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Aglutinação de Leishmania amazonensis induzida por lectinas como método para purificação de promastigotas metacíclicas / Agglutination of Leishmania amazonensis induced lectins as a method for purification of metacyclic promastigotes

Barbosa, Juliana Montezuma January 2012 (has links)
BARBOSA, Juliana Montezuma. Aglutinação de Leishmania amazonensis induzida por lectinas como método para purificação de promastigotas metacíclicas. 2012. 82 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-11-01T13:53:22Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_jmbarbosa.pdf: 1028724 bytes, checksum: 9a305a90c70d8b44a2af3f39bc4f24c6 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-11-06T13:53:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_jmbarbosa.pdf: 1028724 bytes, checksum: 9a305a90c70d8b44a2af3f39bc4f24c6 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-06T13:53:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_jmbarbosa.pdf: 1028724 bytes, checksum: 9a305a90c70d8b44a2af3f39bc4f24c6 (MD5) Previous issue date: 2012 / In experimental leishmaniasis infections, the use of metacyclic enriched inoculum is very important because it can simulate the natural infection and avoids the inflamatory response induced by the high density parasite inoculum. The surface of different evolutionary forms of Leishmania is coated by several glycoconjugates that can be recognized specifically and reversibly by lectins, proteins that have affinity with carbohydrates. This being the case, one could use lectins in order to purify metacyclic Leishmania. The aim of the current study was to evaluate whether lectins of different specificities would agglutinate L. amazonensis promastigotes of different evolutionary forms. A panel of 7 lectins were used. The binding specificity was analyzed by agglutination tests. DVL agglutinated 78% of L. amazonensis promastigotes from logarithmic phase culture and 52% from stationary phase, and therefore was selected for in vivo tests. Stationary phase promastigotes were incubated with DVL to evaluate if the agglutination was stage-specific and it was purified the agglutinated and non agglutinated fractions. Golden hamsters were infected with 106 promastigotes and grouped as: Agglutinated fraction (FA) (n=8); Non agglutinated fraction (FNA) (n=9); Control (CT) (n=8). The lesion size was measured over the course of 6 weeks. The parasite load of regional lymph node was quantified by limiting dilution and histopathological analysis of the lesions were performed on their paws. The lesions began at the third week in all groups. The lesion’s size was similar in all of them, except at the fourth and fifth weeks that FNA presented a transitory reduction (p<0,01). There were no significant differences concerning the parasite load and histopathologic changes among the groups. These data suggest that DVL did not select effectivelly infective forms of L. amazonensis, although it agglutinates promastigotes from the two culture growth phases. / Nas infecções experimentais, estudos utilizando inóculo purificado de Leishmania, com populações metacíclicas mais homogêneas, tem sido importantes por se aproximarem mais da condição de infecção natural e por eliminar uma possível resposta inflamatória induzida por restos parasitários. A superfície dos vários parasitos reveste-se por diversos glicoconjugados. Estes, por sua vez, podem ser reconhecidos especifica e reversivelmente por lectinas, proteínas que possuem afinidade a carboidratos. Por conta disso, tem-se tentado purificar promastigotas metacíclicas de culturas de Leishmania através de aglutinação mediada por lectinas. Com esse intuito, buscou-se avaliar se lectinas de diferentes especificidades seriam capazes de aglutinar promastigotas de L. amazonensis em diferentes estágios evolutivos. Para isso, foi utilizado um painel de 7 lectinas, e a especificidade de ligação aos carboidratos de superfície foi analisada através de ensaios de aglutinação, sendo a lectina de Dioclea violacea (DVL) selecionada para a realização dos ensaios in vivo. A DVL foi capaz de aglutinar L. amazonensis num percentual de 78% em cultura de fase logarítmica e 52% em fase estacionária. Em seguida, promastigotas de fase estacionária foram incubadas com DVL para avaliar se a aglutinação era estágio-especifica. Posteriormente, realizou-se infecção experimental em hamsters dourados (106 promastigotas/animal) para avaliar a infectividade das frações purificadas. Os animais foram divididos em 3 grupos: Fração aglutinada (FA) (n=8); Fração não aglutinada (FNA) (n=9); Controle positivo (CT) (n=8). A evolução da infecção foi acompanhada pelo tamanho da lesão, nas 6 semanas pós-infecção e pela quantificação da carga parasitária no linfonodo regional, por diluição limitante, bem como pela análise anatomopatológica das lesões. Em todos os grupos as lesões iniciaram na 3ª semana. O tamanho da lesão foi muito semelhante em todos os grupos, com exceção da 4ª e 5ª semanas, onde FNA apresentou uma variação transitória (p<0,01). Quanto à carga parasitária e às alterações histopatológicas não houve diferença entre os grupos avaliados. Esses dados sugerem que, embora a DVL seja capaz de se ligar especificamente aos glicoconjugados de superfície das promastigotas, induzindo importante poder de aglutinação nas duas fases de crescimento, ela não foi capaz de selecionar formas infectantes de L. amazonensis.
