84 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2017. / Submitted by Mestrado Biotecnologia (biotecnologiasobral@gmail.com) on 2017-07-13T18:02:08Z No. of bitstreams: 1 dis_2017_effurtado.pdf: 2411957 bytes, checksum: 486815b549f057f37ebf9161be89287e (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2017-07-14T11:25:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dis_2017_effurtado.pdf: 2411957 bytes, checksum: 486815b549f057f37ebf9161be89287e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-14T11:25:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dis_2017_effurtado.pdf: 2411957 bytes, checksum: 486815b549f057f37ebf9161be89287e (MD5) Previous issue date: 2017-06-15 / Biofilms are microbial communities that are attached to biotic or abiotic surfaces. The presence of these communities in biomedical and dental devices has been one of the growing causes of nosocomial infections, being called infections associated with biomaterials. Streptococcus mutans is a Gram-positive bacterium, member of the oral microbiota, with acidogenic and acidic characteristics. It stands out as the main responsible for the progression of caries and other oral diseases, and may also cause infections in the endocardium and intraabdominal. Sutures are part of an essential procedure in dental practice. They are materials that tend to attract bacteria, forming biofilms, consequently worsening surgical site infections. The development of antiadhesive surfaces, by coating with bioactive substances, has stood out among the strategies that prevent the microbial colonization and subsequent establishment of the biofilm. In this context, natural products have been increasingly studied and applied as promising biotechnological tools. Eugenol, popularly called clove oil, is a member of the phenylpropanoids, has effective pharmacological properties and antibacterial action against a wide variety of gram-positive and gram-negative microorganisms. Thus, the objective of this work was to evaluate the influence of the compound on the antimicrobial activity, as well as the capacity of interaction with cotton suture to prevent adhesion and biofilm formation by Streptococcus mutans ATCC 25175. A minimum inhibitory concentration (MIC), minimal bactericidal concentration (MBC), as well as eugenol antibiofilm assays were performed for several Gram-positive microorganisms of Streptococcus genus separately. Before the obtained, all the microorganisms tested demonstrated to be susceptible to the compound, being S. mutans ATCC 25175 the most relevant, and therefore selected for the antiadhesion tests. On these assays, eugenol showed antiadhesive properties by halving the viability of cells initially adhered to the yarn. The biomass and metabolism of the biofilm formed in the suture also experienced significant reductions of approximately one third and fifty percent, respectively. These data corroborate the eugenol efficacy found in the literature in different strategies. In conclusion, these results demonstrate that the compound has great potential of antimicrobial action, being able to be applied as a coating of surfaces, bringing perspectives for the prevention of diseases associated with biomaterials. / Biofilmes são comunidades microbianas que se encontram aderidas a superfícies bióticas ou abióticas. A presença dessas comunidades em dispositivos biomédicos e odontológicos tem sido uma das causas crescentes de infecções hospitalares, sendo denominadas infecções associadas a biomateriais. Streptococcus mutans é uma bactéria Gram-positiva, membro da microbiota oral, com características acidogênica e acidúrica. Destaca-se como a principal responsável pela progressão da cárie e outras doenças bucais, podendo também ocasionar infecções no endocárdio e intra-abdominais. As suturas fazem parte de um procedimento essencial na prática odontológica. São materiais que tendem a atrair bactérias, formando biofilmes, agravando consequentemente infecções de sítio cirúrgico. O desenvolvimento de superfícies antiadesivas, por revestimento com substâncias bioativas, tem se destacado entre as estratégias que impedem a colonização microbiana e posterior estabelecimento do biofilme. Nesse contexto, os produtos naturais têm sido crescentemente estudados e aplicados como ferramentas biotecnológicas promissoras. O eugenol, popularmente chamado de óleo de cravo, é um membro dos fenilpropanóides, possui propriedades farmacológicas eficazes e ação antibacteriana contra uma ampla variedade de microrganismos Gram-positivos e Gramnegativos. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do composto na atividade antimicrobiana, bem como a capacidade de interação com sutura de algodão em impedir a adesão e formação de biofilme por Streptococcus mutans ATCC 25175. Foi verificada a concentração inibitória mínima (CIM), a concentração bactericida mínima (CBM), assim como ensaios antibiofilme do eugenol, realizado para vários microrganismos Gram-positivos do gênero Streptococcus, separadamente. Diante do obtido, todos os microrganismos testados demonstraram ser suscetíveis ao composto, sendo S. mutans ATCC 25175 o mais relevante, e por isso selecionado para os testes antiadesão. Sobre esses ensaios, o eugenol apresentou propriedades antiadesivas por reduzir pela metade a viabilidade de células inicialmente aderidas ao fio. A biomassa e o metabolismo do biofilme formado na sutura também sofreram reduções expressivas de aproximadamente um terço e cinquenta por cento, respectivamente. Esses dados corroboram a eficácia do eugenol encontrados na literatura em diferentes estratégias. Em conclusão, estes resultados demonstram que o composto possui grande potencial de ação antimicrobiana, podendo ser aplicado como revestimento de superfícies, trazendo perspectivas para a prevenção de doenças associadas à biomateriais.

