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Angiogênese de ferida cirúrgica em língua de rato: análise por meio de microscopia eletrônica de varredura de modelo vascular

Verli, Flaviana Dornela January 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000379483-0.pdf: 11148782 bytes, checksum: 3e2c17b0713861a21e02b80c5cd06cd8 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The vascular corrosion cast technique associated with SEM (Scanning Electron Microscopy) is a suitable method to define the angioarchitecture of different organs and to verify the development of intussusceptive angiogenesis. The capillary lumen is casted with resin and the surrounding tissues are corroded with alkaline solution. The aim of this study was to describe the vascular pattern of the tongue ventral surface from Wistar rats submitted or not to a surgery in the region and to verify the development of sprouting and intussusceptive angiogenesis during wound healing in different postsurgical periods. Tongue’s ventral surface from control rats showed a loose net with small mesh as a superficial capillary plexus and anatomical variations of the confluent vessels of the ranina veins. Rats subjected to surgery showed, on the first postsurgical day, sectioned capillary vein and artery extremities to be conically and round respectively. A process of intussusceptive and sprouting angiogenesis involving the blood vessels of the wound healing was observed on the second day following surgery. On the third postsurgical day the same process of the angiogenesis was observed in the granulation tissue. On the seventh postsurgical day, a complete vascularization of the wound capillary bed was achieved, showing parallel running blood vessels perpendicular to the superficial capillary plexus. On the fourteenth postsurgical day, the central blood capillary vessels presented a radial arrangement from the center of the wound. On day twenty-one after surgery the pattern of the superficial vasculature has not achieved previous pre surgical pattern of blood vessels. Intussusceptive and sprouting angiogenesis occurs more frequently on the root end of surgical wound in the tongue and mainly in the second and third postsurgical days. / A técnica de moldagem vascular seguida de corrosão, associada à microscopia eletrônica de varredura (MEV), é um método adequado para descrever a angioarquitetura de diferentes órgãos e para verificar a ocorrência de angiogênese por intussuscepção e por brotamento. O lúmen dos vasos é moldado com resina e a corrosão do tecido circunjacente à resina com solução alcalina. O objetivo do presente estudo foi descrever o padrão vascular do ventre da língua de ratos Wistar submetidos ou não a uma ferida na região, verificar a ocorrência de angiogênese por brotamento e por intussuscepção durante a cicatrização em diferentes tempos pós-operatórios. No ventre da língua dos animais não submetidos ao procedimento cirúrgico, foi observada a presença de trama vascular superficial em forma de rede frouxa, e de variações anatômicas dos vasos confluentes das veias raninas. Nos ratos submetidos ao procedimento cirúrgico, no primeiro dia pós-operatório, as extremidades dos capilares venosos seccionados apresentaram forma cônica, e dos capilares arteriais, forma arredondada. No segundo dia pós-operatório, iniciou-se o processo de angiogênese por intussuscepção e por brotamento.No terceiro dia pós-operatório, observou-se também a ocorrência destas angiogênese nos capilares do tecido de granulação. No sétimo dia pós-operatório, todo o leito cirúrgico encontrava-se revascularizado com capilares centrais paralelos entre si e perpendiculares à trama vascular superficial circunjacente. No 14º dia pós-operatório, os capilares centrais apresentaram inclinação gradual que, no 21º dia, juntamente com a trama vascular superficial, formaram o padrão radial a partir do centro da ferida. O padrão vascular da superfície ventral da língua, 21 dias após o procedimento cirúrgico, ainda não se encontra na mesma organização e disposição do padrão vascular das línguas não submetidas ao procedimento cirúrgico. A ocorrência de angiogênese por intussuscepção e por brotamento é mais freqüente no limite posterior da ferida cirúrgica e no segundo e no terceiro dia pós-operatório.