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Pesquisa de criptococose em cães atendidos no Hospital de clínicas veterinarias da UFRGS, Porto Alegre, Brasil

Oliveira, Izamara Aparecida de January 2005 (has links)
Criptococose é uma levedurose que acomete o homem e vários animais, podendo ocorrer em indivíduos imunocompetentes, mas freqüentemente está associada a um estado de comprometimento imunológico. Atualmente a etiologia desta micose é atribuída a três espécies: Cryptococcus neoformans, C. grubii (isolados no solo rico em fezes de pombos), e C. gattii (isolado nos eucaliptos). A via mais freqüente de contaminação é a inalatória, com posterior colonização do trato respiratório superior, podendo atingir aos alvéolos e desenvolver a sintomatologia respiratória, ou ocorrer disseminação hematógena com possível comprometimento do Sistema Nervoso Central. É notável o aumento na procura de animais de companhia nos grandes centros urbanos e, também, se verifica uma significativa população de pombos nas cidades, alojados em igrejas, prédios, parques e praças. A exposição dos cães a locais possivelmente contaminados e a saúde destes animais constituise uma preocupação e, visto que existem relatos na literatura, ainda que poucos, sobre a criptococose em cães, realizamos uma pesquisa sobre a presença da levedura nesta espécie. Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência do Cryptococcus em cães com sintomatologia respiratória e/ou neurológica, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), localizado na cidade de Porto Alegre, Brasil. A amostragem foi composta por 112 cães. Realizou-se o exame direto, com nigrosina, do líquido cefalorraquidiano (n=17); o cultivo da secreção nasal (112), do sangue total (112) e do líquido cefalorraquidiano (n=17) em ágar níger (Guizotia abissynica), com incubação a 370C durante dez dias; e o teste de aglutinação em látex, utilizando-se o teste Crypto-LA (Wampole), com o soro (n=112) e o líquido cefalorraquidiano (n=17) Para o teste de aglutinação em látex foi realizado, também, tratamento com Pronase em 32 (28,57%) amostras de soro e 4 (23,52%) amostras de líquido cefalorraquidiano. Os resultados do exame direto, do cultivo e do teste de aglutinação em látex foram negativos para o Cryptococcus em todas as amostras testadas. Não se excluiu a possibilidade de ter ocorrido resultados falsos negativos, por não ter sido realizado um lavado nasal para coleta de material para cultivo e, também, porque o Cryptococcus poderia estar presente em pequenas quantidades no organismo e/ou ser pouco capsulado e, portanto, não sendo detectado através do teste de aglutinação em látex. Apesar dos resultados desta amostragem, é plausível a suposição que deva existir a ocorrência da infecção pelo Cryptococcus, embora haja a falta de uma suspeita clínica desta enfermidade, posto que, na região de abrangência do estudo existe uma população canina constantemente exposta ao risco por coabitarem com uma grande população de pombos.
