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[en] DEVELOPMENT AND INTRALABORATORY VALIDATION OF THE METHOD BY CAPILLARY MICELLAR ELECTROKINETIC CHROMATOGRAPHY FOR THE DETERMINATION OF VITAMIN K1 AND K3 IN GREEN TEA AND PHARMACEUTICAL SUPPLEMENTS / [pt] DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO INTRALABORATORIAL DO MÉTODO POR CROMATOGRAFIA ELETROCINÉTICA CAPILAR MICELAR PARA DETERMINAÇÃO DE VITAMINA K1 E K3 EM CHÁ VERDE E EM SUPLEMENTOS FARMACÊUTICOSTATIANE VIDAL DIAS GOMES 13 August 2012 (has links)
[pt] O desenvolvimento e validação de um método analítico para determinação de vitamina K é de fundamental importância considerando a crescente preocupação mundial com questões referentes à qualidade de vida, nutrição, saúde e meio ambiente, além da importância deste micronutriente na saúde. Desenvolveu-se um método baseado na cromatografia eletrocinética capilar micelar (MEKC) para a determinação das vitaminas K1 e K3. As condições ótimas de análise por MEKC foram obtidas a partir de estudo univariado de parâmetros experimentais e instrumentais (tampão borato 3,1 g.L(-1), pH igual a 8,5; CTAB 18,2 g.L(-1); acetonitrila 20 por cento v/v, 25 graus Celsius, 30 kV, Tigual a 15 s). Realizou-se um estudo com uma cela de caminho óptico alongado de modo a melhorar o limite de detecção (LOD) e o limite de quantificação (LOQ) do método. As curvas analíticas de ambas as vitaminas apresentaram comportamento linear e homoscedástico com valores de r próximos a 0,99. Os valores de LOD e de LOQ para a vitamina K1 e para a vitamina K3 ficaram na ordem de 10(-5) g.L(-1) e 10(-4) g.L(-1), respectivamente. A precisão do método apresentou valores entre 2 e 7 por cento para a área dos picos. As recuperações obtidas para a vitamina K1 foram de 101 mais ou menos 2 por cento e 103 mais ou menos 2 por cento para as amostras de suplemento vitamínico e chá verde, respectivamente. Para a vitamina K3, a recuperação obtida foi de 99 mais ou menos 3 por cento para a amostra de chá. Testes comparativos realizados entre o método proposto por MEKC e o método de referência baseado em HPLC demonstraram uma boa exatidão (tcalculado menor que ttabelado). A incerteza associada ao método desenvolvido apresentou valores entre 2 e 30 por cento, sendo as fontes mais relevantes aquelas associadas à construção da curva analítica e ao preparo das soluções. O método analítico desenvolvido pode contribuir para a realização de medições confiáveis e sensíveis de diferentes formas de vitamina K. / [en] The development and validation of an analytical method for determination of vitamin K is of paramount importance considering the growing worldwide concern with questions regarding the quality of life, nutrition, health and environment and the importance of this micronutrient in health. It is developed a method based on capillary micellar electrokinetic chromatography (MEKC) for the determination of vitamin K1 and K3. The optimal condition for analysis by MEKC were obtained by means of experimental and instrumental univariate study (borate buffer 3.1 gL(-1), pH equal 8.5; CTAB 18.2 gL(-1), 20 per cent acetonitrile v/v 25 celsius degrees, 30 kV, T equal 15 s). A study with a longer optical path-length capillary cell was performed to improve the detection limit (LOD) and the limit of quantification (LOQ) of the method. Analytical curves of both vitamins presented linear and homoscedastic behavior, with r values near 0.99. The values of LOD and LOQ for vitamin K1 and vitamin K3 were on the order of 10(-5) g.L(-1) and 10(-4) g.L(-1), respectively. The precision of the method was between 2 and 7 per cent for the peak area. Recoveries for vitamin K1 were 101 more or less 2 per cent and 103 more or less 2 per cent for samples of vitamin supplement and green tea, respectively. For vitamin K3, recovery obtained was 99 more or less 3 per cent for the sample tea. Comparative tests performed among the proposed method by MEKC and the reference method based on HPLC showed good accuracy (tcalculated less than ttabulated). The measurement uncertainty associated with the method developed showed values between 2 and 30 per cent, and the relevant sources were those associated with the analytical curve and the preparation of solutions. The developed analytical method can contribute to achieve sensitive and reliable measurements of different forms of vitamin K.
