O propósito deste estudo foi avaliar, histologicamente, o efeito do laser de baixa intensidade na cicatrização óssea de defeitos de tamanho crítico (DTC- 5mm) criados cirurgicamente em calvárias de ratos, quando associado ou não ao osso bovino inorgânico (Bio-Oss®). 60 ratos machos (Rattusnorvegicus, albinus, Wistar) foram divididos em 6 grupos: C (controle), L (Laser de Baixa Intensidade - GaAlAs, 730nm, 100mW, 6J, 210J/cm2), AO (Osso Autógeno) OAL (Osso Autógeno + Laser de Baixa Intensidade), BO (Osso Bovino Inorgânico), BOL (Osso Bovino Inorgânico + Laser de Baixa Intensidade) . Os animais foram submetidos à eutanásia após 30 dias. A quantidade de osso neoformado e a área de partícula remanescente dos materiais implantados foram calculadas como porcentagem da área do defeito original. Os dados foram submetidos à análise estatística (Teste de Kruskal - Wallis, Teste de Dunn; p<0,05). Os grupos irradiados com laser de baixa intensidade, L (47,67% ± 8,66%), OAL (39,15% ± 16,72%) e BOL (48,57% ± 28,22%) apresentaram maior área de neoformação óssea que os grupos C (9,96% ± 4,50%), OA (30,98% ± 16,59%) e BO (11,36% ± 7,89%) que não foram irradiados. Além disso, foram significativamente melhores que o Grupo C. Dentro dos limites deste estudo, conclui-se que o laser acelerou o processo de neoformação óssea e de reabsorção das partículas dos materiais de enxertia, podendo ser considerado uma modalidade terapêutica interessante a ser associada com biomateriais em cirurgias ósseas reconstrutivas. / This study histologically evaluated the effect of low level laser on the bone healing of critical size defects (CSD- 5mm) surgically created in rat calvaria, associated or not with inorganic bovine bone (Bio-Oss®). Sixty male rats (Rattus norvegicus, albinus, Wistar) were divided in 6 groups: C (control), L (low level laser - GaAlAs, 730nm, 100mW, 6J, 210J/cm2), AO (autogenous bone) OAL (autogenous bone + low level laser), BO (inorganic bovine bone), BOL (inorganic bovine bone + low level laser). The animals were killed after 30 days. The quantity of newly formed bone and area of remaining particles of the implanted materials were calculated as percentages of the original defect area. Data were statistically analyzed (Kruskal Wallis test, Dunn test; p<0.05). The groups irradiated with low level laser, L (47.67% ± 8.66%), OAL (39.15% ± 16.72%) and BOL (48.57% ± 28.22%) presented greater area of new bone formation than the groups C (9.96% ± 4.50%), OA (30.98% ± 16.59%) and BO (11.36% ± 7.89%), which were not irradiated. Also, they were significantly better than group C. within the limits of this study, it was concluded that the laser accelerated the new bone formation and resorption of particles of graft materials, thus it may be considered an interesting therapeutic option for association with biomaterials in reconstructive bone surgeries.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do laser em baixa intensidade na cicatrização de defeitos ósseos preenchidos com vidro bioativo (VB), em animais. Foi criado um defeito ósseo de tamanho crítico (DTC) com 5 mm de diâmetro na calvária de 60 ratos machos adultos (Rattus novergicus, albinos, Winstar), pesando entre 250g e 300g. Os animais foram divididos aleatoriamente em 6 grupos (n=10), sendo: 1) Grupo C (controle), 2) Grupo L (laser), 3) Grupo OA (osso autógeno), 4) Grupo OAL (osso autógeno + laser), 5) Grupo VB (vidro bioativo), 6) Grupo VBL (vidro bioativo + laser). Os animais foram submetidos a eutanásia após 30 dias. As áreas de osso neoformado (AON) e as áreas de partículas remanescentes de vidro bioativo (APR) foram calculados em relação à área total (AT), em porcentagem. Para análise estatística dos dados utilizou-se o teste paramétrico ANOVA, seguido pelo teste Tukey (p>0,05). A maior média de AON foi encontrada no grupo L (47,67 +8,66), seguido pelos grupos OAL (30,98 +16,59)e VBL (31,13 + 16,98). Houve diferença estatisticamente significante em relação ao AON entre o grupo C e os demais grupos com exceção da comparação com o grupo VB (Teste Tukey, p>0,05); entre os grupos L e VB quanto aos valores de AON (Teste Tukey, p>0,05). Não houve diferença estatisticamente significante dos valores de AON entre o grupo OA e os demais grupos estudados (Teste Tukey, p>0,05), entre o grupo OAL e os grupos VB e VBL quanto aos valores de AON (Teste Tukey, p>0,05) e entre os grupos VB e VBL (Teste Tuckey, p>0,05). A maior média de APR foi encontrada no grupo VB (25,15 + 4,82), seguido pelo grupo VBL (17,06 +9,01). Não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos (teste t, p>0,05). O laser em baixa intensidade, com o protocolo de aplicação utilizado, não contribuiu para o aumento da área de neoformação óssea dos sítios preenchidos com vidro bioativo, no período avaliado. / The objective of this study was to evaluate the effect of low-level lasers on the healing of bone defects grafted with bioactive glass (VB) in animals. A bone defect of critical size with 5mm in diameter was made in the skullcap of 60 male adult rats (Rattus novergicus, albinos, Winstar), weighing between 250g and 300g. The rats were divided randomly into 6 groups (n=10). Those being: 1) Group C (control); 2) Group L (laser); 3) Group OA (autogenous bone); 4) Group OAL (autogenous bone + Laser); 5) Group VB (bioactive glass); 6) Group VBL (bioactive glass + laser). The rats were euthanized after 30 days. The areas of new bone formation (AON) and the areas of remaining particles of bioactive glass (APR) were calculated in relation to the total area by percentage. For statistical analysis of the data, the parametric ANOVA rest followed by the Tukey test (p>0,05) was used. The highest average AON was found in group L (47,67 + 8,66), followed by groups OAL (30,98 + 16,59) and VBL (31,13 + 16,98). There was a statistically significant difference regarding in AON between Group C and the other groups with the exception of comparison with Group VB (Tukey Test, p>0,05). There was also a statistically significant difference between the L and VB groups regarding the AON value (Tukey Test, p>0,05). There was no statistically significant difference of AON values between group OA and the other groups studied (Tukey Test, p>0,05); between group OAL and the groups VB and VBL regarding the AON value (Tukey Test, p>0,05); and between the VB and VBL groups (Tukey Test, p>0,05). The highest average of APR was found in group VB (25,15 + 4,82), followed by group VBL (17,06 + 9,01).There was no statistically significant difference between groups (teste t, p>0,05). The low-level laser, with the application protocol used, did not contribute to an increase in the new bone formation area of the sites grafted with bioactive glass in the assessed period of time.

