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Morfoanatomia de órgãos reprodutivos de cinco espécies de malpighiaceae

Souto, Letícia Silva [UNESP] 17 February 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-17Bitstream added on 2014-06-13T21:05:16Z : No. of bitstreams: 1 souto_ls_dr_botib.pdf: 9317690 bytes, checksum: 3e85c4a8912908b6da4810da133b17a0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A família Malpighiaceae possui 1.200 espécies e 66 gêneros, com importância para as formações florestais e savânicas do Velho e do Novo Mundo. A origem monofilética da família é incontestável, entretanto seus táxons intrafamiliares ainda são bastante controversos e considerados artificiais por diversos autores. A morfologia floral de Malpighiaceae é bastante homogênea, mas os frutos possuem extrema diversidade, ocorrendo pericarpos deiscentes ou indeiscentes, carnosos ou secos. Embora caracteres morfológicos dos frutos sejam usados na delimitação de táxons dentro de Malpighiaceae, recentes estudos moleculares indicam a ocorrência de caracteres carpológicos homoplásticos. Assim, estudos minuciosos sobre os frutos da família têm grande potencial taxonômico. Além disso, a vascularização floral pode revelar passos evolutivos, anteriores à morfologia floral atual das espécies. Desta forma, a presente proposta tem como objetivos: 1) descrever, ontogeneticamente, a estrutura dos frutos e sementes de quatro espécies de Malpighiaceae, abrangendo os gêneros Janusia, Mascagnia e Tetrapterys; 2) caracterizar a anatomia floral das espécies do item anterior e de Camarea linearifolia, com ênfase em sua vascularização, buscando correlacionar esses aspectos com o significado evolutivo e ecológico das flores de Malpighiaceae; 3) relatar a esporogênese e gametogênese feminina de Janusia occhionii, investigando a provável ocorrência de apomixia. A vascularização floral encontrada nas espécies segue o padrão geral de número de traços vasculares, com exceção de M. cordifolia, onde a sépala aglandular recebe um traço vascular, mas compartilha os traços laterais das sépalas adjacentes, os quais se bifurcam. No ovário, não é emitido traço dorsal de carpelo, ocorrendo um complexo de procâmbio e meristema fundamental; M. cordifolia, possui conação entre... / The family Malpighiaceae includes 1,200 species and 66 genera and has been important for forests and savannas from the Old and the New World. Its monophyletic origin is unquestionable; however, its intrafamilial taxa have still been controversial and considered artificial by several authors. The flower morphology of Malpighiaceae is quite homogeneous, but fruits present extreme diversity, with dehiscent or indehiscent, fleshy or dry pericarps. Although morphological traits of fruits have been used to delimit taxa within Malpighiaceae, recent molecular studies have indicated the occurrence of carpological homoplastic traits. Thus, detailed studies on Malpighiaceae fruits have great taxonomic potential. Furthermore, flower vascularization can reveal evolution steps prior to the current flower morphology of the species. Thus, the present work aimed to: 1) describe, ontogenetically, the structure of fruits and seeds from four Malpighiaceae species, including the genera Janusia, Mascagnia and Tetrapterys; 2) characterize the flower anatomy of such species and Camarea linearifolia, highlighting their vasculature, in order to correlate these aspects with the evolutive and ecological meaning of Malpighiaceae flowers; 3) report female sporogenesis and gametogenesis in Janusia occhionii, investigating the probable occurrence of apomixis. The flower vasculature observed in the species follows the general pattern as to number of vascular traces, except for M. cordifolia, in which the non-glandular sepal receives one vascular trace but shares the lateral traces from adjacent sepals that bifurcate. In the ovary, the dorsal carpel trace is not emitted, occurring a complex of procambium and ground meristem; M. cordifolia presented conated glands from the anterior and adjacent sepals. In T. chamaecerasifolia and Janusia species, the anterior sepal lost their glands probably by reduction... (Complete abstract click electronic access below)
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Estrututra e ontogênese de órgãos reprodutivos de Connarus suberosus Planch. (Connaraceae) e Oxalis cytisoides Cucc. (Oxalidaceae)

Denardi, João Donizete [UNESP] 28 March 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-03-28Bitstream added on 2014-06-13T18:44:37Z : No. of bitstreams: 1 denardi_jd_dr_botib.pdf: 4402382 bytes, checksum: bc0ab1570e2c005daa396bedb7a9263b (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Considerando que Connaraceae e Oxalidaceae constituem um clado de Oxalidales bem representado na flora brasileira e pouco estudado relativamente à estrutura de órgãos reprodutivos, este trabalho aborda a morfoanatomia e a ontogênese de flores, frutos e sementes de Connarus suberosus (Connaraceae) e Oxalis cytisoides (Oxalidaceae), a fim de avaliar a existência de padrões estruturais comuns a essas espécies. O processamento das amostras para microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão e de varredura seguiu as técnicas usuais. Verificou-se que, estruturalmente, C. suberosus possui heterostilia dimórfica, caracterizada pelas formas brevi- e longistila, as quais se mostraram funcionalmente masculina e feminina, respectivamente. Alguns caracteres morfológicos peculiares a cada forma floral, provavelmente estão associados à evolução da dioicia, como dimensões de sépalas e pétalas e distribuição de tricomas glandulares. Nesta análise, provouse que esses caracteres, aliados às diferenças de tamanho dos verticilos de estames das formas florais, foram utilizados equivocadamente na delimitação de C. suberosus var. fulvus e C. suberosus var. suberosus, que correspondem às formas brevistila e longistila, respectivamente. Independentemente da forma floral, houve variação no número de sépalas, pétalas e estames e tendência à restrição do tecido nectarífero aos setores antepétalos do tubo estaminal. A vascularização carpelar mostrou-se derivada em relação ao padrão descrito para Connaraceae, devido à formação de um complexo ovular mediante união parcial de traços ovulares àqueles derivados de feixes alas. O desenvolvimento do pericarpo e da semente, que pode ocorrer apomiticamente, não é concomitante, visto que a diferenciação seminal inicia-se após a expansão do pericarpo, quando este alcança... / Connaraceae and Oxalidaceae constitute a clade of Oxalidales that is well represented within the Brazilian flora although relatively poorly studied in terms of the structure of their reproductive organs. The present work examined