MONTENEGRO, M.A. Efeito do extrato do bagaço do pendúculo de caju (Anacardium occidentale L.) contra Streptococcus mutans. 2012. 71 f. Dissertação. (MESTRADO EM BIOTECNOLOGIA) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2012. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2017-08-23T13:48:10Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_mamontenegro.pdf: 1919974 bytes, checksum: 87da3b64eae69ed89fb55fe9ea456063 (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2017-09-27T14:58:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_mamontenegro.pdf: 1919974 bytes, checksum: 87da3b64eae69ed89fb55fe9ea456063 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-27T14:58:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_mamontenegro.pdf: 1919974 bytes, checksum: 87da3b64eae69ed89fb55fe9ea456063 (MD5) Previous issue date: 2012 / The Anacardium occidentale L, popularly known as cashew tree, occupies an important place among the fruit trees due to the increasing commercialization of its main products. In northeastern Brazil, its cultivation is one of the main agricultural activities in the region. Concentrating in the states of Ceará, Piauí and Rio Grande do Norte, it is used in folk medicine for various therapeutic purposes, including as an antimicrobial. The cashew apple bagasse is obtained after extracting the juice, being a major source of waste of agribusiness. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial and antibiofilm potential of the hydroalcoholic extract of the cashew apple pomace (ECAP) against the Streptococcus mutans. It was determined the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC) and the preventive assay for biofilm formation through biomass quantification. The Streptococcus mutans strain UA159 was used for this intention. The antimicrobial assay results showed that the ECAP was considered bactericidal (250μg.mL) and was considered bactericidal at the concentration of 1000μg.mL. Inhibition in the biomass was observed at the minimum concentration of 250μg.mL. Thus, it was concluded that the EPAC shows antimicrobial and antibiofilm activity against Streptococcus mutans. These results demonstrate the potential of the ECAP as a possible biotechnological product in the field of dentistry. / O Anacardium occidentale L., conhecido popularmente como cajueiro, ocupa um lugar importante entre as plantas frutíferas devido à crescente comercialização dos seus principais produtos. No nordeste brasileiro, seu cultivo é uma das principais atividades agropecuárias da região. Concentrando-se nos estados do Ceará, Piauí e Rio Grande do Norte, é utilizado na medicina tradicional para diversos fins terapêuticos, inclusive, como antimicrobiano. O bagaço do caju é obtido após a extração do suco, sendo uma importante fonte de resíduos da agroindústria. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o potencial antimicrobiano e antibiofilme do extrato hidroalcoólico do bagaço do pedúnculo do caju (EBPC) frente a bactéria Streptococcus mutans. No presente estudo, determinou-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM), Concentração Bactericida Mínima (CBM) e avaliou-se a inibição da formação de biofilme através da quantificação da biomassa. Para isso, utilizou-se a cepa de S. mutans. Os resultados dos ensaios antimicrobianos mostraram que o EBPC teve ação bacteriostática (CIM = 250 μg.mL-1) e bactericida (CBM = 1000 μg.mL-1). Observou-se inibição da biomassa na concentração mínima de 250 μg.mL-1. Deste modo, concluiu-se que o EBPC apresentou atividade antimicrobiana e antibiofilme frente ao S. mutans. Estes resultados demonstraram o potencial do EBPC como um possível produto biotecnológico na área da odontologia.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-05-30T20:01:31Z No. of bitstreams: 1 CinthiaBeatriceDaSilvaTelles_TESE.pdf: 1798517 bytes, checksum: 1ec7c34c6f828ce70bd877620c9ebb47 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-05-31T22:29:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CinthiaBeatriceDaSilvaTelles_TESE.pdf: 1798517 bytes, checksum: 1ec7c34c6f828ce70bd877620c9ebb47 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-31T22:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CinthiaBeatriceDaSilvaTelles_TESE.pdf: 1798517 bytes, checksum: 1ec7c34c6f828ce70bd877620c9ebb47 (MD5) Previous issue date: 2015-06-26 / Macroalgas marinhas constituem uma fonte extremamente rica de compostos bioativos, dentre eles, polissacar?deos sulfatados. Sargassum filipendula (SF), alga pertencente ? ordem Phaeophycea, ? fonte de heterofucanas conhecidas pela capacidade de modular uma s?rie de fun??es biol?gicas. Considerando a necessidade de encontrar f?rmacos mais eficientes no combate a infec??es microbianas, as heterofucanas de SF foram avaliadas como agentes imunomoduladores e antimicrobianos. As heterofucanas SF0.5V, SF0.7V e SF1.0V apresentaram uma forte atividade imunomoduladora intensificando a libera??o de ?xido n?trico (NO) por macr?fagos murinos (RAW 264.7), bem como, por macr?fagos originados de mon?citos prim?rios humanos. Al?m disso, quando macr?fagos humanos foram infectados por Leishmania infantum e tratados com SF0.5V, SF0.7V e SF1.0V ocorreu um aumento significativo na libera??o extracelular de NO. Como a citotoxicidadede de macrof?gos contra a forma intracelular de leishmanias ? mediada pela produ??o de NO, avaliamos a atividade leishmanicida sobre a forma amastigota intracelular de L. infantum e observamos que macr?fagos infectados e tratados com SF0.5V, SF0.7V e SF1.0V se tornaram menos suscept?veis ? infec??o. As heterofucanas que se mostraram com capacidade de induzir a atividade anti-leishmania tamb?m apresentaram melhor taxa de produ??o de NO, por?m os dados de correla??o levaram a observa??o que este n?o ? o principal mecanismo de a??o das fucanas de SF no combate a esse protozo?rio. A heterofucana SF0.5V tamb?m apresentou atividade inibit?ria da forma??o de biofilme (~ 50%) frente a bact?ria Staphylococcus epidermidis. J? SF0.7V e 1.0V inibiram quase que totalmente a replica??o do protozo?rio Trichomonas vaginalis. Resultados como esse refletem o espectro de a??o desses polissacar?deos sulfatados obtidos de SF e mostram o seu potencial como agentes imunomoduladores e microbicidas. / Fucans, sulphated polysaccharides that contain L-fucose in its constitution, obtained from species of Phaeophyceae of the Sargassum kind, display several biological activities. Heterofucans from Sargassum filipendula are bioactive molecules that contain strong antiproliferative and antioxidant activity. However, their immunomodulatory and antimicrobial activities have not yet been examined. In this context, the aim of this research was to evaluate the heterofucans as for their immunomodulatory capacity and antimicrobial action against Leishmania infantum, Trichomonas vaginalis, Staphylococcus epidermidis and Klebsiella pneumonia (KPC). The five heterofucans obtained from S. filipendula show activities that are distant as stimulants of the immune system and microbial agent. The SF0.5V, SF0.7V amd SF1.0V heterofucans were capable of acting in the activation of murine and human macrophages. In addition to that, SF0.5V has shown antibiofilm activity of S. epidermides and SF0.7V and 1.0V almost completely inhibited the survival of the protozoan T. vaginalis. Results such as this one, reflect the broad range of action of the sulphated polysaccharides obtained from seaweeds, especially from the species S.filipendula