O reparo ósseo é um processo que consiste na restauração dos tecidos. Ele pode ser facilitado através de enxertos, estimulação bioquímica e estimulação física. Por outro lado, pode ser retardado por endotoxina (lipopolissacarídeo; LPS). O exercício físico exerce efeito benéfico para o osso, porém não é reconhecido o efeito sobre a reparação óssea. Assim, investigamos o efeito do exercício físico sobre a ação do LPS no reparo ósseo, por meio, de dosagens de citocinas plasmáticas, densitometria óssea, análise histológica quantitativa do tecido ósseo neoformado e marcadores imuno-histoquímicos, em animais sedentários e treinados. Os ratos foram divididos em quatro grupos: sedentário salina, sedentário LPS, exercício salina e exercício LPS. O exercício consistiu no treinamento físico na esteira durante quatro semanas. Após o treinamento, os ratos foram submetidos à cirurgia para confecção do defeito ósseo na tíbia direita e 24 horas após a cirurgia o LPS foi administrado na dose de 100 ?g/kg ou 1 ml/kg de salina, intraperitoneal. Finalmente, após 10 dias o sangue e as tíbias direitas foram obtidos para as análises, período em que os animais não foram submetidos ao treinamento físico. Os ratos treinados tiveram menor peso corporal do que os ratos sedentários (P<0,001). O exercício físico exerceu efeito positivo na reparação óssea, aumentando a densidade mineral óssea (P<0,005), o conteúdo mineral ósseo (P<0,005), a neoformação óssea (P<0,005), o colágeno tipo I (P<0,05) e a expressão de osteocalcina (P<0,05). As citocinas plasmáticas não foram detectadas na análise. Esses parâmetros não foram afetados pela administração sistêmica de LPS. Assim, os dados são consistentes com o conceito de que o exercício físico exerce um importante efeito osteogênico, que é mantido durante a inflamação sistêmica aguda induzida por uma única dose de LPS. / Bone repair is a process involved in the restoration of injured tissues. It can be facilitated by grafting, biochemical and physical stimulation. On the other hand, may be delayed by endotoxin (lipopolysaccharide; LPS). Physical exercise exerts beneficial effects on the bone, but is not known its effect on bone repair. Thus, we investigated the effect of exercise on the LPS action on bone repair through plasma cytokine measurements, bone densitometry, quantitative histological analysis for new bone tissue and immunohistochemical markers in sedentary and exercised animals. Rats were divided into four groups: sedentary saline, sedentary LPS, exercise saline and exercise LPS. Exercise consisted in physical training on the treadmill for four weeks. After training, rats underwent surgery for making the bone defect in the right tibia and 24 hours after the surgery LPS was administered at a dose of 100 g/kg or 1 ml/kg saline, intraperitonial. Eventually, blood and right tibias were obtained for analysis after 10 days when rats were not submitted to physical training. Exercised rats had lower body weight than the sedentary rats (P<0,001). The physical exercise had a positive effect on bone repair, increased bone mineral density (P<0,005), bone mineral content (P<0,005), bone formation (P<0,005), type I collagen (P<0,05) and osteocalcin expression (P<0,05). Plasma cytokines were not detected in the analysis. These parameters were not affected by systemic administration of LPS. Thus, our data are consistent with the notion that physical exercise has an important osteogenic effect, which is maintained during acute systemic inflammation induced by exposition to a single dose of LPS.