the morphology, anatomy and ontogeny of the flowers, fruits, and seeds of Connarus suberosus (Connaraceae) and Oxalis cytisoides (Oxalidaceae) in order to evaluate the existence of structural patterns common to both species. Preparation of plant samples for viewing under light and electron microscopy followed established techniques. Connarus suberosus demonstrated dimorphic heterostyly, characterized by the brevi- and longistylous morphs, which were observed to be functionally masculine and feminine respectively. Some of the peculiar morphological characteristics of each floral form are probably associated with the evolution of dioecy, such as the dimensions of the sepals and petals and the distribution of the glandular trichomes. The present analysis indicated that these characters, allied to differences in the sizes of the verticils of the two floral forms, had been equivocally used in delimiting C. suberosus var. fulvus and C. suberosus var. suberosus, which correspond to thrum and pin morphs respectively. Independent of the floral form, variation in the numbers of sepals, petals, and stamens were observed, as well as a tendency for the nectary tissues to be restricted to the epipetalous sectors of the staminal tube. Carpel vasculature was observed to be derived in relation to the pattern described for Connaraceae due to the formation of an ovular complex resulting from the partial union of ovular traces derived from wing bundles. The development of the pericarps and seeds, which can occur in an apomixic manner, is not concomitant; the seed differentiation initiates after the expansion of the pericarp when this organ... (Complete abstract click electronic access below)
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Anatomia foliar de Passiflora L. (Passifloraceae) : aspectos taxonômicos e evolutivos

Farias, Vanessa de January 2014 (has links)
Orientadora : Profª. Drª. Patricia Soffiatti / Coorientadora : Profª Drª Valeria Cunha Muschner / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Botânica. Defesa: Curitiba, 22/07/2014 / Inclui referências / Área de concentração :Estrutura e fisiologia do Desenvolvimento Vegetal / Resumo: Passifloraceae possui 17 gêneros e cerca de 630 espécies, subdividida nas Tribos Paropsieae e Passifloreae, onde a primeira é considerada um complexo basal parafilético e a segunda, monofilética. O gênero Passiflora L., pertencente à Passifloreae, com cerca de 525 espécies, distribuídas nas regiões tropicais do Novo Mundo, Ásia e Austrália. A taxonomia de Passiflora baseia-se em diversos caracteres florais e vegetativos, apresentando uma complexa subdivisão taxonômica em subgêneros, seções e séries. Passiflora está subdividido em quatro subgêneros (Astrophea, Decaloba, Passiflora, Deidamioides). Este trabalho teve por objetivo investigar os padrões de diversificação dos caracteres anatômicos foliares em Passiflora, buscando aqueles de valor taxonômico e potenciais sinapomorfias para o grupo, dentro de um contexto filogenético, visando o entendimento de como ocorreu à evolução de alguns caracteres no gênero. Para tanto, foram analisadas quarenta e sete espécies pertencentes à Passiflora e grupos externos, selecionadas a partir de estudos sobre filogenia molecular do grupo. Foram estudados de dois a três indivíduos de cada espécie, obtidos a partir das coleções dos herbários do Departamento de Botânica da UFPR (UPCB) e Museu Botânico Municipal (MBM), Curitiba-PR. Foi utilizada a topologia da árvore filogenética publicada para Passiflora através da análise combinada de oito regiões codificadores do DNA (rbcL, rps4, trnL intron e trnL-trnF, nad1 b/c, nad5 d/e, 26S). Para o estudo anatômico, as amostras foram preparadas seguindo técnicas usuais utilizadas em anatomia vegetal. Uma matriz de caracteres foi elaborada com base nas características anatômicas qualitativas observadas e os estados de caráter utilizados nas análises de reconstrução dos estados ancestrais foram definidos com base nestas características, sendo apresentados apenas aqueles informativos. Nove características foram selecionadas para a reconstrução dos estados de caráter ancestrais - oito anatômicas e uma morfológica. As análises de evolução dos caracteres demonstraram a existência de múltiplos surgimentos para muitas características, indicando que há muita convergência e paralelismo no grupo. Nove caracteres se destacaram com valor taxonômico, e potencial de uso na filogenia do grupo, como a presença de flanges cuticulares, a forma do sistema vascular da nervura central e do pecíolo, a presença de cutícula ornamentada, glândulas na face abaxial, a presença de tricomas glandulares. Alguns caracteres de valor diagnóstico foram observados nas espécies estudadas, promissores para a taxonomia do grupo, como: papilas epidérmicas, ocorrência de calotas de fibras isoladas no cortex da nervura e no pecíolo, faixa de esclerênquima contínua no pecíolo, dentre outros. Este estudo comprova a importância da anatomia foliar para a taxonomia e a filogenia do gênero Passiflora. Os resultados indicam que estudos mais detalhados sobre a estrutura das papilas epidérmicas, tipos de tricomas glandulares e tectores, e a natureza das secreções possivelmente trarão mais informações para o entendimento das relações entre os subgêneros, especialmente dentro do maior subgênero, Passiflora. PALAVRAS-CHAVE: Dilkea, Mitostemma, Passifloraceae, sinapomorfia, taxonomia / Abstract: Passifloraceae has 17 genera and ca. 630 species, subdivided in tribes Paropsieae and Passifloreae. The former is considered a paraphyletic basal complex while the latter is monophyletic. The genus Passiflora L. belongs to Passifloreae comprising ca. 525 species distributed in tropical regions of the New World, Asia and Australia. The taxonomy of Passiflora is based on various vegetative and floral characters, and the genus has a complex taxonomic subdivision into subgenera, sections and series. Passiflora is currently subdivided into four subgenera (Astrophea, Decaloba, Passiflora, Deidamioides). This study aimed to investigate the patterns of diversification of leaf anatomical characters in Passiflora, seeking those of taxonomic value and potential synapomorphies for the group, within a phylogenetic context, aiming to understand the evolution of some selected characters in the genus. Fortyseven species of Passiflora and outgroups were selected from the molecular phylogeny of the group. Two to three individuals of each species were studied, obtained from herbarium collections of the Department of Botany UFPR (UPCB) and Municipal Botanical Museum (MBM), Curitiba-PR. The topology of the phylogenetic tree published for Passiflora through a combined analysis of eight coding DNA regions (rbcL, rps4, trnLintron e