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2018-05-24T14:33:05Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_tony_picoli.pdf: 20734205 bytes, checksum: 9562948ead5815cdb0cbfa769c181bad (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-05-30T12:52:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_tony_picoli.pdf: 20734205 bytes, checksum: 9562948ead5815cdb0cbfa769c181bad (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-30T12:52:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese_tony_picoli.pdf: 20734205 bytes, checksum: 9562948ead5815cdb0cbfa769c181bad (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-11-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A busca por novos fármacos têm levado as pesquisas ao encontro dos produtos naturais que oferecem uma quantidade inimaginável de princípios ativos ainda desconhecidos. A apicultura moderna é um segmento da agropecuária que fornece alguns produtos naturais como a própolis, o mel, a cera, a geleia real e a apitoxina, que vêm sendo alvo de pesquisas devido às diversas atividades biológicas já apresentadas. A apitoxina (veneno de abelhas) é uma complexa mistura de substâncias bioativas, entre elas os peptídeos apamina e melitina. O primeiro tratase da menor neurotoxina conhecida e com apenas 18 aminoácidos em sua composição representa 2% do peso seco do veneno. Já melitina, composta de 26 aminoácidos, corresponde a 50% do peso seco do veneno e é um conhecido peptídeo tóxico capaz de causar lise em diversos tipos celulares. Neste sentido, este estudo objetivou caracterizar estes dois peptídeos quanto à sua citotoxicidade e seu poder antimicrobiano. Através do ensaio de redução do MTT (3-(4,5 dimetiltiazol- 2yl)-2-5-difenil-2H tetrazolato de bromo) foi possível determinar as concentrações citotóxicas de melitina para 50% dos cultivos celulares (CC50), que variou de 2,3 a 4,1 μg/mL e a CC90, que variou de 2,7 a 4,7 μg/mL para diferentes linhagens celulares e, ao expor estas células frente à melitina por diferentes períodos pôde-se observar que com apenas 5 minutos de exposição, houve queda nas viabilidades celulares. Já os ensaios de toxicidade realizados em citometria de fluxo demonstram que, com concentrações de melitina abaixo das consideradas tóxicas pelo ensaio de redução do MTT, as células já apresentavam sinais de toxicidade da melitina, alterando os padrões de apoptose e necrose, aumentando a peroxidação das membranas lipídicas (LPO), assim como a produção intracelular de espécies reativas ao oxigênio (ROS) e da fragmentação de seu DNA. Por microscopia confocal foi possível a observação de focos de apoptose e necrose e do aumento da fluidez das membranas das células proporcional ao aumento da concentração de melitina em que essas foram expostas. Houve correlação positiva entre LPO e ROS (r=0,3158, p<0,05), taxa de apoptose (r= 0,4978, p<0,05) e com a funcionalidade das mitocôndrias (r= 0,3149, p<0,05). LPO parece iniciar os demais eventos de toxicidade celular avaliados e aumentar a funcionalidade mitocondrial em resposta ao estresse sofrido pelas células. Sendo assim, a citometria de fluxo e a microscopia confocal demonstraram eficiência em auxiliar a desvendar os mecanismos de toxicidade de melitina e se portam como técnicas complementares ao ensaio MTT, que avalia a viabilidade celular apenas através da funcionalidade mitocondrial. Quanto à atividade antiviral da melitina, houve a inativação de herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), especialmente na concentração 2μg/ml. Apamina atuando isoladamente não apresentou poder antiviral, porém quando aliada à melitina, apresentou efeito antiviral contra o vírus da diarreia viaral bovina (BVDV). Resultados com padrões semelhantes ocorreram ao analisar o poder virucida das substâncias, quando melitina inativou BoHV-1 em 2 horas de incubação com este vírus mas não apresentou ação contra o BVDV, assim como a apamina, mas a associação potencializou o efeito virucida contra BVDV. Já quanto à atividade antibacteriana, a concentração inibitória mínima (CIM) e bactericida mínima (CBM) de melitina foram, respectivamente (em μg/ml), frente a Staphylococcus aureus (6-7 e 32-64), Escherichia coli (40-42,5 e 64-128) e Pseudomonas aeruginosa (65-70 e 64-128). Biofilmes de S. aureus foram mais sensíveis à ação da melitina quanto comparados aos biofilmes produzidos pelas Gram negativas. Melitina foi capaz de destruir biofilmes pré-formados pelas três espécies bacterianas estudadas além de inibir a formação dos biofilmes por estas espécies quando foram previamente incubadas com melitina em concentrações abaixo da CIM. Os resultados são promissores quanto à capacidade antimicrobiana das substâncias apresentando potencial para o desenvolvimento de novos fármacos e/ou sanitizantes e, os mecanismos de toxicidade avaliados podem auxiliar nesse desenvolvimento. / The search for new drugs leads the researchs to meeting the natural products that offers an unimaginable amount of still unknown active principles. The modern apiculture is a segment of agriculture that provides some natural products such as propolis, honey, wax, royal jelly and apitoxin, which have been the subject of research due to the various biological activities already presented. Apitoxin (bee venom) is a complex mixture of bioactive substances, and between them the peptides apamin and melittin. The first is the smaller known neurotoxin and, with only 18 amino acids in its composition, represent 2% of the dry weight of the venom. Melitin, composed of 26 amino acids, corresponds to 50% of the dry weight of the venom and is a known toxic peptide capable of causing lysis in several cell types. In this sense, this study aims to characterize these two peptides as to their cytotoxicity and their antimicrobial power. By the reduction of MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) - 2-5-diphenyl-2H-tetrazolate bromide) test, it was possible to determine the cytotoxic concentrations of melittin to 50% of the cell cultures (CC50) which ranged from 2.3 to 4.1 μg / mL and CC90, ranging from 2.7 to 4.7 μg / mL for different cell lines, and by expose these cells to melina for different periods it was observed that only 5 minutes of exposure, there was decrease in cellular viability. The toxicity tests performed in flow cytometry shows that, with melittin concentrations below the toxic concentration considerated by the MTT reduction test, the cells showed signs of melittin toxicity, altering