Orientador: Mauro Pedrine Santamaria / Banca: Paulo Vinícius Soares / Banca: Maria Aparecida Neves Jardini / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar um novo protocolo multidisciplinar por meio de um estudo clínico randomizado para o tratamento de recessões gengivais associadas à lesão cervical não-cariosa. Foram selecionados 40 pacientes alocados aleatoriamente em dois grupos: Grupo Teste (n=20), restauração parcial da lesão cervical e cirurgia para recobrimento radicular com enxerto de tecido conjuntivo (CTG+RP) e Grupo Controle (n=20), aplainamento da lesão cervical e cirurgia para recobrimento radicular com enxerto de tecido conjuntivo (CTG). Os grupos foram comparados quanto ao sangramento à sondagem (SS), índice de placa (IP), recessão gengival relativa (RGR), nível clínico de inserção (NIC), altura e largura das papilas (AL, LP),altura e espessura do tecido queratinizado (ATQ e ETQ), profundidade da lesão cervical (PLC), hipersensibilidade dentinária (HD) e na avaliação estética (MRES) durante um período de 6 meses. Após 6 meses, as porcentagens médias de recobrimento da altura da lesão cervical não-cariosa foram de 72,34±25,2 para o grupo teste e 74,85±33,1 para o grupo controle, sem diferença estatística entre eles. Foi notada diferença estatisticamente significante quando a hipersensibilidade cervical foi analisada. O grupo teste mostrou-se mais eficaz em 6 meses de acompanhamento na resolução desse sintoma (p=0,034). Na análise individual dos parâmetros da escala MRES, o grupo teste mostrou um melhor contorno gengival com diferença significante em relação ao grupo controle. Nos demais parâmetros, não houve diferenças significantes. Dentro dos limites do presente estudo, pode-se concluir que ambos os tratamentos foram efetivos e que a presença da restauração parcial de resina composta não interfere na taxa de recobrimento quando o retalho posicionado coronariamente associado ao enxerto de tecido conjuntivo é utilizado para o tratamento de recessões gengivais associadas à lesão cervical... / Abstract: The aim of this study was to evaluate a new multidisciplinary protocol by means of a randomized controlled clinical trial for the treatment of gingival recession associated with cervical lesion non-carious. Were selected 40 patients randomly allocated to one of the following groups: Test group (n = 20), partial restoration of cervical lesion and surgery for root coverage with connective tissue graft (CTG + PR) and control group (n = 20), planning of non-carious cervical lesion and surgery for root coverage with connective tissue graft (CTG + RT). The groups were compared as to bleeding on probing (BOP), biofilm accumulation (IP), relative gingival recession (RGR), clinical attachment level (CAL), height and width of papillae (PH, PW), height and thickness of keratinized tissue (KTH and KTT), depth of the cervical lesion (CLD), dentin hypersensitivity (DH) and aesthetic evaluation (AE) for a period of 6 months. Average percentage rates of root coverage for test and control group were 72.34% and 74.85%, respectively. No significant statistical difference between test and control was observed regarding root coverage. A significant difference (p=0.034) was found for dentin sensitivity when control and test were compared. The test group showed better results regarding this parameter. The individual aesthetic analysis of MRES parameters, the test group showed a better gingival contour with a significant difference compared to the control group. When the other parameters were compared between the two groups, no difference was found. Within the limits of this study it can be concluded that both treatments were effective and that the presence of the partial restoration composite resin does not affect the root coverage when the coronally advanced flap associated with connective tissue graft is used for the treatment of gingival recession associated with non-carious cervical lesion, and provide better contro of dentin .... / Mestre

Orientador: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Coorientadora: Daniela Ponzoni / Banca: Francisley Ávila Souza / Banca: Roberta Okamoto / Banca: Anibal Henrique Barbosa Luna / Banca: Fabiano Gonzaga Rodrigues / Resumo: Proposição: O objetivo desse trabalho foi avaliar a interface enxerto/leito receptor de um bloco sintético bifásico, composto de 60% de hidroxiapatita e 40% de beta tricálcio fosfato (β-TCP) por meio de análise histológica, histométrica e imunoistoquímica. Materiais e métodos: Foram utilizados 12 coelhos albinus que foram submetidos à cirurgia de enxerto ósseo aposicional em bloco para ganho em espessura. O enxerto autógeno foi removido da tíbia com o auxílio de uma broca trefina de 8 mm e parafusado na mandíbula esquerda, enquanto o bloco teste bifásico, composto de 60% de HA e 40% de β-TCP, foi parafusado na mandíbula direita. Os animais sofreram eutanásia após 2 e 8 semanas do procedimento cirúrgico e a peça foi removida para processamento e análises. Os resultados obtidos tiveram sua normalidade testada para definir o teste estatístico indicado. Resultados: Na análise histométrica, podemos observar que o grupo autógeno demonstrou maiores taxas de neoformação óssea nos dois tempos estudados quando comparados ao grupo do biomaterial, demonstrando uma diferença estatisticamente significativa. Quando comparamos os tempos estudados em cada material, o grupo autógeno teve um aumento considerável da segunda para a oitava semana, porem não foi encontrada diferenças estatisticamente significativas. O grupo biomaterial não teve um aumento significativa de neoformação óssea durante o período de reparo. Na