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Eficácia da inclusão de antibióticos em diluente para criopreservação de sêmen ovino e sua influência na viabilidade espermática / Efficiency of antibiotics included in extenders for cryopreservation of ram semen and their influence on sperm viability

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Previous issue date: 2011-02-28 / The objectives of this study were to determine the main bacteria present in ram semen and
to evaluate the efficiency of distinct antibiotics in controlling such microorganisms and on
sperm viability. Ejaculates were collected from five rams and extended in TRIS-egg yolk. In
Experiment 1, the following treatments were tested: control, with no antibiotics; GTLS, with
500 μg/ml of gentamicin, 100 μg/ml of tylosin, 300 μg/ml of lincomycin and 600 μg/ml of
spectinomycin; PENSTREP, with 500 μg/ml of penicillin and 100 μg/ml of streptomycin; CEFT,
with 50 μg/ml of sodium ceftiofur; and ENRO, with 1000 μg/ml of enrofloxacin. For bacteria
identification, samples were collected: the preputial ostium; the artificial vagina; the
ejaculates; the semen pool from the five rams; after treatments allocation and stabilization
at 5°C; and after thawing. In Experiment 2, variation in the antibiotics concentrations used in
Experiment 1 were tested: 25% higher (GTLS+25, PENSTREP+25, CEFT+25 and ENRO+25);
50% higher (GTLS+50, PENSTREP+50, CEFT+50 and ENRO+50); 25% lower (GTLS-25,
PENSTREP-25, CEFT-25 and ENRO-25); and 50% lower (GTLS-50, PENSTREP-50, CEFT-50 and
ENRO-50). Samples of ram semen were used for counting colony forming units (CFU). The
isolated microorganisms were Staphylococcus sp., Klebsiella sp., Corynebacterium sp. and
Bacillus sp. The ENRO treatment presented the lowest sperm motility for semen cooled at
5°C and after thawing (P < 0.05), although the post-thawing motility did not differ from that
observed for the CEFT and GTLS treatments (P > 0.05). No differences were observed among
treatments regarding sperm membrane, acrosome and sperm DNA integrity (P > 0.05). The
post-thawing proportion of sperm having DNA integrity was greater for the PENSTREP than
for the GTLS treatment (P < 0.05), although sperm DNA integrity may have been impaired by
the freezing-thawing process. In experiment 2, the GTLS+50, PENSTREP, ENRO+25 and
ENRO+50 treatments presented reduced sperm motility (P < 0.05). All treatments reduced
the number of CFU in comparison with the control treatment (P < 0.05). The CFU for the
GTLS+50, ENRO+25 and ENRO+50 treatments and the concentrations tested for both those
treatments did not differ (P < 0.05), although both were more effective than the PENSTREP
and CEFT treatments (P < 0.05). However, the ENRO treatment was associated with reduced
sperm motility, especially with high antibiotic concentrations. The treatments did not
influence sperm morphology and the integrity of sperm membrane, acrosome and DNA. / Este estudo tem como objetivos determinar os principais gêneros bacterianos presentes no
sêmen ovino e avaliar a ação de diferentes antibióticos no controle destes microrganismos e
o seu impacto sobre a viabilidade espermática. Todos os ejaculados foram coletados de
cinco machos ovinos e diluídos em Tris-gema de ovo. No experimento 1 foram testados os
seguintes tratamentos: Controle sem antibiótico; GTLS, com 500 μg/ml de gentamicina, 100
μg/ml de tilosina, 300 μg/ml de lincomicina e 600 μg/ml de espectinomicina; PENSTREP, com
500 μg/ml de penicilina e 100 μg/ml de estreptomicina; CEFT, com 50 μg/ml de ceftiofur
sódico; e ENRO, com 1000 μg/ml de enrofloxacina. Para a identificação dos gêneros
bacterianos presentes, amostras foram colhidas do óstio prepucial, da vagina artificial, dos
ejaculados carneiros, do pool de sêmen dos cinco carneiros e após a inclusão dos
tratamentos e estabilização a 5 °C e após o descongelamento. No experimento 2, foram
testadas variações nas concentrações de antibióticos avaliadas no Experimento 1: 25% acima
(GTLS+25; PENSTREP+25; CEFT+25; ENRO+25), 50% acima (GTLS+50; PENSTREP+50;
CEFT+50; ENRO+50), 25% abaixo (GTLS-25; PENSTREP-25; CEFT-25; ENRO-25) e 50% abaixo
(GTLS-50; PENSTREP-50; CEFT-50; ENRO-50). Amostras de sêmen dos carneiros foram
utilizadas para contagem das unidades formadoras de colônias (UFC). Os microrganismos
isolados foram Staphylococcus sp., Klebsiella sp., Corynebacterium sp. e Bacillus sp. O
tratamento com enrofloxacina apresentou a motilidade espermática mais baixa para o
sêmen refrigerado a 5 °C e após o descongelamento (P<0,05), no entanto a motilidade pósdescongelamento
não diferiu (P>0,05) dos tratamentos CEFT e GTLS. Não foram observadas
diferenças entre os tratamentos quanto à integridade da membrana plasmática, do
acrossoma e do DNA espermático (P>0,05). Após o descongelamento, o percentual de
espermatozóides com DNA íntegro foi maior (P<0,05) no tratamento PENSTREP em relação
ao GTLS, apesar de que este parâmetro pode ter sido afetado pelo processo de
criopreservação. No experimento 2, GTLS+50, PENSTREP, ENRO+25 e ENRO+50 foram os
tratamentos que apresentaram redução na motilidade espermática (P<0,05). Todos os
tratamentos reduziram consideravelmente o número de UFC em relação ao grupo controle.
A contagem de UFC para os tratamentos GTLS+50, ENRO+25 e ENRO+50 e as variações de
concentração para ambos não foram diferentes entre si (P>0,05), porém ambos foram mais
efetivos que os tratamentos PENSTREP e CEFT (P<0,05). Porém, o tratamento com
enrofloxacina prejudicou a motilidade espermática, especialmente quando se elevou a
concentração Os tratamentos não influenciaram a morfologia, integridade da membrana
plasmática, integridade de acrossoma e integridade de DNA dos espermatozóides.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/2564
Date28 February 2011
CreatorsMadeira, Elisângela Mirapalheta
ContributorsCPF:69902313000, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4768000E7, Leite, Fabio Pereira Leivas, Bianchi, Ivan
PublisherUniversidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Veterinária, UFPel, BR, Veterinária
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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