trnL-trnF, nad1 b/c, nad5 d/e, 26S) was used. For the anatomical studies, samples were prepared following the usual techniques used in plant anatomy. All the material was submitted to a rehydration process. A character matrix was elaborated based on observed qualitative anatomical features and the character states used in reconstruction analyzes of ancestral states were defined based on these features. Only those informative are here presented. Nine characteres were selected for the reconstruction of ancestral character states - eight anatomical and one morphological. The analysis showed multiple shifts for several analyzed features, indicating that there is a lot of convergence and parallelism in the group. However, nine selected characters stood out with taxonomic value and potential use in group phylogeny, such as the presence of cuticular flanges, the shape of the vascular system of the midrib and petiole, the presence of ornamented cuticle, glands on the abaxial surface, the presence of glandular trichomes. Some characters of diagnose value were observed in this study, promising for the taxonomy of the group, such as epidermal papillae, isolated caps of fibers in the cortex of the midrib and petiole, bands of sclerenchyma in the petiole, among others. This study demonstrates the importance of foliar anatomy for the taxonomy and phylogeny of genus Passiflora. The results indicate that a more detailed study focusing on the structure of the epidermal papillae, types of glandular and tector trichomes, and the nature of secretions possibly will bring more relevant information to the understanding of the relationships between subgenera, especially regarding the far largest subgenus Passiflora. Key words: Dilkea, Mitostemma, Passifloraceae, synapomorphy, taxonomy
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Anatomia do colmo e lâmina foliar de espécies de Paspalum L. (Poaceae: Panicoideae: Paniceae) : novos caracteres taxonômicos e proposta de uma fórmula vascular para representação dos feixes vasculares da lâmina foliar

Silva, André Luiz Henrique da 23 September 2011 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2011. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-05-15T15:20:12Z No. of bitstreams: 1 2011_AndreLuizHenriqueSilva.pdf: 4660966 bytes, checksum: 131f63e1b3e4e478aafb870aa2a80d20 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-15T15:34:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_AndreLuizHenriqueSilva.pdf: 4660966 bytes, checksum: 131f63e1b3e4e478aafb870aa2a80d20 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-15T15:34:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_AndreLuizHenriqueSilva.pdf: 4660966 bytes, checksum: 131f63e1b3e4e478aafb870aa2a80d20 (MD5) / Paspalum L. é um dos mais importantes gêneros de Poaceae e tem grande interesse na ciências agrárias pela utilidade na recuperação de solos, alimentação dos povos indianos paisagismo e, principalmente, em pastagens. Suas espécies podem ser encontradas em diversos ambientes, que estão concentradas nas regiões tropicais e subtropicais da América Latina. A anatomia da lâmina foliar tem sido amplamente utilizada em estudos taxonômico de Paspalum, mas as descrições e descritores não estão padronizados e isto dificulta uma visão ampla da contribuição dos caracteres anatômicos na taxonomia do gênero. O presente estudo visa contribuir com o conhecimento da anatomia foliar e do colmo, esta última quase otalmente desconhecida para as espécies de Paspalum, com o objetivo de avaliar caractere de importância taxonômica e padronização dos descritores. Exsicata testemunha fo depositada no Herbário da Universidade de Brasília. O trabalho foi realizado no Laboratório de Anatomia Vegetal do Departamento de Botânica da Universidade de Brasília. Foram analisadas dez espécies: Paspalum atratum Swallen, P. bicilium Mez, P. burmanii Filg. Morrone & Zuloaga, P. decumbens Sw., P. erianthum Nees ex Trin., P. eucomum Nees ex Trin., P. guttatum Trin., P. minarum Hack., P. sp. e P. trachycoleon Steud. As regiõe medianas do entrenó do colmo e da lâmina foliar foram preparadas conforme as técnica usuais em Anatomia Vegetal, com pequenas adaptações, e montadas em lâminas permanentes Cerca de 150 descritores foi obtido a partir da análise anatômica dos colmos e das lâmina oliares. Cerca de 80 descritores possuem valor taxonômico. A padronização de vário caracteres, estados de caracteres e redefinição de termos são apresentados no trabalho. Uma órmula vascular (FV) totalmente inédita está sendo proposta para a descrição dos feixe vasculares da lâmina foliar de Poaceae. O trabalho também traz descrições do gênero e espécies, ilustrações anatômicas e chave dicotômica para a distinção anatômica dos táxons. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Paspalum L. is one of the most important genera of Poaceae and has great interest in agricultural sciences for the use in the soil recuperation, feeding the Indian people, landscaping, and especially in pastures. Its species can be found in several environments, which are concentrated in tropical and subtropical regions of Latin America. The anatomy of the leaf blade has been widely used in taxonomic studies of Paspalum, but the descriptions and the descriptors are not standardized and it difficults a broad view of the contribution of anatomical characters in the taxonomy of the genus. The present study aims to contribute to the knowledge of the leaf and stem anatomy, the latter almost totally unknown to the Paspalum species, with the aim of evaluating characters of taxonomical value and the standardization of the descriptors. The voucher specimen was deposited in the University of Brasilia Herbarium. The study was conducted at the Laboratory of Plant Anatomy, Department of Botany, University of Brasilia. We analyzed ten species: Paspalum atratum Swallen, P. bicilium Mez, P. burmanii Filg., Morrone & Zuloaga, P. decumbens Sw., P. erianthum Nees ex Trin., P. eucomum Nees ex Trin., P. guttatum Trin., P. minarum Hack., P. sp. e P. trachycoleon Steud. The median regions of the internode of the stem and leaf blade were prepared according to the usual techniques in Plant Anatomy, with small adjustments, and mounted on permanent slides. About 150 descriptors was obtained from the anatomical analysis of stems and leaf blades. About 80 descriptors have taxonomic value. The standardization of several characters, character states and redefinition of terms are proposed in the study. A vascular formula (VF) is a totally new proposal for the description of the vascular bundles of the leaf blade of Poaceae. The work also includes descriptions of the genus and species, anatomical illustrations and dichotomous key to the anatomical distinction of taxa.