imunoistoquímica, com relação ao tempo, podemos observar que a enzima TRAP mostrou maior manifestação no período de 2 semanas do que no período de 8 semanas considerando os dois materiais estudados. No quesito material, a proteína OC mostrou mais evidente no grupo autógeno de uma forma geral. Quando se avaliou material e tempo em cada proteína isoladamente não foram encontradas diferenças... / Abstract: Proposition: The purpose of this study was to evaluate the interface graft / recipient bed of a two-phase synthetic block, consisting of 60 % hydroxyapatite and 40 % beta tricalcium phosphate (β -TCP) by histological analysis, histometric and immunohistochemistry. Methods: We used 12 albinus rabbits that underwent appositional bone graft surgery block to gain in thickness. The autogenous graft was removed from the tibia with the aid of a trephine drill 8 mm and screwed into the left jaw, while the biphasic pattern block, composed of 60 % HA and 40% β -TCP, was screwed in the right jaw. The animals were euthanized after 2 and 8 weeks of surgery and the piece was removed for processing and analysis. The results were tested for normality define the statistical test indicated. Results: In histometric analysis, we can see that the autogenous group showed higher rates of bone formation in both times studied compared to the biomaterial group, demonstrating a statistically significant difference. When we compare the times studied in each material, the autogenous group had a significant increase from the second to the eighth week, however, there was no statistically significant differences. The biomaterial group remained during the repair period. In immunohistochemistry, with respect to time, we can see that the TRAP enzyme showed greater expression in the two weeks period than 8 weeks considering the two materials studied. In the item material, OC protein was more evident in the group of autogenic general. When assessing the material and time each protein alone were no statistically significant differences. Conclusion: The block kept tested values of bone formation below the control block, showing less potential for integration. Its composition has proven reliable for alveolar reconstruction in thickness to fill order. Further studies with... / Doutor

Orientador: Elcio Marcantonio Junior / Co-orientador: Luís Antonio Violin D. Pereira / Banca: Ulf M. E. Wikesjo / Banca: Eliane dos Santos Porto Barboza / Banca: Jamil Awad Shibli / Banca: Luis Carlos Spolidorio / Resumo: O objetivo do estudo foi comparar o uso de rhBMP-2/ACS com o do enxerto ósseo autógeno para aumento ósseo em espessura na região anterior de maxila. 24 pacientes foram selecionados e divididos de forma randomizada em 2 grupos: Grupo 1 - rhBMP-2/ACS ou Grupo 2 - enxerto ósseo autógeno intraoral particulado. Uma malha de titânio foi utilizada para manutenção do arcabouço dos enxertos. O ganho ósseo clínico, a análise histológica/histomorfométrica (biópsia aos 6 meses), tomografias (pré-operatória, 3 e 6 meses) e PCR em tempo real (raspagem de osso neoformado obtida aos 6 meses) foram os métodos de avaliação. Clinicamente, o pós-operatório foi estável. O aumento ósseo médio em espessura clínica foi 3,2±0,9 vs. 3,7±2,1mm (p=0,31) para o Grupo 1 e Grupo 2, respectivamente. O Grupo 1 apresentou aumento ósseo tomográfico significante aos 2mm da crista óssea quando comparado ao Grupo 2 (1,5±0,7 vs. 0,5±0,9mm; p=0,01). Na análise histológica, o Grupo 1 apresentou uma medula óssea significativamente rica em células e vasos sanguíneos (p=0,002) quando comparado ao Grupo 2, entretanto, nenhuma diferença estatística foi encontrada para os outros parâmetros. PCR em tempo real resultou em maior expressão gênica de BMP2 e Runx2 (p=0,001 e p=0,0021, respectivamente) no Grupo 1 e RANKL:OPG, BSP e OPN no Grupo 2 (p=0,01, p=0,005 e p=0,0009, respectivamente). Um total de 62 implantes foram instalados aos 6 meses. Em conclusão, o Grupo 1 apresentou um aumento ósseo clínico e tomográfico comparável ao Grupo 2, apresentando um resultado histológico e de expressão gênica superior, sugerindo ser uma alternativa viável ao enxerto ósseo autógeno. / Abstract: The objective of this study was to compare bone augmentation in the anterior maxilla following implantation of rhBMP2/ACS vs. autogenous bone graft. In this study, 24 patients were selected and equally randomized into 2 groups: Group 1 - rhBMP2/ACS or Group 2 - intraoral particulated autogenous bone graft. A titanium mesh was used for space provision in both Groups. Average clinical bone gain, histological/histomorphometrical (core biopsy obtained at 6 month), CBCT (preoperative, 3 and 6 months follow-up) and real time PCR (new bone scraped at 6 months) were used as evaluation methods. Clinical healing was generally uneventful. Mean clinical ridge width increased 3.2±0.9 vs. 3.7±2.1 mm (p=0.31) for Group 1 and Group 2, respectively. Group 1 yielded statistically significant CBCT bone gain only at subcrestal level compared with Group 2 (1.5±0.7 vs. 0.5±0.9mm; p=0.01). In the histological analysis, specimens from group 1 showed bone marrow significant richer in cells and capillaries (p=0.002) than Group 2, however no difference was found in other parameters. Real time PCR showed higher expression of genes BMP2 and Runx2 in Group 1 (p=0,001 e p=0,0021, respectively) and RANKL:OPG, BSP and OPN in Group 2 (p=0,01, p=0,005 and p=0,0009, respectively). A total of 62 implants were installed after 6 months. In conclusion, Group 1 supported clinically and tomographically relevant alveolar ridge augmentation of comparable magnitude to Group 2, presenting more favorable histological and gene expression results, suggesting an alternative for autogenous bone graft. / Doutor