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[en] METHODS FOR THE IMIDACLOPRID QUANTIFICATION IN AQUEOUS SOLUTIONS: METROLOGICAL VALIDATION AND COMPARISON BETWEEN UV-VIS SPECTROPHOTOMETRY AND HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY / [pt] MÉTODOS DE QUANTIFICAÇÃO DE IMIDACLOPRID EM SOLUÇÕES AQUOSAS: VALIDAÇÃO METROLÓGICA E COMPARAÇÃO ENTRE ABSORCIOMETRIA MOLECULAR E CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIAKELLY NEOOB DE CARVALHO CASTRO 21 May 2007 (has links)
[pt] Um procedimento analítico é considerado apropriado para
uma aplicação
específica quando é capaz de gerar resultados confiáveis,
que possibilitem a
tomada de decisão com grau de confiança adequado, sendo
sua adequação
consolidada mediante a realização de ensaios de validação.
Este trabalho
propõe a utilização de um procedimento analítico
alternativo, mais simples e
econômico, baseado na técnica espectrofotométrica de
absorção molecular,
para quantificação de imidacloprid, um inseticida
sistêmico, em amostras de
solução aquosa. Foi demonstrado que o procedimento
proposto é adequado ao
uso pretendido descrevendo-se, detalhadamente, cada etapa
da validação,
considerando-se os limites estabelecidos para cada
parâmetro de validação e
aplicando-se técnicas estatísticas apropriadas na
avaliação dos mesmos: análise
de variância, análise de regressão, testes de
significância, gráficos de controle e
a estimativa da incerteza de medição. As incertezas de
medição dos
procedimentos de rotina e alternativo foram estimadas e
comparadas às
tolerâncias estipuladas, estabelecendo o procedimento
alternativo como
adequado. Uma comparação experimental deste procedimento
com o de rotina
(baseado em HPLC) foi realizada como parte do protocolo de
validação. Além
da avaliação do procedimento para quantificação de
imidacloprid em nível de
traços, foi investigada também a possibilidade de sua
utilização, para a
quantificação do mesmo ingrediente ativo em produtos
formulados. Neste caso,
foi demonstrado, através da comparação das incertezas
estimadas às tolerâncias
estabelecidas, que o procedimento alternativo não é
adequado, por apresentar
incertezas na ordem de aproximadamente 50% do valor destas
tolerâncias, não
possuindo assim o rigor metrológico requerido para esta
aplicação. / [en] Fit for purpose analytical procedures must be sufficiently
reliable to support
any decision taken based on the generated results. In
order to achieve that,
consolidated adequacy evaluation of the analytical
procedure must be obtained
by performing validation experiments. In this work, an
alternative and simpler
spectrophotometric method for the quantification of
imidacloprid in aqueous
samples was compared to the HPLC-UV based reference method
used in
routine. The overall validation procedure started with a
detailed description of
each validation stage, followed by the settling of the
limits for each of the
validation parameters and then, applying the following
statistical techniques to
evaluate each of the parameters: ANOVA, regression
analysis, significance
tests, control charts and uncertainty estimation. The
measurement of
uncertainties estimation, based on ISO-GUM
recommendations, was done for
both analytical procedures (the alternative one and the
reference one). After
comparing these uncertainties with the tolerance values,
the adequacy of the
alternative proposed procedure was confirmed. Finally, by
consolidating the
validation, the experimental comparison of quantification
methods was
conducted. Besides evaluating the analytical procedure for
trace-level
imidacloprid quantification in water samples, the proposed
method was also
evaluated as the analytical procedure for imidacloprid
based formulated
products. In this case, it was demonstrated that the
spectrophotometric method
did not present the requested metrological requirements
for such application,
since the estimated uncertainties of the alternative
procedure were about 50 %
of the tolerance values.
