Två huvudsakliga metodprinciper används inom cytologi för diagnostisering av cellförändringar, nämligen konventionell och vätskebaserad metod. De kan båda appliceras på såväl gynekologiska som icke-gynekologiska prover, där den senare bland annat omfattar olika sorters exsudat. Syftet med den här studien var att utveckla metoden för den vätskebaserade metoden så att etanolfixerade exsudat kunde prepareras och även påvisa bättre resultat än då de preparerats med konventionell metod. För att göra detta har 61 unika prover kategoriserade som exsudat preparerats totalt, varav 61 med konventionell metod, 54 med vätskebaserad metod och 22 med vätskebaserad metod med tillsats av ättiksyra. De färdiga glasen bedömdes sedan i mikroskop och gavs scorevärden utifrån fyra parametrar: mängden celler exklusive inflammatoriska celler; bedömbarheten av cellmorfologin; mängden inflammatorisk komponent samt mängden bakgrundsmaterial. Resultaten visade ingen förbättring mellan de glas som preparerats med konventionell eller vätskebaserad metod. Däremot visade resultaten för de ättiksyrabehandlade proverna på förbättrade scorevärden jämfört med de andra metoderna. Som slutsats drogs att vätskebaserad metod med tillsats av ättiksyra uppnår syftet eftersom det reducerar mängden bakgrundsmaterial, förekomst av ring på objektglasen samt vidhåller en god cellmorfologi, vilket gör proverna lättare att diagnostisera för cytodiagnostikerna. / Two main principles is used within cytology in order to diagnose cytological abnormalities; conventional and liquid-based cytology. Both methods can be applied on both gynaecological and non-gynaecological samples of which the later includes samples categorized as exudate. The aim of this study was to develop the method for liquid-based cytology so that exudate fixated with ethanol could be prepared and also achieve better results compared to conventional method. In order to do so, 61 unique samples were prepared of which 61 with conventional method, 54 with liquid-based method and 22 with liquid-based method with added acetic acid. The slides was then examined in microscope and was given score values within four parameters: amount of cells; cell morphology; amount of inflammatory component and amount of background. The results indicated no difference between the slides prepared with conventional or liquid-based method. However, the slides prepared with addition of acetic acid indicated more opportunistic score values when compared. The conclusion was that liquid-based method with the addition of acetic acid did satisfy the aim of this study as it reduces the amount of background, reduces “ring formation” on the slides and preserve the cells morphology well, which makes the samples easier to diagnose.

Trensums Food AB är ett företag som producerar ett flertal olika livsmedelsprodukter åt flera globala varumärksägare. Några produkter som produceras av företaget är olika såser bl.a. BBQ-sås och vaniljsås. Genom att tillsätta syra i såserna så att pH blir < 4,2 anses produkterna säkra. Uppdragsgivare till produkten menar att det är viktigt att använda ättiksyra istället för andra syror och att inte pH är helt avgörande för en säker produkt. Syftet med projektet var att undersöka hur effektiva olika organiska svaga syror är på att avdöda olika mikroorganismer i BBQ-sås och mjölkbaserad sås. Det som främst påverkar den antimikrobiella aktiviteten hos en syra är mängden odissocierad syra. Mängden odissocierad syra i produkten beror på syrans pKa-värde, totala halten av syran och det omgivande pH i produkten. pH mättes i produkterna för att se om pH är avgörande för avdödningen eller om det är valet av syra som är viktigast. Syrorna som undersöktes var ättiksyra, citronsyra och mjölksyra på mikroorganismerna Candida utilis, Bacillus subtilis och Enterococcus faecium. BBQ-sås och mjölkbaserad sås tillverkades i olika batcher med viktprocenten 0, 0,12, 0,24 samt 0,36 % av respektive syra. I varje prov ympades respektive mikroorganism till en uppskattad halt på ca 103 CFU/ml. Efter 5 dagars inkubation i rumstemperatur mättes halten CFU/ml. Ättiksyra var den syra som var effektivast både i BBQ-såsen och den mjölkbaserade såsen. I BBQ-såsen reducerade ättiksyra med samtliga viktprocent alla mikroorganismerna till under minsta detektionsgränsen (< 101 CFU/ml). Citronsyra och mjölksyra reducerade enbart E.faecium och B.subtilis till under minsta detektionsgränsen. I den mjölkbaserade såsen som även var kontaminerad av andra mikroorganismer var det bara ättiksyra som synligt reducerade halten med ökad viktprocent syra. pH var lägre i BBQ-såsen med citronsyra och mjölksyra än med ättiksyra. Detta visar på att avdödningen av de undersökta mikroorganismerna inte bara är pH-beroende utan också påverkas av vilken syra som används. Den antimikrobiella