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000388585-0.pdf: 2402252 bytes, checksum: 61c5f710d7d456a08638eac157bdc111 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The bone marrow besides having a high number of heterogenic cells, like connective, hematopoietics, and neuronal cells, also presents a great number of stem cells. These cells are pluripotent, so can differentiate in any connective cell when a stimulus is given. The aim of this study was to evaluate bone marrow stem cells adhesion, proliferation, and differentiation to osteoblast in vitro, over a collagen membrane and a poli-lactic (glycolic) acid scaffold (PLGA), using either recombinant human bone morphogenetic protein (rhBMP-4) and platelet rich plasma (PRP). Bone marrow cells were aspirated from iliac crest and purify using specifics techniques. These cells were separated in main big groups cultured over collagen membrane and PLGA scaffold. Each culture had 4 distinct treatments: (1) with rhBMP-4; (2) with rhBMP-4 and PRP; (3) with PRP; and (4) control (only standard medium). The groups were evaluated after 6, 9 14 and 21 days. Microscopic analysis of collagen membrane and PLGA scaffold were performed using either Propidium Iodide, and Eosin and Hematoxilin. Real time PCR was performed to identify the expression level of osteopontin and osteocalcin, and standard PCR to osteopontin. The results showed cellular adhesion in both biomaterials, and suggest a higher cell proliferation and differentiation in rhBMP-4 and PRP, and PRP groups. The groups with rhBMP-4 had more differentiate cells that control group. The data obtained here indicate that PRP and/ or rhBMP-4 induce adhesion, proliferation and differentiation of bone marrow stem cells into osteogenic lineage. / O estroma da medula óssea, além de conter uma população heterogênea de células conjuntivas, nervosas e hematopoiéticas, mantém uma quantidade de células com características de células tronco (células mesenquimais indiferenciadas). Estas possuem capacidade de se diferenciarem em qualquer célula de natureza conjuntiva quando estimuladas pelo organismo. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a adesão, a proliferação e a diferenciação de células mesenquimais da medula óssea cultivadas sobre membrana de colágeno bovino e sobre arcabouço de ácido poliglicólico polilático (PLGA) com a adição do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) e/ ou da proteína morfogenética óssea recombinante humana (rhBMP-4). As células foram coletadas da medula óssea da crista do osso ilíaco humana e separadas por técnica específica. As células foram cultivadas em dois suportes: membrana de colágeno e arcabouço de PLGA, e receberam 4 tratamentos distintos: (1) com rhBMP-4, (2) com rhBMP-4 e PRP, (3) com PRP e (4) controle (somente meio de cultura). Os subgrupos foram avaliados em 6, 9, 14 e 21 dias. Foram realizadas análises microscópicas das membranas e arcabouços com as colorações de Iodeto de Propídio e de Hematoxilina e Eosina. Foi feito PCR em tempo real a fim de se avaliar a expressão de osteopontina e osteocalcina e PCR convencional para osteopontina. Os resultados mostraram adesão celular tanto na membrana de colágeno como no arcabouço de PLGA. Sugere-se haver uma maior proliferação e diferenciação celular nos grupos que foram adicionados PRP, e rhBMP-4 e PRP juntos. Nos grupos com rhBMP-4 parece haver uma maior diferenciação celular que o grupo controle. Os dados obtidos indicam que o PRP e/ ou a presença de rhBMP-4 induzem adesão, proliferação e diferenciação de células da medula óssea em células de linhagem osteogênica.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000431500-0.pdf: 1563957 bytes, checksum: 69f1b1753af9d037782b9078a3ce2f8f (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Tissue engineering, using pluripotent cells, biocompatible matrixes and growth factors, may play a major role in bone regeneration. Through living tissue biopsy, it is possible to obtain mesenchymal stem cells that, when expanded and cultivated in vitro, can generate several types of tissues. Thus, it is possible to present an alternative to bone grafts, since the amount of material collected is smaller when compared to conventional bone grafts. The present research aimed to find a better biocompatible matrix, evaluating, in vitro, the cytotoxicity of TEOSYAL® hyaluronic acid directly onto pre-osteoblastic lineage mouse cells denominated OFCOL II, in a quantitative and qualitative way. The following experimental groups have been formed: A) Cells + Hyaluronic Acid (HA) + Platelet Rich Plasma with thrombin (PRP) + Hydroxyapatite (HP); B) Cells + HA + PRP + HP; C) Cells + HA + HP; D) Cells + HP; E) Cells + HA; F) Cells + PRP with thrombin; G) Cells + PRP and H) Pure DMEM with 15% of Fetal Bovine Serum (FBS), used as a positive control. The OFCOL II cells were seeded 24 hours before the experiments and incubated at 37ºC with 5% CO2. After reaching the semi-confluence, the cells were exposed to the experimental groups for an additional period of 48 hours under the same temperature and humidity conditions. The cellular viability was evaluated through MTT test and compared to the positive control group H. The numerical values, obtained in absorbance, were subjected to statistical analysis of variance (ANOVA), complemented by TUKEY test, with significance level p < 0. 