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Desenvolvimento e aperfeiçoamento de estratégias para a conservação e propagação in vitro de Pfaffia glomerata (Spreng) Pedersen e Lippia filifolia (Mart. and Schauer ex Schauer), com ênfase ao uso do óleo mineral e biorreatores de imersão temporária / Development and improvement of strategies for the in vitro conservation and propagation of Pfaffia glomerata (Spreng) Pedersen and Lippia filifolia (Mart. And Schauer ex Schauer), with emphasis on the use of mineral oil and temporary immersion bioreactors

Lacerda, Luciana Florêncio de 13 March 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-03T19:00:15Z No. of bitstreams: 1 2017_LucianaFlorênciodeLacerda_PARCIAL.pdf: 4407575 bytes, checksum: c82ac683a06e3040492f03482ebca5e8 (MD5) / Rejected by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br), reason: Boa noite, Deixe os resumo,abstract,introdução geral. E restrinja o resto. Atenciosamente, on 2017-08-22T21:54:41Z (GMT) / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-10-10T17:58:50Z No. of bitstreams: 2 2017_LucianaFlorênciodeLacerda_RESUMO.pdf: 161671 bytes, checksum: 24b30b87c36ff72e96df505308093262 (MD5) 2017_LucianaFlorênciodeLacerda _PARCIAL.pdf: 1665374 bytes, checksum: cdd1b8cb9e428ab2394db3b4ec15aa4c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-04-25T17:14:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 2017_LucianaFlorênciodeLacerda_RESUMO.pdf: 161671 bytes, checksum: 24b30b87c36ff72e96df505308093262 (MD5) 2017_LucianaFlorênciodeLacerda _PARCIAL.pdf: 1665374 bytes, checksum: cdd1b8cb9e428ab2394db3b4ec15aa4c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-25T17:14:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 2017_LucianaFlorênciodeLacerda_RESUMO.pdf: 161671 bytes, checksum: 24b30b87c36ff72e96df505308093262 (MD5) 2017_LucianaFlorênciodeLacerda _PARCIAL.pdf: 1665374 bytes, checksum: cdd1b8cb9e428ab2394db3b4ec15aa4c (MD5) Previous issue date: 2018-04-25 / Pfaffia glomerata e Lippia filifolia apresentam importantes propriedades medicinais e fazem parte da lista de espécies que podem ser distribuídas aos usuários do Sistema Único de Saúde (SUS). Neste sentido, o objetivo do presente trabalho foi desenvolver e aperfeiçoar estratégias para a conservação e propagação in vitro de Pfaffia glomerata e Lippia filifolia, com ênfase ao uso do óleo mineral e o uso de biorreatores de imersão temporária. Para os estudos de micropropagação utilizou-se como material vegetal microestacas (1,0 cm) contendo uma gema lateral, as quais foram inoculadas em diferentes sistemas de cultivo: meio semissólido, líquido estacionário, líquido sob agitação e líquido em biorreatores de imersão temporária, modelos RITA® e BIT Embrapa®. Após 30 dias de cultivo, a percentagem de sobrevivência, a altura, a taxa de multiplicação e a taxa de enraizamento das brotações, além do peso da massa fresca (g) e seca (g) dos brotos regenerados nos cinco sistemas de cultivo foram avaliados. Já para a conservação in vitro dois experimentos foram realizados. No primeiro deles, microestacas de aproximadamente 1,0 cm de altura com pelo menos uma gema lateral foram avaliadas as quais foram inoculadas em meio de MS e mantidas, inicialmente sob uma camada de óleo mineral contendo diferentes volumes (5, 10 e 15 mL) sobre as estacas e colocadas sobre diferentes temperaturas (15, 20 e 25°C). A caracterização anatômica foi realizada com o auxilio do corante Azul de Toluidina e para as análises histoquímicas foram utilizados o Reagente de Schiff/ ácido periódico - PAS para polissacarídeos neutros e o Xylidine Ponceau para proteínas totais. Nos resultados referentes a micropropagação, verificou-se que P. glomerata apresentou altas taxas de multiplicação nos sistemas de cultivo líquido com agitação e líquido em biorreatores de imersão temporária modelo RITA®, e semissólido. O cultivo em biorreatores de imersão temporária modelo RITA® proporcionou melhores resultados para ganho de massa fresca e seca, altura e taxa de enraizamento. Para a multiplicação de L. filifolia o sistema de cultivo semissólido proporcionou uma alta taxa de sobrevivência e formação de plantas com altura média de 7,0 cm. Variações morfológicas foram verificadas nas plantas cultivadas no sistema de cultivo líquido com e sem agitação. O sistema de biorreatores de imersão temporária modelo RITA® apresentou resultados superiores quando comparados ao modelo Embrapa. De maneira geral, a L. filifolia apresentou dificuldades de enraizamento in vitro. O resultado do primeiro experimento de conservação mostrou que as duas espécies estudadas apresentaram médias de sobrevivência em óleo mineral acima de 90 %, sugerindo ser uma alternativa para a conservação das espécies. No experimento de conservação, verificou-se que P. glomerata pode ser mantida por até 12 meses sob temperatura de 15 °C e imersa sob óleo mineral, com sobrevivência média acima de 90%. A L. filifolia obteve uma menor taxa de sobrevivência com média de 24,9% na temperatura de 15 °C, após os 12 meses de conservação. Anatomicamente as folhas de P. glomerata no tratamento de 5 mL apresentaram folhas mais espessas, com células do parênquima do tipo paliçádico, as células do mesofilo apresentaram arranjo compacto com poucos espaços intercelulares. No tratamento com 15 mL de óleo mineral, as células da epiderme e do mesofilo foram mais volumosas com paredes celulares delgadas. O caule das plantas que estavam conservadas em óleo mineral, independente do tratamento, não