FORTALEZA, M. T. V. Contribuição ao estudo das acídias do Golfo do México coletadas durante os cruzeiros 'Hourglass' (1965-1967). 2013. 83 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Marinhas Tropicais) - Instituto de Ciências do Mar, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013 . / Submitted by Geovane Uchoa (geovane@ufc.br) on 2016-08-30T12:03:04Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_mtvfortaleza.pdf: 2848071 bytes, checksum: 6de052e5e7e10164bf01af537b54467e (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid (nadsa@ufc.br) on 2016-08-30T16:26:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_mtvfortaleza.pdf: 2848071 bytes, checksum: 6de052e5e7e10164bf01af537b54467e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-30T16:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_mtvfortaleza.pdf: 2848071 bytes, checksum: 6de052e5e7e10164bf01af537b54467e (MD5) Previous issue date: 2013 / The oceanographic expeditions are conducted with the purpose of surveying poorly studied marine environments, gathering valuable information. The "Hourglass Cruises" were led by the Research Laboratory of Marine Conservation Board and Florida in the 1960s and considered one of the major oceanographic expeditions in the Gulf of Mexico. During the campaigns, samples of various taxa were collected, including representatives of Ascidiacea - a group with little knowledge for the region. The animals were collected with a steel dredge and placed in 10% formalin for at least 24 hours for fixation, subsequently placed in 40% isopropyl alcohol, and finally preserved in 70% ethanol. Specimens of the families Polyclinidae, Holozoidae, Polycitoridae and Euherdmaniidae were studied, yielding 22 diferent species. The most speciouse genera were Aplidium and Eudistoma. The fauna from the region is composed of a mixture of tropical and more temperate species, a pattern also known for other marine invertebrate taxa. / As expedições oceanográficas são realizadas com a finalidade de se estudar ambientes marinhos ainda pouco conhecidos, obtendo informações bastante valiosas. Os cruzeiros "Hourglass" foram conduzidos na década de 1960 pelo Laboratório de Pesquisa Marinha da Diretoria de Conservação da Flórida e considerados uma das maiores expedições oceanográficas na região do Golfo do México. Durante as campanhas foram coletadas amostras de vários táxons, entre eles representantes da classe Ascidiacea, um grupo ainda hoje pouco conhecido na região. Os animais foram coletados por meio de uma draga de aço e permaneceram em formalina a 10% por pelo menos 24 horas para fixação, sendo posteriormente colocados em álcool isopropílico a 40% e finalmente em etanol a 70% como meio final para conservação. Foram analisados os representantes das famílias Polyclinidae, Holozoidae, Polycitoridae e Euherdmaniidae. Para estas famílias foram identificadas 22 espécies, com destaque para os gêneros Aplidium e Eudistoma. A fauna encontrada é formada por uma mistura de espécies tropicais e temperadas, um padrão semelhante ao observado para outros táxons.

COSTA, T. E. da S. Ciclo reprodutivo de Eudistoma vannamei MILLAR, 1977 (Tunicata:Ascidiacea) e sua influência no metabolismo primário. 2011. 70 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Marinhas Tropicais) - Instituto de Ciências do Mar, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Geovane Uchoa (geovane@ufc.br) on 2016-03-28T14:39:12Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_tedascosta.pdf: 979103 bytes, checksum: ab59b4c4e5f43ffb750f76a8730b6401 (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid(nadsa@ufc.br) on 2016-03-30T14:26:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_tedascosta.pdf: 979103 bytes, checksum: ab59b4c4e5f43ffb750f76a8730b6401 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-30T14:26:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_tedascosta.pdf: 979103 bytes, checksum: ab59b4c4e5f43ffb750f76a8730b6401 (MD5) Previous issue date: 2011 / The ascidian Eudistoma vannamei is endemic to the Brazilian Northeast region, where it is found in the intertidal areas of coastal reefs, is considered one of the most abundant species of the encrusting fauna. This work presents data on the reproductive period of the species, also aiming to relate variations in the fatty acid composition to events on the reproductive