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Efeito da laserterapia (GaAlAs) no processo de reparo dos tecidos ósseo e mole em ratos submetidos à terapia com Zolendronato

Izquierdo, Cristina de Moraes January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000431350-0.pdf: 4232517 bytes, checksum: a5e9d5cc32cc4cac954fa99bf3ac4396 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Bisphosphonates are drugs, administered/given either orally or intravenously, that are used to treat bone disorders. They inhibit osteoclast formation by suppressing osteoclast-mediated bone resorption and accumulate persistently in the mineralized bone matrix. Notwithstanding the benefit obtained from their use, treatment with bisphosphonates has been associated with maxillary bone necrosis. In this study, 54 rats were used. The rats were randomized into three different groups: G1 (control group); G2 (group treated with zoledronic acid) and G3 (group treated with zoledronic acid and laser therapy). Each group was divided in 2 subgroups (A and B). In group A, the incisive were extracted. In group B, a bur was used to remove bone from the first molar region.Zoledronic acid treatment was initiated one month before surgery and given in three doses of 0,6 mg/kg. Low-level laser therapy was applied during the procedure and every 48h, at a dose of 1J/cm2, given punctually, using a power of 90 mW and wavelength of λ=830nm. The rats were killed at 44 days after the surgical procedure. Specimens were evaluated macroscopically, and underwent histological and histomorphometric analysis. Statistical analysis included the Chi-Square test, Fisher´s Exact test and Anova test. The results indicated that laser therapy didn´t prevent the osteonecrosis. And that Zolendronic Acid associated with a local pathology has the potencial to increase the occurrence of osteonecrosis. / Os bisfosfonatos (BPs) são medicamentos utilizados para tratamento de desordens reabsortivas ao tecido ósseo. Administrados por via oral ou endovenosa, os BPs inibem a atividade osteoclástica suprimindo a remodelação óssea mediada pelos osteoclastos e ficam acumulados de modo persistente na matriz óssea mineralizada. Apesar do benefício de sua utilização, há uma potencial relação entre a terapia com bifosfonatos e a osteonecrose de maxilares. Nesse estudo foram utilizados 54 ratos. Os animais foram selecionados aleatoriamente e divididos, de modo randomizado, em 3 grupos contendo 18 espécimes. Em todos os grupos, o período de observação foi de 03 meses. O grupo G1 foi o controle; o G2 recebeu a medicação sem laserterapia (LLLT) e o G3 foi o grupo teste que recebeu terapia medicamentosa e laserterapia. Cada grupo foi subdividido em 2 subgrupos contendo 9 espécimes. No subgrupo A foi feita a exodontia do incisivo inferior esquerdo; enquanto que no subgrupo B foi realizado um desgaste com broca na região do primeiro molar inferior esquerdo. A terapia medicamentosa foi realizada com o zolendronato e administrada em doses de 0,6 mg/kg, iniciadas um mês antes da cirurgia. Em cada espécime foi aplicada uma dose da solução a cada 28 dias, totalizando 3 aplicações da substância. A exodontia do incisivo inferior ou defeito com broca foi realizado sete dias após a segunda dose do fármaco. A LLLT foi realizada no momento do procedimento e a cada 48h, com dose de 1J/cm2, aplicada de forma pontual com potência de 90 mW e comprimento de onda de 830 nm. As peças foram observadas através das análises macroscópica, histológica e histomorfométrica. A análise estatística foi realizada através dos testes Qui-quadrado, Exato de Fisher e Anova.De acordo com a metodologia utilizada, os 14 autores concluíram que o Zolendronato associado a uma patologia local, potencializa a possibilidade de ocorrência da osteonecrose. E que a laserterapia não impede o estabelecimento da mesma no protocolo utilizado.
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Análise do tempo e da fluência da LLLT no processo de reparo de feridas em dorso de ratos

Poli, Vladimir Dourado January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000425869-0.pdf: 4399384 bytes, checksum: 3e433ccca5e1acd4bbb191c1f4293ca1 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This study aimed to compare the effects of different fluencies of indiumgallium- aluminum phosphide laser (λ= 685 nm) on skin wound healing in rats. Thirty six male rats were used, divided in three groups of 12 animals each. Two standardized skin wounds were created on the back of each animal, one treated with laser and the other serving as control. In group 1, the irradiations were performed with a dosimetry equivalent to average doses used in most recent polls, determined as 8 J/cm2. The second group was irradiated with twice the dose of energy (16 J/cm2) and group 3 with half the dose (4 J/cm2). The irradiations were performed immediately after surgery, in 48 hours, on 4 and 7 days, and the animals were killed at 4, 7 and 9 days. Therefore, each animal received, depending on his death, two, three or four irradiations. The healing tissues were excised and analyzed with optical microscopy. Histomorphometric analysis was performed, considering the measures between the epithelial edges, and histomorphological analysis. Using the paired ttest, there was a significant difference (p = 0. 004) between values referring to the average of the measures between the test and control samples. When analyzing the energy doses used (4, 8 and 16 J/cm2) and time of observation of the animals (4, 7 and 9 days), it appears that there was no difference in the fluency factor, but it occurred on the time factor, with changes most evident in the early stages (4 days) of the healing process. Based on histomorphologic and histomorphometric analysis, this study demonstrated that the Low Level Laser Therapy (LLLT) increases the rate of wound healing in rats when irradiated with indium-gallium-aluminum phosphide laser (λ = 685 nm). There are no differences between fluencies used (4, 8 and 16 J/cm2), but the time factor seems to be relevant, with changes most evident in the early stages of the healing. / O presente estudo teve como propósito comparar, em diferentes tempos, diferentes fluências do laser vermelho de fosfeto de índio-gálio-alumínio (λ=685 nm) sobre o processo de cicatrização de feridas cutâneas padronizadas em dorso de ratos. Foram realizadas duas feridas cirúrgicas em 36 ratos, sendo uma tratada com laser e a outra servindo como controle. Os ratos foram divididos em três grupos. No grupo um, as irradiações foram realizadas com dosimetria equivalente a média das doses mais utilizadas nas pesquisas recentes, determinada como 8 J/cm2. O grupo dois foi irradiado com o dobro da dose de energia, ou seja, 16 J/cm2, e o grupo três com metade da dose, ou 4 J/cm2. As irradiações foram realizadas imediatamente após o término da cirurgia, em 48 horas, em quatro e sete dias, e os animais foram mortos aos quatro, sete e nove dias. Portanto, cada animal recebeu, na dependência de sua morte, duas, três ou quatro irradiações. As lesões foram excisadas e analisadas em microscopia óptica. Foram realizadas análises histomorfométricas, considerando as medidas entre as bordas epiteliais, e análises histomorfológicas. Verificou-se, utilizando-se o teste t pareado, que houve diferença significativa (p = 0,004) entre os valores referentes às médias das medidas entre as amostras teste e controle. Ao se analisar as doses de energia utilizadas (4, 8 e 16 J/cm2) e o tempo de observação dos animais (quatro, sete e nove dias), verifica-se que não houve diferença em relação ao fator fluência, mas ocorreu quanto ao fator tempo, sendo as alterações mais evidentes nos momentos iniciais (quatro dias) do processo de reparo.A partir das análises histomorfométrica e histomorfológica, este estudo demonstrou que a terapia a laser em baixa intensidade (LLLT) aumenta a velocidade de cicatrização em ferimentos produzidos em dorso de ratos quando irradiados com o laser de fosfeto de índiogálio- aluminio (λ = 685 nm). Não há diferenças entre as doses de energia utilizadas (4, 8 e 16 J/cm2), mas há em relação ao fator tempo, sendo as alterações evidenciadas nos momentos iniciais da cicatrização.