O tratamento das lesões ósseas cavitárias com autoenxerto ainda é considerado o padrão-ouro. Seu uso, entretanto, é limitado, devido principalmente à baixa disponibilidade e à morbidade do sítio doador. Os enxertos ósseos sintéticos são estudados com o objetivo de superar as limitações decorrentes da retirada de autoenxerto ou da disponibilidade de bancos de tecidos. O vidro bioativo é um material sintético osteoindutor, osteocondutor e antibacteriano, à base de sílica e cria um arcabouço para o crescimento ósseo. Objetivo: comparar o vidro bioativo com o autoenxerto, com relação às características histomorfométricas. Métodos: foi realizado um estudo experimental prospectivo caso-controle em animais, para comparar o vidro bioativo com o autoenxerto com relação às características histomorfométricas. Oito coelhos foram submetidos a uma cirurgia em que um defeito cavitário foi criado em ambos os fêmures proximais; de um lado, o defeito ósseo criado foi preenchido com os grânulos de vidro bioativo; do outro, o defeito ósseo foi preenchido com o autoenxerto retirado do lado contralateral. Os lados foram randomizados. Catorze dias após a cirurgia os animais foram sacrificados. Resultados: a análise histológica revelou que a neoformação óssea entre os dois grupos foi equivalente, e que a contagem de osteoblastos foi superior nos fêmures tratados com vidro bioativo. A contagem de osteócitos, por outro lado, foi menor. A semelhança na intensidade de neoformação óssea coincide com o encontrado na literatura. As diferenças de contagem celular são concordantes com o mecanismo de ação do vidro bioativo: aumento do turnover ósseo, estímulo dos osteoblastos e retardo na sua diferenciação para osteócitos. Conclusão: o vidro bioativo promove neoformação óssea semelhante ao autoenxerto neste modelo animal de defeito ósseo cavitário. Nível de evidência III, estudo caso-controle / Autograft is still considered the gold standard in the treatment of cavitary bone lesions. The low availability and donor site morbidity, however, limits its use. Synthetic bone grafts have been studied in order to overcome the limitations of autograft or allograft. Bioactive glass is an osteoinductive, osteoconductive and antibacterial silica-based synthetic material. It promotes the creation of a scaffold for bone growth. Objectives: to compare bioactive glass and autograft regarding their histomorphometric characteristics. Methods: the author conducted a prospective case-control experimental study on animals, to compare the histomorphometric characteristics of bioactive glass versus autograft. Eight rabbits underwent surgery in which a cavitary defect was created in both proximal femurs. On one side, the bone defect was filled with bioactive glass granules and on the other, the defect was filled with autograft grafted from the contralateral side. The sides were randomized. Fourteen days after surgery, the animals were euthanized. Results: histologic analysis revealed that bone neoformation was equivalent among the two groups and the osteoblasts cell-count was higher in the femurs treated with bioactive glass. The osteocytes cell-count, however, was lower. The similarity in bone formation between both groups was also found in the literature. The differences in cell-count of osteocytes and osteoblasts are in accordance with the mechanism of action of the bioactive glass: increase in bone turnover, stimulation of osteoblasts and inhibition of their differentiation into osteocytes. Conclusion: bioactive glass is similar to autograft regarding bone neoformation, in this animal model of cavitary bone defects. Level of evidence III, case-control study

O objetivo do estudo foi avaliar a influência do diâmetro do orifício piloto e a freqüência da colocação dos implantes no torque de inserção e na resistência ao arrancamento. Foram utilizados parafusos de 5, 6 e 7mm do sistema USS de fixação vertebral, os quais foram inseridos nos corpos de prova de madeira, poliuretana, polietileno e osso bovino. Para inserção dos implantes foram confeccionados com broca orifícios piloto com diâmetros menor, igual e maior que o diâmetro interno do parafuso. O torque de inserção dos parafusos avaliado nos corpos de prova de madeira foi mensurado por meio de torquímetro com capacidade de 5Nm, e nos demais corpos de prova foi utilizado torquímetro de 2Nm. Os ensaios mecânicos de arrancamento dos parafusos foram realizados utilizando máquina universal de ensaio Emic? e Software Tesc 3.13 para análise dos resultados, utilizando células de carga com capacidade de 2000 N e 20000 N, selecionadas de acordo com a resistência mecânica de cada corpo de prova, e com velocidade de aplicação de força de 2 mm/min. Os valores do torque de inserção dos parafusos de 5, 6 e 7mm de diâmetro externo, nos diferentes materiais, apresentaram maiores valores de torque na primeira inserção, com exceção dos corpos de prova de poliuretana com orifício piloto de 5,5mm. O diâmetro do orifício piloto em relação ao diâmetro interno do parafuso apresentou influência no torque de inserção dos implantes, nos diferentes corpos de prova, observando maior torque de inserção nos corpos de prova com orifício piloto menor que o diâmetro interno do parafuso e menor torque de inserção nos corpos de prova com diâmetro do orifício piloto maior que o diâmetro interno do parafuso. A força máxima de arrancamento nos parafusos de 5, 6 e 7mm de diâmetro externo, inseridos nos diferentes corpos de prova, apresentaram maiores valores na primeira inserção nos diferentes diâmetros de orifício piloto. O diâmetro do orifício piloto em relação ao diâmetro interno do parafuso apresentou influência na força máxima de arrancamento dos implantes, nos diferentes corpos de prova, observando maior força de arrancamento nos corpos de prova com orifício piloto menor que o diâmetro interno do parafuso e menor força de arrancamento nos corpos de prova com diâmetro do orifício piloto maior que o diâmetro interno do parafuso. Podemos concluir que a freqüência de colocação dos implantes influencia na qualidade da ancoragem. A realização de menor freqüência de colocação dos implantes proporciona uma melhor fixação. A perfuração do orifício piloto com instrumental de menor diâmetro, em relação ao diâmetro interno do parafuso, tende a apresentar melhor fixação do parafuso que a perfuração com diâmetro maior. / The aim of the study was to evaluate the influence of the diameter of the pilot hole and the frequency of screw placement on pullout out resistance and insertion torque of the pedicle screw. Pedicle screws of 5, 6 and 7mm of the USS system for