Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The acetylcholinesterase enzyme is responsible for the acetylcholine
hydrolisis in the synaptic cleft during the transmission of nervous impulse. The
investigation of new inhibitors of this important enzyme is very relevant on tentative
to minimize the effects due damages on cholinergic transmission, mainly in
pathologies as Alzheimer s disease. Therefore, this work has investigated the
inhibitory potencial of different classes of heterocyclic compounds (pyrazole,
isoxazole and isoxazolinone), in vitro, on the acetylcholinesterase activity on different
cerebral structures of rats (cortex, striatum and hippocampus). Among all tested
compounds, only the 2c compound did not show any inhibition; all the remaining
compounds showed significative inhibition (p<0,05), and the compounds 2a and 3c,
that shown the best inhibitory efficacy (51 and 59 %, respectively), were the
compounds selected to the kinetic enzimatic assays. From these results it was
possible to characterize the kinetic parameters (Km and VMAX) and the inhibition type
showed by every compound through the Lineweaver-Burk and Cornish-Bowden
plots. The mentioned parameters to the compound 2a were Km = 0.2 mM and VMAX =
7.94 μmoles ASCh/h/mg of protein. The compound exihibited a competitive inhibition
type with Ki = 1.46 mM. To the compound 3c, the values of Km and VMAX were 0.05
and 1.42 μmoles ASCh/h/mg of protein, respectively. This compound performed a
noncompetitive inhibition type with Ki = 2.2 mM. All the compounds were previously
diluted in methanol PA in concentrations of 0.031 mM, 0.0625 mM, 0.125 mM, 0.250
mM and 0.500 mM. The inhibitors selected to the kinetic assays were also diluted in
methanol PA in the concentrations of 0.125, 0.250, 0.500 and 1.0 mM. / A enzima acetilcolinesterase é responsável pela hidrólise de acetilcolina na
fenda sináptica durante a transmissão do impulso nervoso. A investigação de novos
inibidores dessa importante enzima é de grande relevância na tentativa de minimizar
os efeitos causados por danos na transmissão colinérgica, principalmente em
patologias como a doença de Alzheimer. Frente a isto, este trabalho investigou o
potencial inibitório de diferentes classes de compostos heterocíclicos (pirazóis,
isoxazóis e isoxazolinonas), in vitro, sobre a atividade da enzima acetilcolinesterase
de diferentes estruturas cerebrais de ratos (córtex, estriado e hipocampo). Dos onze
compostos testados, apenas o denominado aqui como 2c, foi o único a não
apresentar inibição significativa da enzima em nenhuma estrutura testada; todos os
dez compostos restantes apresentaram inibição significativa (p< 0,05), sendo que os
compostos 2a e 3c, por possuírem maior eficácia inibitória (53 e 59%,
respectivamente) foram os compostos selecionados para os ensaios de cinética
enzimática. A partir destes ensaios foi possível a caracterização dos parâmetros
cinéticos (Km e VMÁX) e do tipo de inibição apresentada por cada composto através
da plotagem dos dados em gráficos de Lineweaver-Burk e Cornish-Bowden, sendo
que os parâmetros citados encontrados para o composto 2a foram: Km = 0,2 mM e
VMÁX = 7,94 μmoles ASCh/h/mg de proteína. O composto apresentou inibição
competitiva com um Ki = 1,46 mM. Já o composto 3c apresentou valores de Km e
VMÁX iguais a 0,05 mM e 1,42 μmoles ASCh/h/mg de proteína, respectivamente. A
inibição exercida por este composto foi do tipo não-competitiva com Ki = 2,2 mM.
Todos os compostos foram diluídos em metanol PA, nas concentrações de 0,031;
0,062; 0,125; 0,250 e 0,500 mM. Os compostos selecionados para os ensaios de
cinética enzimática foram diluídos também em metanol PA, nas concentrações de
0,125; 0,250; 0,500 e 1,0 mM.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/11199 |
| Date | 09 September 2011 |
| Creators | Serres, Jonas Daci da Silva |
| Contributors | Morsch, Vera Maria, Bagatini, Margarete Dulce, Zanatta, Nilo |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas: Bioquímica Toxicológica, UFSM, BR, Bioquímica |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 200800000002, 400, 500, 300, 500, 500, 05cf99a1-4e49-4daa-bb3b-26eee86569c1, ac60e743-3338-4e9d-b415-445be18c0990, 4fb7b234-c0d6-4c37-8ef8-e3c3f0cd78b5, 2f7bd6ce-78fa-4968-ac66-2d1407e90f60 |
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