05 for comparison between all groups. As for comparisons between the control and each experimental group, the T test was used. In the cell morphology evaluation, it was used optical microscopy at magnification 100x. The results proved a decrease in cell viability in groups B (67% viability) and C (68% viability), differing from group D (99% viability). When comparing each experimental group to the positive control group, a statistical difference (p < 0. 05) was obtained for groups B, C and E. Therefore, through these results, it was observed a decrease in cellular viability in the groups with the presence of TEOSYAL® hyaluronic acid. The addition of PRP to hyaluronic acid improved cell viability since it was possible to obtain a survival rate of 79% (group A), although this stimulus was insufficient to enhance it. Regarding image analysis, morphological changes were found in experimental groups and control group. It is possible to conclude that the presence of TEOSYAL® hyaluronic acid exerted a decrease effect on the cell lineage OFCOL II viability. / A engenharia tecidual, dispondo de células, matrizes biocompatíveis e fatores de crescimento, pode exercer um grande papel na regeneração óssea. Através de biopsias de tecido vivo, pode-se obter células-tronco mesenquimais que, quando expandidas e cultivadas in vitro, são capazes de originar tecidos de diversos fenótipos. Desta maneira, é possível estabelecer uma alternativa aos enxertos ósseos, uma vez que a quantidade de material coletado é menor quando comparada aos enxertos ósseos convencionais. Essa pesquisa visou contribuir para a melhor escolha de uma matriz biocompatível, avaliando in vitro, de forma direta, a citotoxicidade do ácido hialurônico TEOSYAL® sobre as células da linhagem pré-osteoblástica de camundongos denominadas OFCOL II de forma quantitativa e qualitativa. Foram criados os seguintes grupos experimentais: A) células + Ácido hialurônico (AH) + Plasma rico em Plaquetas com Trombina (PRP) + Hidroxiapatita (HP); B) células + AH + PRP + HP; C) células + AH + HP; D) células + HP; E) células + AH; F) células + PRP com trombina; G) células + PRP e H) células + DMEM puro com 15% de soro bovino fetal, utilizado como controle. As células OFCOL II foram semeadas 24 horas antes dos experimentos e incubadas em estufa a 370C com 5% de CO2. Após atingirem a semi-confluência, as células foram expostas aos diferentes estímulos conforme o grupo experimental por um período adicional de 48 horas nas mesmas condições de temperatura e umidade.A viabilidade celular foi avaliada através do teste MTT e comparada ao grupo controle H. Os valores numéricos, obtidos através de absorbância, foram submetidos à análise estatística ANOVA, complementados por TUKEY, com nível de significância p < 0,05 para comparação entre todos os grupos. Já para as comparações entre cada grupo experimental e o controle foi utilizado o Teste T. Na avaliação da morfologia celular, foi utilizada a microscopia óptica em aumento de 100x e 200x. Os resultados encontrados comprovaram uma diminuição na viabilidade celular nos grupos B (67% de viabilidade) e C (68% de viabilidade), diferindo do grupo D (99% de viabilidade). Ao comparar cada grupo experimental ao grupo controle, foi obtida uma diferença estatística (p < 0,05) para os grupos B, C e E. Portanto, foi observado, através destes resultados, uma diminuição da viabilidade celular nos grupos com a presença do ácido hialurônico TEOSYAL®. A adição do PRP ao ácido hialurônico aumentou a 8 viabilidade celular, já que foi obtida uma viabilidade de 79% (grupo A), porém, insuficiente para potencializá-la. Nas imagens, foram encontradas diferenças morfológicas entre os grupos experimentais e o grupo controle. Pode-se concluir que a presença do ácido hialurônico TEOSYAL® causou diminuição na viabilidade da linhagem celular OFCOL II.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000425706-0.pdf: 3229059 bytes, checksum: 45284ea4f41049f07baee7ea1b986c3f (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This present work has analyzes the integration level of onlay bone grafts of the skull in rats’ mandibular region, combined or not with calcium phosphate cement (Norian ). For this, histology, morphometry, and biomechanical test of traction force have been evaluated. Twenty seven male Wistar rats were subjected to removal of bicortical grafts of the skullcap and fixed in the mandibular angles. The animals were divided into 6 groups: C21d – graft fixation (control – death after 21 days); I21d – graft fixation with Norian powder between the graft and recipient bed (death after 21 days), B21d - graft fixation and placement with Norian , acting as a barrier on the edges of the bone graft (death after 21 days) C55D - graft fixation (control - 55 days after death); I55d - graft fixation with Norian powder between the graft and the recepient bed (death after 55 days); B55d - graft fixation and placement with Norian , acting as a barrier on the edges of the graft (death after 55 days). The hemi-jaws on the left side were taken to the histology and histometric exam and hemi-jaws of the right to a traction force test.There was no infection in none of the cases or postoperative complications. Histological and histometric analysis – Norian ’s remnants were seen in both 21 and in 55 days, showing a gradual replacement by vascularized bone tissue; a higher bone formation was observed in the graft / bone interface receptor (GBIR) on the left side in the groups using the calcium phosphate (B21d, B55d and I55d in relation to C21d) (p = 0. 043); a better result was also observed in regard to the total newly formed bone on the left side interface of these same groups (p = 0. 08); the I55d group presented superior results than the control groups (C21d and C55d) and the group B21d concerning the GBIR bone formation on the right side (p = 0. 