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Avaliação da resposta tecidual e da genotoxidade a discos de poli (ácido L/D-láctido) implantados em calota craniana de ratos

Göelzer, Juliana Gonçalves January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000425578-0.pdf: 1317181 bytes, checksum: b20aaf08d45d26e52a920073367ead4a (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The aim of present study was to evaluate the local tissue reaction in the skull of rats using the implantation of disks of poly (lactic L/D-acid) and evaluate its genotoxicity, throught the induction of micronuclei in polychromatic erythrocytes (PCE) in the bone marrow of mice. It used 25 male Wistar rats, with 200 and 300 grams. 20 animals underwent surgical procedures and had the discs implanted, and 5 animals received postoperative medication in the same way, serving as a control group for genotoxicity. With a 4. 1 mm trephine drill, two ostectomies circular were done, one in each parietal bone. On the right drilling a disc of poly (lactic L/D-acid ) was inserted, and on the left one it was filled by blood clot (control group). The animals were killed at the appropriate times (15, 30, 90 and 120 days after surgery), by inhalation of isoflurane. In the 20 operated animals the skull was removed and fixed in formalin 10%. The samples were subjected to decalcification and then to paraffinembedded and subjected to cuts of 6 microns in the transverse direction, at the portion of larger diameter discs. The slides obtained were subjected to histochemical technique of staining EH. To evaluate the genotoxicity, both femurs of each animal were removed and the contents of the bone marrow extracted directly on a slide with a drop of fetal calf serum, and mixed. It was made a smear with this material. The slides were dried, fixed in methanol and stained one section of each femur with Giemsa and the other with Acridine Orange. The results were subjected to statistical evaluation by analysis of variance (ANOVA). In histological evaluation, between 15 and 30 days, the bone defect was made clear in both groups, and it is not observed bone formation and resorption episodes or foreign body reaction. In periods of 90 and 120 days in the control group, it was noticed a new formation at the edges of the defect. In the experimental group, there was new bone formation at the edges of the defect and migrating below the site occupied by the disk and the absence of inflammatory infiltrate. Regarding to the evaluation of genotoxicity it was not detected a significant reduction (p <0. 05) in the frequency of EPC in relation to negative control or significant increase (p <0. 05) in the EPC with micronuclei. It can be concluded that the material used in this study is biocompatible and well tolerated by the tissues studied, and found negative for chromosomal mutagenicity when tested. / O objetivo do presente estudo foi avaliar a reação tecidual local, em calota craniana de ratos, frente à implantação de discos de poli (ácido L/D-láctico) e avaliar a sua toxicidade genética, pela indução de micronúcleos em eritrócitos policromáticos (EPC) na medula óssea de ratos. Foram utilizados 25 ratos Wistar, machos, com 200 e 300 gramas. 20 animais sofreram procedimento cirúrgicos e tiveram os discos implantados, e 5 animais receberam medicação pós-operatória da mesma maneira, servindo como grupo controle para genotoxicidade. Com uma broca trefina 4,1mm foram realizadas duas ostectomias circulares, uma em cada osso parietal. Na perfuração direita foi inserido um disco de poli(ácido L/D-láctico), e a do lado esquerdo foi preenchida por coágulo sanguíneo (grupo controle). Os animais foram eutanasiados nos tempos apropriados (15, 30, 90 e 120 dias após a cirurgia), por inalação de isoflurano. Nos 20 animais operados foi retirada a calota craniana e fixada em formalina tamponada a 10%. As amostras foram submetidas à descalcificação e após emblocados em parafina e submetidos a cortes de 6 μm, no sentido transversal, na porção de maior diâmetro dos discos. As lâminas obtidas foram submetidas à técnica histoquímica de coloração HE. Para avaliação da genotoxicidade, ambos os fêmures de cada animal foram removidos e o conteúdo da medula óssea extraído diretamente sobre uma lâmina com uma gota de soro bovino fetal, e homogeinizada. Com este material foi feito um esfregaço. As lâminas foram secas, fixadas em metanol e coradas uma lâmina de cada fêmur com Giemsa e a outra com Acridine Orange. Os resultados obtidos foram submetidos a avaliação estatística pela Análise de Variância (ANOVA). Na avaliação histológica, no período de 15 e 30 dias, em ambos os grupos o defeito ósseo foi bem evidenciado, não sendo observados neoformação óssea, episódios de reabsorção óssea nem reação de corpo estranho. Nos períodos de 90 e 120 dias, no grupo controle, observou-se neoformação nas bordas do defeito. No grupo experimental, houve neoformação óssea nas bordas do defeito e migrando abaixo do local ocupado pelo disco e ausência de infiltrado inflamatório. Quanto a avaliação de genotoxicidade, não foi detectada redução significativa (p < 0,05) da frequência de EPC em relação ao controle negativo nem aumento significante (p < 0,05) nos EPC com micronúcleos. Pode-se concluir que o material utilizado neste estudo é biocompatível e bem tolerado pelos tecidos estudados, sendo considerado negativo para mutagenicidade cromossômica no ensaio realizado.