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[en] METROLOGICAL RELIABILITY OF THE ANTIDOPING LABORATORY OF THE BRAZILIAN JOCKEY CLUB. STUDY CASE: VALIDATION OF ANALYTICAL METHOD FOR DETERMINATION OF CAFFEINE IN URINE OF RACE HORSES / [pt] CONFIABILIDADE METROLÓGICA DO LABORATÓRIO ANTIDOPING DO JOCKEY CLUB BRASILEIRO. ESTUDO DE CASO: VALIDAÇÃO DE MÉTODO ANALÍTICO PARA DETERMINAÇÃO DE CAFEÍNA EM URINA DE CAVALOS DE CORRIDAINDIA MARIA HILUF DE LIMA 08 October 2004 (has links)
[pt] A presente pesquisa de mestrado relaciona-se ao
desenvolvimento e à
validação de um método analítico para detecção de
substâncias proibidas em
matrizes biológicas de cavalos de corrida e seu impacto na
confiabilidade
metrológica de serviços laboratoriais voltados à atividade
turfística visando (i) a
especificação de desempenho de um laboratório antidoping
capacitado para
identificar a presença de substâncias proibidas acordadas
pela indústria de
carreiras de cavalo; (ii) a adequação às condições
brasileiras dos métodos
analíticos aplicáveis à determinação antidoping em matrizes
biológicas de
animais em competição e (iii) a definição de um padrão de
excelência
harmonizado aos critérios da International Federation of
Horseracing Authorities
entendidos como instrumentos para a conquista do
credenciamento do
laboratório antidoping e subseqüente participação em
acordos internacionais de
reconhecimento mútuo. Para fundamentar o desenvolvimento da
pesquisa, o
trabalho considerou como estudo de caso o Laboratório
Antidoping do Jockey
Club Brasileiro (LAD/JCB).
Original no seu escopo, o trabalho contribui para ampliar a
abrangência da
atividade de acreditação laboratorial no Brasil tendo em
vista tratar-se de uma
nova categoria de laboratório de ensaio ainda não existente
na matriz
laboratorial credenciada cuja confiabilidade laboratorial
foi desenvolvida à luz
dos critérios da norma internacional ISO/IEC 17025.
No contexto do desenvolvimento são ainda discutidos
aspectos relevantes
relacionados ao sistema da gestão laboratorial; expressão
das incertezas de
medição associadas à determinação antidoping em consonância
a práticas e
procedimentos internacionalmente consensados; capacitação
de pessoal técnico
especializado; rastreabilidade ao Sistema Internacional de
Unidades (SI) e
validação e adequação de metodologias analíticas utilizadas
em laboratórios
antidoping.
Atenção particular é direcionada ao Methode Alcalins Sur C-
18,
desenvolvido pelo Laboratoire LAB-Contrôle antidopage da
França, aplicável a
determinação da presença de substâncias dopantes em
matrizes biológicas (urina) de cavalos de corrida,
utilizado como método fonte para o
desenvolvimento de um método alternativo adequado às
condições laboratoriais
do Laboratório Antidoping do Jockey Club Brasileiro e
moldado à detecção de
substâncias dopantes mais freqüentes na atividade
turfística brasileira.
Tendo a cafeína sido estatisticamente identificada a
substância mais
presente nas análises realizadas pelo Laboratório
Antidoping do Jockey Club
Brasileiro ao longo de seus sete anos de atuação, o Methode
Alcalins Sur C-18
foi adequado e validado para sua determinação analítica. À
pesquisa
desenvolvida atribuem-se, também, créditos pela introdução
de um novo atributo
na validação qualitativa da metodologia, denominado valor-
limite de
determinação, subsidiando a determinação de uma faixa de
concentração, para
que resultados incorretos (falso-positivos e falso-
negativos) não constem de
laudos emitidos.
Adicionalmente à adequação e validação do método analítico
desenvolvido, a pesquisa de mestrado contribuiu não apenas
para atribuir
visibilidade a uma nova categoria de laboratórios, mas,
principalmente, para
preparar o Laboratório Antidoping do Jockey Club Brasileiro
para demonstrar sua
competência técnica como estratégia de conquista de um
credenciamento
internacionalmente reconhecido.
A presente pesquisa de mestrado voltada ao equacionamento
de um
problema inédito no Brasil de interesse da indústria
relacionada à atividade
turfística desenvolveu-se no contexto do Convênio FINEP/MCT
no.
22.01.0692.00, Referência 1974/01, que aportou recursos do
Fundo Setorial
Verde Amarelo para direcionar o esforço de pesquisa em
metrologia para a
solução de dez projetos-piloto de interesse da indústria.
No c / [en] This Master s Degree dissertation addresses the development
in
adjustment and validation and the metrological reliability
of laboratory services
covering horseracing activities. The work includes (i) the
specification of the
performance of an antidoping laboratory capable of
identifying the presence of
forbidden substances, as defined by the horse-racing
industry; (ii) the validation
of analytical methods applicable in doping tests of
biological matrices of
competing animals to Brazilian laboratories conditions, and
(iii) the definition of a
standard of excellence in harmony with the criteria of the
International Federation
of Horseracing Authorities as the tools utilized for the
accreditation of the
antidoping laboratory and the subsequent participation in
international
agreements of mutual recognition. In order to validate the
methodology, the
Brazilian Jockey Club Antidoping Laboratory (LAD/JCB) was
used as a studycase.