045); about the item on the horizontally newly formed bone on the left side, the group C21d had no significant difference in comparison to C55d, however, it presented less bone formation than the other groups that used the calcium phosphate (p = 0. 018). The traction force test - different devices have been developed to achieve an effective fixation of the specimens during the mechanical test, such as the EMIC DL-200 machine and the MTest 3. 0 version program to obtain the strength necessary to remove the grafts measured in Newton (N).The traction test demostrated that the C21d group’s results were significantly lower than other groups (p = 0. 08), furthermore, in two specimens from this group, one graft was not integrated and the other was weakly attached to the bone receptor. Comparing the control groups (21d and 55d), over time, there was a significant increase of the strenght required for the removal of the graft (p = 0. 032). The study showed good results in the use of onlay grafts associated with Norian , presenting higher levels of bone formation, even when dealing with a region of constant muscle stress. Furthermore, there was a better biomechanic integration, especially in the initial and most critical part of healing. / O presente trabalho analisou o nível de integração de enxertos ósseos onlay de calota craniana de ratos, em região mandibular, associados ou não ao cimento de fosfato de cálcio (Norian®). Para isso, foram realizadas avaliações histológicas, histométricas, além de teste biomecânico de força de tração. Vinte e sete ratos Wistar, machos, foram submetidos à remoção de enxertos bicorticais da calota craniana e fixados nos ângulos mandibulares. Os animais foram divididos em 6 grupos: C21 d - fixação do enxerto (controle - morte após 21 dias); 121 d - fixação do enxerto com o pó do Norian® entre o enxerto e o leito receptor (morte após 21 dias); B21 d - fixação do enxerto e colocação de Norian®, atuando como barreira, sobre as bordas do enxerto (morte após 21 dias); C55d - fixação do enxerto (controle - morte após 55 dias); 155d - fixação do enxerto com o pó do Norian entre o enxerto e o leito receptor (morte após 55 dias); B55d - fixação do enxerto e colocação de Norian, atuando como barreira, sobre as bordas do enxerto (morte após 55 dias). As hemimandíbulas do lado esquerdo foram destinadas ao exame histológico e histométrico e as hemi-mandíbulas do lado direito ao teste de força de tração. Em nenhum dos casos ocorreu infecção ou complicações pós-operatórias.Análise histológica e histométrica - resquícios do Norian foram vistos tanto em 21 quanto em 55 dias, demonstrando uma gradual substituição por tecido ósseo vascularizado; foi observada uma maior formação óssea na interface enxerto/osso receptor (TEOR) do lado esquerdo nos grupos que utilizaram o fosfato de cálcio (B21d, B55d e 155d em relação ao C21 d) (p= 0,043); um melhor resultado também foi observado em relação ao osso total neoformado na interface do lado esquerdo, nesses mesmos grupos W-0,08); o grupo 155d apresentou resultados superiores aos grupos controle (C21d e C55d) e ao grupo B21d na formação de osso na IEOR do lado direito (p= 0. 045): no item osso neoformado horizontalmente do lado esquerdo, o grupo C21d não apresentou diferença significativa em relação ao C55d, contudo, demonstrou haver formado menos osso que os demais grupos que utilizaram o fosfato de cálcio (p= 0,018). Teste de força de tração - diferentes dispositivos foram desenvolvidos para conseguir uma fixação eficaz dos espécimes durante o ensaio mecânico, sendo utilizada a máquina EMIC® DL-200 e o programa MTest versão 3. 0 para obtenção das forças de remoção dos enxertos em Newton (N). O teste de tração demonstrou que o grupo C21d apresentou resultados significativamente inferiores aos demais grupos (p= 0,08), além disso, em dois espécimes deste grupo, um enxerto não estava integrado e o outro estava fracamente aderido ao osso receptor. Comparando-se os grupos Controle (21d e 55d), ao longo do tempo, houve um aumento significativo na força necessária para a remoção dos enxertos (p= 0,032). O estudo demostrou bons resultados na utilização dos enxertos onlay associados ao Norian®, apresentando maior nível de formação óssea, mesmo se tratando de uma região de constante estresse muscular. Além disso, houve uma melhor integração biomecânica, principalmente na fase inicial e mais crítica da cicatrização.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000386622-0.pdf: 8591467 bytes, checksum: ed9eba44f55cbf4c0707a1758c121da0 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Low level laser therapy is used in the therapeutic of the bone tissue and adjacent structures. However, its biological effects depend on the optic properties of the interaction of the radiation with the target tissue, which are correlated to the physical parameters of the biological object and the parameters of the laser light. Therefore, the aim of this work was evaluate the interaction of lasers with the human dry bone, through the determination of the coefficients of attenuation and the penetration of diode lasers in the red visible region and in the infra-red laser light in this tissue. Three bone blocks of the region of the body of different human dry mandibles was cut, with total average thickness of 0,0744 m. The samples had been sliced block-type of average thickness of 0,0402 m and irradiated with red visible laser ( 682-685 nm), continuous, in contact and with irradiance of 8,679 Wm-2, 10. 