the patterns of apoptosis and necrosis, increasing the peroxidation of membranes (LPO), as well as an intracellular production of oxygen reactive species (ROS) and the fragmentation of their DNA. By confocal microscopy it was possible to observe foci of apoptosis, necrosis and the increase of cell membranes fluidity proportional to the increase in the concentration of melittin in which they were exposed. There was a positive correlation between LPO and ROS (r = 0.3158, p <0.05), apoptosis rate (r = 0.4978, p <0.05) and mitochondrial functionality (r = 0.3149, P0.05). LPO seems to initiate the other evaluated events of cellular toxicity and increase mitochondrial functionality in response to the stress undergone by the cells. Therefore, the flow cytometry and confocal microscopy have demonstrated efficiency in helping to unravel the mechanisms of melittin toxicity and behave as complementary techniques to the MTT assay, which evaluates the cellular viability by mitochondrial functionality. As for the antiviral activity of melittin, there was inactivation of bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), especially at 2μg / ml concentration. Apamin acting alone did not present antiviral power, but when allied to melittin, presented antiviral effect against bovine viral diarrhea virus (BVDV). Results with similar patterns ocurred when analyzing the virucidal power of the substances, when melittin inactivated BoHV-1 with 2 hours of incubation with this virus but showed no action against BVDV, as well as apamine, but the association potentiated their virucidal effect against BVDV. As for antibacterial activity, the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) of melittin were, respectively (in μg / mL), against Staphylococcus aureus (6-7 and 32- 64), Escherichia coli (40- 42,5 and 64-128) and Pseudomonas aeruginosa (65-70 and 64-128). Biofilms of S. aureus were more sensitive to the action of melitin compared to biofilms produced by Gram negative bacteria. Melittin was able to destroy preformed biofilms by the three bacterial species studied and inhibited the formation of biofilms by these species when they were previously incubated with melittin at concentrations below MIC. The results are promising as to the antimicrobial capacity of the substances presenting potential for the development of new drugs and / or sanitizers and the mechanisms of toxicity can aid in the development.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / O Anacardium occidentale L., conhecido popularmente como cajueiro, ocupa um lugar importante entre as plantas frutÃferas devido à crescente comercializaÃÃo dos seus principais produtos. No nordeste brasileiro, seu cultivo à uma das principais atividades agropecuÃrias da regiÃo. Concentrando-se nos estados do CearÃ, Piauà e Rio Grande do Norte, à utilizado na medicina tradicional para diversos fins terapÃuticos, inclusive, como antimicrobiano. O bagaÃo do caju à obtido apÃs a extraÃÃo do suco, sendo uma importante fonte de resÃduos da agroindÃstria. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o potencial antimicrobiano e antibiofilme do extrato hidroalcoÃlico do bagaÃo do pedÃnculo do caju (EBPC) frente a bactÃria Streptococcus mutans. No presente estudo, determinou-se a ConcentraÃÃo InibitÃria MÃnima (CIM), ConcentraÃÃo Bactericida MÃnima (CBM) e avaliou-se a inibiÃÃo da formaÃÃo de biofilme atravÃs da quantificaÃÃo da biomassa. Para isso, utilizou-se a cepa de S. mutans. Os resultados dos ensaios antimicrobianos mostraram que o EBPC teve aÃÃo bacteriostÃtica (CIM = 250 Âg.mL-1) e bactericida (CBM = 1000 Âg.mL-1). Observou-se inibiÃÃo da biomassa na concentraÃÃo mÃnima de 250 Âg.mL-1. Deste modo, concluiu-se que o EBPC apresentou atividade antimicrobiana e antibiofilme frente ao S. mutans. Estes resultados demonstraram o potencial do EBPC como um possÃvel produto biotecnolÃgico na Ãrea da odontologia. / The Anacardium occidentale L, popularly known as cashew tree, occupies an important place among the fruit trees due to the increasing commercialization of its main products. In northeastern Brazil, its cultivation is one of the main agricultural activities in the region. Concentrating in the states of CearÃ, Piauà and Rio Grande do Norte, it is used in folk medicine for various therapeutic purposes, including as an antimicrobial. The cashew apple bagasse is obtained after extracting the juice, being a major source of waste of agribusiness. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial and antibiofilm potential of the hydroalcoholic extract of the cashew apple pomace (ECAP) against the Streptococcus mutans. It was determined the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC) and the preventive assay for biofilm formation through biomass quantification. The Streptococcus mutans strain UA159 was used for this intention. The antimicrobial assay results showed that the ECAP was considered bactericidal (250&#956;g.mL) and was considered bactericidal at the concentration of 1000&#956;g.mL. Inhibition in the biomass was observed at the minimum concentration of 250&#956;g.mL. Thus, it was concluded that the EPAC shows antimicrobial and antibiofilm activity against Streptococcus mutans. These results demonstrate the potential of the ECAP as a possible biotechnological product in the field of dentistry.

Fungos isolados de organismos marinhos têm despertado o interesse de pesquisadores no mundo inteiro, por representarem uma fonte diferenciada de metabólitos secundários, devido às condições ambientais as quais esses microrganismos estão sujeitos. Diversas atividades biológicas têm sido relatadas para estas substâncias, principalmente antitumoral, antimicrobiano e antiparasitária. O crescente aumento nos casos de resistência a antibióticos aponta para a necessidade da disponibilidade de novos agentes terapêuticos. Neste contexto, este trabalho objetivou a identificação dos fungos associados a organismos marinhos coletados na Ilha do Arvoredo (SC), visando o isolamento bioguiado de metabólitos de extratos de micélio e meios de cultivo. As atividades antibiótica e antibiofilme frente aos patógenos Staphylococcus epidermidis ATCC 35984 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 e anti-Trichomonas vaginalis ATCC 30236 e isolados clínicos, foram investigadas. Todos os fungos isolados foram cultivados por períodos de 7, 14 e 21 dias. Utilizando técnicas moleculares, foram identificados 37 fungos pertencentes ao Filo Ascomycota e um ao Filo Basidiomycota, distribuídos entre 15 diferentes gêneros. O rastreamento de metabólitos quanto à atividade antibiótica foi realizado utilizando a técnica de difusão em agar, obtendo-se 19 amostras com halos de inibição superiores a 10 mm de diâmetro. As atividades antiformação e erradicação de biofilme previamente formado foram avaliadas pelo método de coloração com cristal violeta, e 5% do total de amostras apresentaram inibição de formação e 1% a erradicação de mais de 75% de biofilme de