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Pesquisa de criptococose em cães atendidos no Hospital de clínicas veterinarias da UFRGS, Porto Alegre, Brasil

Oliveira, Izamara Aparecida de January 2005 (has links)
Criptococose é uma levedurose que acomete o homem e vários animais, podendo ocorrer em indivíduos imunocompetentes, mas freqüentemente está associada a um estado de comprometimento imunológico. Atualmente a etiologia desta micose é atribuída a três espécies: Cryptococcus neoformans, C. grubii (isolados no solo rico em fezes de pombos), e C. gattii (isolado nos eucaliptos). A via mais freqüente de contaminação é a inalatória, com posterior colonização do trato respiratório superior, podendo atingir aos alvéolos e desenvolver a sintomatologia respiratória, ou ocorrer disseminação hematógena com possível comprometimento do Sistema Nervoso Central. É notável o aumento na procura de animais de companhia nos grandes centros urbanos e, também, se verifica uma significativa população de pombos nas cidades, alojados em igrejas, prédios, parques e praças. A exposição dos cães a locais possivelmente contaminados e a saúde destes animais constituise uma preocupação e, visto que existem relatos na literatura, ainda que poucos, sobre a criptococose em cães, realizamos uma pesquisa sobre a presença da levedura nesta espécie. Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência do Cryptococcus em cães com sintomatologia respiratória e/ou neurológica, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), localizado na cidade de Porto Alegre, Brasil. A amostragem foi composta por 112 cães. Realizou-se o exame direto, com nigrosina, do líquido cefalorraquidiano (n=17); o cultivo da secreção nasal (112), do sangue total (112) e do líquido cefalorraquidiano (n=17) em ágar níger (Guizotia abissynica), com incubação a 370C durante dez dias; e o teste de aglutinação em látex, utilizando-se o teste Crypto-LA (Wampole), com o soro (n=112) e o líquido cefalorraquidiano (n=17) Para o teste de aglutinação em látex foi realizado, também, tratamento com Pronase em 32 (28,57%) amostras de soro e 4 (23,52%) amostras de líquido cefalorraquidiano. Os resultados do exame direto, do cultivo e do teste de aglutinação em látex foram negativos para o Cryptococcus em todas as amostras testadas. Não se excluiu a possibilidade de ter ocorrido resultados falsos negativos, por não ter sido realizado um lavado nasal para coleta de material para cultivo e, também, porque o Cryptococcus poderia estar presente em pequenas quantidades no organismo e/ou ser pouco capsulado e, portanto, não sendo detectado através do teste de aglutinação em látex. Apesar dos resultados desta amostragem, é plausível a suposição que deva existir a ocorrência da infecção pelo Cryptococcus, embora haja a falta de uma suspeita clínica desta enfermidade, posto que, na região de abrangência do estudo existe uma população canina constantemente exposta ao risco por coabitarem com uma grande população de pombos.
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Pesquisa de criptococose em cães atendidos no Hospital de clínicas veterinarias da UFRGS, Porto Alegre, Brasil

Oliveira, Izamara Aparecida de January 2005 (has links)
Criptococose é uma levedurose que acomete o homem e vários animais, podendo ocorrer em indivíduos imunocompetentes, mas freqüentemente está associada a um estado de comprometimento imunológico. Atualmente a etiologia desta micose é atribuída a três espécies: Cryptococcus neoformans, C. grubii (isolados no solo rico em fezes de pombos), e C. gattii (isolado nos eucaliptos). A via mais freqüente de contaminação é a inalatória, com posterior colonização do trato respiratório superior, podendo atingir aos alvéolos e desenvolver a sintomatologia respiratória, ou ocorrer disseminação hematógena com possível comprometimento do Sistema Nervoso Central. É notável o aumento na procura de animais de companhia nos grandes centros urbanos e, também, se verifica uma significativa população de pombos nas cidades, alojados em igrejas, prédios, parques e praças. A exposição dos cães a locais possivelmente contaminados e a saúde destes animais constituise uma preocupação e, visto que existem relatos na literatura, ainda que poucos, sobre a criptococose em cães, realizamos uma pesquisa sobre a presença da levedura nesta espécie. Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência do Cryptococcus em cães com sintomatologia respiratória e/ou neurológica, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), localizado na cidade de Porto Alegre, Brasil. A amostragem foi composta por 112 cães. Realizou-se o exame direto, com nigrosina, do líquido cefalorraquidiano (n=17); o cultivo da secreção nasal (112), do sangue total (112) e do líquido cefalorraquidiano (n=17) em ágar níger (Guizotia abissynica), com incubação a 370C durante dez dias; e o teste de aglutinação em látex, utilizando-se o teste Crypto-LA (Wampole), com o soro (n=112) e o líquido cefalorraquidiano (n=17) Para o teste de aglutinação em látex foi realizado, também, tratamento com Pronase em 32 (28,57%) amostras de soro e 4 (23,52%) amostras de líquido cefalorraquidiano. Os resultados do exame direto, do cultivo e do teste de aglutinação em látex foram negativos para o Cryptococcus em todas as amostras testadas. Não se excluiu a possibilidade de ter ocorrido resultados falsos negativos, por não ter sido realizado um lavado nasal para coleta de material para cultivo e, também, porque o Cryptococcus poderia estar presente em pequenas quantidades no organismo e/ou ser pouco capsulado e, portanto, não sendo detectado através do teste de aglutinação em látex. Apesar dos resultados desta amostragem, é plausível a suposição que deva existir a ocorrência da infecção pelo Cryptococcus, embora haja a falta de uma suspeita clínica desta enfermidade, posto que, na região de abrangência do estudo existe uma população canina constantemente exposta ao risco por coabitarem com uma grande população de pombos.
