Return to search

Μοριακή ανίχνευση και τυποποίηση αδενοϊνών από ασθενείς με επιπεφυκίτιδα / Molecular detection and typing of adenoviruses from patients with conjunctivitis

Η επιπεφυκίτιδα (φλεγμονή του επιπεφυκότα) είναι η πιο συχνή ασθένεια των οφθαλμών, η οποία
εκδηλώνεται σε παγκόσμια κλίμακα με τη μορφή σποραδικών κρουσμάτων ή επιδημίας. Μπορεί να
είναι λοιμώδους (βακτήρια, ιοί, παράσιτα) ή μη λοιμώδους αιτιολογίας. Η κύρια αιτία της οξείας
ιογενούς αιτιολογίας επιπεφυκίτιδας είναι οι αδενοϊοί. Περίπου το 15- 70% του συνόλου των
κρουσμάτων της επιπεφυκίτιδας οφείλονται στους αδενοϊούς.
Σκοπός της μελέτης είναι η χρήση επιδημιολογικών δεδομένων προκειμένου να πραγματοποιηθεί
επιδημιολογική παρακολούθηση των κρουσμάτων επιπεφυκίτιδας στο Πανεπιστημιακό Γενικό
Νοσοκομείο Πατρών (ΠΓΝΠ) από ασθενείς οι οποίοι επισκέφθηκαν την οφθαλμιατρική κλινική και
τα εξωτερικά ιατρεία του νοσοκομείου τη χρονική περίοδο 2 Ιανουαρίου – 29 Ιουλίου 2012
(εβδομάδες 1- 30), ο καθορισμός της συχνότητας της ιογενούς αιτιολογίας επιπεφυκίτιδας και ο
εντοπισμός πιθανής ύπαρξης επιδημίας. Ταυτόχρονα, πραγματοποιήθηκε μοριακή ανίχνευση και
τυποποίηση αδενοϊών από ασθενείς με κλινική εικόνα ιογενούς επιπεφυκίτιδας το χρονικό
διάστημα μεταξύ 27 Φεβρουαρίου και 17 Ιουνίου.
Όλα τα κρούσματα καταγράφηκαν από τα ιατρικά αρχεία του ΠΓΝΠ για το χρονικό διάστημα
Ιανουαρίου- Ιουλίου του 2012 και για το ίδιο χρονικό διάστημα το προηγούμενο έτος (2011).
Καταγράφηκαν 231 κρούσματα επιπεφυκίτιδας (47,1% άνδρες και 52,8% γυναίκες), από τα οποία
τα 205 ήταν ιογενούς αιτιολογίας, τα 4 βακτηριογενούς αιτιολογίας και 22 ήταν απροσδιόριστης
αιτιολογίας από τους ιατρούς. Για την ίδια χρονική περίοδο το προηγούμενο έτος (2011), σύμφωνα
με τα αρχεία του ΠΓΝΠ καταγράφηκε ένα σύνολο από 156 κρούσματα επιπεφυκίδας (38,5%
άνδρες και 61,5% γυναίκες), από τα οποία τα 135 ήταν ιογενούς αιτιολογίας, τα 3 βακτηριογενούς
αιτιολογίας και 18 ήταν απροσδιόριστης αιτιολογίας. Ο αριθμός κρουσμάτων επιπεφυκίτιδας τους
δυο πρώτους μήνες καθώς και τον Ιούλιο του 2012 ήταν στα ίδια επίπεδα με τους αντίστοιχους
μήνες το 2011 και παρατηρείται επιδημία που πραγματοποιήθηκε μεταξύ Μαρτίου- Ιουνίου 2012.
Οι ασθενείς κατανέμονταν σε όλες τις ηλικίες και στα δυο φύλα.
Το χρονικό διάστημα μεταξύ 27 Φλεβάρη- 17 Ιουνίου του 2012 (εβδομάδες 9- 24), 48 επιχρίσματα
επιπεφυκότα ασθενών με κλινική εικόνα αδενικής επιπεφυκίτιδας συλλέχθηκαν από τους ιατρούς
του ΠΓΠΝ και μεταφέρθηκαν υπό κατάλληλες συνθήκες στο εργαστήριο Υγιεινής της Ιατρικής
Σχολής του Πανεπιστημίου Πατρών. Ταυτόχρονα συμπληρώθηκε από τους ιδίους ερωτηματολόγιο
με δημογραφικά και κλινικά στοιχεία. Το DNA του ιού απομονώθηκε με Qiagen και ενισχύθηκε με
nested PCR. Τα θετικά αποτελέσματα επιβεβαιώθηκαν με αλληλούχιση του PCR προϊόντος. Για τον
προσδιορισμό της συγγένειας μεταξύ των διαφόρων απομονωμένων αλληλουχιών του DNA,
φυλογενετική ανάλυση πραγματοποιήθηκε. Από το σύνολο των δειγμάτων που αναλύθηκαν με μοριακές τεχνικές, DNA αδενοϊού ανιχνεύθηκε σε 40 δείγματα (83%). Στα σαράντα θετικά
δείγματα καθορίστηκε η αλληλουχία του DNA τους, από τα οποία τα 29 (72,5%) προσδιορίστηκαν
ως τύπος HAdV17 και τα 5 (12,5%) ως τύπος HAdV-54. Σε 6 θετικά δείγματα (15%) ο τύπος του
ιού δεν προσδιορίστηκε. Τέλος, με τη βοήθεια των μοριακών τεχνικών προκύπτει το συμπέρασμα
ότι το στέλεχος αδενοϊού 17 (Αd 17) είναι η αιτία της εμφάνισης επιδημίας μεταξύ Μαρτίου-
Ιουνίου 2012.
Η έρευνα αυτή είναι από τις λίγες πιυ έχουν πραγματοποιηθεί στον Ελλαδικό χώρο σε κρούσματα
επιπεφυκίτιδας με αποτέλεσμα να εμπλουτίζει τα φτωχά επιδημιολογικά και μοριακά δεδομένα για
την συγκεκριμένη ασθένεια και το συγκεκριμένο τύπο ιών. Παράλληλα μέσω της έρευνας
υπογραμμίζεται η ανάγκη για εθνικό σύστημα επιτήρησης της επιπεφυκίτιδας. / Conjunctivitis (inflammation of the conjunctiva) is the most common eye disease that occurs