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Avaliação microscópica do processo de reparo ósseo na presença de enxerto ósseo humano liofilizado mineralizado e demineralizado e membrana de cortical bovina em calota craniana de ratos

Saueressig, Frederico January 2005 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000342765-0.pdf: 7940438 bytes, checksum: a8d36361946c4de2fd70b4c4968e6358 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The aims of this study was to evaluate new bone formation and biocompatibility by the utilization of Human Demineralized and Mineralized Freeze- Dried Bone Graft (U. S. Tissue & Cell®) and evaluate if Bovine Bone Cortical Membrane (Gen-derm®) enhances the bone repair through the repair process in osseous cavities containing these materials. For that, 36 albinos rats (Rattus norvegicus) distributed in six groups according to the time of sacrifice (7, 14, 21, 30, 60 and 90 days). With a spherical drill of 2mm in diameter at low rotation three osseous cavities were made in the calvaria of each animal. One cavity had anterior orientation and two posterior one. The left posterior cavity was filled with Human Demineralized Freeze-Dried Bone Graft, the right posterior with Human Mineralized Freeze-Dried Bone Graft, while the anterior cavity did not received any material forming the control group. In three animals of each group the cavities were covered by biological membranes. The animals were sacrificed at intervals of 7, 14, 21, 30, 60 and 90 days. The specimens obtained were processed by the paraffin technique, sectioned in the transversal way and stained by H&E. The microscopic evaluation consisted in histomorphometric analysis by the measurement of the proportion of new bone formation as well the number of giant multinucleated cells in each cavity. The obtained numbers were submitted to statistic usage, using the Anova test and Bonferroni´s pairwise comparisons, considering pS0,05.The obtained results allowed us to concluded that: 1) The Bovine Bone Cortical Membrane enhances the bone repair; 2) Human Demineralized and Mineralized Freeze-Dried Bone Graft showed osteocondute properties; 3) Human Demineralized and Mineralized Freeze-Dried Bone Graft are biocompatible; 4) The animal model are suitable for the research design. / Os objetivos do presente estudo foram: avaliar o potencial de formação óssea frente à utilização de enxerto ósseo humano liofilizado desmineralizado e mineralizado da marca U. S. Tissue & Cell®; avaliar se a utilização da membrana de cortical bovina nacional Gen-derm®, influencia na cicatrização óssea e avaliar a biocompatibilidade dos enxertos ósseos, através do processo de reparo do tecido ósseo em cavidades contendo os referidos materiais. Para a realização do experimento, utilizaram-se 36 ratos albinos (Rattus norvegicus) distribuídos em seis grupos de seis animais cada, conforme a época do sacrifício (7, 14, 21, 30, 60 e 90 dias). Com uma broca esférica de 2 mm de diâmetro em baixa rotação, foram confeccionadas três cavidades, duas na porção mais posterior e uma na anterior da calota craniana de cada animal. A perfuração posterior esquerda foi preenchida com Enxerto Ósseo Humano Desmineralizado Liofilizado, a perfuração posterior direita com Enxerto Ósseo Humano Mineralizado Liofilizado e a perfuração anterior foi preenchida com o coágulo sangüíneo do animal, servindo dessa forma como grupo controle. Em três animais de cada grupo a membrana biológica foi utilizada cobrindo as cavidades preenchidas pelos biomateriais.Os animais foram sacrificados nos intervalos de 7, 14, 21, 30, 60 e 90 dias e os espécimes obtidos, processados pela técnica da parafina, sendo os cortes realizados em sentido transversal e corados por HE. A avaliação microscópica consistiu numa análise histomorfométrica, através da mensuração da área de proporção de tecido ósseo neoformado, bem como do número de células gigantes multinucleadas presentes no campo histológico. Os valores obtidos foram submetidos a avaliação estatística pela Análise de Variância (Anova) e comparações múltiplas pelo método de Bonferroni, considerando pS0,05. Os resultados obtidos permitem concluir que: 1) o uso da membrana de cortical óssea bovina desmineralizada interferiu positivamente na cicatrização óssea; 2) os materiais enxerto ósseo humano liofilizado desmineralizado e mineralizado apresentam propriedades osteocondutoras; 3) os materiais enxerto ósseo humano liofilizado desmineralizado e mineralizado são materiais biocompatíveis; 4) O modelo animal utilizado se mostrou adequado para o design da pesquisa.