apresentou fistula. Para a L. filifolia no tratamento com 5mL de óleo mineral as folhas se apresentaram delgadas com epiderme contendo células volumosas, arredondadas e achatadas. O mesofilo apresentou parênquima clorofiliano com células paliçádicas, com células arredondadas e achatadas com espaços intercelulares. Foi verificado a presença de tricomas em ambas as faces epidérmicas. No tratamento com 10 mL de óleo mineral, foi possível observar um desarranjo das células que compõe o cilindro vascular, com células adjacentes aos feixes vasculares. As plantas conservadas em 15 mL de óleo mineral apresentaram epiderme espessa e mesofilo com células volumosas e compactas com vários espaços intercelulares. No caule, os tratamentos com óleo mineral apresentaram células de maior volume quando comparados com o controle. No tratamento com 5 mL, as células do cortex apresentaram formato alongado e vários espaços intercelulares. Os feixes vasculares são menores. Histoquimicamente evidenciou-se que o amido e as proteínas aparecem como material de reserva na folha e no caule das duas espécies. / Pfaffia glomerata and Lippia filifolia have important medicinal properties and are part of the list of species that can be distributed to users of the Unified Health System (SUS). In this sense, the objective of the present work was to develop and improve strategies for the in vitro conservation and propagation of Pfaffia glomerata and Lippia filifolia, with emphasis on the use of mineral oil and the use of temporary immersion bioreactors. For the micropropagation studies, microcuttings (1.0 cm) containing a lateral yolk were used as plant material, which were inoculated in different culture systems: semisolid medium, stationary liquid, liquid under stirring and liquid in temporary immersion bioreactors, RITA® and BIT Embrapa® models. After 30 days of cultivation, the percentage of survival, height, multiplication rate and shoot rooting rate, as well as the weight of the fresh (g) and dry mass (g) of the regenerated shoots in the five cropping systems were evaluated . For the in vitro conservation, two experiments were performed. In the first one, microseconds of approximately 1.0 cm in height with at least one lateral yolk were evaluated which were inoculated in MS medium and initially maintained under a layer of mineral oil containing different volumes (5, 10 and 15 mL) On the cuttings and placed at different temperatures (15, 20 and 25 ° C). The anatomical characterization was performed with the aid of the Toluidine Blue dye and for the histochemical analyzes the Schiff Reagent / periodic acid - PAS was used for neutral polysaccharides and Xylidine Ponceau for total proteins. In the micropropagation results, it was verified that P. glomerata showed high multiplication rates in the liquid culture systems with agitation and liquid in temporary immersion bioreactors RITA model, and semi-solid. The cultivation in RITA® temporary immersion bioreactors provided better results for fresh and dry mass gain, height and rooting rate. For the multiplication of L. filifolia the semi-solid cultivation system provided a high survival rate and formation of plants with a mean height of 7.0 cm. Morphological variations were verified in plants cultivated in the liquid culture system with and without agitation. The RITA® temporary immersion bioreactor system presented superior results when compared to the Embrapa model. In general, L. filifolia presented difficulties in in vitro rooting. The results of the first conservation experiment showed that the two species studied presented survival averages in mineral oil above 90%, suggesting that it is an alternative for the conservation of the species. In the conservation experiment, it was found that P. glomerata can be maintained for up to 12 months at a temperature of 15 ° C and immersed under mineral oil, with a mean survival above 90%. L. filifolia had a lower survival rate with a mean of 24.9% at 15 ° C after 12 months of storage. Anatomically the leaves of P. glomerata in the treatment of 5 mL presented thicker leaves, with cells of the parenchyma of the paliçádico type, the cells of the mesofilo presented compact arrangement with few intercellular spaces. In the treatment with 15 ml of mineral oil, the cells of the epidermis and the mesophyll were more voluminous with thin cell walls. The stem of the plants that were conserved in mineral oil, regardless of the treatment, did not present fistula. For L. filifolia in the treatment with 5mL of mineral oil the leaves were thin with epidermis containing bulky, rounded and flattened cells. The mesophyll presented chlorophyllic parenchyma with paliçadic cells, with rounded and flattened cells with intercellular spaces. The presence of trichomes on both epidermal faces was verified. In the treatment with 10 mL of mineral oil, it was possible to observe a derangement of the cells that make up the vascular cylinder, with cells adjacent to the vascular bundles. The plants preserved in 15 mL of mineral oil presented thick and mesophilic epidermis with voluminous and compact cells with several intercellular spaces. In the stem, the treatments with mineral oil presented cells of greater volume when compared with the control. In the 5 mL treatment, the cortex cells presented an elongated shape and several intercellular spaces. The vascular bundles are smaller. Histochemically showed that the starch and the proteins appear as reserve material in the leaf and stem of the two species.