cycle. For this study 10 colonies of the species were collected bimonthly at Flecheiras beach, Trairi city, Ceara state, from December 2007 to June 2010. A total of 200 colonies were collected, preserved and taken to the laboratory. For the study of the reproductive period 10 zooids were dissected from each colony and classified according to the development of the gonads and the presence of larvae or eggs in the atrial cavity. From the first 120 samples, part of the colony was separated and submitted to extraction in methanol, with a later partition in hexane. The hexanic partition was analyzed through gas chromatography coupled to mass spectrometry for determination of the fatty acid composition. The analysis of gonadal development was not a good indicator for reproductive effort. On the other hand, the presence of larvae or eggs was a more reliable marker, showing a continuous reproduction for the species, with a peak of effort between December and April, coinciding with the rainy season for the region. As to the fatty acids, a total of 32 different types were identified, out of which the miristic, plamitic, margaric, stearic, palmitoleic, oleic and gondoic acids were the major components. The analysis with a generalized linear model indicated a correlation for the miristic and stearic acids with the number of zooids with larvae or eggs in the atrial cavity. / A espécie de ascídia Eudistoma vannamei é endêmica do nordeste brasileiro, sendo encontrada na zona entremarés dos recifes costeiros, uma das espécies mais abundantes da fauna incrustante. No presente trabalho foi estudado o período reprodutivo desta espécie, procurando-se ainda relacionar variações nos teores de ácidos graxos com os eventos do ciclo reprodutivo. Para tal foram realizadas coletas bimensais na praia de Flecheiras, no Município de Trairi, Ceará, desde dezembro de 2007 até junho de 2010. Em cada coleta eram retiradas 10 colônias, num total de 200 colônias obtidas ao final do período estudado. Das primeiras 120 colônias coletadas, parte do material seguiu um processo de extração química em metanol e posterior partição em hexano. Todas as colônias foram examinadas quanto ao seu estado reprodutivo a partir da remoção de 10 zoóides, classificados quanto ao desenvolvimento das gônadas e presença de ovos ou larvas incubados na cavidade atrial. As partições hexânicas dos extratos da ascídia seguiram para análise em cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas, para determinação da composição dos ácidos graxos. Os resultados obtidos indicaram que a avaliação do desenvolvimento gonadal não foi um bom indicativo do esforço reprodutivo. A presença de ovos e larvas na cavidade atrial, por outro lado, foi um indicador mais confiável revelando um período reprodutivo contínuo, com maior intensidade nos meses de dezembro a abril, coincidindo com a estação chuvosa da região. Quanto aos ácidos graxos, foram identificadas 32 tipos, dentre os quais os ácidos mirístico, palmítico, margárico, esteárico, palmitoléico, oléico e gondóico foram os componentes majoritários. Uma análise utilizando um modelo linear generalizado indicou uma correlação entre os ácidos mirístico e esteárico com o número de zoóides apresentando larvas ou ovos incubados na cavidade atrial.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Eudistoma vannamei (Millar, 1977) à uma ascÃdia endÃmica do litoral do Nordeste brasileiro, largamente encontrado nas praias rochosas do estado do CearÃ. Previamente, o extrato bruto apresentou um interessante perfil em termos de bioatividade. O fracionamento bioguiado identificou uma mistura 1:1 altamente citotÃxica, contendo dois derivados inÃditos de estaurosporina, 2-hidroxi-7-oxoestaurosporina (I) e 3-hidroxi-7-oxoestaurosporina (II). IC50 para I/II e estaurosporina (STP) foram obtidas apÃs 72h de incubaÃÃo com diversas linhagens de cÃlulas tumorais, utilizando-se o ensaio do MTT, e em linfÃcitos humanos normais, atravÃs do ensaio de AlamarBlue. I/II superou a citotoxicidade de STP em 7 vezes, em mÃdia, para as cÃlulas tumorais, ao passo que mostrou-se tÃo ativa quanto frente Ãs cÃlulas normais. Uma anÃlise cinÃtica sobre a progressÃo de ciclo celular, ativaÃÃo de resposta a dano e vias de reparo de DNA, e induÃÃo de apoptose de cÃlulas HL-60 (leucemia) foi conduzida com 40 ou 80ng/mL I/II e acessada por citometria de fluxo e