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Avaliação histológica do reparo em enxertos de derme acelular, estimulado por laser não ablativo

Silveira, Vinícius Salim January 2012 (has links)
Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2012-04-24T20:18:32Z No. of bitstreams: 1 437947.pdf: 4406312 bytes, checksum: 345c5221d1c49908c5c03b2f35838af9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-24T20:18:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 437947.pdf: 4406312 bytes, checksum: 345c5221d1c49908c5c03b2f35838af9 (MD5) / Este trabalho tem por objetivo avaliar a integração do enxerto de derme acelular Alloderm® (LifeCell Corp., The Woodlands, TX) em sítios de implantação e comparar tal integração entre grupos que receberam incidência de laser não ablativo e grupos que não receberam essa incidência, por meio de análise da quantidade de fibroblastos no interior do enxerto e de avaliação do processo cicatricial e da reposta inflamatória do organismo em torno do mesmo. Foram inseridos no tecido subcutâneo da região calvaria de 32 ratos (Rattus Norvegicus, Wistar) fragmentos padrões de 5mm2 de Alloderm®. Aplicou-se laserterapia de 4J/cm2 por sessão iniciando imediatamente após a intervenção cirúrgica e fazendo mais três incidências com intervalos de 48 horas. As mortes dos animais ocorreram no primeiro, terceiro, sétimo e décimo quarto dias de pós operatório e as peças foram coradas com Hematoxilina-Eosina (H.E.). Na análise das lâminas foi observada, presença significativamente maior de edema no grupo controle, em todos os períodos de observação, em comparação ao grupo irradiado com laser. Observou-se também ausência de infiltrado inflamatório neutrofítico no grupo irradiado com laser em todos os períodos estudados, estando o mesmo infiltrado presente significativamente no grupo controle em três dos quatro períodos estudados. Observou-se infiltrado linfocítico desde o primeiro período de verificação no grupo irradiado, sendo que no grupo controle este tipo de infiltrado começou a ser observado no segundo período de observação. Além disso, observou-se ainda, uma vascularização bem mais intensa no grupo controle quando comparado ao irradiado. Não se verificou diferença significativa entre os grupos na quantidade de fibroblastos no interior do enxerto. Os resultados encontrados sugerem que a terapia adicional com laser não ablativo é efetiva no processo cicatricial e na integração do enxerto de derme acelular. / This study aimed to evaluate the integration of an acellular dermal matrix graft (AlloDerm®; LifeCell Corp., The Woodlands, TX) at the implantation site and to compare integration rates between groups receiving and not receiving nonablative laser treatment by the quantification of fibroblasts within the graft and assessment of the healing process and inflammatory response around the graft. Standard 5-mm2 AlloDerm® sheets were implanted into the subcutaneous tissue in the calvaria of 32 Wistar rats (Rattus Norvegicus). Laser therapy was given at a dose of 4 J/cm2 per session immediately after surgical intervention, followed by 3 additional applications at 48-h intervals. The animals were killed 1, 3, 7, and 14 days after surgery. The specimens were stained with hematoxylin-eosin (HE). Analysis of the slides showed a significantly higher amount of edema in the control group at all observation time points, compared to the laser-irradiated group. Absence of neutrophilic inflammatory infiltrate was observed in the laser-irradiated group at all time points, but a significant amount of this infiltrate was found in the control group at 3 of the 4 observation time points. Lymphocytic infiltration was evident as early as the first observation time point in laser-irradiated animals, whereas in controls this type of infiltration was observed only after the second time point. In addition, the control group showed significantly greater revascularization than the laser-irradiated group. There was no significant difference between groups in the quantity of fibroblasts within the graft. These findings suggest that additional nonablative laser therapy is effective in the healing and integration of acellular dermal grafts.