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Efeito do fósforo sobre a interação das bactérias isoladas da rizosfera de Guandu (Cajanus cajan)

Finger, Giovana Peroni [UNESP] 19 February 2002 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-02-19Bitstream added on 2014-06-13T20:04:35Z : No. of bitstreams: 1 finger_gp_dr_jabo.pdf: 202689 bytes, checksum: 8c08fdd7e58dc736f674eaa545675de9 (MD5) / Foram isoladas e quantificadas bactérias totais, actinomicetos, bactérias esporuladas aeróbias, bactérias Gram negativas, pseudomonas e bactérias solubilizadoras de fosfato de solo rizosférico de guandu cultivado em células rizosféricas, empregando meios de cultura seletivos e o método de diluição seriada. As células rizosféricas foram utilizadas para separar o solo ao redor das raízes em camadas milimétricas. Do grupo de bactérias totais 50 bactérias foram isoladas por tratamento e submetidas ao teste de aglutinação com exsudato radicular, produzido em solução nutritiva, em estado bruto ou parcialmente purificado em coluna de Sephadex. Os grupos de bactérias totais, actinomicetos e bactérias Gram negativas, sofreram aumentos significativos na presença do guandu, fósforo (P) e na menor distância das raízes. As bactérias esporuladas aeróbias diminuíram com o aumento das doses de P. O grupo das pseudomonas foi o menos representativo no solo rizosférico e as solubilizadoras de fosfato apresentaram um aumento percentual nas doses crescentes de P. O teste de aglutinação mostrou a influência da planta sobre as bactérias com a maior porcentagem de reações positivas. O P não mostrou efeito sobre as reações de aglutinação quando analisado em conjunto com os fatores planta e distância da raiz. O exsudato radicular, produzido em solução nutritiva sem P e purificado, foi o que aglutinou o maior número de bactérias da rizosfera de guandu. Os testes de aglutinação mostraram que houve interações entre as bactérias e as plantas. / Total bacteria, actinomycetes, aerobic sporulated bacteria, Gram negative bacteria, pseudomonas and P-solubilizing bacteria of rhizospheric soil of pigeonpea cultivated in rhizospheric cells were isolated and quantified using selective culture medium and serial dilluition method. The rhizospheric cells were used to separate soil around roots into millimetric layers. From the groups of total bacteria, 50 bacteria were isolated per treatment and submitted to agglutination test using roots exudate produced into nutritive solution, crude solution or partialy purified by Sephadex column. Total bacteria, actinomycetes and Gram negative bacteria presented significative increasing considering the presence of pigeonpea, phosphorus (P) and at smallest root distance. Aerobic sporulated bacteria decreased at increasing doses of P. The pseudomonas group was less representative to rhizospheric soil and those wich solubilized phosphate presented an increased percentage at increasing doses of P. The agglutination test showed the influence of plant over bacteria presenting higher positive reaction percentage. The did not show effect over agglutination when analysed together with plant and root distance factors. The roots exsudate produced into nutritive solution without P and purified agglutinated the highest number of bacteria of rhizospheric of pigeonpea. The agglutination test showed that there were interaction between bacteria and plants.
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Efeito do fósforo sobre a interação das bactérias isoladas da rizosfera de Guandu (Cajanus cajan) /

Finger, Giovana Peroni. January 2002 (has links)
Orientador: Ely Nahas / Banca: Ana Maria Rodrigues Cassiolato / Banca: Diva de Souza Andrade / Banca: Eliana Gertrudes de Macedo Lemos / Banca: José Moacir Marin / Resumo: Foram isoladas e quantificadas bactérias totais, actinomicetos, bactérias esporuladas aeróbias, bactérias Gram negativas, pseudomonas e bactérias solubilizadoras de fosfato de solo rizosférico de guandu cultivado em células rizosféricas, empregando meios de cultura seletivos e o método de diluição seriada. As células rizosféricas foram utilizadas para separar o solo ao redor das raízes em camadas milimétricas. Do grupo de bactérias totais 50 bactérias foram isoladas por tratamento e submetidas ao teste de aglutinação com exsudato radicular, produzido em solução nutritiva, em estado bruto ou parcialmente purificado em coluna de Sephadex. Os grupos de bactérias totais, actinomicetos e bactérias Gram negativas, sofreram aumentos significativos na presença do guandu, fósforo (P) e na menor distância das raízes. As bactérias esporuladas aeróbias diminuíram com o aumento das doses de P. O grupo das pseudomonas foi o menos representativo no solo rizosférico e as solubilizadoras de fosfato apresentaram um aumento percentual nas doses crescentes de P. O teste de aglutinação mostrou a influência da planta sobre as bactérias com a maior porcentagem de reações positivas. O P não mostrou efeito sobre as reações de aglutinação quando analisado em conjunto com os fatores planta e distância da raiz. O exsudato radicular, produzido em solução nutritiva sem P e purificado, foi o que aglutinou o maior número de bactérias da rizosfera de guandu. Os testes de aglutinação mostraram que houve interações entre as bactérias e as plantas. / Abstract: Total bacteria, actinomycetes, aerobic sporulated bacteria, Gram negative bacteria, pseudomonas and P-solubilizing bacteria of rhizospheric