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Análise cromatográfica, morfológica e molecular da síntese do oleoresina em plantas jovens de Copaifera multijuga hayne (fabaceae – caesalpinioideae)

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Previous issue date: 2011-09-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Adult plants Copaifera genus are known to have one of the
resin oils most commonly used in folk medicine, which credited to several
pharmacological and cosmetic properties. In plant oil resin produced in
secondary xylem, is used for its defense against various internal agents and
external. In this paper we analyzed the essential oil extracted in young plants
Copaifera Hayne multijuga in order to confirm the presence of coding sequences
enzymes responsible for synthesis of oil and to generate a cDNA library. To the
oil extraction was used the technique of steam distillation in Clevenger apparatus
modified and then the spectrophotometric analysis of masses for classification of
sesquiterpene compounds (essential oil). In chromatographic analysis allowed
identification of various compounds present in both the young plant as the plant
the adult Copaifera gender, such as ß-caryophyllene, α-copaene, D germacrene, α-
humulene, δ-cadineno, γ-elemene, α-cubebeno and α-bergamotene etc.
Minority studied. In one approach we used immunohistochemistry methods
microscopic to locate secretory canals of the plant, where slides were
prepared using semi-automated microtome, stained blue solution
toluidine reagent and NADI. After these analyzes, proved the presence of these
secretory ducts in young leaves, a cDNA library was constructed, utilizandose
as a source of mRNA similar biological material (young leaves of C. multijuga), and
subsequently their nucleotides sequenced by pirosenquenciamento the
which was analyzed by computational biology, using programs prioritized
biosynthesis of terpenes and sesquiterpenes, where their coding sequences
enzymes were found, showing engagement of the mRNA in the oil construction
not essential in adult plants of this species. Using techniques
chromatography to identify phytochemicals compounds, together with methods
histological and then the sequencing of genes expressed in young leaves
and therefore the secretory oil rosin, allow confirmation of the biosynthesis
various substances present in this oil as well as their metabolic pathways. Those
Data are presented for the first time together, believing that they can
helping to open new frontiers in research and development
biotechnologies based upon its results. / As plantas adultas do gênero Copaifera são conhecidas por possuírem um dos
óleos resina mais utilizados na medicina popular, ao qual creditam-se diversas
propriedades farmacológicas e cosméticas. Na planta, o óleo resina, produzido no
xilema secundário, é utilizado para sua defesa contra diversos agentes internos e
externos. Neste trabalho analisou-se o óleo essencial extraído em plantas jovens de
Copaifera multijuga Hayne, a fim de confirmar a presença de seqüências codificadoras
de enzimas responsáveis pela síntese do óleo e gerar uma biblioteca de cDNA. Para a
extração do óleo foi usada a técnica de arraste a vapor em aparelho de clevenger
modificado e a seguir a análise espectrofotométrica de massas para classificação dos
compostos sesquiterpênicos (óleo essencial). Na análise cromatográfica permitiu a
identificação de vários compostos presentes tanto na planta jovem quanto na planta
adulta do gênero Copaifera, como: ß-cariofileno, α-copaeno, D germacreno, α-
humuleno, δ-cadineno, γ-elemeno, α-cubebeno e α-bergamoteno entre outros
minoritários estudados. Numa abordagem histoquímica utilizou-se métodos
microscópicos para localizar canais secretores da planta, onde lâminas foram
preparadas utilizando o micrótomo semi-automático, coradas em solução de azul de
toluidina e em reagente de NADI. Após estas análises, comprovada a presença desses
ductos secretores em folhas jovens, foi construída uma biblioteca de cDNA, utilizandose
como fonte de mRNA material biológico similar (folhas jovens de C. multijuga), sendo
posteriormente seqüenciado seus nucleotídeos por meio de pirosenquenciamento, o
qual foi analisado por biologia computacional, utilizando-se programas que priorizaram
a biossíntese dos terpenos e sesquiterpenos, onde suas seqüências codificadoras de
enzimas foram encontradas, mostrando envolvimento do mRNA na construção do óleo
essencial em plantas não adultas desta espécie. A utilização de técnicas
cromatográficas para identificação de compostos fitoquímicos, aliadas a métodos
histológicos e posteriormente ao seqüenciamento de genes expressos de folhas jovens
e, portanto secretoras de óleo resina, permitiram a confirmação da biossíntese de
diversas substâncias presentes nesse óleo, bem como suas rotas metabólicas. Esses
dados são apresentados pela primeira vez conjuntamente, acreditando-se que possam
contribuir para a abertura de novas fronteiras na pesquisa e no desenvolvimento de
biotecnologias baseadas em seus resultados.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/4396
Date28 September 2011
CreatorsBastos, Ana Paula Meneses Rodrigues
ContributorsVeiga Junior, Valdir Florêncio da, Astolfi Filho, Spartaco
PublisherUniversidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFAM, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
Relation32215883775770440, 600

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