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Avaliação histológica do reparo em enxertos de derme acelular, estimulado por laser não ablativo

Silveira, Vinícius Salim January 2012 (has links)
Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2012-05-04T13:05:59Z No. of bitstreams: 1 437947.pdf: 4406312 bytes, checksum: 345c5221d1c49908c5c03b2f35838af9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-04T13:05:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 437947.pdf: 4406312 bytes, checksum: 345c5221d1c49908c5c03b2f35838af9 (MD5) / Este trabalho tem por objetivo avaliar a integração do enxerto de derme acelular Alloderm® (LifeCell Corp., The Woodlands, TX) em sítios de implantação e comparar tal integração entre grupos que receberam incidência de laser não ablativo e grupos que não receberam essa incidência, por meio de análise da quantidade de fibroblastos no interior do enxerto e de avaliação do processo cicatricial e da reposta inflamatória do organismo em torno do mesmo. Foram inseridos no tecido subcutâneo da região calvaria de 32 ratos (Rattus Norvegicus, Wistar) fragmentos padrões de 5mm2 de Alloderm®. Aplicou-se laserterapia de 4J/cm2 por sessão iniciando imediatamente após a intervenção cirúrgica e fazendo mais três incidências com intervalos de 48 horas. As mortes dos animais ocorreram no primeiro, terceiro, sétimo e décimo quarto dias de pós operatório e as peças foram coradas com Hematoxilina-Eosina (H.E.). Na análise das lâminas foi observada, presença significativamente maior de edema no grupo controle, em todos os períodos de observação, em comparação ao grupo irradiado com laser. Observou-se também ausência de infiltrado inflamatório neutrofítico no grupo irradiado com laser em todos os períodos estudados, estando o mesmo infiltrado presente significativamente no grupo controle em três dos quatro períodos estudados. Observou-se infiltrado linfocítico desde o primeiro período de verificação no grupo irradiado, sendo que no grupo controle este tipo de infiltrado começou a ser observado no segundo período de observação. Além disso, observou-se ainda, uma vascularização bem mais intensa no grupo controle quando comparado ao irradiado. Não se verificou diferença significativa entre os grupos na quantidade de fibroblastos no interior do enxerto. Os resultados encontrados sugerem que a terapia adicional com laser não ablativo é efetiva no processo cicatricial e na integração do enxerto de derme acelular. / This study aimed to evaluate the integration of an acellular dermal matrix graft (AlloDerm®; LifeCell Corp., The Woodlands, TX) at the implantation site and to compare integration rates between groups receiving and not receiving nonablative laser treatment by the quantification of fibroblasts within the graft and assessment of the healing process and inflammatory response around the graft. Standard 5-mm2 AlloDerm® sheets were implanted into the subcutaneous tissue in the calvaria of 32 Wistar rats (Rattus Norvegicus). Laser therapy was given at a dose of 4 J/cm2 per session immediately after surgical intervention, followed by 3 additional applications at 48-h intervals. The animals were killed 1, 3, 7, and 14 days after surgery. The specimens were stained with hematoxylin-eosin (HE). Analysis of the slides showed a significantly higher amount of edema in the control group at all observation time points, compared to the laser-irradiated group. Absence of neutrophilic inflammatory infiltrate was observed in the laser-irradiated group at all time points, but a significant amount of this infiltrate was found in the control group at 3 of the 4 observation time points. Lymphocytic infiltration was evident as early as the first observation time point in laser-irradiated animals, whereas in controls this type of infiltration was observed only after the second time point. In addition, the control group showed significantly greater revascularization than the laser-irradiated group. There was no significant difference between groups in the quantity of fibroblasts within the graft. These findings suggest that additional nonablative laser therapy is effective in the healing and integration of acellular dermal grafts.
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Avaliação da resposta tecidual a discos de ácido poli-l/d láctico: estudo experimental em ovelhas

Cielo, Vinícius Flores January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000427033-0.pdf: 1511979 bytes, checksum: 5e65b939e0aae98244311352791e72a9 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The aim of this study was to evaluate the inflammatory reaction, more specifically the foreign body reaction and behavior of bone remodeling in sheep’s tibiae and ulnae after installation of copolymer discs consisting of 95% poly-L lactic acid and 5% acid poly-D Lactic (PLDLA). It was used two adult female sheep which was fixed, by screws, for circular discs of PLDLA in each tibia and ulna of the sheep. A total of 16 discs were fixed in each animal. The sheeps were randomly divided into two groups according to the time of death after surgery: 30 and 60 days. Subsequently the samples were processed, resulting in a slide for each sample. After that the slides were investigated in optical microscope with magnification of 40 x and 100 x. In the slices of periosteal were evaluated the inflammatory infiltrate in a descriptive way in an increase of 40 X and quantitatively, by counting inflammatory cells in five random fields per sample in an optical microscope in an increase of 100 X. The inflammatory density was quantified according to the following scale: grade 0 - absence of inflammatory infiltrate, grade 1 - less than 30 cells per field, grade 2 - 30 to 100 cells per field and grade 3 - greater than 100 cells per field. In bone tissue it was analyzed two random fields per sample and if some bone resorption area appeared in the area of contact with the discs, this was described. In the end of the study, histological sections of the both groups showed tissue composed of organized fibroblasts and the inflammatory infiltrate varied from absent to mild. Talking about bone resorption, it had association with compression of the discs to the bone tissue, without evidence of bone resorption caused by the discs. At the end of the study verified biocompatibility, abscense of osteolisys at macroscopic view, disc structure undefformed and appropriated fit between titanium screw and PLDLA disc. / O objetivo desse estudo foi avaliar a reação inflamatória, mais especificamente a reação de corpo estranho, e o comportamento de remodelação óssea em tíbias e ulnas de ovelhas, após instalação de discos de um copolímero constituído de 95% de ácido Poli-L Láctico e 5% de ácido Poli-D Láctico (PLDLA). Foram utilizadas duas ovelhas fêmeas adultas em que se fixaram, através de parafusos, quatro discos circulares de PLDLA em cada tíbia e ulna das ovelhas, totalizando 16 discos em cada animal. As ovelhas foram aleatoriamente divididas em dois grupos, de acordo com o período de morte após a cirurgia: 30 e 60 dias. Posteriormente as amostras foram processadas, obtendo-se uma lâmina por amostra, que foram investigadas ao microscópio óptico com aumentos de 40x e 100x. Nas lâminas de periósteo avaliou-se o infiltrado inflamatório de forma descritiva, em um aumento de 40 X, e de forma quantitativa, pela contagem de células inflamatórias em cinco campos aleatórios por amostra no microscópio óptico, em aumento de 100 X. A densidade inflamatória foi quantificada conforme a seguinte escala: grau 0 – ausência de infiltrado inflamatório, grau 1 – menor que 15 células por campo, grau 2 – 15 a 50 células por campo e grau 3 – maior que 50 células por campo. O tecido ósseo foi analisado macroscopicamente, e havendo área de reabsorção óssea na área de contato com os discos, esta foi descrita. Observou-se ao final do estudo que as secções histológicas dos grupos 30 de 60 dias apresentavam tecido conjuntivo composto por fibroblastos maduros, organizados e o infiltrado inflamatório variava de ausente a leve. Em relação à reabsorção óssea há associação com a compressão dos discos ao tecido ósseo, não havendo indícios de reabsorção óssea causadas pelos discos. No final do estudo verifica-se biocompatibilidade, ausência de osteólise a nível macroscópico, manutenção da estrutura do disco e adequada associação entre o parafuso de titânio e disco de PLDLA.
