L'exploration de nouvelles démarches dans la prise en charge de la douleur est requise pour intégrer raisonnablement aux soins de haute qualité, des soins plus individualisés. Parmi ces méthodes, l'analgésie hypnotique est une procédure éprouvée expérimentalement par laquelle des suggestions appropriées d'analgésie hypnotique modifient les réponses physiologiques associées à la douleur au niveau périphérique (e.g. réponses autonomiques) et central (spinal et cérébral) et atténuent les réponses nociceptives physiologiques et l'expérience subjective correspondante de la douleur. Lors de l'interruption de grossesse du 1er trimestre (IG), en plus de l'anesthésie du col de l'utérus, divers moyens pharmacologiques sont utilisés avec un succès mitigé pour soulager la douleur et l'anxiété et sont parfois responsables d'effets secondaires (fentanyl, protoxyde d'azote). Chez 30 femmes demandant une IG, notre étude pilote suggère qu'une courte intervention d'hypnose avant et pendant l'IG diminue significativement la consommation de protoxyde d'azote pendant l'IG comparativement aux soins standard (36 % versus 87 %). Suite à cette étude pilote, notre objectif était d'évaluer si, en association avec les soins standards, une intervention brève d'hypnose, avant et pendant la procédure chirurgicale d'IG diminue la consommation de médication analgésique par les femmes lors de l'IG sans toutefois augmenter leur douleur et anxiété lors du geste le plus douloureux de la procédure chirurgicale (soit pendant l'aspiration-évacuation du foetus). Nous avons mené un essai clinique randomisé (n=350) sur une période de un an et demi qui a confirmé la supériorité globale du traitement par l'hypnose par rapport au traitement standard quant à la consommation de médicaments. En effet, dans cette étude, l'intervention standardisée d'hypnose a permis de diminuer le besoin des femmes en sédation par fentanyl et midazolam de plus de 20 % tout en assurant la non-infériorité de l'hypnose par rapport au traitement standard en ce qui concerne les niveaux d'anxiété et de douleur lors de l'aspiration. Nous concluons que l'analgésie hypnotique est une intervention qui peut aider à soulager la douleur et l'anxiété lors d'une IG et plus généralement lors de procédures médicales pour lesquelles douleur et anxiété sont anticipées. / The exploration of new approaches in the pain management is necessary to integrate reasonably into high quality care, more individualized treatments. Among these methods, hypnotic analgesia is a proven and tested procedure by which suitable suggestions of hypnotic analgesia modify the physiological responses associated with the pain at peripheral (e.g. autonomic responses) and central (spinal and cerebral) levels and attenuate the physiological nociceptive responses and the corresponding subjective experiment of pain. During the surgical procedure of first trimester pregnancy's interruption (IP), in addition to the anaesthesia of the uterine cervix, several pharmacological methods are used with more or less success to relieve the pain and the anxiety and are sometimes responsible for side effects (fentanyl, nitrous oxide). Among 30 women requiring a IP, our pilot study suggests that a hypnosis intervention before and during the IP significantly decreases the nitrous oxide's consumption during the IP compared to standard care (36% versus 87%). The objective of the next step was to evaluate if, in adjunction with the standard care, a short hypnosis intervention, before and during the surgical procedure of IP decreases women's consumption of analgesic medication at the time of the IP without however increasing the pain and the anxiety at the time of the most painful point of the surgical procedure (suction-evacuation of the fetus). We carried out a clinical trial over one and a half year period which clearly established the superiority of the hypnosis treatment compared to the standard treatment in regard with the women's consumption of medication. Indeed, the hypnosis standardized intervention decreased the women's need for sedation by fentanyl and midazolam of more than 20% while ensuring non-inferiority of hypnosis compared to the standard treatment in regard to the anxiety and pain levels during suctionevacuation. We conclude that hypnotic analgesia is an intervention which can help to relieve pain and anxiety during first trimester interruption of pregnancy and more generally at the time of medical procedures for which pain and anxiety are anticipated.

