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Desenvolvimento de marcadores moleculares para identificação de Isolados Clínicos de Candida spp.

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Previous issue date: 2007-08-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The vulvovaginal candidiasis (VVC) it is one of the most frequent vaginal infections.
The yeasts of the genus Candida are the etiologic agents of this infection, being Candida
albicans the majority responsible. However, an increase has been verifying in the incidence of
infections caused by other species ( C. glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis and C. krusei).
With intention of presenting an inclination for the process of identification of Candida's five
species, commonly isolated of the vulva and vagina, it was made the analysis of species -
specific molecular markers for the region ITS1 -5.8S-ITS2, of the rDNA. The analysis of the
nucleotides sequences of that region came quite conserved for the strains of a same species
and, parallel, divergent among the species of the genus. The markers were translated in
nucleotides segments, of the whic h it was possible to develop species -specific
oligonucleotides technically proper, besides ranches enzymatic inter and intra -specific
capable of to identify/differentiate Candida's species. A parallel analysis of the " fingerprint ",
generated by simple PCR, it verified the inadequability of the use of the universal
oligonucleotídeos ITS1, ITS2, ITS3 and ITS4 for the identification of those species. In a
contrary way, the developed species -specific oligonucleotides came efficient corroborating, in
practice, with the hypothesis presented in this work. Restriction enzymes selected for the
differentiation of Candida's species they constitute an alternative to be explored hereafter, in
experiments of PCR-RFLP. / A candidíase vulvovaginal (CVV) é uma das mais freqüentes infecções vaginais. As
leveduras do gênero Candida são os agentes etiológicos desta infecção, sendo Candida
albicans a responsável majoritária. Contudo, tem -se verificado um aumento na incidência de
infecções causadas por outras espécies (C. glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis e C.
krusei). Com intuito de apresentar um viés para o processo de identificação das cinco espécies
de Candida, comumente isoladas da vulv a e vagina, foi feita a análise de marcadores
moleculares espécie-específicos para a região ITS1-5.8S-ITS2, do rDNA. A análise das
seqüências nucleotídicas dessa região apresentou-se bastante conservada para as cepas de uma
mesma espécie e, paralelamente, divergente entre as espécies do gênero. Os marcadores se
traduziram em segmentos nucleotídicos, dos quais foi possível dese nvolver oligonucleotídeos
espécie-específicos tecnicamente apropiados, além de sítios enzimáticos inter e intraespecíficos
capazes de identificar/diferenciar as espécies de Candida. Uma análise paralela do
fingerprint , gerado por simples PCR, constatou a inadequabilidade do uso dos
oligonucleotídeos universais ITS1, ITS2, ITS3 e ITS4 para a identificação dessas espécies. De
forma contrária, os oligonucleotídeos espécie -específicos desenvolvidos apresentaram-se
eficientes corroborando, na prática, com a hipótese apresentada neste trabalho . Enzimas de
restrição selecionadas para a diferenciação das espécies de Candida constituem uma
alternativa a ser explorada futuramente, em experimentos de PCR -RFLP.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/2237
Date09 August 2007
CreatorsOliveira, Hugo Valério Corrêa de
ContributorsMartins, Adriana Sotero
PublisherUniversidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFAM, BR, Instituto de Ciências Biológicas
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
Relation32215883775770440, 600

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