aktiviteten beror på syrans pKa-värde och därmed mängden odissocierad syra. Ättiksyra har ett högre pKa-värde än både citronsyra och mjölksyra och befinner sig i högre utsträckning i odissocierad tillstånd än de övriga syrorna i båda produkterna. / Trensums Food AB is a company that produces a wide variety of food products to different global trademark owners. Some of the products produced by Trensums Food AB are different kind of sauces, including BBQ-sauce and vanilla sauce. The sauce products are considered safe when an acid is added resulting in a pH < 4,2. The outsource of the company claims that it is important to use acetic acid instead of other kind of acids and that the pH is not crucial to consider the product safe. The goal of this project was to investigate how effectively different kind of organic acids work against microorganisms in the BBQ-sauce and milk-based sauce produced by Trensums Food AB. The main antimicrobial activity of an acid depends on its concentration of undissociated acid. Which further depends on the pKa-value of the acid and also the surrounding pH in the product. The pH was measured in the products to see if pH is critical for the antimicrobial activity or if the choice of acid is more important. The acids used in this project was acetic acid, citric acid and lactic acid and they were tested on Candida utilis, Bacillus subtilis and Enterococci faecium. BBQ-sauce and milk-based sauce were made in different batches containing 0, 0,12, 0,24 and 0,36 weight percent of respective acid. Each batch contained 103 CFU/ml of respective microorganism. After 5 days of incubation a viable count was performed. The acetic acid was the most effective acid in both type of sauces, reducing all microorganisms below the detection limit (< 101 CFU/ml) in the BBQ-sauce within all batches. The citric acid and lactic acid reduced only E.faecium and B.subtilis to a value below the lowest level of detection. In the milk-based sauce, which was contaminated with additional microorganisms, it was only the acetic acid that showed an increasing effect of antimicrobial activity with increasing concentration of acid. The pH was lower in the BBQ-sauce when using citric acid and lactic acid compared to when using acetic acid. Thus concluding that the antimicrobial activity of the selected microorganisms is not solely dependent on the level of pH but additionally the type of acid being used. The acetic acid has a higher pKa-value compared to the other acids and is therefore to a higher extent in a undissociated state.

En vanlig orsak till otillfredsställande cytologiska preparat är kontamination av blod. På Cytologilaboratoriet, Länssjukhuset Ryhov tvättas blodiga gynekologiska preparat i Cytolyt® solution och ättiksyra för att reducera kontaminationer. Syftet med studien var att studera den potentiella påverkan tvätt med Cytolyt® solution och ättiksyra har på mesotelcellers morfologi. I studien ingick 60 exsudat av pleuravätska och ascites som analyserades med konventionell cytologisk metod. Utstryk utfördes och analyserades utan tvätt (kontroller) och efter tvätt i olika tider varpå preparaten bedömdes med avseende på mesotelcellers morfologi. Av kontrollerna hade 53% en välbevarad cytoplasma men endast 5.8% av de tvättade proverna. Cirka 87% av kontrollerna och 46% av de tvättade proverna hade en välbevarad och distinkt cellkärna. Morfologiska förändringar hos mesotelceller kunde påvisas efter tvätt i Cytolyt® solution och ättiksyra men förändringarna kunde inte kopplas till eller misstolkas som patologiska förändringar. / A common reason for unsatisfactory cytological smears is contamination of blood. Blood contaminated gynaecological samples are washed with Cytolyt® solution and acetic acid at the Cytological Laboratory, County Hospital Ryhov to reduce contaminations. The objective of this study was to determine the potential effect of Cytolyt® solution and acetic acid on the morphology of mesothelial cells. In this study 60 samples of pleural effusions and ascites was analysed with conventional cytological method. Cytological smears were prepared without wash (controls) and with wash for different durations. The morphology of mesothelial cells in the samples were then examined. Out of the controls 53% had a wellpreserved cytoplasm while this distribution decreased to 5.8% amongst the washed smears. About 87% of the controls and 46% of the washed smears had a preserved and distinct nucleus. Changes in morphology could be seen in mesothelial cells after wash with Cytolyt® solution and acetic acid. However, the changes could not be associated with disease. Washing exudates with Cytolyt® solution and acetic acid can alter morphological changes in mesothelial cells although the changes seen cannot be mistaken for pathological changes.