481 Wm-2 and 14,946 Wm-2; the same was done with infra-red laser light (826-829 nm) with irradiance of 9,854 Wm-2, 18,278 Wm-2 and 28,440 Wm-2. Throughout the experiment the blocks had been being successively removed and the samples irradiated, becoming possible the irradiation under different thicknesses of tissue. The data had been measured by direct spectrorradiometric and analyzed in the program Origin 7. 0® through equations of adjustment to this experimental model. The measured results had demonstrated the following trends:The transmission of lasers in the region of the visible red and the infra-red is proportional to the inverse of the thickness of the tissue irradiated; the coefficient of attenuation of the bone tissues is proportional to the irradiance; the penetration of lasers visible red and infra-red is proportional to the inverse of irradiance and don’t change significantly whit irradiance, but change with wavelength; the laser in the region of the infra-red had a lower coefficient of attenuation and a higher penetration in relation to the visible red. It can be concluded that the values of the attenuation coefficient and the penetration of lasers in the region of wavelength in visible red (682 - 685 nm) and of the infra-red (826 - 829 nm) in the region of mandible body dry human being, mainly are determined by the optic and morphologic characteristics of the tissue, not being possible the determination of an only standard kind laser/tissue interaction, and yes trends. / Lasers em baixas densidades de potência são empregados na terapêutica do tecido ósseo e de estruturas adjacentes. Entretanto, seus efeitos biológicos dependem das propriedades ópticas da interação da radiação com o tecido alvo, as quais são correlacionadas aos parâmetros físicos do meio e da luz laser. Portanto, realizou-se um trabalho com objetivo de avaliar a interação dos lasers com o tecido ósseo humano seco, através da determinação dos coeficientes de atenuação e da penetração dos lasers de diodo na região visível e do infravermelho próximo do espectro eletromagnético nesse tecido. Foram confeccionadas três peças ósseas da região do corpo de mandíbulas humanas secas distintas, com espessura média total de 0,0744 m. As amostras foram fatiadas em blocos de espessura média de 0,0402 m e irradiadas com laser vermelho (I 682-685 nm), contínuo, pontual, em contato e com irradiâncias de 8,679 Wm-2, 10,481 Wm-2 e 14,946 Wm-2; o mesmo foi realizado com o laser infravermelho (I 826-829 nm) com irradiâncias de 9,854 Wm-2, 18,278 Wm-2 e 28,440 Wm-2. Ao longo do experimento os blocos foram sendo sucessivamente retirados e as amostras irradiadas, tornando possível a irradiação sob diferentes espessuras de tecido. Os dados foram obtidos por espectrorradiometria direta e analisados no programa Origin 7. 0® através de equações de ajuste a esse modelo experimental.Os resultados obtidos demonstraram as seguintes tendências: a transmissão dos lasers vermelho e infravermelho possuem relação inversamente proporcional à espessura do tecido irradiado; o coeficiente de atenuação do tecido ósseo aos lasers é inversamente proporcional à irradiância incidente; a penetração dos lasers possuem relação inversamente proporcional à irradiância e não altera-se significativamente em função da irradiância e sim em função do comprimento de onda; o laser na região do infravermelho possui um menor coeficiente de atenuação e uma maior penetração em relação ao vermelho. Pode-se concluir que os valores do coeficiente de atenuação e a penetração dos lasers na região do vermelho de I 682 - 685 nm e do infravermelho de I 826 - 829 nm do espectro eletromagnético na região de corpo de mandíbula humana seca, são principalmente determinados pelas características ópticas e morfológicas do tecido, não sendo possível a determinação de um padrão único de interação laser/tecido, e sim tendências.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000425578-0.pdf: 1317181 bytes, checksum: b20aaf08d45d26e52a920073367ead4a (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The aim of present study was to evaluate the local tissue reaction in the skull of rats using the implantation of disks of poly (lactic L/D-acid) and evaluate its genotoxicity, throught the induction of micronuclei in polychromatic erythrocytes (PCE) in the bone marrow of mice. It used 25 male Wistar rats, with 200 and 300 grams. 20 animals underwent surgical procedures and had the discs implanted, and 5 animals received postoperative medication in the same way, serving as a control group for genotoxicity. With a 4. 1 mm trephine drill, two ostectomies circular were done, one in each parietal bone. On the right drilling a disc of poly (lactic L/D-acid ) was inserted, and on the left one it was filled by blood clot (control group). The animals were killed at the appropriate times (15, 30, 90 and 120 days after surgery), by inhalation of isoflurane. In the 20 operated animals the skull was removed and fixed in formalin 10%. The samples were subjected to decalcification and then to paraffinembedded and subjected to cuts of 6 microns in the transverse direction, at the portion of larger diameter discs. The slides obtained were subjected to histochemical technique of staining EH. To evaluate the genotoxicity, both femurs of each animal were removed and the contents of the bone marrow extracted directly on a slide with a drop of fetal calf serum, and mixed. It was made a smear with this material. The slides were dried, fixed in methanol and stained one section of each femur with Giemsa and the other with Acridine Orange. The results were subjected to statistical evaluation by analysis of variance (ANOVA). In histological evaluation, between 15 and 30 days, the bone defect was made clear in both groups, and it is not observed bone formation and resorption episodes or foreign body reaction. In periods of 90 and 120 days in the control group, it was noticed a new formation at the edges of the defect. In the experimental group, there was new bone formation at the edges of the defect and migrating below the site occupied by the disk and the absence of inflammatory infiltrate. Regarding to the evaluation of genotoxicity it was not detected a significant reduction (p <0. 