soil of pigeonpea cultivated in rhizospheric cells were isolated and quantified using selective culture medium and serial dilluition method. The rhizospheric cells were used to separate soil around roots into millimetric layers. From the groups of total bacteria, 50 bacteria were isolated per treatment and submitted to agglutination test using roots exudate produced into nutritive solution, crude solution or partialy purified by Sephadex column. Total bacteria, actinomycetes and Gram negative bacteria presented significative increasing considering the presence of pigeonpea, phosphorus (P) and at smallest root distance. Aerobic sporulated bacteria decreased at increasing doses of P. The pseudomonas group was less representative to rhizospheric soil and those wich solubilized phosphate presented an increased percentage at increasing doses of P. The agglutination test showed the influence of plant over bacteria presenting higher positive reaction percentage. The did not show effect over agglutination when analysed together with plant and root distance factors. The roots exsudate produced into nutritive solution without P and purified agglutinated the highest number of bacteria of rhizospheric of pigeonpea. The agglutination test showed that there were interaction between bacteria and plants. / Doutor
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Desenvolvimento de teste rápido para detecção de rotavírus: imunoensaio de captura e aglutinação em látex

Silveira, Waldemir de Castro January 2005 (has links)
Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-13T12:18:47Z No. of bitstreams: 1 waldemir-de-castro-silveira.pdf: 669613 bytes, checksum: b8a4602ed033af1429638f26a5325f0d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-13T12:18:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 waldemir-de-castro-silveira.pdf: 669613 bytes, checksum: b8a4602ed033af1429638f26a5325f0d (MD5) Previous issue date: 2005 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O rotavírus humano (RV) pode ser detectado prontamente pelo método de aglutinação do látex (LTE), com elevada sensibilidade e especificidade, através da reação cruzada com o anticorpo anti-rotavírus decarneiro. As partículas de látex revestidas com a imunoglobulina G anti-rotavírus, são especificamente aglutinadas na presença do RV, com resultados macroscopicamente evidentes dentro de poucos minutos. Para a sensibilidade e a especificidade do método de LTE proposto, comparou-se com outro método similar (Rota-Kit Slidex®; BioMérieuxl), um total de 81 amostras fecais de crianças até 5 anos com gastroenterite aguda. Com 36 amostras diarréicas RV-positivos e 45 RV-negativos, a ensibilidade analítica do teste de LTE proposto foi > 99,99%, e a especificidade analítica também foi > 99,99%. O LTE demonstrou ser capaz de detectar partículas de rotavírus em fezes diarréicas em concentrações 20 vezes menores que o limite de detecção do Rota-Kit Slidex®. A freqüência de testes positivos de LTE pareceu ser proporcionalà concentração de viríons na amostra fecal. O LTE demonstrou uma sensibilidade de 94,0% (34 de 36 positivos), e uma especificidade > 99,99% (45de 45 negativas) quando comparado com o Rotazyme II®, um ensaio imunoenzimático (Abbott Laboratories). O método do LTE é rápido, facilmenteutilizável para detectar o RV em amostra fecal de crianças e é apropriado para a aplicação como um teste diagnóstico simples, principalmente para triagem de grandes grupos de pacientes. O LTE é estável por pelo menos 2 anos searmazenado sob refrigeração (4°C) e se mostra útil para laboratórios de pequeno porte, para rotinas ambulatoriais, de emergências e de triagem e finalmente, para discriminar amostras negativas que poderão então ser testadas por testes mais sensíveis. / Human rotavírus (HRV) can readily be detected by the latex agglutination assay method (LTE), with raised sensitivity and specificity, based on crossed reaction with the anti-rotavirus sheep antibody. The latex particles coated with anti-rotavirus immunoglobulin G, agglutinates specifically when in contact with HRV in few minutes, with evident macroscopically results. The sensitivity and the specificity performance of the proposed method (LTE), was compared with another similar method (Rota-Kit Slidex®, BioMérieux), a total of 81 specimens from children with acute gastroenteritis were tested. With 36 HRV positive samples and 45 HRV negative samples, the analytical sensitivity of LTE was better than 99,99% and the analytical specificity, also, was better than 99,99%. The LTE demonstrated to be capable to detect particles of HRV in fecal samples in concentrations20 lesser times that the limit of detection of Rota-Kit Slidex®. The frequency of positive tests of LTE seemed to be proportional to the concentration of virions in the fecal sample. The LTE demonstrated a sensitivity of 94,0%(34 of 36 positives), and a specificity >99,99% (45 of 45 negatives) whencompared with Rotazyme II® (Abbott Laboratories). The method of the LTE is fast and easily usable to detect HRV in children fecal sample and is appropriate for application as a test of simple diagnosis, mainly for screening of great groups of patients. The LTE is stable per at least 2 yearsif stored under refrigeration (4°C) and it shows useful for small laboratories, clinic routines, emergence rooms and screenings and finally to discriminate negative samples that could then be tested by more sensible tests.