Vid cytologisk bedömning av celler i exsudat kan olika metoder användas vid preparering. Vid konventionell utstryksmetod stryks provet ut manuellt på objektglas medan vätskebaserad ThinPrepmetod preparerar provet i en automatiserad process. Studiens syfte var att jämföra konventionell utstryksmetod och vätskebaserad ThinPrepmetod med tillsats av ättiksyra vid preparering av etanolfixerade exsudat. I studien användes totalt 34 prover av pleuravätska och ascites. Proverna preparerades med konventionell utstryksmetod och två varianter av ThinPrepmetod, ThinPrepmetod 1 och ThinPrepmetod 2. Preparaten bedömdes av två cytodiagnostiker utifrån fem kriterier; cellförekomst, förekomst av inflammatoriska celler, cellmorfologi, bakgrundsmaterial och förekomst av atypiska eller maligna celler. Resultaten visade på att ThinPrepmetod 2 gav likvärdiga, och i vissa avseenden bättre, resultat än konventionell utstryksmetod. ThinPrepmetoden har generellt fler fördelar jämfört med konventionell utstryksmetod, framförallt innebär den en tidsbesparing för de som bedömer preparaten vilket också gynnar patienter. En mer omfattande studie rekommenderas för att konfirmera resultaten i denna studie. / Preparation of effusions for cytological evaluation can be performed with different methods. Conventional smears are performed by spreading the sample directly onto a slide while liquid-based ThinPrep method prepares the sample in an automated process. The aim of this study was to compare conventional smears with liquid-based ThinPrep preparation, with additional acetic acid, of effusions fixated with ethanol. A total of 34 samples of pleural effusions and ascites were included. The samples were prepared with conventional smears and two versions of the ThinPrep method, ThinPrep method 1 and ThinPrep method 2. The preparations were examined by two cytotechnologists based on five criteria; occurrence of cells, occurrence of inflammatory cells, cell morphology, background material and the presence of atypical or malignant cells. The results showed that ThinPrep method 2 obtained equivalent and, in some aspects, even better results compared to conventional smears. In general, the ThinPrep method has several advantages compared to the conventional smears. In particular, it is timesaving when examining the slides, which also benefits the patients. A more comprehensive study is recommended to confirm the results of this study.

Urinblåsecancer är den sjunde vanligaste cancerformen i Sverige där blåssköljvätska utgör det huvudsakliga provmaterialet vid utredning. ThinPrep® är en vanligt förkommande metod som används inom vätskebaserad cytologi vid analys av blåssköljvätska. Fixering av provmaterialet kan försvåra diagnostiken på grund av förändrad morfologi samt artefakter.  Studiens syfte var att jämföra erhållet preparatinnehåll från blåssköljvätskor som fixerats med fixeringslösning innehållande ättiksyra med CytoLyt® solution. Studien ämnade även jämföra ThinPrep® filtren ”Non-GYN” och ”UroCyte”.  Studien inkluderade 90 patientprover av blåssköljvätska som fixerades med tillsats av ättiksyra samt CytoLyt®, varvid filtren ”Non-GYN” samt ”UroCyte” användes. Preparaten bedömdes av cytodiagnostiker samt cytopatolog utifrån kriterierna: bakgrundsmaterial, cellmängd samt färgbarhet. Resultatet visade att CytoLyt® i kombination med filtret ”Non-GYN” gav ett mer representativt preparat samt lämnade en god bakgrundsbild. Användandet av CytoLyt® resulterade i fler diagnostiska fördelar jämfört med fixering av ättiksyra, vilket även gynnar patienter. / Bladder cancer is the seventh most common form of cancer in Sweden where the main source of material for investigation are bladder washings. A common method within liquid-based cytology for analysis of bladder washings is ThinPrep®. Altered morphology as well as artifacts due to fixation can complicate funkar “the diagnostics of the sample. The aim of this study was to compare the slide content obtained from bladder washings fixed with fixative containing acetic acid with CytoLyt® solution. The study also intended to compare the ThinPrep® filters "Non-GYN" and "UroCyte". A total of 90 samples of bladder washings from patients where included. The samples where fixed with the addition of acetic acid and CytoLyt®, using the "Non-GYN" and "UroCyte" filters. A cytotechnologist and a cytopathologist assessed the preparations based on the criteria background material, cell quantity and the amount of colour change. The results showed that CytoLyt® in combination with the filter "Non-GYN" gave a more representative preparation and provided a good background image. The use of CytoLyt® resulted in more diagnostic benefits compared to fixation with acetic acid, which also benefits patients.