05) in the frequency of EPC in relation to negative control or significant increase (p <0. 05) in the EPC with micronuclei. It can be concluded that the material used in this study is biocompatible and well tolerated by the tissues studied, and found negative for chromosomal mutagenicity when tested. / O objetivo do presente estudo foi avaliar a reação tecidual local, em calota craniana de ratos, frente à implantação de discos de poli (ácido L/D-láctico) e avaliar a sua toxicidade genética, pela indução de micronúcleos em eritrócitos policromáticos (EPC) na medula óssea de ratos. Foram utilizados 25 ratos Wistar, machos, com 200 e 300 gramas. 20 animais sofreram procedimento cirúrgicos e tiveram os discos implantados, e 5 animais receberam medicação pós-operatória da mesma maneira, servindo como grupo controle para genotoxicidade. Com uma broca trefina 4,1mm foram realizadas duas ostectomias circulares, uma em cada osso parietal. Na perfuração direita foi inserido um disco de poli(ácido L/D-láctico), e a do lado esquerdo foi preenchida por coágulo sanguíneo (grupo controle). Os animais foram eutanasiados nos tempos apropriados (15, 30, 90 e 120 dias após a cirurgia), por inalação de isoflurano. Nos 20 animais operados foi retirada a calota craniana e fixada em formalina tamponada a 10%. As amostras foram submetidas à descalcificação e após emblocados em parafina e submetidos a cortes de 6 μm, no sentido transversal, na porção de maior diâmetro dos discos. As lâminas obtidas foram submetidas à técnica histoquímica de coloração HE. Para avaliação da genotoxicidade, ambos os fêmures de cada animal foram removidos e o conteúdo da medula óssea extraído diretamente sobre uma lâmina com uma gota de soro bovino fetal, e homogeinizada. Com este material foi feito um esfregaço. As lâminas foram secas, fixadas em metanol e coradas uma lâmina de cada fêmur com Giemsa e a outra com Acridine Orange. Os resultados obtidos foram submetidos a avaliação estatística pela Análise de Variância (ANOVA). Na avaliação histológica, no período de 15 e 30 dias, em ambos os grupos o defeito ósseo foi bem evidenciado, não sendo observados neoformação óssea, episódios de reabsorção óssea nem reação de corpo estranho. Nos períodos de 90 e 120 dias, no grupo controle, observou-se neoformação nas bordas do defeito. No grupo experimental, houve neoformação óssea nas bordas do defeito e migrando abaixo do local ocupado pelo disco e ausência de infiltrado inflamatório. Quanto a avaliação de genotoxicidade, não foi detectada redução significativa (p < 0,05) da frequência de EPC em relação ao controle negativo nem aumento significante (p < 0,05) nos EPC com micronúcleos. Pode-se concluir que o material utilizado neste estudo é biocompatível e bem tolerado pelos tecidos estudados, sendo considerado negativo para mutagenicidade cromossômica no ensaio realizado.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000431499-0.pdf: 9135185 bytes, checksum: f582813177d93f41d7f068b6594f67b4 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Objective: The purpose of this study was to analyze the effect of low level laser therapy (LLLT) in the process of bone incorporation of deep-frozen block allografts. Materials and Methods: A total of 14 rabbits: two rabbits as donors of bone tissue and 12 rabbits were performed as receivers bone blocks autografts and allografts in the calvária. They were divided into groups treated with low level laser therapy (allograft and autograft) and control groups (autograft and allograft) without irradiation. The animals were killed at 35 days (n = 6) and 70 days (n = 6). The energy parameters used were: application of diode laser (GaAlAs) - wavelength of 830 nm - 4 J/cm2 at four points on the blocks of grafts for a total of 16 J/cm2 per application. The total dose of treatment after eight applications was 128 J/cm2.Results: The allograft bone processed by deep-freezing associated with LLLT showed incorporation at the graft-host interface, bone remodeling moderate, partial filling of osteocytes lacunae, less inflammatory infiltrate in the early periods and higher collagen deposition than the control group. Conclusion: The allograft bone processed by deep-freezing associated with LLLT is suitable as an alternative for the treatment of bone defects. The processing of bone grafts by deep-freezing method maintains the structural and osteoconduction characteristics of bone tissue. / Objetivo: o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da laserterapia de baixa potência no processo de incorporação óssea de aloenxertos em bloco com congelamento profundo. Materiais e Métodos: foram utilizados 14 coelhos: dois coelhos como doadores do tecido ósseo e 12 coelhos como receptores onde foram realizados aloenxertos e autoenxertos ósseos em bloco na calvária. Foram divididos em grupos com tratamento com laserterapia de baixa potência (aloenxerto e autoenxerto) e grupos controles (aloenxerto e autoenxerto) sem irradiação. Os animais foram mortos com 35 dias (n=6) e 70 dias (n=6). Os parâmetros de energia empregados foram: aplicação de laser de diodo (AsGaAl) – comprimento de onda de 830 nm - 4 J/cm2 em quatro pontos sobre os blocos de enxertos perfazendo um total de 16 J/cm2 por aplicação. A dose total do tratamento após as oito aplicações foi de 128 J/cm2.Resultados: o aloenxerto ósseo processado por congelamento profundo associado à laserterapia de baixa potência apresentou incorporação na interface com o hospedeiro, remodelação óssea moderada, preenchimento parcial das lacunas osteocíticas, menor infiltrado inflamatório nos períodos iniciais e maior deposição de fibras colágenas quando comparado ao grupo controle. Conclusão: o aloenxerto ósseo processado por congelamento profundo associado à laserterapia de baixa potência é adequado como uma alternativa para o tratamento de defeitos ósseos. O processamento do osso alógeno pelo método de congelamento profundo mantém as características estruturais e de osteocondução do tecido ósseo.