worldwide in both sporadic and epidemic form. There are infectious conjunctivitis, which is caused
by a variety of microorganisms (such as bacteria, viruses and parasites) and noninfectious
conjunctivitis, which is caused by an allergic reaction. The leading cause of acute viral
conjunctivitis in clinical practice includes human adenoviruses (HAdVs). About 15- 70% of all
conjunctivitis cases worldwide are associated with AdVs.
The aim of the study is the performance of epidemiological surveillance of cases of conjunctivitis
using epidemiological data from patients who visited the ophthalmic clinic and the outpatient
ophthalmic department of the University General Hospital of Patras (UGHP) in the period from
January 2nd to July 29th in 2011 and 2012 (weeks 1st-30th), in order to determine the frequency of
viral conjunctivitis and to determine a potential epidemic. An additional task of the study is the
molecular detection and typing of adenoviruses for cases of patients with clinical viral conjunctivitis
in the period from February 27th to June 17th 2012.
All conjunctivitis cases referred to UGHP in the period between January and July 2012 as well as
between January and July 2011 were ascertained using medical records. 231 conjunctivitis cases
were reported (47.1% male and 52.8% female), in which 205 were virological conjunctivitis, 4
bacteriological conjunctivitis and 22 were undefined conjunctivitis. For the same period the
previous year (2011), according to the records of UGHP recorded a total of 156 conjunctivitis cases
(38.5% male and 61.5% female), of which 135 were of viral origin, 3 bacteriogenic orogin and 18
were undetermined etiology. The number of conjunctivitis cases in the first two months and in July
2012 was at the same level as the corresponding period in 2011 and there is an epidemic that took
place between March and June 2012. Patients were allocated to all age groups and both sexes.
In the period from February 27th ,2012 to June 17th , 2012 (weeks 9th – 24th), 48 conjunctival swabs
were collected from cases which were clinically suspected of having adenoviral conjunctivitis and
transported under appropriate conditions to the laboratory of Hygiene, Medical School, University
of Patras. At the same time, the patients were asked to answer a structured questionnaire with
demographic and clinical data. The viral DNA was isolated with Qiagen and amplified by nested
PCR. The positive results were confirmed by sequencing the PCR product. To determine the
relatedness between the different isolated sequences, a phylogenetic analysis was constructed.
Of the total samples, which were analyzed with molecular techniques, adenovirus DNA was
detected in 40 samples (83%). Of the positive samples which were confirmed by sequencing, 29
samples (72.5%) were typed as AdV17 and 5 samples (12.5%) as AdV54. For 6 positive samples (15%) the serotype was not determined. Finally, it was concluded that the strain Adenovirus 17 (Ad
17) was the cause of the epidemic between March and June 2012.
There are poor epidemiological and molecular data for this particular disease in Greece. This study
is one of the very few on conjunctivitis determination in Greece. This research underscores the
need for a national surveillance system for conjunctivis outbreaks.

Identiferoai:union.ndltd.org:upatras.gr/oai:nemertes:10889/6993
Date02 April 2014
CreatorsΜπαλασοπούλου, Αγγελική
ContributorsΒανταράκης, Απόστολος, Balasopoulou, Aggeliki, Γεωργακόπουλος, Κωνσταντίνος, Ματσούκας, Ιωάννης
Source SetsUniversity of Patras
Languagegr
Detected LanguageGreek
TypeThesis
Rights12
RelationΗ ΒΚΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της.

Page generated in 0.0022 seconds