vertebral fixation were inserted into wood, polyurethane, polyethylene and bovine bone. The pilot hole for screw insertion was drilled with small, equal and wider than the internal diameter of the screw. The insertion torque was measured in the wood test bodies used a torquímetro with capacity of 5Nm, and other test bodies was used a torquimetro of 2Nm. Mechanical pullout assays were performed using a universal testing machine rehearsals of screws pullout were accomplished using universal machine Emic® and Software Tesc 3.13 for analysis of the results. Load cells were using with capacity of 2000 N and 20000 N, selected in agreement with the mechanical resistance of each test bodies. A constant displacement rate of 2mm/min was applied until failure. The values of the insertion torque of the screws of 5, 6 and 7mm of external diameter, in the different materials, they presented highest insertion torque in the first insert, in the different materials, except for the polyurethane test bodies with pilot hole of 5,5mm. The diameter of the pilot hole in relation to the internal diameter of the screw exerts an influence in the torque of insert of the implants. We observed highest insert torque in the test bodies with smaller pilot hole than the internal diameter of the screw and smaller insert torque in the proof bodies with diameter of the wider pilot hole than the internal diameter of the screw. The pullout resistance of the screws of 5, 6 and 7mm of external diameter performed highest values in the first screw insert, in the different diameters of pilot hole and test bodies. The diameter of the pilot hole in relation to the internal diameter of the screw exerts an influence in the pullout resistance of the implants. The highest pullout resistance was observed in the test bodies with smaller pilot hole than the internal diameter of the screw. The smaller pullout resistance was observed in the test bodies with diameter of the larger pilot hole than the internal diameter of the screw. We can conclude that the frequency of placement of the implants influences in the quality of the anchorage. The accomplishment of smaller frequency of placement of the implants provides a better fixation. The perforation of the pilot hole with instrumental of smaller diameter, in relation to the internal diameter of the screw, tends to present better fixation of the screw than the perforation with larger diameter.

O processo de reparo do tecido ósseo tem sido alvo de estudos com o intuito de promover uma melhora na qualidade e tempo de reparo. Um elemento que tem sido estudado por alguns grupos é o fluoreto, pois tem sido proposto como terapêutico para osteoporose (Europa). Deste modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar comparativamente o efeito do fluoreto administrado na água de beber sobre o reparo ósseo alveolar de ratos. Neste estudo foram utilizados 4 grupos com ratos Wistar de 80 dias de vida (n=200), os quais receberam água de beber contendo 5, 15 e 50 ppm de fluoreto e água deionizada (controle) durante todo experimento. Esses animais tiveram o incisivo superior direito extraído. Os animais foram eutanasiados 0 hora, 7, 14, 21 e 30 e 60 dias após a extração. Amostras de plasma sanguíneo foram obtidas para análise de concentração de flúor, e a região do alvéolo dental foi coletada para as análises de microscopia (Hematoxilina Eosina e imunoistoquímica) e zimografia (metaloproteinases de matriz 2 e 9 MMP-2 e 9). A análise de concentração de flúor no plasma sangüíneo mostrou maior presença desse elemento no grupo tratado com 50 ppm de F nos períodos de 21 e 30 dias. Na análise histológica foi detectado osso neoformado em todos os animais até 60 dias, porém o grupo de 50 ppm de F apresentou menor formação óssea nos períodos de 14, 21 e 30dias. A análise morfométrica confirmou um aumento na densidade de volume de osso neoformado, entre 7 e 60 dias, nos grupos controle, 5 ppm, 15 ppm e 50 ppm de F, com concomitante diminuição na densidade de volume de coágulo sangüíneo. A expressão de RANK-L e OPG não foi alterada pela exposição crônica ao fluoreto na água de beber durante os períodos estudados (p<0,05). A atividade da MMP-2 foi mais acentuada no período inicial, enquanto a MMP-9 teve maior atividade no período final. Concluiu-se que o F, em altas concentrações pode alterar a dinâmica do reparo ósseo alveolar diminuindo a formação de novo tecido ósseo, associado a um atraso na remissão do coágulo sangüíneo. Proteínas como RANK-L, OPG, MMP-2 e MMP-9 também podem ter sua expressão alterada no tecido ósseo em reparo. / The repair of bone has been investigated with the aim of promoting an improvement in the quality and time of the repair process. One element that has been studied by some groups is fluoride, it has been proposed as a treatment for osteoporosis (Europe). Thus, the objective was to comparatively evaluate the effect of fluoride administered in drinking water on alveolar bone repair in rats. This study used 4 groups of rats of 80 days (n=200), which received drinking water containing 5, 15, and 50 ppm of fluoride, and deionized water (control) throughout the experiment. These animals had their upper right incisor extracted. The animals were euthanized 0 hours, 7, 14, 21 and 30 and 60 days after extraction. Samples of blood plasma were obtained for analysis of fluoride concentration, and the region of the alveolus was collected for microscopic analysis (Hematoxylin eosin and Immunohistochemistry) and zymography (metalloproteinases 2 and 9 MMP-2 and 9). Analysis of fluoride concentration in blood plasma showed a greater presence of this element in the group treated with 50 ppm of F in periods of 21 and 30 days. Histological analysis detected a new bone formed in all animals up to 60 days, but the group of 50 ppm F showed lower bone formation at 14, 21 and 30 days. Morphometric analysis confirmed an increase in the volume density of newly formed bone, between 7 and 60 days in control groups, 5 ppm, 15 ppm and 50 ppm F, with a concomitant decrease in the volume density of blood clot. The expression of RANK-L and OPG was not altered by chronic exposure to fluoride in drinking water during the study period (p<0.05). The activity of MMP-2 was more pronounced in the early period, while MMP-9 had higher activity in the final period. It was conclude that the F, in high concentrations change the dynamics of the alveolar bone repair by decreasing the formation of new bone, associated with a delay in treating the blood clot. Proteins as RNK-L, OPG, MMP-2 and MMP-9 may also have changed in their expression in bone tissue repair.