Original in its scope, this work contributes towards the
widening of the
accreditation of laboratories in Brazil, considering the
fact this new category of
testing laboratories is still nonexistent within the
Brazilian network of accredited
testing laboratories which considers the international
standard ISO/IEC 17025 as
the basic criteria.
With regard to development, some relevant aspects are still
being
discussed in relation to the laboratory management system:
the unreliability of
the measurements for the determination of doping, in view
of internationally
accepted practices and procedures; qualification of
specialized technical
personnel; traceability of SI (the International Unit
System) and the validation and
adjustment of analytical methodologies utilized in
antidoping laboratories.
Special attention is dedicated to Methode Alcalins Sur C-
18, developed by
Laboratoire LAB-Contrôle Antidopage in France, applicable
to the determination
of the presence of doping substances in the biological
matrix (urine) of racehorses, used as method source for the
development of an alternative method
adjusted to the Antidoping Laboratory of the Brazilian
Jockey Club conditions and
molded to detection of the more frequents doping substances
in the brazilian
horserancing activities.
Having the caffeine been the doping substance statistically
identified as the
most frequent in the tests carried out by the Brazilian
Jockey Club Antidoping
Laboratory, along its seven years of services, the Methode
Alcalins Sur C-18
was adapted and validated for its analytical
determinations. The applied research
carried out was also credited with the introduction of a
new attribute to the
methodology qualitative validation, designated as limit-
value for determination,
which provides key-information for the determination of a
concentration band, in
order that incorrect results (false-positive and false-
negative) do not appear in
the laboratory reports usually issued.
Besides the adaptation and validation of the analytical
method thus
developed, this Master s Degree dissertation contributes
not only towards greater
visibility of a new category of laboratories, but mainly to
the preparation of the
Brazilian Jockey Club Antidoping Laboratory to demonstrate
its technical capacity
as a policy and strategy for becoming in the near future an
internationally
recognized accredited laboratory.
The present M.Sc. Dissertation addresses the metrological
reliability of
antidoping laboratories, a pioneering issue in Brazil,
aiming at the solution of a
problem related to the horse-racing industry. It was
developed under the financial
support of the FINEP/MCT Agreement no. 22.01.0692.00,
Reference 1974/01
(Green-Yellow governmental Sectoral Fund) which droved
research cooperative
efforts in metrology to the solution of ten pilot-projects.
In this case specifically,
cooperated to the development of the M.Sc. research
entitled Metrological
reliability of the Antidoping Laboratory of the Brazilian
Jockey Club
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[en] STATISTICAL METHODOLOGY FOR ANALYTICAL METHODS VALIDATION APPLICABLE CHEMISTRY METROLOGY / [pt] METODOLOGIA ESTATÍSTICA PARA VALIDAÇÃO DE MÉTODOS ANALÍTICOS APLICÁVEL À METROLOGIA EM QUÍMICASONIA MARIA DE FREITAS 31 October 2003 (has links)
[pt] A metodologia estatística escolhida para validação de
métodos analíticos aplicável à metrologia em química é
fundamental para assegurar a qualidade, comprovar a
eficiência e demonstrar a exatidão dos resultados das
medições nas análises químicas. Essa metodologia,
desenvolvida em conformidade com o rigor metrológico,
resulta num sistema de medições validado, confiável e com
incertezas quantificadas. Este trabalho propõe uma
metodologia geral para validação de métodos analíticos. A
metodologia desenvolvida resultou de uma síntese de métodos
parciais descritos na literatura, e inclui uma escolha
crítica de técnicas mais adequadas dentro das alternativas
existentes. A abordagem proposta combina quatro diferentes
aspectos da validação: a modelagem da curva de calibração;
o controle da especificidade do método; a comparação da
tendência e precisão (repetitividade e precisão
intermediária) do método com um método de referência; e a
estimação das componentes de incerteza inerentes a todos
esses aspectos. Como resultado, além de uma proposta para
validação de métodos para uso em análises químicas, obtêm-
se a função de calibração inversa e as incertezas
expandidas, que permitem obter os resultados analíticos
associados aos valores da resposta, com suas respectivas
incertezas associadas. Na modelagem geral para obtenção da
curva de calibração, empregam-se técnicas estatísticas para
avaliação da linearidade e para o cálculo do mínimo valor
detectável e do mínimo valor quantificável. A