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Análise histomorfométrica comparativa entre o cimento de α-TCP e os grânulos de β-TCP/HA no reparo ósseo de calotas cranianas de ratos

Grandi, Gisela January 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000397726-0.pdf: 6415316 bytes, checksum: 94e18040fb876738a7854d94d6e2b15c (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Osseous defects can be the result of pathologies, traumas and surgeries. Depending on its extension, the bone repair does not occur spontaneously therefore, fillings are necessary. Biomaterials have been a viable alternative as bone substitutes. Among them, emphasis is given on bioceramics due to their biocompatibility, atoxicity and osteoconduction properties. This study has comparatively analyzed two types of bioceramics, α- tricalcium phosphate (α-TCP) and β-tricalcium phosphate-HA (β-TCP/HA) inserted in critical osseous defects performed on 50 rat calvariae (Rattus norvegicus albinus, Wistar) male, adults, with an average body weight of 300 to 400 g. The animals were divided in two groups with 25 animals each: α- group and β/HA group. On the calvaria of each animal, two cavities were made measuring 4 mm of diameter each. The left cavity was filled with the correspondent material of each group and the right one was filled with autogenous bloodclot corresponding to the control group. The animals were sacrificed 7, 21, 60, 90 and 120 days after surgery. The parietal bones containing the cavities were removed and the parts were submitted to a histological processing by the HE technique. By using software Image Pro Plus 6. 2, a histomorphometric analysis was performed which allowed the measurement of the defect neoformed bone area in different observation periods. The results expressed in mean percentage of the defect area filled by the neoformed bone, in the α- TCP group were: 1,6% (+ 2,37) on day 7, 5,24% (+ 5,58) on day 21, 24% (+ 14,5) on day 60, 30,21% (+ 6,84) on day 90 and 50,59% (+ 5,42) on day 120. In the β - TCP/HA group, the results were 1,94% (+ 3,10) on day 7, 2,53% (+ 1,19) on day 21, 12,47% (+ 3,87) on day 60, 26,84% (+ 2,80) on day 90 and 38,82% (+ 8,76) on day 120 post-surgery. In the control group, the mean results were 0,15% on day 7, 10,12% on day 21, 15,10% on day 60, 18,94% on day 90 and 48,50% on day 120. The study concluded that the cements α-TCP e β-TCP/HA promote osteoconduction; the cement α-TCP is more biosoluble and presents a higher percentage of bone neoformation area, and the β-TCP/HA is reabsorbed more slowly promoting volume maintenance of the implanted area. / Os defeitos ósseos podem decorrer de fatores como patologias, traumas e cirurgias. Dependendo de sua extensão, o reparo ósseo não acontece de forma espontânea, necessitando o uso de enxertos. Os biomateriais têm sido uma alternativa viável como substitutos ósseos. Dentre eles, destacam-se as biocerâmicas pela sua biocompatibilidade, atoxicidade e propriedades osteocondutoras. Este estudo analisou comparativamente dois tipos de biocerâmicas, cimento de α-fosfato tricálcico (α−TCP) e grânulos de β-fosfato tricálcico-HA (β-TCP/HA), inseridas em defeitos ósseos críticos confeccionados em calotas cranianas de 50 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar), machos, adultos, com peso corporal médio de 300 a 400g. Os animais foram divididos em dois grupos com 25 animais: grupo-α e grupo-β/HA. Na calota craniana de cada animal, foram confeccionadas duas cavidades medindo 4 mm de diâmetro cada. A cavidade esquerda foi preenchida pelo material correspondente de cada grupo e a cavidade direita foi preenchida por coágulo sangüíneo autógeno, correspondendo ao grupo controle. Os animais foram mortos aos 7, 21, 60, 90 e 120 dias de pós-operatório. Os ossos parietais contendo as cavidades foram removidos e as peças operatórias submetidas a processamento histológico pela técnica de HE. Com auxílio do software Image Pro Plus 6. 2, foi realizada análise histomorfométrica que permitiu mensurar a área de osso neoformado dos defeitos nos diferentes períodos de observação. Os resultados, expressos em porcentagem média de área do defeito preenchido por osso neoformado, no grupo α−TCP foram: 1,6% (+ 2,37) aos 7 dias, 5,24% (+ 5,58) aos 21 dias, 24% (+ 14,5) aos 60 dias, 30,21% (+ 6,84) aos 90 dias e 50,59% (+ 5,42) aos 120 dias. No grupo β−TCP/HA, os resultados foram de 1,94% (+ 3,10) aos 7 dias, 2,53% (+ 1,19) aos 21 dias, 12,47% (+ 3,87) aos 60 dias, 26,84% (+ 2,80) aos 90 dias e 38,82% (+ 8,76) aos 120 dias de pós-operatório. No grupo controle, as médias dos resultados foram de 0,15% aos 7 dias, 10,12% aos 21 dias, 15,10% aos 60 dias, 18,94% aos 90 dias e 48,50% aos 120 dias. Conclui-se que o cimento α-TCP e os grânulos β−TCP/HA promovem osteocondução; o cimento α-TCP é mais solúvel e apresenta maior porcentagem de área de neoformação óssea. Os grânulos β−TCP/HA são reabsorvidos mais lentamente, o que parece promover manutenção do volume da região implantada.