Un développement normal et optimal du système nerveux central durant l'embryogenèse est crucial pour l'organisation des circuits nociceptifs chez le nouveau-né. Durant le développement de l'enfant, les mécanismes impliqués dans la perception de la douleur maturent et sont influencés par l'exposition aux stress environnants. En effet, le stress peut induire un phénomène de l'analgésie liée au stress (stress induced analgesia,SIA). Ce phénomène peut impliquer les opioïdes et/ou la neurotensine (NT). D'ailleurs, il existe de nombreuses évidences que la NT endogène joue un rôle primordial dans le SIA de type naloxone-indépendant. La NT exerce ses effets analgésiques par sa liaison aux récepteurs NTS1 et NTS2. Nous proposons donc de déterminer le rôle du récepteur NTS2 dans le SIA chez le rat issu d'une colonie non stressée ainsi que chez la souris de type sauvage (WT) et la souris ayant été délétée du gène responsable de l'expression du récepteur NTS2 (KO NTS2). Nous avons évalué l'influence d'un stress sévère de type non-opioïdergique en utilisant le test de la nage en eau froide (15[degré]C) durant trois minutes, sur la modification de la perception de la douleur. Les expérimentations chez les rats mâles ont été effectuées aux jours postnataux 25 et 60 (P25 et P60). Les agonistes neurotensinergiques utilisés sont le JMV-431(30[mu]g/kg) et [bêta]-lactotensine (200[mu]g/kg), deux agonistes sélectifs du récepteur NTS2. Le NT69L (5?g/kg) a été utilisé comme agoniste spécifique des récepteurs neurotensinergiques (NTS1 et NTS2). Les agonistes neurotensinergiques ont été administrés de façon individuelle par voie intrathécale et la nage en eau froide a été effectuée 10 minutes suivant l'administration du composé en question. Les comportements douloureux ont été évalués grâce au test plantaire (Hargreaves test) 20, 30 et 40 minutes suivant l'administration du composé. Les résultats de la modification de la perception de la douleur suite à l'administration de chacun des agonistes à P25 ont révélé une augmentation du temps de retrait des pattes arrières au test plantaire au temps 20 minutes après l'injection. Les agonistes neurotensinergiques NTS2 amplifient l'effet du SIA en période infantile et cet effet est soutenu jusqu'au temps 30. Chez l'adulte (P60), les agonistes potentialisent également le SIA. Le SIA est aussi présent chez la souris. La modification de la perception de douleur a été évaluée au test plantaire et au test à la formaline (douleur tonique). Suite au stress de nage en eau froide, les souris WT étaient moins sensibles à la douleur que les souris KO NTS2 à 30 minutes. De plus, les résultats du test à la formaline ont aussi révélé, suite au stress sévère, que les souris KO NTS2 étaient plus sensibles à la douleur que les souris WT au cours de la phase inflammatoire. Afin de supporter ces résultats, nous avons récolté des échantillons de plasma pour dosage de corticostérone par radioimmunoassay (RIA). En condition basale, les souris KO NTS2 ont des concentrations plus basses que les souris WT. Les résultats ont aussi démontré des concentrations plus élevées de corticostérone en condition de stress en comparaison avec les individus non stressés. Également, on peut constater que les souris KO NTS2 stressées ont des niveaux de corticostérone plus bas que les individus de type sauvage ayant subi un stress. En utilisant une approche pharmacologique et génétique, nous avons ainsi démontré que le récepteur NTS2 était impliqué dans le SIA. Ces études ciblant le stress permettront d'améliorer notre compréhension entourant les facteurs externes pouvant influer sur le développement optimal des circuits nociceptifs au cours de l'enfance.

