Application of Taenia saginata metacestodes as alternative antigen is an important
alternative for neurocysticercosis (NC) serodiagnosis. The cross reaction with
Echinococcus granulosus infection occurred in homologous and heterologous antigens,
and could be avoid with different purified methods. This study analyzed antigen fractions
obtained from crude saline extract of T. saginata metacestodes purified by affinity
chromatography with the lectin jacalin (unbound and bound fraction), concanavalin A
(unbound and bound fraction), concanavalin A using jacalina unbound fraction (unbound
and bound fraction) and N-acetil (unbound and bound fraction). The fraction were tested
for the detection of IgG antibodies by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and
immunoblot for the laboratory diagnosis of human NC. The application of T. saginata
metacestodes as an alternative antigen for use in ELISA and WB tests compared with the
metacestodes antigen of Taenia solium in CFS samples was also analyzed. Serum
samples were obtained from 142 individuals: 40 were diagnosed with NC, 62 presented
Taenia sp. and other parasitic diseases and 40 were apparently healthy individuals. The
CSF samples were obtained from 35 patients with definitive neurocysticercosis; and 35
patients with other neurological disorder. Among the fractions, unbound concanavalin A
demonstrated statically higher sensitivity and specificity by ELISA (90% and 93.1 %,
respectively). By Immunoblot, the concanavalin unbound showed 100% of sensitivity
and specificity, where only serum samples from patients with NC recognized the protein
of 64-68 kDa, so this antigen fraction may be used as specific antigen for diagnosis of
NC. The sensitivity and specificity of ELISA using antigen obtained from T. solium
applied to CSF samples results of 100%. When the tests were conducted using T.
saginata metacestodes, results were 100% and 94.3%, respectively. The 47-52, 64-68 and
70 kDa antigens were recognized by only CSF samples from patients with NC. The
results indicated that T. saginata metacestodes can be used as alternative antigen for NC
diagnosis using LCR samples. / A utilização de metacestódeos de Taenia saginata como antígeno alternativo constitui
uma importante ferramenta no sorodiagnóstico da neurocisticercose humana (NC). A
reatividade cruzada com indivíduos infectados por Echinococcus granulosus é comum
em antígenos homólogos e heterólogos, podendo ser evitada com diferentes métodos de
purificação. O presente estudo analisou as diferentes frações antigênicas obtidas, a partir
do extrato salino total de metacestódeos de T. saginata, por cromatografia de afinidade
em coluna de Jacalina (fração ligante e não ligante), de Concanavalina A (fração ligante e
não ligante), de Concanavalina A utilizando a fração não ligante de Jacalina (fração
ligante e não ligante) e Coluna de N-acetil (fração ligante e não ligante). As frações
foram avaliadas quanto a detecção de anticorpos IgG anti-metacestódeos de Taenia
solium nos testes ELISA e Immunoblotting. Foi avaliada a utilização do extrato salino
total de metacestódeos de T. saginata como antígeno alternativo nos testes ELISA e
Immunoblotting para detecção de anticorpos IgG no LCR. Foram obtidas 142 amostras de
soro, sendo 40 de pacientes com diagnóstico definitivo de NC, 62 de indivíduos
infectados por Taenia sp e por outros parasitos e 40 de indivíduos saudáveis. Foram
coletadas 70 amostras de LCR, sendo 35 de pacientes com diagnóstico definitivo de NC e
35 de indivíduos com outras manifestações neurológicas. Entre todas as frações
analisadas, a fração não ligante de Concanavalina A demonstrou maior sensibilidade e
especificidade pelo teste ELISA em amostras de soro (90% e 93,1%, respectivamente).
Pelo Immunoblotting esta mesma fração demonstrou 100% de sensibilidade e
especificidade, sendo que apenas pacientes com NC reconheceram a banda especifica de
64-68 kDa, indicando que esta fração antigênica pode se usada como antígeno especifico
no sorodiagnóstico da NC humana. A sensibilidade e especificidade do teste ELISA
utilizando o antígeno homólogo no LCR humano foi de 100%. Quando este teste foi
conduzido com o antígeno heterólogo obteve-se 100% de sensibilidade e 94,3% de
especificidade. Na reação de Immunoblotting as bandas antigênicas de 47-52, 64-68 e 70
kDa foram reconhecidas exclusivamente no LCR de pacientes com NC. Os resultados
conferem ao extrato salino de T. saginata sensibilidade e especificidade para ser
utilizado como antígeno alternativo para o diagnostico da NC no LCR. / Doutor em Imunologia e Parasitologia Aplicadas
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/urn:repox.ist.utl.pt:RI_UFU:oai:repositorio.ufu.br:123456789/16548 |
| Date | 16 May 2008 |
| Creators | Oliveira, Heliana Batista de |
| Contributors | Costa-cruz, Julia Maria, Silva, Deise Aparecida de Oliveira, Shimizu, Sumie Hoshino, Silva, Cláudio Vieira da, Livramento, José Antônio |
| Publisher | Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas, UFU, BR, Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFU, instname:Universidade Federal de Uberlândia, instacron:UFU |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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