S. epidermidis. Da mesma forma, 5% das amostras foram capazes de inibir ou erradicar entre 51% e 75% biofilmes de P. aeruginosa. Entre os isolados, foram selecionados um fungo pertencente à ordem Sordariales (isolado F22, 14 dias de cultivo) e outro ao gênero Penicillium (isolado F37, 7 dias de cultivo). Os filtrados dos fungos foram particionados com acetato de etila e submetidos à separação cromatográfica, levando à identificação dos compostos mevalonolactona e cis-cyclo(leucyl-tyrosyl) (identificados por técnicas espectroscópicas e espectrométricas), ambos ativos na inibição da formação de biofilme de S. epidermidis ATCC. Mevalonolactona também apresentou atividade frente a isolados clínicos de S. epidermidis revelando, além da atividade antibiofilme, atividade antibiótica em concentração de 0,06 mg/mL. A atividade frente ao parasita T. vaginalis foi avaliada pela técnica de coloração de resazurina e a viabilidade dos trofozoítos caracterizada utilizando trypan blue. Duas amostras dos fungos Hipocrea lixii e Penicillium citrinum mostraram a presença de metabólitos ativos. A inibição do crescimento dos trofozoítos foi observada em 24 horas (MIC=2,5 mg/mL), de acordo com a curva cinética de crescimento. A ausência de hemólise de eritrócitos também foi observada para estas duas amostras. Os resultados obtidos corroboram com os relatos sobre o grande potencial dos fungos marinhos para a descoberta de metabólitos ativos. / Fungi isolated from marine organisms attract the interest of many researchers around the world, since they produce differentiated secondary metabolites due to the environmental conditions to which these organisms are subjected. Several biological activities have been reported for these compounds, mainly as antitumoral, antibacterial and, antiprotozoal. The increasing cases of antimicrobial drug resistance reveal the necessity for the search for new therapeutic agents. In this context, this study aimed to identify the fungi associated with marine organisms collected in the Arvoredo Island (SC/Brazil), in order to isolate bioactive metabolites in extracts of mycelia and broth. The antibiotic and antibiofilm activities against Staphylococcus epidermidis ATCC 35984 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and anti-Trichomonas vaginalis ATCC 30236 and clinical isolates activity were investigated. The isolated fungi from marine organisms were cultured for 7, 14 and 21 days. Using molecular techniques, 36 fungi belonging to the Ascomycota and one to Basidiomycota phyla, were identified, distributed among 15 different genera. Screening for metabolites possessing antibiotic activity was performed using the agar diffusion assay, for which was obtained 19 samples with inhibition halo higher than 10 mm in diameter. The inhibition and eradication of biofilm were performed by cristal violet staining method, and 5% of the total samples showed inhibition and 1% eradication of more than 75% of S. epidermidis biofilm. Moreover, 5% of the samples were able to inhibit and eradicate between 51% and 75% of biofilm formed by P. aeruginosa. Among these samples, one strain belonging to the order Sordariales (isolate F22, 14-days of cultive) and one to the genus Penicillium (isolate F37, 7-days of cultive) were selected. The filtrate was extracted with ethyl acetate and subjected to separation by chromatographic techniques, leading to purified compounds mevalonolactone and cis-cyclo(leucyl-tyrosyl) (identified by spectroscopic and spectrometric techniques), both able to inhibit biofilm formation by S. epidermidis ATCC. Mevalonolactone also showed activity against clinical isolates of S. epidermidis revealing, both antibiofilm and antibiotic activities at 0.06 mg.mL-1. The anti-T. vaginalis assay was carried out using the resazurin staining method andviability of trophozoites were characterized using trypan blue. Two samples of the fungi Hypocrea lixii and Penicillium citrinum showed the presence of active metabolites able to inhibit the trophozoites growth in 24 hours (MIC = 2.5 mg.mL-1), according to the kinetic curve of growth. Absence of hemolysis of erythrocytes was also observed for these two filtrate samples. The results corroborate with the reports of the great potential of marine fungi in the discovery of active metabolites.

Fungos isolados de organismos marinhos têm despertado o interesse de pesquisadores no mundo inteiro, por representarem uma fonte diferenciada de metabólitos secundários, devido às condições ambientais as quais esses microrganismos estão sujeitos. Diversas atividades biológicas têm sido relatadas para estas substâncias, principalmente antitumoral, antimicrobiano e antiparasitária. O crescente aumento nos casos de resistência a antibióticos aponta para a necessidade da disponibilidade de novos agentes terapêuticos. Neste contexto, este trabalho objetivou a identificação dos fungos associados a organismos marinhos coletados na Ilha do Arvoredo (SC), visando o isolamento bioguiado de metabólitos de extratos de micélio e meios de cultivo. As atividades antibiótica e antibiofilme frente aos patógenos Staphylococcus epidermidis ATCC 35984 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 e anti-Trichomonas vaginalis ATCC 30236 e isolados clínicos, foram investigadas. Todos os fungos isolados foram cultivados por períodos de 7, 14 e 21 dias. Utilizando técnicas moleculares, foram identificados 37 fungos pertencentes ao Filo Ascomycota e um ao Filo Basidiomycota, distribuídos entre 15 diferentes gêneros. O rastreamento de metabólitos quanto à atividade antibiótica foi realizado utilizando a técnica de difusão em agar, obtendo-se 19 amostras com halos de inibição superiores a 10 mm de diâmetro. As atividades antiformação e erradicação de biofilme previamente formado foram avaliadas pelo método de coloração com cristal violeta, e 5% do total de amostras apresentaram inibição de formação e 1% a erradicação de mais de 75% de biofilme de S. epidermidis. Da mesma forma, 5% das amostras foram capazes de inibir ou erradicar entre 51% e 75% biofilmes de P. aeruginosa. Entre os isolados, foram selecionados um fungo pertencente à ordem Sordariales (isolado F22, 14 dias de cultivo) e outro ao gênero Penicillium (isolado F37, 7 dias de cultivo). Os filtrados dos fungos foram particionados com acetato de etila e submetidos à separação cromatográfica, levando à identificação dos compostos mevalonolactona e cis-cyclo(leucyl-tyrosyl) (identificados por técnicas espectroscópicas e espectrométricas), ambos ativos na inibição da formação de biofilme de S. epidermidis ATCC. Mevalonolactona também apresentou atividade frente a isolados clínicos de S. epidermidis revelando, além da atividade antibiofilme, atividade antibiótica em concentração de 0,06 mg/mL. A atividade frente ao parasita T. vaginalis foi avaliada pela técnica de coloração de resazurina e a viabilidade dos trofozoítos caracterizada utilizando trypan blue. Duas amostras dos fungos Hipocrea lixii e Penicillium citrinum mostraram