Étant donné que l'utilisation des cannabinoïdes dans un but thérapeutique est en pleine expansion, notre laboratoire a voulu vérifier, à l'aide de deux études cliniques fondamentales chez des sujets sains, le potentiel analgésique d'un cannabinoïde synthétique, le nabilone, lors de différents tests de douleur. Ces tests incluent l'utilisation d'une thermode (plaque chauffante) utilisée sur la peau à des températures supérieures au seuil de la douleur ainsi que l'utilisation du test du réflexe RIII vu par électromyogramme (EMG) et potentiels évoqués vus par électroencéphalogrammes (EEG) réalisé à l'aide de stimulations électriques du nerf sural. L'effet analgésique du nabilone était vérifié à l'aide de ces mesures électrophysiologiques de même que par l'utilisation de méthodes psychophysiques de mesure de perception de la douleur des participants utilisant une échelle analogue visuelle de la douleur allant de 0 à 100. Le potentiel synergistique du nabilone suite à l'activation d'un mécanisme de contrôle de la douleur appelé contrôle inhibiteur diffus nociceptif (CIDN) a aussi été vérifié. Ces tests furent effectués en double aveugle avec un placébo et des doses de 0 mg, 0,5 mg et 1 mg de nabilone. Malgré une tendance positive, nous n'avons pas réussi à voir un effet analgésique concret du nabilone 0 mg, 0,5 mg et 1 mg plus fort que l'effet placébo aussi bien dans les tests de thermode que de RIII. Le nabilone n'a pas su non plus, sur la population totale, créer d'effet synergistique avec l'effet du CIDN. Par contre, suite à des analyses statistiques plus poussées, nous avons pu voir que le nabilone avait, chez les femmes, un effet antihyperalgésique suite à l'activation du CIDN. Des effets très différents ont pu aussi être vus entre la réponse des femmes et des hommes suite au test du RIII quant à son effet spinal et supraspinal.

La neurotensine est un peptide découvert de manière fortuite en 1973 (Carraway et al., 1973). Dans le système nerveux, on la retrouve dans les zones impliquées dans le contrôle de la douleur (Dobner, 2005). Lorsqu'elle est injectée en intrathécal et en supraspinal elle exerce un effet analgésique en douleur aiguë (Clineschmidt et al., 1977; Kalivas et al., 1982; Urban et al., 1993). Plus récemment, son effet analgésique en intrathécal dans un modèle de douleur tonique a été démontré (Roussy et al., 2008). Le mécanisme proposé pour cette analgésie est qu'elle initierait un contrôle inhibiteur descendant qui inhiberait la transmission des stimuli nociceptifs périphériques (Dobner, 2006). Jusqu'à maintenant, son effet n'a pas été étudié en douleur neuropathique. La douleur neuropathique est une douleur chronique initiée ou causée par une lésion primaire du système nerveux. Plus [de] 3.75 million d'Américains en sont atteints (Chong et al., 2003) et malheureusement, il existe un nombre limité de médicaments efficaces pour cette affliction. Il existe plusieurs modèles animaux de douleur neuropathique chez le rat. Le modèle le plus largement reconnu est le modèle de constriction chronique du nerf sciatique (Bennett et al., 1988). À ce jour, 3 récepteurs lui ont été identifiés. NTR1 et NTR2 sont des récepteurs à sept domaines transmembranaires couplés aux protéines G et sont tous deux impliqués dans l'analgésie induite par la NT (Buhler et al., 2005). NTR3 est une protéine totalement différente possédant un seul domaine transmembranaire et dont le rôle n'est pas encore connu (Kitabgi, 2002). Dans cette étude, nous avons utilisé le modèle de constriction chronique du sciatique chez le rat pour démontrer que la neurotensine ainsi que ses analogues peptidiques modifiés, NT69L et PD149163, à différentes doses exercent un effet analgésique en douleur neuropathique.La douleur a été quantifiée par le test de von Frey électronique automatique et le test plantaire. Le PD149163 est un agoniste spécifique du récepteur NTR1 et il a provoqué un effet analgésique marqué. Ces résultats démontrent donc pour la première fois l'implication du récepteur NTR1 dans l'inhibition de la douleur d'origine neuropathique.