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Morfologia foliar de espécies arbóreas de um capão de Floresta Ombrófila Mista, PR, Brasil

Silveira, Talita Iatski da 27 August 2009 (has links)
No description available.
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Embriogênese somática do cafeeiro (Coffea arabica L.) e caracterização bioquímica e anatômica das diferentes etapas envolvidas no processo / Somatic embryogenesis of coffee (Coffea arabica l.) and histological and biochemical analysis of the different stages involved in the process

Bartos, Patrícia Monah Cunha 09 August 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2012. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2015-02-11T19:54:44Z No. of bitstreams: 1 2012_PatriciaMonahCunhaBartos.pdf: 5171997 bytes, checksum: f37ae0a08f137f7c3295b501f9c492c0 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-02-11T19:55:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_PatriciaMonahCunhaBartos.pdf: 5171997 bytes, checksum: f37ae0a08f137f7c3295b501f9c492c0 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-11T19:55:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_PatriciaMonahCunhaBartos.pdf: 5171997 bytes, checksum: f37ae0a08f137f7c3295b501f9c492c0 (MD5) / A cafeicultura é uma atividade de grande expressão no cenário agroindustrial brasileiro, colocando o Brasil como o maior produtor e maior exportador de café do mundo. Coffea arabica L. (Rubiaceae) é responsável por 70% de todo o café produzido e comercializado no mundo. O sucesso dos programas de melhoramento genético do cafeeiro tem disponibilizado variedades mais adaptadas. Entretanto a propagação convencional do cafeeiro é muito lenta. Dessa forma, a propagação clonal da espécie é fundamental para possibilitar uma rápida difusão de novos genótipos de interesse. Sendo assim, a micropropagação via embriogênese somática é a melhor opção para a rápida propagação clonal em larga escala dessa espécie. Nesse contexto, o objetivo do trabalho foi otimizar as estratégias de clonagem via embriogênese somática indireta a partir de folhas jovens do cafeeiro (Coffea arabica L. variedade Catuaí Vermelho), além de compreender as principais etapas do processo, com o auxílio de cortes anatômicos e análises bioquímicas. Na fase de indução de calo, foi avaliada a influência de genótipos de Coffea arabica (Catuaí Vermelho, Mundo Novo, Híbrido 427-2, Híbrido Clone 12), associados a tipos de folhas fenotipicamente semelhantes; a influência do número de explantes por placa de Petri (4, 6, 8 e 10) e tipos de folhas fenotipicamente semelhantes; o efeito de concentrações de sacarose (1, 2, 3 e 4%); as combinações de caseína hidrolisada (0 e 100 mg.L-1) e extrato de malte (0 e 400 mg.L-1); o efeito de tipos de auxinas (2,4-D e Picloram) e suas concetrações (2,5; 5; 10 e 20 μM) para as variedades Catuaí Vermelho e Mundo Novo, além da citocinina 2-iP (5, 10, 20 e 30 μM). Na fase de multiplicação, foi analisada a influência da densidade inicial de calos embriogênicos (6, 8, 10 e 12 g.L-1); volumes de Erlenmeyers (125 e 250 ml), associados ao ajuste ou não da densidade, bem como a presença e ausência de luz. Experimentos também foram efetuados na fase de regeneração, maturação e germinação de embriões, onde foram testados o número de calos embriogênicos por placa de Petri (4, 6, 8 e 10), o efeito da luz e escuro, associado ao tempo de cultivo (30, 60 e 90 dias), além do efeito da luz e escuro associado a diferentes densidades iniciais de células (1, 5 e 10 g.L-1). Para melhor entender o processo embriogênico, cortes anatômicos seriados foram realizados em explantes foliares com diferentes períodos de cultivo nos meios primário e secundário (0, 4, 7, 15, 30 dias), calo primário tipo 1, calo primário tipo 2, calo embriogênico, embriões globulares, embriões torpedo, embriões cotiledonares e embriões zigóticos. Por fim, foram extraídos e quantificados os carboidratos, os aminoácidos e as proteínas de diversas fases do desenvolvimento embriogênico. Verificou-se que a variedade Catuaí Vermelho é a que melhor responde ao protocolo de indução de calo. A amostragem de folhas e a percentagem de formação de calo primário tipo 2 influenciam a percentagem de formação de calo embriogênico. A utilização de seis explantes por placa, a concentração de 3% de sacarose, a utilização de caseína hidrolisada associada ao extrato de malte e a concentração de 10 μM de 2-iP proporcionam os melhores resultados para a formação de calo embriogênico. Na fase de multiplicação, o tratamento com densidade inicial de 10 g.L-1 de calo embriogênico, o uso do frasco de 250 ml de capacidade, com ajuste parcial da densidade e material cultivado na ausência de luz responderam com as melhores taxas de multiplicação de calo embriogênico. A etapa de regeneração, maturação e germinação de embriões somáticos foi otimizada com a inoculação de quatro ou seis explantes por placa, cultivados por 90 dias em meio de regeneração e, quando transferidos para o meio de germinação líquido, a densidade inicial de 5 g.L-1 proporcionou a maior sincronização na maturação dos embriões. Em relação à anatomia das diferentes etapas, foi verificado que a formação de calo primário acontece aos 7 dias de cultivo e esse calos se originaram a partir de divisões sucessivas de células do procâmbio. Calos primários tipo 1 e tipo 2 apresentaram morfologia e tipos celulares distintos e o calo embriogênico é originado do calo primário tipo 1. O metabolismo dos carboidratos, aminoácidos e proteínas auxiliam para uma melhor interpretação e entendimento sobre os processos de indução da embriogênese somática, assim como a regeneração, maturação e germinação dos embriões somáticos. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Coffee cultivation is a very important activity for Brazilian agroindustry, positioning Brazil as the largest producer and exporter of coffee in the world. Coffea arabica L. (Rubiaceae) is responsible for seventy percent of all the coffee produced and sold worldwide. The success of programs for the genetic improvement of coffee has resulted in the availability of better-adapted varieties. However, conventional propagation of the coffee plant is very slow. Thus, clonal propagation of the species is fundamental to enable rapid proliferation of new genotypes of interest. Micropropagation via somatic embryogenesis is the best option for rapid, large-scale clonal propagation of this species. In this context, this work aimed to optimize cloning strategies via indirect somatic embryogenesis, using young leaves of coffee plants (Coffea arabica L. variety Catuaí Vermelho), and to understand the key steps in the process, with the aid of anatomical sections and biochemical analyses. In the callus induction phase, we evaluated the influence of genotypes of Coffea arabica (Catuaí Vermelho, Mundo Novo, Híbrido 427-2, Híbrido Clone 12), associated with phenotypically similar leaf types; the influence of the number of explants per Petri dish (4, 6, 8, and 10) and phenotypically similar leaf types; the effect of sucrose concentrations (1, 2, 3, and 4%); combinations of hydrolyzed casein (0 and 100 mg/L) and malt extract (0 and 400 mg/L); the effect of auxin types (2,4-D and Picloram) and their concentrations (2.5, 5, 10, and 20μM) for the Catuaí Vermelho and Mundo Novo varieties, as well as cytokinin 2-iP (5, 10, 20, and 30μM). In the multiplication phase, we analyzed the influence of the initial density of the embryogenic calli (6, 8, 10, and 12 g/L); the volumes of the Erlenmeyer flasks (125 and 250 ml), associated with the adjustment or non-adjustment of density, as well as the presence or absence of light. Experiments were also conducted in the regeneration, maturation, and embryo-germination phase to test the number of embryogenic calli per Petri dish (4, 6. 8, 10), the effect of light and dark associated with cultivation time (30, 60, and 90 days), in addition to the effect of light and dark associated with the different initial densities of the cells (1, 5, and 10 g/L). In order to gain a better understanding of the embryogenic process, series of anatomical sections were prepared from foliar explants at different stages of growth in primary and secondary media (0, 4, 7, 15, and 30 days): primary callus type 1, primary callus type 2, embryogenic callus, globular embryos, torpedo embryos, cotyledonary embryos, and zygotic embryos. Finally, carbohydrates, amino acids, and proteins from various phases of embryogenic development were extracted and quantified. It was found that the Catuaí Vermelho variety was the one that best responded to the callus induction protocol. The leaf sample and the percentage of primary callus type 2 influenced the formation of embryogenic callus. The use of six explants per dish, a concentration of 3% of sucrose, hydrolyzed casein in combination with malt extract, and a concentration of 10 μM of 2-iP provide the best results for embryogenic callus formation. In the multiplication phase, treatment with an initial density of 10 g/L of embryogenic callus, the use of a 250 ml capacity flask, with partial adjustment of density, and material cultivated in the absence of light led to the highest rates of multiplication of embryogenic callus. The regeneration, maturation, and germination phase of somatic embryos was optimized with the inoculation of four or six explants per petri dish, cultivated for 90 days in regeneration medium and, when transferred to liquid germination medium, an initial density of 5 g/L yielded the highest synchronization in the maturation of the embryos. In relation to the anatomy of the different stages, it was found that the formation of primary callus occurs at seven days of cultivation, and that these calli originate from the successive division of procambium cells. Primary calli type 1 and type 2 have distinct morphology and distinct cell types, and the embryogenic callus originates from type 1 primary callus. The metabolism of carbohydrates, amino acids, and proteins enables a better interpretation and understanding of the induction processes of somatic embryogenesis, and of the regeneration, maturation, and germination of somatic embryos.
