Diversos trabalhos têm demonstrado a presença de peptídeos bioativos em hemolinfa de insetos e seu potencial uso como agentes terapêuticos. Este trabalho buscou identificar e isolar proteínas da hemolinfa de Lonomia obliqua com ação antiviral. A adição de hemolinfa antes da infecção reduziu o título de poliovírus de 1,5x107 TCID50/mL no cultivo controle para 4x105 TCID50/mL e em aproximadamente 100 vezes o título do sarampo. Após cromatografia de gel filtração, foram obtidos 3 pools de proteína. O pool responsável pela ação antiviral foi identificado (Pool 2), uma vez que reduziu em 87 vezes o título de poliovírus, e de 1,6x106 TCID50/mL para 2,7x105 TCID50/mL o título do sarampo. O Pool 2 foi fracionado por cromatografia de troca iônica. A fração responsável pela ação antiviral da hemolinfa de Lonomia obliqua frente ao poliovírus e sarampo foi identificada (RQ 3-4), esta proteína, de aproximadamente 20 kDa, tem ação sobre vírus envelopado (sarampo) e vírus desprovido de envelope viral (poliovírus). / Several works have demonstrated the presence of bioactive peptides in insect hemolymph and their potential use as therapeutic agents. This work sought to identify and purify proteins from Lonomia obliqua hemolymph with antiviral activity. The analyses demonstrated that the best time for hemolymph addition in the cell culture is before the infection, the poliovirus titer had reduced from 1.5x107 TCID50/mL to 4x105 TCID50/mL and for measles, the virus titer was about 100 times lower than the control. After gel filtration chromatography, the hemolymph was divided into 3 pools of protein. The pool responsible for the antiviral activity was identified (Pool 2), once it reduced to 87 times the poliovirus titer, and the measles titer from 1.6x106 TCID50/mL to 2.7x105 TCID50/mL. The Pool 2 was fractionated by ion-exchange chromatography. The fraction from Lonomia obliqua hemolymph responsible for the antiviral activity was identified - RQ 3-4, this protein of approximately 20 kDa, has antiviral effect on enveloped virus (measles) and on non enveloped virus (poliovirus).
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:teses.usp.br:tde-29042010-084931 |
| Date | 16 October 2009 |
| Creators | Katia Nardelli Greco |
| Contributors | Ronaldo Zucatelli Mendonça, José Antonio Jerez, Alvaro Paiva Braga de Sousa |
| Publisher | Universidade de São Paulo, Biotecnologia, USP, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP, instname:Universidade de São Paulo, instacron:USP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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