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Previous issue date: 2012-08 / CNPQ; CAPES / O aumento na concentração de IgA Secretora em secreções externas é uma importante
ferramenta de diagnóstico para infecções que acometem as mucosas. O uso de metodologia de
imunoquimiluminescência para realizar tal diagnóstico permite uma maior sensibilidade que
os métodos espectrofotométricos tradicionalmente utilizados. Neste trabalho, um ensaio Dotimunoquimiluminescente
(Dot-CLIA) foi proposto para a determinação de IgA Secretora. Os
anticorpos anti-IgAS e anti-IgG-peroxidase foram previamente conjugados com éster de
acridina (AE). Dot-ELISA e Dot-CLIA foram então realizadas aplicando amostras de IgAS
em discos de membranas de nitrocelulose (0,45 μm de diâmetro de poro) e foi medida a
atividade da peroxidase e a quimiluminescência (expressa em unidade relativa de luz; URL),
respectivamente. O complexo ternário formado por IgAS/anti- IgAS-AE/anti-IgG-peroxidase-
AE e o controle (PBS em substituição a IgAS) forneceram valores de 302.255 ± 28.736 RLU
e 8.247 ± 3.479 RLU, respectivamente. Dot-ELISA simultaneamente realizada forneceu cor
marrom pelo complexo ternário e ausência de cor foi observada para o controle. A relação
entre RLU versus quantidade de IgAS utilizando o método proposto mostrou uma curva
hiperbólica. O leite materno sem lipídios e caseína purificado por HPLC apresentou três picos
de proteína e os que correspondiam a IgAS e ao componente secretor livre apresentaram
valores de cerca de 50.000 RLU e 30.000 RLU, respectivamente. Portanto, pode-se concluir
que o ensaio Dot-CLIA é capaz de avaliar quantitativamente e especificamente IgAS em
fluidos biológicos.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/12603 |
| Date | 08 1900 |
| Creators | BEZERRA, Ana Katarina Moraes Monteiro |
| Contributors | CARVALHO JÚNIOR, Luiz Bezerra de |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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