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Análise da vasculatura de linfonodos submandibulares em diferentes tempos do processo cicatricial de ferida cirúrgica em língua de ratos

Schneider, Tissiana Rachel Rossi January 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000393358-0.pdf: 4895507 bytes, checksum: 9eba41c68f55060563cbb2a7cf544bf8 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This study evaluated the vasculature of the submandibular lymph nodes in different healing stages of surgical wound produced in tongues from male Wistar rats. Using scanning electron microscopy (SEM), 123 lymph nodes were evaluated through the corrosion cast technique, and using light microscopy, 232 lymph nodes were evaluated through the histological sections stained with hematoxylin and eosin after 2, 3, 7, 10, 14 and 21 postoperative days. Analyzing the histological sections, it was observed that inside of the folliculenodules there was a small quantity of blood vessels, most of them concentrated in the basal portion. When the experimental groups were compared it was observed that after 21 post operative days there was the major quantity of blood vessels not presenting significant difference in the 2, 7 and 14 post operative days. When the experimental groups were compared with the controls it was observed a significant difference in the 2, 3, 14 and 21 post operative days in relation to the average number of blood vessels. During the analysis of the vascular models through the SEM, it was measured the area of follicule-nodules and the diameter of the capillaries that surround those nodules.A significant increase in the diameter of the capillaries was observed starting from the second day and persisted until the tenth post operative day. The area of the folliculo-nodules increased significantly only after the third day and this increasing persisted until the fourteenth post surgical day. The intussusceptive angiogenesis was seen in all evaluated groups, although it was in larger amount in the second and third postoperative days (83,33% and 80% respectively). In this study, it was observed that the increase of vascular diameter occurred before the increase of the folliculo-nodules area, and the quantity of blood vessels were similar in the basal portion of the follicule-nodules and the peripherical region of the deep cortex. / Este estudo avaliou a vasculatura dos linfonodos submandibulares em diferentes tempos cicatriciais de ferida cirúrgica produzida em ventre de língua de ratos Wistar machos. Através da microscopia eletrônica de varredura (MEV), foram avaliados 123 linfonodos pela técnica de moldagem vascular, e em microscopia de luz, foram avaliados 232 linfonodos através de cortes histológicos corados com HE, nos tempos 2, 3, 7, 10, 14 e 21 dias pós-operatórios. Analisando os cortes histológicos, verificou-se que o interior dos nódulos foliculares apresentou uma quantidade pequena de vasos sanguíneos, ficando estes concentrados na porção basal desses nódulos. Quando os grupos experimentais foram comparados entre si, constatou-se maior quantidade de vasos sanguíneos aos 21 dias pós-operatórios, não diferindo significativamente dos tempos de 2, 7 e 14 dias. Quando os grupos experimentais foram comparados aos controles, constatou-se diferença significativa aos 2, 3, 14 e 21 dias pós-operatórios em relação ao número médio de vasos sanguíneos. Durante a análise dos modelos vasculares através da MEV, mensurouse a área dos nódulos foliculares e os diâmetros dos capilares que circundam esses nódulos. Observou-se um aumento significativo no diâmetro dos capilares a partir do segundo dia, que persistiu até o décimo dia pós-operatório. A área dos nódulos foliculares aumentou significativamente somente a partir do terceiro dia e esse aumento persistiu até o décimo-quarto dia pós-operatório. A angiogênese por intussuscepção foi vista em todos os grupos avaliados, no entanto, em maior quantidade no segundo e terceiro dia pós-operatório (83,33% e 80% respectivamente).Observou-se, no presente estudo, que o aumento do diâmetro dos capilares ocorreu anteriormente ao aumento da área dos nódulos foliculares, e que a quantidade de vasos sanguíneos foi semelhante na porção basal dos nódulos foliculares e na região periférica ao córtex profundo.

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