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Compostos sintagmáticos nominais VN, NN, NA, AN e NprepN no português arcaico (Sécs. XIII - XVI)

Santos, Antônia Vieira dos Santos January 2009 (has links)
Submitted by Suelen Reis (suziy.ellen@gmail.com) on 2013-05-17T12:18:35Z No. of bitstreams: 2 Tese_Antonia dos Santos v2.pdf: 654873 bytes, checksum: b153dc0654d46438bc4ec3503b5170a0 (MD5) Tese_Antonia dos Santos v1.pdf: 1239837 bytes, checksum: a8be6cda82c020dc396eefb258d81f57 (MD5) / Approved for entry into archive by Alda Lima da Silva(sivalda@ufba.br) on 2013-05-23T18:54:56Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese_Antonia dos Santos v2.pdf: 654873 bytes, checksum: b153dc0654d46438bc4ec3503b5170a0 (MD5) Tese_Antonia dos Santos v1.pdf: 1239837 bytes, checksum: a8be6cda82c020dc396eefb258d81f57 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-23T18:54:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_Antonia dos Santos v2.pdf: 654873 bytes, checksum: b153dc0654d46438bc4ec3503b5170a0 (MD5) Tese_Antonia dos Santos v1.pdf: 1239837 bytes, checksum: a8be6cda82c020dc396eefb258d81f57 (MD5) Previous issue date: 2009 / Este estudo sobre os compostos sintagmáticos nominais com as estruturas VN (Verbo-Nome), NN (Nome-Nome), NA (Nome-Adjetivo), AN (Adjetivo-Nome) e NprepN (Nomepreposição- Nome) na língua portuguesa arcaica, fundamentado em um corpus representativo do ponto de vista da tipologia textual e das sincronias abrangidas (sécs. XIII-XVI), busca contribuir para uma descrição mais abrangente da composição de palavras nesse período da língua, ampliando, dessa forma, o leque de estudos históricos sobre os processos de formação de palavras. Aborda-se, ainda, de forma complementar, alguns lexemas aglutinados registrados nos textos, por tratar-se de antigas justaposições que já constituíam uma unidade semântica e pela importância do papel que essas formas representam no processo de mudança lingüística. No que tange ao tratamento teórico do tema, essas estruturas, em especial NA, AN e NprepN, costumam ser excluídas do âmbito da composição. Nesta tese, contudo, defende-se o seu estatuto legítimo de compostos com base em alguns trabalhos recentes sobre a composição, como o de Ribeiro (2006), e em algumas idéias extraídas do campo da fraseologia. Nesse sentido, adota-se uma perspectiva abrangente do fenômeno compositivo e relaciona-se a aparente realidade heterogênea dos produtos composicionais com a atuação de fatores de fixação e opacificação – sintática e semântica –, o que promove a intersecção entre compostos e outras unidades plurilexicais com caráter nominal, como colocações e expressões idiomáticas, motivando a discussão, neste trabalho, dos conceitos relacionados com esses termos. Antes da descrição e análise dos compostos do português arcaico, busca-se saber que tipo de estrutura – VN, NN, NA, AN e NprepN – está presente na língua latina. Afinal, além dos compostos morfológicos, a língua latina conhecia também os justapostos, estruturas que identificamos com os compostos sintagmáticos do português. A descrição e análise dos compostos observa a caracterização morfológica dos elementos que constituem o composto, a identificação do tipo de relação sintático-semântica que se desenvolve no interior do composto, a leitura sintático-semântica do composto enquanto produto e o seu grau de aproximação ou distanciamento em relação à área léxico-semântica dos constituintes, buscando-se, assim, sistematizar de modo mais coerente a composição sintagmática na língua portuguesa arcaica. / Salvador
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Detecção de anticorpos contra Leptospira spp. em animais de vida livre do Pantanal do Mato Grosso do Sul /

Silva, Talita Ribeiro. January 2016 (has links)