Os princípios biológicos da regeneração óssea guiada (ROG) têm contribuído para o desenvolvimento de membranas que, em odontologia, são utilizadas em diversas situações como tratamentos com implantes dentários, aumento de rebordo alveolar e reparo de defeitos ósseos de origem traumática e patológica. Resultados de experimentos in vitro comparando a membrana obtida pela associação do polímero poli(fluoreto de vinilideno-trifluoretileno) e da cerâmica titanato de bário (P(VDFTrFE)/ BT) à membrana de politetrafluoretileno (PTFE) mostraram uma resposta favorável de osteoblastos, fibroblastos e queratinócitos à membrana de P(VDFTrFE)/ BT. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da membrana de P(VDFTrFE)/ BT sobre a formação óssea in vivo. Foram criados defeitos ósseos com 5 mm de diâmetro em calvárias de ratos machos Wistar (peso 200-250 g), distribuídos em três grupos com relação à utilização ou não de membranas nos defeitos ósseos: (1) membrana de P(VDF-TrFE)/BT; (2) membrana de PTFE; (3) nenhum tipo de membrana. Ao final de 4 e 8 semanas os animais foram eutanasiados e as amostras foram submetidas à: (1) análise por microtomografia computadorizada (micro-CT) para avaliar volume ósseo, superfície óssea, superfície óssea específica, número de trabéculas, separação trabecular e espessura trabecular, (2) análise histológica com base em cortes histológicos não descalcificados, (3) análise por reação em cadeia da polimerase em tempo real (PCR em tempo real) para avaliar a expressão gênica dos marcadores ósseos runt-related transcription factor 2 (RUNX2), fosfatase alcalina (ALP), sialoproteína óssea (BSP), osteocalcina (OC), osteoprotegerina (OPG) e receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL) e (4) análise da expressão de microRNAs (miRs) pela técnica de sequenciamento na plataforma Illumina. Os dados das análises morfométricas e da expressão gênica foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo teste de Fischer quando apropriado, e para a análise da expressão de miRs foi utilizado o teste de Mann-Whitney para comparar a membrana de P(VDF-TrFE)/BT à de PTFE. Para todas as comparações o nível de significância adotado foi de 0,05. Os defeitos que não receberam a membrana tiveram uma formação óssea insignificante. Ambas as membranas favoreceram a formação óssea, sendo a superfície óssea maior sobre a membrana de P(VDF-TrFE)/BT comparada à de PTFE em 4 (p=0,01) e 8 (p=0,001) semanas e a separação trabecular maior sobre a membrana de PTFE comparada à de P(VDF-TrFE)/BT em 4 (p=0,05) e 8 (p=0,001) semanas. A expressão gênica de BSP (p=0,01), OC (p=0,001) e OPG (p=0,001) foi maior e de RANKL (p=0,001) foi menor sobre a membrana de P(VDFTrFE)/ BT comparada à de PTFE em 4 semanas. A expressão gênica de RUNX2 (p=0,001) e OC (p=0,05) foi maior e de ALP (p=0,05), RANKL (p=0,01) e OPG (p=0,001) foi menor sobre a membrana de P(VDF-TrFE)/BT comparada à de PTFE em 8 semanas. Quarenta e cinco e 13 miRs foram regulados positivamente (>2 vezes) em 4 semanas e 8 semanas, respectivamente, e 11 e 39 miRs foram regulados negativamente (>2 vezes) em 4 semanas e 8 semanas, respectivamente, pela membrana de P(VDF-TrFE)/BT comparada à de PTFE. Os resultados indicam que a membrana de P(VDF-TrFE)/BT favorece a formação óssea quando comparada à membrana de PTFE e, portanto, pode ser considerada um biomaterial promissor para ser utilizado em procedimentos de ROG. / Biological principles of guided bone regeneration (GBR) have contributed to development of membranes that, in dentistry, are used in several situations such as treatment with dental implants, alveolar bone augmentation and repair of traumatic and pathological bone defects. Results of in vitro experiments comparing membrane obtained by the combination of poly(vinylidene fluoride-trifluoroethylene) and barium titanate ceramics (P(VDF-TrFE)/BT) with polytetrafluoroethylene (PTFE) membrane showed a favorable response of osteoblasts, fibroblasts and keratinocytes to the P(VDF-TrFE)/BT membrane. The aim of this study was to evaluate the effect of P(VDFTrFE)/ BT membrane on in vivo bone formation. Bone defects with 5 mm in diameter were created in calvaria of male Wistar rats (weight 200-250 g), distributed into three groups regarding the use or not of membranes on defects: (1) P(VDF-TrFE)/BT membrane; (2) PTFE membrane; (3) no membrane. At the end of 4 and 8 weeks, the animals were euthanized and samples were subjected to: (1) computed microtomography analysis (micro-CT) to assess bone volume, bone surface, specific bone surface, trabecular number, trabecular thickness and trabecular separation; (2) histological analysis based on non-decalcified histological sections; (3) real time polymerase chain reaction (real time PCR) to evaluate gene expression of the bone markers runt-related transcription factor 2 (RUNX2), alkaline phosphatase (ALP), bone sialoprotein (BSP), osteocalcin (OC), osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL); (4) microRNAs (miRs) sequencing analysis at Illumina platform. Data from morphometric and gene expression analyses were submitted to the Kruskal-Wallis test followed by Fischer\'s test, when appropriate, and from miRs expression to the Mann-Whitney test to compare P(VDF-TrFE)/BT with PTFE membrane. For all comparisons, the significance level was 0.05. Defects without membrane exhibit a non significant bone formation. Both membranes favored osteogenesis with an increased bone formation on the P(VDF-TrFE)/BT membrane compared with PTFE at 4 (p=0.05) and 8 weeks (p=0.001). Trabecular separation was greater on PTFE membrane compared with the P(VDF-TrFE)/BT at 4 (p=0.05) and 8 weeks (p=0.001). At 4 weeks, the gene expression of BSP (p=0.01), OC (p=0.001) and OPG (p=0.001) were higher on P(VDF-TrFE)/BT membrane compared with PTFE, while RANKL (p=0.001) was lower. The gene expression of RUNX2 (p=0.001) and OC (p=0.05) were higher and ALP (p=0.05), RANKL (p=0.01) and OPG (p=0.001) were lower on the membrane of P(VDF- TrFE)/BT compared with PTFE at 8 weeks. Fortyfive and 13 miRs were up-regulated (> 2 fold) at 4 weeks and 8 weeks, respectively, and 11 and 39 miRs were negatively regulated (> 2 fold) at 4 weeks and 8 weeks, respectively, on the P(VDF-TrFE)/BT membrane compared with PTFE membrane. The results indicate that the P(VDF-TrFE)/BT membrane favors bone formation compared with PTFE membrane and, therefore, may be considered a promising biomaterial for using in GBR procedures.

Orientador: José Ricardo de Albergaria Barbosa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-24T03:15:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_PauloHemersonde_D.pdf: 8285563 bytes, checksum: e294a6dc0647058066633e61386f29b1 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Em maxilas severamente absorvidas, como tratamento de reabilitação, podem ser utilizados os implantes dentais osseointegráveis convencionais. Todavia, nestas situações, estão presentes obstáculos para a instalação dos implantes como: quantidade insuficiente e qualidade inadequada do osso encontrado na maxila. Nestas situações, são necessárias cirurgias reconstrutivas para restabelecer as dimensões do rebordo avelolar em espessura e altura possibilitando assim a instalação adequada destes implantes. Geralmente, essas reconstruções utilizam osso autógeno retirado de algum sitio doador do paciente, como a calota craniana, costela e crista do ilíaco. Alternativamente, com os avanços da engenharia tecidual, a rhBMP-2 (recombinant human bone morphogenethic protein-2) surgiu eliminando a necessidade de qualquer remoção de sítio doador como também qualquer outro biomaterial nas reconstruções ósseas dos maxilares deixando o procedimento com menor morbidade e maior aceitabilidade dos pacientes. Desta forma, a presente pesquisa apresenta 2 estudos descritos nos capítulos a seguir. CAPÍTULO 1: O objetivo deste estudo foi avaliar a sobrevida de implantes instalados em osso nativo de maxilas como também nas reconstruídas com osso autógeno. Foi obtido um acompanhamento de 8-10 anos com pacientes de ambos os grupos reabilitados com próteses fixas sobre implantes dentais. O sucesso dos implantes em maxilas reconstruídas com ósso autogeno não apresentaram diferenças estatísticas à implantes inseridos em maxilas com osso nativo. CAPÍTULO 2: O objetivo deste estudo foi apresentar uma nova técnica de reconstrução óssea de maxila utilizando rhBMP-2 objetivando previsibilidade e melhores resultados no aumento do volume ósseo necessário. A técnica sugerida ofereceu bons resultados no volume ósseo a ser obtido nas reconstruções ósseas de maxila com rhBMP-2. / Abstract: In maxillary severely absorbed as rehabilitation treatment, can be used conventional dental implants. However, these situations are present obstacles to the installation of the implants as insufficient and inadequate quality of bone found in the jaw , as well as the expansion of the maxillary sinus pneumatization . In these situations, it is necessary reconstructive surgery to restore the dimensions of thickness and height on rim thus allowing proper installation of these implants. Generally, these reconstructions using autogenous bone taken from a donor site from the patient , such as calota craneal , rib and the iliac crest . Alternatively, with advances in tissue engineering, rhBMP-2 (recombinant human bone morphogenethic protein-2) appeared eliminating the need to remove any donor site as well as any other biomaterial in the maxila bone reconstruction procedure with leaving the lower morbidity and higher patient acceptability. Given the above, this research presents two studies described in the following chapters. CHAPTER 1: The objective of this study was to evaluate the survival of implants placed in native bone in the maxilla as well as in maxilla reconstructed with autogenous bone. We obtained a follow-up of 8-10 years with both groups of patients rehabilitated with fixed prostheses on dental implants. The survival of implants in maxilla was reconstructed with autogenous bone implants inserted into the lower maxilla with native bone. CHAPTER II: The objective of this study was to present a new technique for reconstruction of maxilla bone using rhBMP-2 seeking precision in increased bone volume needed. The suggested technique offered precision in bone volume to be obtained in the maxilla bone reconstruction with rhBMP-2. / Doutorado / Cirurgia e Traumatologia Buco-Maxilo-Faciais / Doutor em Clínica Odontológica