a presença de metabólitos ativos. A inibição do crescimento dos trofozoítos foi observada em 24 horas (MIC=2,5 mg/mL), de acordo com a curva cinética de crescimento. A ausência de hemólise de eritrócitos também foi observada para estas duas amostras. Os resultados obtidos corroboram com os relatos sobre o grande potencial dos fungos marinhos para a descoberta de metabólitos ativos. / Fungi isolated from marine organisms attract the interest of many researchers around the world, since they produce differentiated secondary metabolites due to the environmental conditions to which these organisms are subjected. Several biological activities have been reported for these compounds, mainly as antitumoral, antibacterial and, antiprotozoal. The increasing cases of antimicrobial drug resistance reveal the necessity for the search for new therapeutic agents. In this context, this study aimed to identify the fungi associated with marine organisms collected in the Arvoredo Island (SC/Brazil), in order to isolate bioactive metabolites in extracts of mycelia and broth. The antibiotic and antibiofilm activities against Staphylococcus epidermidis ATCC 35984 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and anti-Trichomonas vaginalis ATCC 30236 and clinical isolates activity were investigated. The isolated fungi from marine organisms were cultured for 7, 14 and 21 days. Using molecular techniques, 36 fungi belonging to the Ascomycota and one to Basidiomycota phyla, were identified, distributed among 15 different genera. Screening for metabolites possessing antibiotic activity was performed using the agar diffusion assay, for which was obtained 19 samples with inhibition halo higher than 10 mm in diameter. The inhibition and eradication of biofilm were performed by cristal violet staining method, and 5% of the total samples showed inhibition and 1% eradication of more than 75% of S. epidermidis biofilm. Moreover, 5% of the samples were able to inhibit and eradicate between 51% and 75% of biofilm formed by P. aeruginosa. Among these samples, one strain belonging to the order Sordariales (isolate F22, 14-days of cultive) and one to the genus Penicillium (isolate F37, 7-days of cultive) were selected. The filtrate was extracted with ethyl acetate and subjected to separation by chromatographic techniques, leading to purified compounds mevalonolactone and cis-cyclo(leucyl-tyrosyl) (identified by spectroscopic and spectrometric techniques), both able to inhibit biofilm formation by S. epidermidis ATCC. Mevalonolactone also showed activity against clinical isolates of S. epidermidis revealing, both antibiofilm and antibiotic activities at 0.06 mg.mL-1. The anti-T. vaginalis assay was carried out using the resazurin staining method andviability of trophozoites were characterized using trypan blue. Two samples of the fungi Hypocrea lixii and Penicillium citrinum showed the presence of active metabolites able to inhibit the trophozoites growth in 24 hours (MIC = 2.5 mg.mL-1), according to the kinetic curve of growth. Absence of hemolysis of erythrocytes was also observed for these two filtrate samples. The results corroborate with the reports of the great potential of marine fungi in the discovery of active metabolites.

Fungos isolados de organismos marinhos têm despertado o interesse de pesquisadores no mundo inteiro, por representarem uma fonte diferenciada de metabólitos secundários, devido às condições ambientais as quais esses microrganismos estão sujeitos. Diversas atividades biológicas têm sido relatadas para estas substâncias, principalmente antitumoral, antimicrobiano e antiparasitária. O crescente aumento nos casos de resistência a antibióticos aponta para a necessidade da disponibilidade de novos agentes terapêuticos. Neste contexto, este trabalho objetivou a identificação dos fungos associados a organismos marinhos coletados na Ilha do Arvoredo (SC), visando o isolamento bioguiado de metabólitos de extratos de micélio e meios de cultivo. As atividades antibiótica e antibiofilme frente aos patógenos Staphylococcus epidermidis ATCC 35984 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 e anti-Trichomonas vaginalis ATCC 30236 e isolados clínicos, foram investigadas. Todos os fungos isolados foram cultivados por períodos de 7, 14 e 21 dias. Utilizando técnicas moleculares, foram identificados 37 fungos pertencentes ao Filo Ascomycota e um ao Filo Basidiomycota, distribuídos entre 15 diferentes gêneros. O rastreamento de metabólitos quanto à atividade antibiótica foi realizado utilizando a técnica de difusão em agar, obtendo-se 19 amostras com halos de inibição superiores a 10 mm de diâmetro. As atividades antiformação e erradicação de biofilme previamente formado foram avaliadas pelo método de coloração com cristal violeta, e 5% do total de amostras apresentaram inibição de formação e 1% a erradicação de mais de 75% de biofilme de S. epidermidis. Da mesma forma, 5% das amostras foram capazes de inibir ou erradicar entre 51% e 75% biofilmes de P. aeruginosa. Entre os isolados, foram selecionados um fungo pertencente à ordem Sordariales (isolado F22, 14 dias de cultivo) e outro ao gênero Penicillium (isolado F37, 7 dias de cultivo). Os filtrados dos fungos foram particionados com acetato de etila e submetidos à separação cromatográfica, levando à identificação dos compostos mevalonolactona e cis-cyclo(leucyl-tyrosyl) (identificados por técnicas espectroscópicas e espectrométricas), ambos ativos na inibição da formação de biofilme de S. epidermidis ATCC. Mevalonolactona também apresentou atividade frente a isolados clínicos de S. epidermidis revelando, além da atividade antibiofilme, atividade antibiótica em concentração de 0,06 mg/mL. A atividade frente ao parasita T. vaginalis foi avaliada pela técnica de coloração de resazurina e a viabilidade dos trofozoítos caracterizada utilizando trypan blue. Duas amostras dos fungos Hipocrea lixii e Penicillium citrinum mostraram a presença de metabólitos ativos. A inibição do crescimento dos trofozoítos foi observada em 24 horas (MIC=2,5 mg/mL), de acordo com a curva cinética de crescimento. A ausência de hemólise de eritrócitos também foi observada para estas duas amostras. Os resultados obtidos corroboram com os relatos sobre o grande potencial dos fungos marinhos para a descoberta de metabólitos ativos. / Fungi isolated from marine organisms attract the interest of many researchers around the world, since they produce differentiated secondary metabolites due to the environmental conditions to which these organisms are subjected. Several biological activities have been reported for these compounds, mainly as antitumoral, antibacterial and, antiprotozoal. The increasing cases of antimicrobial drug resistance reveal the necessity for the search for new therapeutic agents. In this context, this study aimed to identify the fungi associated with marine organisms collected in the Arvoredo Island (SC/Brazil), in order to isolate bioactive metabolites in extracts