especificidade do método analítico é avaliada pela adição de
padrões a um conjunto de amostras representativas e
posterior recuperação dos mesmos, com ajuste por mínimos
quadrados e testes de hipóteses. Para estudar a tendência e
a precisão do método quando comparado a um método de
referência, utiliza-se um modelo hierárquico de quatro
níveis e a aproximação de Satterthwaite para determinação
do número de graus de liberdade associados aos componentes
de variância. As técnicas estatísticas utilizadas são
ilustradas passo a passo por exemplos numéricos. / [en] The use of statistical methodology for analytical methods
validation is vital to assure that measurements have the
quality level required by the goal to be attained. This
thesis describes a statistical modelling approach for
combining four different aspects of validation: checking
the linearity of the calibration curve and compute the
detection and the quantification limits; controlling the
specificity of the analytical method; estimating the
accuracy (trueness and precision) of the alternative
method, for comparison with a reference method. The general
approach is a synthesis of several partial techniques found
in the literature, according to a choice of the most
appropriate techniques in each case. For determination of
the response function, statistical techniques are used for
assessing the fitness of the regression model and for
determination of the detection limit and the quantification
limit. Method specificity is evaluated by adjusting a
straight line between added and recovered concentrations
via least squares regression and hypotheses tests on the
slope and intercept. To compare a method B with a reference
method A, the precision and accuracy of method B are
estimated. A 4-factor nested design is employed for this
purpose. The calculation of different variance estimates
from the experimental data is carried out by ANOVA. The
Satterthwaite approximation is used to determine the number
of degrees of freedom associated with the variance
components. The application of the methodology is
thoroughly illustrated with step-by-step examples.
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[en] ANALYSIS OF THE UNCERTAINTIES OF THE QUANTITATIVE PHASE ANALYSIS BY X-RAY POWDER DIFFRACTION BASED ON THE RIETVELD METHOD / [pt] ANÁLISE DAS INCERTEZAS DA QUANTIFICAÇÃO DE FASE PELO MÉTODO DE RIETVELD EM ANÁLISE DE PÓ POR DIFRAÇÃO DE RAIOS XTEREZINHA FERREIRA DE OLIVEIRA 25 April 2005 (has links)
[pt] A análise de sistemas de medição consiste do exame da
adequação do sistema
quanto ao operador, ao instrumento e a outras fontes de
variação, bem como da
comparação da variância do erro de medição com a variância
natural do
processo. Nesse aspecto, esta pesquisa teve por objetivo a
análise das
incertezas da quantificação de fase pelo método de Rietveld
em análise de pó.
Os efeitos de vários fatores na quantificação de fase foram
avaliados utilizando
técnicas estatísticas de planejamento experimental e de
análise multivariada,
com a utilização de materiais de alto nível de
rastreabilidade na realização dos
experimentos, no Laboratório de difração de raios X do
Departamento de
Ciências de Materiais e Metalurgia da PUC-Rio. Através da
determinação do
construto de variação do processo, constatou-se que a
quantificação das fases
analisadas sofre influência das condições de medição de
forma diferenciada de
material para material, impossibilitando a obtenção de uma
fórmula geral para
cálculo dos erros de quantificação, embora os erros possam
ser determinados
por uma análise de repetitividade e reprodutibilidade
apropriadamente
conduzida. / [en] The analysis of measurement systems is done by the
examination of the
adequacy of the system according to the operator, the
instrument and other
sources of variability, as well as by the comparison of the
measurement error
variance with the natural process variance. This research
consisted in the
evaluation of the uncertainties of phase quantification in
powder analysis by the
Rietveld method. The evaluation of the effects of several
factors on the phase
quantification was performed using statistical techniques
of design of experiments
and of multivariate analysis, with the use of materials of
high level of traceability
for the conduction of the experiments, in the Laboratory of
X-ray Diffraction of the
Pontifícia Universidade Católica do Rio de Janeiro. Through
the determination of
the variational structure of the process it was verified
that the analyzed phases
suffer influence of the measurement conditions in a
differentiated way, which
prevents the obtention of a general formula for calculation
of the quantification
error, although the errors can be determined by a
repeatability and reproducibility
analysis properly conducted.
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