Orientadores: Pedro Duarte Novaes, Cristiane Ribeiro Salmon / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T00:19:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neves_JulianadosSantos_D.pdf: 4044530 bytes, checksum: 22df8d6b0c562b9ece71cf5970d118cc (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A administração intermitente do hormônio paratireóideo (PTH) promove um aumento da massa óssea, sendo atualmente utilizado no tratamento de osteoporose. Entretanto, poucos estudos têm avaliado os efeitos do PTH sobre o metabolismo do osso alveolar, e mais especificamente, no processo de reparo desta estrutura, podendo este surtir um efeito favorável na cicatrização da ferida alveolar. Considerando-se que o padrão de cicatrização da ferida do alvéolo de molares de ratos é similar ao de humanos e a sua relevância clínica, este estudo teve como objetivo analisar o efeito da administração intermitente do PTH sobre o reparo alveolar após exodontia de molares de ratos. Ratas Wistar de 200g tiveram seus primeiros molares inferiores extraídos e receberam injeções subcutâneas de 40 ?g/kg de hPTH(1-34) (grupo PTH) ou solução veículo (grupo controle) em dias intemitentes após a exodontia. Os animais foram sacrificados aos 3, 5, 7 e 11 dias após a cirurgia. Análises histomorfométricas do volume de osso recém-formado, número de osteoblastos e osteoclastos TRAP-positivos foram realizadas em cortes histológicos seriados. O Ligante do receptor ativador do fator nuclear ?? (RANKL), Sialoproteína óssea (BSP) e Osteopontina (OPN) foram localizadas no alvéolo em cicatrização por imunohistoquímica. A expressão dos genes de Colágeno 1 (Col1?1), Fosfatase alcalina (Alp), Fator de crescimento insulínico (Igf-1), Osteocalcina (Ocn), Bsp, Opn, Osteoprotegerina (Opg) e Rankl, foi analisada por qRT-PCR. A presença de osso recém-formado foi notada em alvéolos a partir de 5 dias de reparo em ambos os grupos. O volume de osso recém-formado foi significativamente maior no grupo PTH nos períodos de 5, 7 e 11 dias (p<0.05), acompanhado de um número maior de osteoblastos aos 5 dias de reparo (p<0.05). No grupo controle houve um aumento gradual na expressão de todos os genes estudados, com exceção de OPN, nos períodos após a cirurgia. De um modo geral, a expressão de Col1?1, Alp, Igf-1 e Ocn foi maior no grupo PTH nos períodos iniciais, seguido por um decréscimo significativo aos 7 dias de reparo comparado ao grupo controle. A expressão de Bsp foi similar em ambos os grupos, enquanto a expressão de Opn foi menor vi no grupo PTH aos 7 e 11 dias de reparo, com estas proteínas apresentando a mesma distribuição nas trabéculas ósseas em formação no interior do alvéolo. O número de osteoclastos TRAP-positivos foi similar em ambos os grupos em todos os períodos avaliados, assim como o padrão de marcação para RANKL. Entretanto, a razão dos genes Rankl:Opg foi maior no grupo PTH aos 11 dias de reparo, sugerindo que o PTH pode favorecer a osteoclastogênese a partir deste período. Conclui-se que o tratamento intermitente com hPTH (1-34) teve um efeito anabólico sobre o processo de reparo do osso alveolar de forma pontual aos 5 dias, estimulando o aumento no número de osteoblastos e da expressão de genes relacionados a diferenciação e produção de matriz por estas células, causando consequentemente, um aumento no volume de osso recém-formado no interior do alvéolo / Abstract: The intermittent administration of parathyroid hormone (PTH) promotes an increase in bone mass, and it is currently used to treat osteoporosis. However, few studies have evaluated the effects of PTH on the metabolism of the alveolar bone, and more specifically in the repair process of this structure, which may have a positive effect on alveolar wound healing. Considering that the pattern of the alveolar wound healing post molar extraction in rats is similar to that of the humans and its clinical relevance, this study aimed to analyze the effect of intermittent PTH administration on alveolar wound healing after extraction of rat molars. Wistar rats (200g) had their first molars extracted and received subcutaneous injections of 40 ?g/kg of hPTH (1-34) (PTH group) or vehicle solution (control group) in alternated days after the extraction. The animals were sacrificed at 3, 5, 7 and 11 days after surgery. Histomorphometric analysis of the volume of newly formed bone, number of osteoblasts and TRAP-positive