of mycelia and broth. The antibiotic and antibiofilm activities against Staphylococcus epidermidis ATCC 35984 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and anti-Trichomonas vaginalis ATCC 30236 and clinical isolates activity were investigated. The isolated fungi from marine organisms were cultured for 7, 14 and 21 days. Using molecular techniques, 36 fungi belonging to the Ascomycota and one to Basidiomycota phyla, were identified, distributed among 15 different genera. Screening for metabolites possessing antibiotic activity was performed using the agar diffusion assay, for which was obtained 19 samples with inhibition halo higher than 10 mm in diameter. The inhibition and eradication of biofilm were performed by cristal violet staining method, and 5% of the total samples showed inhibition and 1% eradication of more than 75% of S. epidermidis biofilm. Moreover, 5% of the samples were able to inhibit and eradicate between 51% and 75% of biofilm formed by P. aeruginosa. Among these samples, one strain belonging to the order Sordariales (isolate F22, 14-days of cultive) and one to the genus Penicillium (isolate F37, 7-days of cultive) were selected. The filtrate was extracted with ethyl acetate and subjected to separation by chromatographic techniques, leading to purified compounds mevalonolactone and cis-cyclo(leucyl-tyrosyl) (identified by spectroscopic and spectrometric techniques), both able to inhibit biofilm formation by S. epidermidis ATCC. Mevalonolactone also showed activity against clinical isolates of S. epidermidis revealing, both antibiofilm and antibiotic activities at 0.06 mg.mL-1. The anti-T. vaginalis assay was carried out using the resazurin staining method andviability of trophozoites were characterized using trypan blue. Two samples of the fungi Hypocrea lixii and Penicillium citrinum showed the presence of active metabolites able to inhibit the trophozoites growth in 24 hours (MIC = 2.5 mg.mL-1), according to the kinetic curve of growth. Absence of hemolysis of erythrocytes was also observed for these two filtrate samples. The results corroborate with the reports of the great potential of marine fungi in the discovery of active metabolites.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-05-13T18:09:13Z No. of bitstreams: 1 fabiodesouzafernandes.pdf: 24065820 bytes, checksum: da2a7ed64d78294c49d6e226495eda40 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-27T21:20:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fabiodesouzafernandes.pdf: 24065820 bytes, checksum: da2a7ed64d78294c49d6e226495eda40 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-27T21:20:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fabiodesouzafernandes.pdf: 24065820 bytes, checksum: da2a7ed64d78294c49d6e226495eda40 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Na Química Medicinal, dentre as várias técnicas de planejamento racional para a síntese de novas moléculas bioativas, a hibridação é umas das mais usadas. A união de dois ou mais compostos biologicamente ativos, no intuito de se criar um novo fármaco que conserve as propriedades biológicas das moléculas base e/ou crie uma nova atividade biológica para o composto híbrido, faz desta técnica um caminho rápido, eficaz e oportuno no descobrimento de novos candidatos a fármacos. Sinteticamente, dentre os vários métodos de junção de duas ou mais moléculas a Reação de Mannich está entre as metodologias aplicadas para isto. Este primeiro capítulo trata da síntese N-bases de Mannich derivadas da pirazinamida, que resultou na obtenção de dezenove compostos inéditos. Em um primeiro momento, foi realizada a tentativa de síntese de N-bases de Mannich derivadas da pirazinamida, utilizando três diferentes aminoálcoois Nalquilados. O desenvolvimento da metodologia mostrou que a reação era dependente do pH, tendo este que ser básico. No entanto, a baixa conversão da reação, juntamente com a difícil purificação do produto, uma vez que o mesmo apresentava o mesmo fator de retenção da pirazinamida e alta instabilidade impedindo qualquer funcionalização in situ inviabilizou qualquer possibilidade de continuação desta síntese. Desta forma, foi feita a substituição dos aminoálcoois N-aquilados por piperazinas N-substituídas, contendo cadeias lipofílicas, uma porção D-galactose, amidas lipofílicas, aminoalcoóis aromáticos e heteroaromáticos, sendo sintetizados 5 derivados inéditos da piperazina. A partir da reação de Mannich das piperazinas Nsubstituídas com a pirazinamida foram obtidas quatorze N-Bases de Mannich inéditas. Tanto as piperazinas N-substituídas como as N-bases de Mannich sintetizadas, foram submetidas à avaliação de suas atividades antibacterianas, antibiofilme e antituberculose, sendo que os resultados para atividade antibiofilme apresentaram bastante promissores. As lactamas são amidas cíclicas presentes em vários produtos naturais e em compostos sintéticos com atividade biológica. Devido a esta importância dentro da química medicinal, várias são as estratégias desenvolvidas para a síntese destes anéis heterocíclicos, com o objetivo de se conseguir uma síntese rápida, eficiente, estereoseletiva e utilizando a química verde para destes compostos. Dentre as várias metodologias sintéticas que permitem a obtenção estereoseletiva de Lactamas está à reação de Mannich-Acilação, inicialmente desenvolvida por Castagnoli em 1969 e aperfeiçoada recentemente pelo grupo de pesquisa do Professor Dr. Jared Shaw. Sendo assim, o segundo capítulo aborda desenvolvimento de uma metodologia a paritr da reação de Mannich-Acilação para a síntese de δ-lactamas como suporte para um estudo computacional sobre o mecanismo e estereoseletividade da reação. Para isso, a síntese do anidrido altamente reativo α-ciano glutárico, bem como, dos anidridos α- ciano glutárico substituídos com grupos metila ou fenila nas posições β ou γ foram realizadas. O escopo e as limitações da reação imina-anidrido com uma ampla variedade de iminas também foi investigada. As reações contendo aminas substituídas por grupos alquil volumosos e aromáticos foram mais diastereoseletivas. Já as reações envolvendo o uso dos anidridos α-ciano glutáricos não substituídos e contendo os grupos metila e fenila na posição β mostraram-se altamente diastereoseletivas, enquanto que para as reações envolvendo o anidrido α-ciano glutárico substituídos na posição γ houve uma perda da seletividade. Os estudos computacionais mostraram que a origem do estereocontrole da reação se dá na etapa de acilação, onde efeitos estéreos e trans anulares para o estado de transição na forma eclipsada justificam a formação do produto majoritário tendo uma relação syn entre os grupos carboxilato e fenil. Neste capítulo também foram exploradas algumas aplicações, no que diz respeito à utilização das δ-lactamas como possíveis inibidores da proteína FtsZ, em um estudo onde as δ-lactamas serviram como substratos na reação clássica de descarboxilação alilativa e na síntese dos produtos naturais Gelsidilam