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Il est fréquemment observé en clinique que les femmes sont plus susceptibles de vivre une douleur récurrente, des niveaux de douleur plus sévères et de la douleur de plus longue durée, que les hommes (UNRUH, 1996). Plusieurs facteurs ont déjà été pris en considération pour expliquer cette réalité, qu'ils soient psychosociaux ou physiologiques. Cependant, certaines évidences nous permettent de croire que les hormones sexuelles ont un important rôle à jouer dans ces différences de perception et de modulation de la douleur entre les hommes et les femmes. En effet, les seuils de douleur et la prévalence de certaines maladies varient selon le statut hormonal de l'individu (avant la puberté, pendant le cycle menstruel, pendant la grossesse, après la ménopause et l'andropause). Afin de nous permettre d'étudier le rôle individuel des principales hormones sexuelles (oestrogène, progestérone et testostérone) chez les deux sexes, un modèle animal de douleur de type inflammatoire, le test à la formaline, a été utilisé. L'intérêt de ce test réside dans le fait que les phénomènes nociceptifs observés sont multphasiques [sic] : une phase aiguë, une phase d'inhibition et une phase tonique. Ces phénomènes s'apparentent à différents types de douleurs observées en clinique. Ainsi, le premier projet présenté dans cette thèse nous a permis d'évaluer, par l'administration de ces hormones à des rats gonadectomisés, l'effet hypoalgésique ou hyperalgésique de chacune des hormones sexuelles sur la perception et la modulation de la nociception suite à un test à la formaline. Ces tests effectués chez les douze groupes de rats utilisés pour ce projet nous ont permis d'observer que (1) la testostérone joue un rôle hypoalgésique sur les phases dites nociceptives (aiguë et tonique) et que (2) les hormones sexuelles femelles ont une action modulatrice sur le mécanisme inhibiteur observé en interphase du test à la formaline. Cet effet sélectif des hormones sexuelles femelles sur une phase inhibitrice, l'interphase, a été la source d'inspiration pour le deuxième projet rapporté dans cette thèse, soit l'étude de l'implication des opioïdes endogènes dans ce mécanisme inhibiteur. C'est d'ailleurs par l'injection de naloxone, un antagoniste non spécifique des récepteurs opioïdes, que nous avons tout d'abord évalué la composante opioïdergique de l'interphase. La première conclusion tirée de cette étude est que l'interphase est opioïdergique chez les femelles et non opioïdergique (ou faiblement opioïdergique) chez les mâles. Suite à cette observation, nous avons ensuite décidé d'explorer d'avantage ce phénomène chez la femelle en évaluant à quel niveau du système nerveux (périphérique, spinal ou supraspinal) cette action prenait place. Différentes combinaisons d'antagonistes spécifiques pour chaque type de récepteurs opioïdes ([mu], [delta], et [kappa]) ont été également administrées aux rats femelles afin de déterminer le mode d'action spécifique de l'interphase.Il nous a été possible d'observer que cette action des opioïdes se fait principalement au niveau spinal mais également au niveau supraspinal et que l'activation combinée des récepteurs [delta] et [kappa] était nécessaire pour expliquer ce phénomène. Finalement, ces projets nous ont permis de mieux comprendre le rôle des hormones sexuelles dans les différences de douleur observées entre les hommes et les femmes et nous servirons à orienter des recherches futures vers des traitements adéquats selon le sexe de l'individu.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