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000413419-0.pdf: 7548238 bytes, checksum: fb7df37e9d8df24acf3390709418323f (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Tissue engineering has been showing a promising approach on the treatment of patients with trauma or facial deformities that need extensive areas of bone grafts. It involves the association of an appropriate kind of cell and a biocompatible and biodegradable scaffold that imitates functionally and structurally a specific kind of tissue. Calcium Phosphate Cement (CFC) appears as an interesting alternative of biomaterial to be used as a scaffold due to its characteristics as biocompatibility, bioactivity and osteoconductivity. Thus, the aim of the present study was to evaluate the ability of macroporous tridimensional CFC scaffolds, made with brazilian rawmaterial, to allow the adhesion, proliferation and differentiation of mesenchymal stem cells, derived from human bone marrow in cells osteogenic lineage. For that, cells obtained from iliac crest of an adult human donor were routinely processed until experimental conditions and, after that, cultured over CFC discs, macroporous that had as poror generation body, paraffin spheres, with size between 100 and 250μm. For the induction of cells in osteogenic lineage, BMP4 was added to the culture. Culture periods were established in five, ten and fifteen days. After these periods cells were evaluated due to their morphology by Scanning Electron Microscopy. The expression levels of genes BGLA and SSP1, that codify the osteocalcine (OC) and osteopontine (OP) proteins, as well as the Alkaline phosphatase activity (ALP), other important osteoblastic marker , were quantified by the PCR technique in real time QT-PCR) using the fluorophore SYBR GREEN® . The QT-PCR detected the expression of the genes BGLA and SSP1 and the alkaline phosphatase activity in the periods of 10 and 15 days of culture, what permitted them to check that had a cell proliferation and the differentiation of it in osteogenic cells.In the period of five days, it was not observed the expression of any observed genes. From theses results we concluded that the macroporous CFC, with pore size between 100 and 250 μm, created through the utilization of the paraffin microspheres, permits the adhesion, proliferation and differentiation of mesenchymal stem cells and can be used as an scaffold to the bone tissue engineering. / A engenharia tecidual tem se mostrado um campo promissor para a reabilitação de pacientes com traumas ou deformidades faciais que necessitem de áreas extensas de enxerto ósseo. Seu princípio básico envolve a associação de um tipo apropriado de célula e de um arcabouço biocompatível e bioabsorvível que mimetize funcional e estruturalmente determinado tipo de tecido. O Cimento de Fosfato de Cálcio (CFC) aparece como uma alternativa viável de biomaterial a ser utilizado com esta finalidade em virtude de suas características como biocompatibilidade, bioatividade e osteocondutividade. Assim, o objetivo da presente pesquisa foi avaliar a capacidade de suportes tridimensionais macroporosos de CFC, confeccionados com matérias-primas brasileiras, de permitir a adesão, proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea humana. Para isso, células obtidas da crista ilíaca de um doador humano adulto foram rotineiramente processadas até as condições experimentais e, a seguir, cultivadas sobre suportes de CFC, macroporosos, que tiveram como corpo gerador de poros, microesferas de parafina, com tamanho entre 100 e 250μm. Para indução das células em linhagem osteogênica foi acrescentada Proteína Morfogênica Óssea (BMP4) ao meio de cultura. Os períodos de cultura estabelecidos foram de cinco, dez e 15 dias. Após estes períodos, o comportamento e a morfologia das células junto ao biomaterial foram avaliados por meio de Microscopia Eletrônica de Varredura.Os níveis de expressão dos genes BGLA e SSP1, que codificam as proteínas osteocalcina (OC) e osteopontina (OP) respectivamente, bem como a atividade da Fosfatase Alcalina (ALP), outro marcador osteoblástico importante, foram quantificados pela técnica de PCR em Tempo Real (QT-PCR) utilizando o fluoróforo SYBR Green®. O QT-PCR detectou a expressão dos genes BGLA e SSP1 e a atividade da fosfatase alcalina nos períodos de 10 e 15 dias de cultura, o que nos permitiu constatar que houve proliferação celular e diferenciação destas em células osteogênicas. No período de cinco dias, não foi observada a expressão de nenhum dos genes investigados. A partir destes resultados concluímos que o CFC, macroporoso, com tamanho de poros entre 100 e 250μm, criados por meio da utilização de microesferas de parafina, permite a adesão, proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais em células osteogênicas, podendo ser utilizado como arcabouço para engenharia de tecido ósseo.