western blotting. Estudos de ciclo celular indicaram que I/II (40ng/mL) induz bloqueio de ciclo celular em G2/M e que este efeito prossegue irreversÃvel mediante a remoÃÃo do estÃmulo. STP (200ng/mL) induziu o bloqueio quase que completo em G2/M apÃs 24h de incubaÃÃo, enquanto perÃodos mais longos de incubaÃÃo provocam um aumento substancial de cÃlulas poliplÃides. A expressÃo de proteÃnas envolvidas no controle do ciclo celular (Cdk1, Cdk2, ciclina A e ciclina B1), associada à observaÃÃo morfolÃgica de cÃlulas tratadas com 40ng/mL I/II e coradas com H/E em lÃminas de vidro sugere que o bloqueio està ocorrendo, de fato, na fase G2. O bloqueio em G2 foi parcamente observado em cÃlulas tratadas com 80ng/mL I/II, conquanto caracterÃsticas apoptÃticas fizeram-se deveras evidentes. A avaliaÃÃo de dano à fita dupla de DNA atravÃs do teste do cometa neutro indica a induÃÃo apenas de baixo nÃvel de dano de DNA em cÃlulas tratadas com 40ng/mL I/II por 24, 48 ou 72h. Entretanto, cÃlulas tratadas com 80ng/mL I/II exibiram nÃveis mais elevados de dano. A expressÃo de proteÃnas relacionadas a dano de DNA (ATM e H2A.X) deu-se numa forma tempo- e concentraÃÃo-dependente, enquanto o bloqueio de ciclo e os marcadores de reparo (Chk1, Cdc25C, BRCA1) foram ativados, predominantemente, em cÃlulas tratadas com 40ng/mL I/II. Inversamente, a externalizaÃÃo de PS e a ativaÃÃo das caspases efetoras 3 e 7 e de PARP mostraram-se altamente expressos em cÃlulas tratadas com 80ng/mL I/II mostrou um claro efeito citostÃtico em cÃlulas HL-60 na menor concentraÃÃo testada, evidenciado pelo persistente bloqueio de ciclo celular e baixo dano em DNA; e um objetivo efeito citotÃxico na concentraÃÃo maior, motivado pelo extensivo dano em DNA e induÃÃo de apoptose. / Eudistoma vannamei Millar, 1977 is an endemic tunicate from the northeastern Brazilian coast, widely distributed over the rocky beaches of Cearà State. Previously, the crude extract showed an interesting bioactivity profile. Bioassay-guided fractionation yielded a highly cytotoxic 1:1 mixture identified as two novel staurosporine derivatives, 2-hydroxy-7-oxostaurosporine (I) and 3-hydroxy-7-oxostaurosporine (II). IC50 for I/II and staurosporine (STP) were obtained after 72h incubation with various tumor cell lines using the MTT assay and in normal human lymphocytes, by the AlamarBlue assay, where I/II outperformed STP in a 7-fold average. On normal cells, I/II showed to be equally effective as STP and, thus, showed a 25-fold average selectivity towards tumor cells. A kinetic analysis on cell cycle progression, activation of DNA damage and repair pathways and apoptosis induction of HL-60 cells (leukemia), was carried out with 40 or 80ng/mL I/II and accessed by flow cytometry and western blotting. Cell cycle studies indicated that I/II induces a G2-M arrest (at 40ng/mL, 45, 63 and 94% of arrested cells after 24, 48 and 72h treatment, respectively, against 9, 10 and 13% for the non-treated culture). Moreover, 24h-G2/M arrest is sustained and irreversible following removal of stimuli. STP induces 83% G2/M arrest at 200ng/mL after 24h incubation, whilst longer incubation periods provoke a substantial increase in polyploidy. Expression-rate of cell cycle related proteins (Cdk1, Cdk2, cyclin A and cyclin B1) paired with morphological observation of 40ng/mL I/II-treated H/E-stained cells placed on glass slides suggest that arrest is actually occurring at the G2 phase. G2 arrest is merely seen in 80ng/mL I/II-treated cells, while apoptotic features were quite evident. Double-strand breaks evaluated by the neutral comet assay indicates only low scored DNA damage against 24, 48 or 72h 40ng/mL I/II treated cells. However, 80ng/mL I/II-treated cells exhibited higher scored damage. DNA damage proteins (ATM and H2A.X) were expressed in a time- and concentration-dependent manner; while, cycle arrest and repair markers (Chk1, Cdc25C, BRCA1) were activated mostly on 40ng/mL I/II-treated cells. Conversely, PS externalization and activation of effector caspases 3 and 7 and PARP were highly blotted mostly for 80ng/mL I/II-treated cells. I/II induced a clear cytostatic effect on HL-60 cells at the lower concentration, distinguished by persistent cell cycle arrest and low DNA damage; and an objective cytotoxic effect at the higher concentration, motivated by extensive DNA damage and induction of apoptosis.