De nombreuses études portant sur le microbiote intestinal ont mis en évidence son importance dans la physiologie et la physiopathologie de l’hôte. Les bactéries, acteurs majeurs du microbiote, participent au maintien de l’homéostasie intestinale en régulant plusieurs fonctions essentielles allant de la protection de la barrière intestinale au développement du système immunitaire. Des altérations de la composition et de la diversité de ce microbiote ont été observées dans des pathologies du tractus digestif comme le syndrome de l’intestin irritable et les maladies inflammatoires chroniques de l’intestin. Afin de restaurer l’homéostasie intestinale, des thérapies utilisant des bactéries probiotiques ont été utilisées. Parmi les bactéries probiotiques testées, Escherichia coli Nissle 1917 (E. coli Nissle 1917) a été décrite comme exerçant des fonctions anti-diarrhéiques, analgésiques et anti-inflammatoires. Néanmoins les mécanismes d’actions impliqués dans ces activités demeurent inconnus. Afin de les mettre en évidence, nous avons utilisé deux approches en spectrométrie de masse pour analyser les lipides bactériens. Une première approche sans apriori, nous a permis de mettre en évidence la production de lipopeptides dont le C12AsnGABAOH constitué d’un acide gras de 12 carbones, d’une asparagine et du GABA, le neurotransmetteur inhibiteur majoritaire du système nerveux. Ce lipopeptide était produit par des enzymes codées par des gènes faisant partis d’un cluster : l’îlot pks. A l’inverse du GABA seul, le C12AsnGABAOH traversait la barrière épithéliale intestinale (BEI) in vitro et in vivo. L’ajout de l’aminolipide par la bactérie confère donc au GABA la capacité d’atteindre les terminaisons nerveuses sensitives. Ce lipopeptide diminuait l’activation neuronale induite par l‘activation de nocicepteurs dans des cultures de neurones sensitifs via le récepteur GABAB. In vivo, il inhibait l’hypersensibilité viscérale induite par l’activation de nocicepteurs chez la souris. Dans une deuxième étude, nous avons réalisé une étude en spectrométrie de masse avec apriori en recherchant les acides gras à longue chaine (AGLC) hydroxylés dans différentes souches d’E. coli. Le C18-3OH un AGLC de 18 carbones possédant une hydroxylation en position 3 était produit en plus grande quantité par les bactéries E. coli Nissle 1917 indépendament de l’ilôt pks. Le C18-3OH n’était pas capable de traverser la BEI et s’accumulait dans les cellules in vitro, dans les tissus ex vivo, et dans le colon in vivo. Dans les tissus, le C18-3OH modulait l’expression de gènes qui était sous la dépendance du récepteur PPAR-γ. Enfin nous avons mis en évidence dans un modèle de colite induite par le DSS que le C18-3OH réduisait la perméabilité paracellulaire et les paramètres inflammatoires chez la souris. Ces travaux de thèse nous ont permis de démontrer pour la première fois que les bactéries E. coli Nissle 1917 pouvaient communiquer avec les cellules de l’hôte en sécrétant des lipopeptides et des AGLC. Deux d’entre eux le C12AsnGABAOH et le C18-3OH étaient des molécules bioactives. Le C12AsnGABAOH inhibait l’hypersensibilité viscérale et le C18-3OH réduisait le statut inflammatoire des cellules épithéliales intestinales. Ces composés lipidiques pourraient être impliqués dans les effets probiotiques exercés par E. coli Nissle 1917 et représenter des agents thérapeutiques dans le traitement de la douleur viscérale et de l’inflammation intestinale / Numerous studies have highlighted the importance of intestinal microbiota in the physiology and physiopathology of the host. Bacteria, the most represented microorganisms of the microbiota, contribute to the maintenance of intestinal homeostasis by regulating several essential functions ranging from the protection of the intestinal barrier to the development of the immune system. Impairment in the composition and diversity of this microbiota have been observed in pathologies of digestive tract such as irritable bowel syndrome and inflammatory bowel disease. In order to restore intestinal homeostasis, therapies using probiotic bacteria were used. Among probiotic bacteria tested, Escherichia coli Nissle 1917 (E. coli Nissle 1917) has been used for its anti-diarrheal, analgesic and anti-inflammatory properties. Nevertheless, the mechanisms of action involved in these therapeutic effects remain unknown. In order to study them, we used two approaches in mass spectrometry to analyse bacterial lipids. A first untargeted approach, allowed us to highlight the production of lipopeptides including C12AsnGABAOH composed by a fatty acid of 12 