osteoclasts were performed on serial histological sections. Receptor activator of nuclear factor ?? ligand (RANKL), bone sialoprotein (BSP) and osteopontin (OPN) were localized at the healing socket by immunohistochemistry. Collagen 1 (Col1?1), alkaline phosphatase (Alp), insulin growth factor (Igf-1), osteocalcin (Ocn), Bsp, Opn, osteoprotegerin (Opg) and Rankl gene expression was assessed by qRT-PCR. Newly formed bone was observed in sockets from 5 days of repair in both groups. The volume of newly formed bone was significantly higher in PTH group at 5, 7 and 11 days of repair (p <0.05). In the control group there was a gradual increase in the expression of all genes studied, except for Opn, through the periods of healing. Overall, the expression of Col1?1, Alp, Igf-1 and Ocn in the PTH group was higher at the initial periods, followed by a significant down-regulation at 7 days of repair compared to the control group. Bsp expression was similar in both groups, while Opn expression was down-regulated by PTH at 7 and 11 days of repair. Both proteins showed the same distribution on the forming trabeculae in the socket. The number of TRAP-positive osteoclasts was similar in both groups in all periods of repair, as well as the labeling pattern for RANKL. However, viii Rankl:Opg ratio was higher in the PTH group at 11 days of repair, suggesting that PTH may promote osteoclastogenesis from this period. In conclusion, the intermittent treatment with hPTH-(1-34) had an anabolic effect on the alveolar wound healing specifically at 5 days of repair, stimulating an increase on the osteoblast number and on the expression of genes related to the differentiation and production of bone matrix by these cells, thereby resulting in increased volume of newly formed bone in the healing socket / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:01:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4208_1.pdf: 1327476 bytes, checksum: 011aa147e142bc085f86f772d68720ca (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Universidade Salgado de Oliveira / Foram avaliados os efeitos da reposição de uma dieta normoprotéica imposta na fase de crescimento ósseo acelerado sobre o crescimento somático, a placa epifisária e o crescimento ósseo de ratos jovens desnutridos a partir do período de lactação. Foram utilizados ratos machos wistar distribuídos aleatoriamente nos grupos: Grupo Nutrido (GN, n=10; filhotes amamentados por nutrizes que receberam dieta normoprotéica, caseína 17%) durante o período de aleitamento e Grupo Desnutrido (GD, n=20; filhotes amamentados por nutrizes que receberam dieta hipoprotéica, caseína 8%) no mesmo período. Após o desmame até o 35º dia de vida, metade dos filhotes do GD passou a receber a dieta normoprotéica (caseína a 17%), constituindo o Grupo Reposição (GR), enquanto a outra metade continuou a receber a dieta hipoprotéica (caseína 8%). Os animais do GN continuaram a receber dieta normoprotéica (caseina 17%). Acompanhou-se a evolução do peso corporal. Aos 36 dias de vida, os animais foram anestesiados, sacrificados e coletados o fêmur e a tíbia direitos. Os ossos foram dissecados, pesados em balança digital e mensurados em toda sua extensão com o auxílio de um paquímetro. Secções longitudinais da epífise proximal do fêmur (5&#956;m) foram coradas com Hematoxilina-Eosina. Foi avaliado o número de condrócitos proliferativo e hipertrófico. Utilizaram-se os testes t-Student e Mann-Whitney, sendo p&#8804;0,05. O peso corporal (g) foi menor nos GD e GR comparados ao GN (p<0,05). Entre GD e GR, o peso corporal foi maior no GR, a partir do 32º dia (p<0,05). O GD apresentou comprimento (mm) do fêmur (22,07±1,03) e da tíbia (27,09±1,03) menor que GN (23,95±0,8) e (29,40±0,46) (p<0,001). Da mesma forma, o GR apresentou comprimento do fêmur (23,30±0,59) (p=0,031) e da tíbia (28,10±1,05) (p=0,002) menor que o GN. Entre os GD e GR, o comprimento do fêmur foi maior no segundo (p=0,004), mas o comprimento da tíbia não apresentou diferença entre os grupos (p=0,074). O GD apresentou peso do fêmur (g) (0,26±0,03) e da tíbia (0,21± 0,03) menor que o GN (0,37± 0,03) e (0,31±0,03) (p<0,001). O GR apresentou peso do fêmur (0,31±0,02) e da tíbia (0,25±0,01) menor em relação ao GN (p<0,001). Entre os GD e GR, o peso do fêmur (p<0,001) e da tíbia (p=0,005) foi maior no GR. O número de condrócitos proliferativo foi menor no GD (5,71±0,83) comparado ao GN (9,98±1,06) (p<0,001) e GR (8,22±2,00) (p=0,032). Não houve diferença nessas células entre GN e GR (p=0,222). O número de condrócitos hipertróficos foi menor no GD (1,65±0,84) comparado ao GN (4,18±0,37) (p<0,001) e GR (3,25±0,93) (p=0,021), mas entre GN e GR não houve diferença (p=0,069). A reposição de uma dieta normoprotéica aplicada na fase de crescimento ósseo acelerado minimizou os efeitos da desnutrição sob o crescimento somático e sob o tecido ósseo. Além disso, promoveu um crescimento de recuperação completo com relação ao número de condrócitos