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Avaliação da exposição aguda e sub-letal ao glifosato (N-fosfometil-glicina) e ao AMPA (ácido amino-metil-fosfônico) em brânquias e fígado de Poecilia reticulata com o emprego de biomarcadores moleculares e morfológicos / Evaluation of acute and sub-lethal exposure to glyphosate (N-phosphomethyl-glycine) and to AMPA (amino-methyl-phosphonic acid) in gills and liver of Poecilia reticulata using molecular and morphological biomarkers

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Previous issue date: 2013-02-15 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The present research aimed to investigate the acute toxicity of glyphosate (Nphosphomethyl-glycine),
the active ingredient of Roundup®, as well as of
aminomethylphosphonic acid (AMPA), its main degradation product, in the teleost fish
Poecilia reticulata, commonly known as guppies. Thus, were performed tests Lethal
Concentration mean (LC50) and behavioral, histopathology and proteomics analysis. Male
and female P. reticulata presented median lethal concentration (LC50) at 96h the values of
68.78 and 70.87 mg/L for glyphosate and 180.00 and 164.32 mg/L for AMPA,
respectively, characterizing them as practically non toxic compounds to guppies. However,
the results of behavioral analyses showed that both products generate stressing situations to
the fish, causing behavioral changes such shock against the tank walls, hypoactivity,
irregular swimming, swimming on the surface of water, darkening of the body,
aggressiveness, and lethargy. Histopathological and morphometric analyses of liver and
gill of guppies exposed to sublethal concentrations of glyphosate (35mg/L) and AMPA
(82 mg/L) indicated that both organs were affected . The gills of fish exposed to the
tested products presented higher reaction rates to progressive changes, such as proliferation
of the interlamellar epithelium and partial and total fusion of secondary lamellae. Liver
presented higher reaction rates to regressive changes, such as steatosis, pyknotic nuclei,
and necrosis. The proteomic analysis showed that Glyphosate induces differential liver
proteins in P. reticulata. The image analysis allowed measuring 225 spots in the control
group and 180 spots in the group exposed to Glyphosate. Of this total, 88 spots were
exclusive to the control group and 43 spots were exclusive of the treated group. Of the 137
spots matched between control and treated groups 13 were down regulated and 8 were up
regulated due to sublethal exposure to Glyphosate. The behavioral, histopathological and
proteomic changes observed indicated that, although considered to have low toxicity to
animals in the guides that evaluate toxicity of chemicals, both glyphosate and AMPA
promote that are deleterious to animal health, indicating the need to establish new
parameters or modify concepts indicating the need to use several biomarkers, beyond
assessing the mortality rate, to establish a more reliable criteria for toxicity parameters. / A presente pesquisa teve como objetivo investigar a toxicidade aguda do Glifosato (Nfosfometil-glicina),
princípio ativo dos herbicidas Roundup, e do AMPA (ácido aminometil-fosfônico),
seu principal produto de degradação. O sistema-modelo eleito para a
investigação foi o teleósteo Poecilia reticulata. Realizaram-se testes de Concentração Letal
média (CL50), análises comportamentais, histopatológicas e proteômicas. Os dados de
mortalidade coletados durante o teste de Concentração Letal média (CL50) permitiram
determinar os valores de 68,78 e 70,87 mg/L como CL50 do Glifosato e os valores de 180 e
164,32 mg/L como a CL50 do AMPA para machos e fêmeas de P. reticulata
respectivamente. Tais valores caracterizam o Glifosato e o AMPA como praticamente não
tóxico aos guarus em testes de toxicidade aguda. No entanto, os resultados das análises
comportamentais também realizadas durante a CL50 mostraram que ambos os produtos
testes são capazes de gerar situações de estresse aos peixes, causando alterações de
comportamento como choques contra as paredes do aquário, hipoatividade, natação
irregular, nado na superfície da água, escurecimento corporal, agressividade e letargia. As
análises histopatológicas e morfométricas das brânquias e do fígado de guarus expostos a
concentrações subletais de Glifosato (35µg/L) e de AMPA (82µg/L) indicaram que ambos
os órgãos são alterados morfologicamente. As brânquias de peixes expostos aos produtos
testes apresentaram maiores índices de reação para as alterações progressivas tais como
aumento do epitélio interlamelar e fusão parcial e total das lamelas secundárias. O fígado
por sua vez apresentou maiores índices de reação para as alterações regressivas como
esteatose, núcleos picnóticos e necrose. As análises proteômicas mostraram que o
Glifosato induz a expressão diferencial de proteínas hepáticas em P. reticulata. As análises
das imagens dos géis permitiram mensurar 225 spots no grupo controle e 180 spots no
grupo exposto a Glifosato. Desse total, 88 spots foram exclusivos do grupo controle e 43
spots foram exclusivos do grupo tratado. Dos 137 spots pareados entre os grupos controle
e tratado 13 foram regulados negativamente e 8 foram regulados positivamente devido a
exposição subletal ao Glifosato. As alterações encontradas indicam que o Glifosato e o
AMPA, apesar de serem considerados poucos tóxicos por guias que avaliam a toxicidade
de produtos químicos, são promotores de alterações deletérias para a saúde animal,
indicando que há necessidade de estabelecimento de novos parâmetros ou mudança de
conceitos, indicando a necessidade de utilizar vários biomarcadores, além da avaliação da
taxa de mortalidade, para estabelecer um critério mais confiável para parâmetros de
toxicidade.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/7383
Date15 February 2013
CreatorsAntunes, Adriana Maria
ContributorsMorais, Simone Maria Teixeira de Sabóia, Bailão, Alexandre Melo, Morais, Simone Maria Teixeira de Sabóia
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Biologia (ICB), UFG, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas - ICB (RG)
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess
RelationEmbargada pela autora/orientadora em 12/03/2013. Autorizado o povoamento pela autora/orientadora em 29/05/2017., 6883982777473437920, 600, 600, 600, 600, -3872772117827373404, -1634559385931244697, -2555911436985713659

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