carbons, an asparagine and GABA (gamma amino butyric acid), the main inhibitory neurotransmitter of the nervous system. This lipopeptide was produced by enzymes encoded by genes of a cluster call the pks island. In contrast to GABA alone, C12AsnGABAOH crosses the intestinal epithelial barrier (IEB) in vitro and in vivo. The addition of the aminolipid by the bacteria confer to the GABA the ability to reach sensory nerve endings. This lipopeptide decreased neuronal activation induced by activation of nociceptors in sensory neuron primary cultures via the GABAB receptor. In vivo, it inhibited visceral hypersensitivity induced by activation of nociceptors in mice. In a second study, we carried out a mass spectrometry targeted approaches looking for hydroxylated long chain fatty acids (LCFA) in different strains of E. coli. C18-3OH a LCFA of 18 carbons with a hydroxylation on its third position was produced in higher amounts by E. coli Nissle 1917 independently of the pks island. The C18-3OH was not able to cross the IEB and accumulated in cells in vitro, in tissues ex vivo and in colon in vivo. In tissues, C18-3OH modulated the expression of genes regulated by PPAR-γ receptor. Finally, in a DSS-induced colitis in mice, C18-3OH decreased paracellular permeability and inflammatory parameters. These thesis works allowed us to demonstrate for the first time that E. coli Nissle 1917 could signal to host cells by secreting lipopeptides and LCFAs. Two of them C12AsnGABAOH and C18-3OH were bioactive molecules. C12AsnGABAOH inhibited visceral hypersensitivity and C18-3OH reduced the inflammatory status of intestinal epithelial cells. These lipid compounds could be involved in the probiotic effects exerted by E. coli Nissle 1917 and represent therapeutic agents in the treatment of visceral pain and intestinal inflammation.

La neurostimulation périphérique (en anglais transcutaneous electrical nerve stimulation ou TENS) est une modalité thérapeutique fréquemment utilisée en réadaptation pour diminuer la douleur. À ce jour, cependant, l’efficacité analgésique du TENS chez les aînés demeure peu documentée. La majorité des études effectuées jusqu’à présent ont été réalisées chez les jeunes adultes ou chez des populations d’âge hétérogènes. La présente étude, un essai croisé randomisé à double insu, avait pour objectif de documenter l’efficacité analgésique du TENS conventionnel et du TENS acupuncture chez les aînés et d’observer si la réponse analgésique de ces deux modalités de TENS entre les aînés et les jeunes adultes est différente. Quinze aînés et quinze jeunes adultes ont participé à l’étude. Les participants étaient évalués à trois occasions distinctes pour recevoir en alternance un TENS conventionnel, un TENS acupuncture et un TENS placebo. Une douleur expérimentale était créée à l’aide d’une thermode de type Peltier, appliquée au niveau de la colonne lombaire pendant deux minutes, période durant laquelle les participants devaient évaluer l’intensité de leur douleur avec une échelle visuelle analogue reliée à un ordinateur (CoVAS). Les mesures de douleur ont été prises avant, pendant et après l’application de chaque type de TENS. Chez les jeunes adultes, lorsque comparée au niveau de douleur initiale, une diminution significative de la douleur a été observée pendant et après l’application du TENS conventionnel et acupuncture. Le TENS conventionnel et acupuncture étaient supérieurs au traitement placebo (toutes les valeurs de p < 0,05). Cependant, chez les aînés, le TENS conventionnel et acupuncture n’ont pas permis de diminuer significativement la douleur. De plus, aucune modalité TENS ne se démarquait du traitement placebo (toutes les valeurs de p > 0,05). Bien que le TENS conventionnel et le TENS acupuncture soient efficaces chez les jeunes adultes, les présents résultats suggèrent que le TENS n’est pas la meilleure option de traitement pour diminuer la douleur chez les aînés, du moins lorsqu’il est utilisé seul (monothérapie). Des études futures, visant à déterminer des façons de bonifier l’effet du TENS chez les aînés, sont nécessaires.