Orientador: Luis Antonio Mathias / Coorientador: Raphaella Barbosa Meireles Bartoli / Banca: Anna Monteiro Correia Lima / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Resumo: A leptospirose é uma zoonose que causa grandes prejuízos para a saúde pública e para a saúde animal. O objetivo deste trabalho foi estudar a ocorrência de anticorpos contra 20 sorogrupos de Leptospira spp. em diferentes espécies de animais de vida livre do Pantanal do Mato Grosso do Sul. Foram utilizadas 224 amostras de soro de animais de vida livre das sub-regiões de Nhecolândia e Paiaguás, no Mato Grosso do Sul, provenientes de um banco de soros da Embrapa Pantanal. As amostras foram submetidas ao teste de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando diluição inicial de 1/50 para os animais selvagens e 1/100 para os suínos ferais. As frequências de reagentes de acordo com o sexo e de acordo com a faixa etária foram comparadas por meio do teste exato de Fisher e os cálculos foram realizados com o auxílio do programa R. Dos 35 cachorros-do-mato (Cerdocyon thous), 37,14% foram considerados reagentes e os sorogrupos mais frequentes foram Pomona, Pyrogenes, Grippotyphosa e Canicola. Entre os quatis (Nasua nasua), 22,22% apresentaram reação na SAM, e quanto aos sorogrupos, Pomona foi o mais frequente. Dos 95 veados-campeiros (Ozotoceros bezoarticus) avaliados, 31,58% foram reagentes, sendo os sorogrupos mais frequentes o Pomona e o Autumnalis. Para os suínos em estado feral (Sus scrofa), 36,84% foram sororreagentes e os sorogrupos mais encontrados foram Pomona e Icterohaemorrhagiae. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre as frequências de reagen... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Leptospirosis is a zoonotic disease that causes great damage to public health and animal health. The objective of this investigation was to study the occurrence of antibodies against 20 Leptospira spp. serogroups in different species of free-ranging animals of Pantanal, Mato Grosso do Sul, Brazil. Serum samples of 224 animals from the subregions of Nhecolândia and Paiaguás in Mato Grosso do Sul were collected and tested through the microscopic agglutination test (MAT), at an initial dilution of 1/50 for wild animals and 1/100 for feral swine. The frequencies of reagents according to sex and according to age group were compared using Fisher's exact test, and the calculations were performed with the software R. Of the 35 crabeating foxes, 37.14% reacted to Leptospira, and the most frequent serogroups were Pomona, Pyrogenes and Canicola. For coatis, of the 18 samples examined, only four 22.22% showed reaction in MAT, and Pomona was the most frequent serogroup. Of the 95 deer evaluated, 31.58% were reactors, and the most common serogroups were Pomona and Autumnalis. For feral pigs, of the 76 samples analyzed, 36.84% were reactors and the most frequent serogroups were Pomona and Icterohaemorrhagiae. There was no significative difference between the frequency of male and female reactors, and among the age groups in any of the animal species studied. This study found high frequencies of wild animals and feral swine reactors. For all species, the highest proportion of reactions was o... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Padronização da técnica de análise quantitativa da aglutinação de diferentes mananoligossacarídeos a linhagens de E. Coli patogênicas / Standardization of the Quantitative Analysis of the Agglutination of Different Mananoligosacarides to Pathogenic E. Coli Lineages

PEREZ, Paula Marioto 26 April 2017 (has links)
Submitted by Adriana Martinez (amartinez@unoeste.br) on 2017-08-31T19:39:30Z No. of bitstreams: 1 Paula Marioto.pdf: 1937783 bytes, checksum: c8d05805d5d9ba92ed3e0712c1e36797 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T19:39:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula Marioto.pdf: 1937783 bytes, checksum: c8d05805d5d9ba92ed3e0712c1e36797 (MD5) Previous issue date: 2017-04-26 / The objective of this study was to standardize a quantitative technique to evaluate the in vitro capacity of agglutination of different mannanoligosaccharides (MOS) to the strain of Escherichia coli isolated from cases of infantile diarrhea in children from 0 to 5 years of age. The research for the expression of fimbria Type 1 present in the isolates was performed by the microhemoagglutination test. For the oligosaccharide agglutination assays three MOS markers were extracted from S. cerevisae, groups 1, 2 and 3, filtered through a microfilter, later diluted for surface sowing in chromogenic Agar E. coli. For microscopic evaluation of binder capacity of the MOS were subjected to slide agglutination tests. In order to estimate the total bacterial count (CBT), the counts of the three-plate set were calculated. Assumptions of homogeneity of variances and normality of data were