e Gelgamina B tendo a reação de Mannich-Acilação desenvolvida neste capítulo como uma das etapas chave. / In the Medicinal Chemistry, there are many techniques for development of new bioactive molecules. One way to do a rational planning of new drugs is using the molecular hybridization technique. In the molecular hybridization, the combination of two or more biologically active compounds in order to create a new pro-drug that preserves the biological properties or improve efficacy when compared to the parent drugs, makes this technique a quick way, effective and timely in the discovery of new drug candidates. Mannich reaction can be applicable to combine two or more fragments of drugs with biological activity. The first chapter will show the synthesis of new N-Mannich bases derived from pyrazinamide, which resulted in the synthesis of nineteen novel compounds. First of all, we tried to make the synthesis of new N-Mannich bases from of reaction between pyrazinamide, formaldehyde and N-alkylated amino alcohols. The development of this methodology showed that the reaction was pH dependent and it had to be basic. So we tried to control the pH of reaction using some bases, but the lower conversion of reaction together with the difficult purification of the product and the high instability led to an unsuccessful planning to get the products desired. Because of this, was made replacing of N-alkylated amino alcohols by N-substituted piperazines having lipophilic chain, D-galactose moiety, lipophilic amides, aromatic and heteroaromatic amino alcohols. With these new components we ran the Mannich reactions and was possible to synthesize fourteen novel N-Mannich bases. The N-substituted piperazines and N-Mannich bases synthesized were evaluated by antibacterial, antibiofilm and antituberculosis activities. The results of antibiofilm and antibacterial activity for some hybrids were very promising. In the second chapter, was developed a methodology to the synthesis of δ- lactams from cycloaddition between imines and cyano glutaric anhydrides like a support to mechanism and diastereoselectivity study of reaction. For this was made the synthesis of β, γ-substituted and unsubstituted cyano anhydrides. The scope of reaction was studied using differents amines and aldehydes. The reactions that were ran with bulky alkyl-substituted amines or aromatic amines were more selective than methylamine. The reactions involving the use of α-cyano-glutaric anhydrides unsubstituted or containing methyl groups and phenyl in the β position showed high diastereoselectivity. Reactions using the γ substituted anhydrides had a poor diastereoselectivity. Computational studies showed that acylation step is a determinant factor to diastereoselectivity, where the eclipsed transition state to anti product has steric and trans anular effects. Some applications of -lactams were made in other studies involving Tethering technique, decarboxylative allylation and total synthesis of Gelsedilam and Gelegamine B.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-27T14:21:32Z No. of bitstreams: 1 osmarnascimentosilva.pdf: 5346948 bytes, checksum: c6c4bb9eae4172e04c4553f57d4e27d0 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-27T15:15:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 osmarnascimentosilva.pdf: 5346948 bytes, checksum: c6c4bb9eae4172e04c4553f57d4e27d0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T15:15:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 osmarnascimentosilva.pdf: 5346948 bytes, checksum: c6c4bb9eae4172e04c4553f57d4e27d0 (MD5) Previous issue date: 2015-04-28 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Com o aumento na incidência de infecções resistentes a múltiplos antibióticos, existe hoje um grande interesse pelos peptídeos antimicrobianos (PAMs) como modelos para a produção de novos antibióticos. Os PAMs são mediadores multifuncionais da resposta imune inata, com atividade antibacteriana direta. O uso de PAMs como agentes terapêuticos tem algumas limitações, como a estabilidade, a toxicidade e alta massa molecular. Apesar dessas limitações, eles apresentam propriedades compensatórias, como imunomodulatória e antitumoral bem como a capacidade de inibir β-lactamases. O desenho racional de PAMs tem sido usado para gerar análogos com atividade melhorada. No presente trabalho avaliamos a atividade antibacteriana in vitro e in vivo da clavanina A e através da modificação incremental criamos dois análogos dos peptídeos mostoparano-L e clavanina A (clavanina-MO e mastoparanoMO),além disso, utilizamos o desenho racional de peptídeos para a criação de dois inibidores de β-lactamase (dBLIPs 1 e 2). A clavanina A mostrou se eficiente na eliminação de S. aureus em um modelo de infecção de ferida e impediu o início da sepse e, assim, reduziu a mortalidade de camundongos infectados em um modelo de infecção bacteriana sistêmica. A clavanina-MO e mastoparano-MO impediram o crescimento de bactérias planctônicas e levaram à erradicação de biofilmes bacterianos maduros. Os peptídeos modificados mostram-se promissores como agentes terapêuticos contra infecções bacterianas sistêmicas e biofilmes causadas por uma variedade de bactérias. dBLIP-1 e dBLIP-2 em combinação com antibióticos convencionais foram eficazes na eliminação de Escherichia coli e Staphylococcus aureus que expressam β-lactamases em um modelo murino de infecção sistêmica. dBLIPs 1 e 2 fornecem pistas para superar a resistência à base de β-lactamase. / With the increased incidence of multiple antibiotic resistant infections, there is huge interesting in antimicrobial peptides (AMPs) as templates to produce novel antibiotics. The AMPs are multifunctional mediators of innate immune response with direct antibacterial activities. Nevertheless, the use of AMPs as therapeutic agents has certain limitations such as stability, toxicity and high molecular mass. Despite such limitations, they show additional properties such as antitumor and immunomodulatory as well as the ability to inhibit β-lactamases. Furthermore, the rational AMPs design has been used to produce analogues with improved activity. In the present study, we utilized the rational AMPs design for generation of two β-lactamase inhibitors (dBLIPs 1 and 2) and through two incremental modification created analogues of clavanin A and mostoparan-L (clavanin-MO and mastoparan-MO respectively) peptides. Both inhibitors in combination with conventional antibiotics were effective for control of Staphylococcus aureus and Escherichia coli expressing β-lactamase in a murine model of systemic infection. dBLIPs 1 and 2 provide clues to overcome resistance to β-lactamase base. The clavanin-MO and mastoparan-MO prevented the growth of planktonic bacteria, leading to the mature biofilm eradication of pathogenic Gram-negative and -positive. The clavanina-MO and mastoparan-MO are promising therapeutic agents against systemic infections and bacterial biofilms caused by a wide bacterial variety.