validated, respectively, by the Levene and Shapiro-Wilk test. Homozygous variables were compared by analysis of variance in one way (ANOVA one-way), with contrasts by the Tukey method. Heterocedastic variables were compared with one-way ANOVA with application of the Welche contrast contrasts by the Games-Howell method. Correlations between CBTs, Titres hemagglutinants, diameters and areas of the globules were evaluated by the Pearson correlation test. All analyzes were conducted in software R, considering probability of error type 1 = 5% Of the 30 strains tested, 25 (83.3%) expressed hemagglutinating capacity with titers ranging from 1: 4 to 1: 16. The results suggest that the MOS showed effective action on the agglutination of the bacteria, since the estimates of CBTs of the strains treated with MOS were inferior the counts of the pure sample. The degree of agglutination may vary according to the composition of the MOS, since product 1 showed higher CBTs than the others, indicating that the agglutinated beads were not able to retain bacteria in the pores of the filters similarly to products 2 and 3. It was observed significant correlation between mannose-sensitive haemagglutination and MOS agglutination for products 1 and 2, suggesting that the intensity of bacterial agglutination may be related to the expression of type 1 fimbriae. It is concluded that the filtration and culture technique can be used to evaluate different degrees of agglutination of MOS products and the amount of bacteria retained in the filters appears to be more related to the expression of mano-sensitive type 1 fimbriae than to the sizes of the globules produced. / O objetivo deste estudo foi padronizar uma técnica quantitativa para avaliar a capacidade in vitro de aglutinação de diferentes mananoligossacarídeos (MOS) à cepa de Escherichia coli isoladas de casos de diarreia infantil, de crianças de 0 a 5 anos de vida. A pesquisa para a expressão da fímbria tipo 1 presente nos isolados foi realizada pelo teste de microhemoaglutinação. Para realização dos ensaios de aglutinação de oligossacarídeos utilizou-se três marcas comerciais de MOS, extraídos de S. cerevisae, grupos 1, 2 e 3, filtrados através de um microfiltro, posteriormente diluídos para semeadura superficial em Ágar cromogênico E. coli. Para avaliação microscópica da capacidade aglutinante do MOS foram submetidas a testes de aglutinação em lâmina.Para estimar a contagem bacteriana total (CBT), calculou-se a média das contagens do conjunto de três placas. Pressupostos de homogeneidade de variâncias e normalidade de dados foram validados, respectivamente, pelo teste de Levene e Shapiro-Wilk. Variáveis homocedásticas foram comparadas por análise de variância em uma via (ANOVA one-way), com contrastes pelo método de Tukey. Variáveis heterocedásticas foram comparadas com ANOVA one-way com aplicação da correção de Welche contrastes pelo método de Games-Howell. As correlações entre CBTs, Títulos hemaglutinantes, diâmetros e áreas dos glóbulos foram avaliados pelo teste de correlação de Pearson. Todas as análises foram conduzidas no software R, considerando-se probabilidade de erro tipo 1= 5%. Das 30 cepas testadas, 25 (83,3%) expressaram capacidade hemaglutinante com títulos variando entre 1:4 e 1:16. Os resultados sugerem que o MOS apresentou ação efetiva na aglutinação das bactérias, visto que as estimativas de CBTs das cepas tratadas com MOS foram inferiores as contagens da amostra pura. O grau de aglutinação pode variar segundo a composição do MOS, visto que o produto 1 apresentou CBTs superiores aos demais, denotando que os glóbulos aglutinados não foram capazes de reter bactérias nos poros dos filtros de forma similar aos produtos 2 e 3.Observou-se correlação significativa e negativa entre a hemaglutinação sensível à manose e aglutinação de MOS para os produtos 1 e 2, o que sugere que intensidade da aglutinação por bactérias pode estar relacionada a expressão de fímbrias do tipo 1. Conclui-se que a técnica de filtragem e cultura pode ser utilizada para avaliar diferentes graus de aglutinação de produtos a base de MOS e a quantidade de bactérias retidas nos filtros parece estar relacionada mais com a expressão de fímbrias tipo 1 mano-sensíveis do que com os tamanhos dos glóbulos produzidos.

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