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Aspectos anatômicos da raiz e lâmina foliar de Saccharum L. (POACEAE) nativas do Brasil

Chaves, Bruno Edson 16 August 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biológia, Departamento de Botânica, 2012. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2013-04-17T10:10:56Z No. of bitstreams: 1 2012_BrunoEdsonChaves.pdf: 5391313 bytes, checksum: f274ed8947c83f4068eb4559846d5c33 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2013-04-17T10:11:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_BrunoEdsonChaves.pdf: 5391313 bytes, checksum: f274ed8947c83f4068eb4559846d5c33 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-17T10:11:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_BrunoEdsonChaves.pdf: 5391313 bytes, checksum: f274ed8947c83f4068eb4559846d5c33 (MD5) / O trabalho visa estudar as estruturas anatômicas das raízes e lâminas foliares de Saccharum angustifolium (Nees) Trin., S. asperum (Nees) Steud. e S. villosum Steud. e duas prováveis espécies novas (Saccharum sp. 1 e Saccharum sp. 2), enfocando aspectos de importância taxonômica e ecológica. As espécies foram avaliadas qualitativamente e quantitativamente. A anatomia radicular revelou valor taxonômico e mostrou que plantas que se desenvolvem em condições semelhantes tendem a ser anatomicamente mais próximas. Para a anatomia da lâmina foliar aplicada a taxonomia ainda foi utilizada S. ravennae (L.) L. como grupo externo. A anatomia da lâmina foliar, apesar de possuir caracteres comuns a outras espécies de Andropogoneae e Panicoideae, mostraram variações anatômicas, destacando-se o uso das características em secção transversal, secção paradérmica da face abaxial da ala, do bordo e da epiderme da região da nervura central em vista frontal que melhor delimitam as espécies. As espécies separaram-se em dois grupos: S. ravennae e espécies nativas. É provável que as características distintivas destes dois grupos sejam peculiares aos subgêneros Saccharum e Erianthus, respectivamente. Das espécies analisadas S. villosum é a que possui maior ocorrência/distribuição no Brasil, o que refletiu na sua diversidade morfológica e anatômica. Desta forma, também foram estudadas as variações intraespecíficas e a influencia de fatores ambientais nas características estruturais da lâmina foliar desta espécie. Com base em caracteres anatômico-taxonômicos acredita-se que a variedade anatômica apresentada por estes espécimes seja porque mais de uma espécie esteja envolvida dentro da sua atual descrição. Ecologicamente, verificou-se que 42,839% da variação apresentada por S. villosum, em sua circunscrição atual, é explicada por fatores ambientais, sendo a temperatura o fator mais relacionado às variações estruturais. Admitiu-se ainda escleromorfismo oligotrófico para esta espécie, uma vez que possui uma série de características xeromórficas mesmo em ambientes brejosos.
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Caracterização anatômica e composição química do óleo essencial de manjericão (Ocimum spp.)

Canini, Giselle Beber 07 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-04-16T12:04:37Z No. of bitstreams: 1 2012_GiselleBeberCanini.pdf: 8300917 bytes, checksum: fbbce07078bcd921adbfa1b398a4772a (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-04-17T10:55:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_GiselleBeberCanini.pdf: 8300917 bytes, checksum: fbbce07078bcd921adbfa1b398a4772a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-17T10:55:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_GiselleBeberCanini.pdf: 8300917 bytes, checksum: fbbce07078bcd921adbfa1b398a4772a (MD5) / O manjericão (Ocimum spp) é uma planta da família Lamiaceae de porte variável, que apresenta propriedades aromáticas, condimentares e medicinais, com óleo essencial de grande valor de mercado. Espécies de manjericão são facilmente encontradas em mercados de todo Brasil e apresentam grande variabilidade morfoanatômica e química. O objetivo do presente trabalho foi analisar anatomicamente cinco acessos do gênero Ocimum, encontrados no mercado de hortaliças de Brasília, DF e Salvador, BA, comparar suas características e avaliar a influência da sazonalidade no rendimento e composição química do óleo essencial, teor de linalol, 1,8-cineol e eugenol e na quantidade em miligramas de linalol e 1,8-cineol de um acesso de Ocimum basilicum. O experimento foi conduzido na Embrapa, Instituto de Biologia da UnB e Estação Biológica de Brasília, UnB, onde os acessos foram multiplicados por estaquia e cultivados em estufa tipo glasshouse. Após o enraizamento as plantas foram transplantadas para o campo, onde permaneceram por seis meses até a coleta das amostras para análise anatômica. As coletas para extração de óleo essencial foram efetuadas nas estações chuvosa e seca. Realizaram-se cortes transversais, paradérmicos e microscopia eletrônica de varredura das amostras. As extrações foram feitas por hidrodestilação em aparelho Clevenger modificado e a análises foram realizadas em cromatógrafo Shimadzu, GC 17A. A identificação dos constituintes foi feita baseada nos espectros de massa obtidos em Agilent 5973N. Na anatomia das folhas, foram observadas diferenças entre os acessos estudados em relação ao tamanho de tricomas tectores e sua presença nas faces adaxial e abaxial. Os tricomas glandulares foram observados em todos os acessos e em ambas as faces. O formato do pecíolo também apresentou diferenças entre os acessos. Os estômatos foram classificados como diacíticos. Foram observados três tipos de tricomas, que estão presentes em todos os acessos: tricomas tectores unisseriados e pluricelulares; tricomas glandulares capitados, ao mesmo nível da epiderme (com uma célula basal, um pedúnculo e duas células apicais) e tricomas glandulares peltados, em depressões (com uma célula basal e de uma a quatro células apicais). Os três compostos majoritários encontrados no óleo essencial do acesso estudado foram linalol, 1,8-cineol e eugenol. Houve efeito de época para o rendimento de óleo essencial, a percentagem relativa dos compostos majoritários e a quantidade em miligramas de linalol, sendo que os maiores rendimentos foram observados na estação chuvosa. Os resultados permitem concluir que a caracterização anatômica é uma ferramenta essencial para a diferenciação de acessos comerciais do gênero Ocimum encontrados em mercados e evidenciam que a época de colheita é um fator determinante para aumento do rendimento e obtenção de óleo essencial de melhor qualidade. _______________________________________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The basil (Ocimum spp) is a complex of the Lamiaceae family of variable shape, that presents aromatical, condimentar, and medicinal properties, with essential oil of great value of market. Species of basil are easily found in markets of all Brazil and present great morpho-anatomic and chemical variability. The objective of the present work was to analyze anatomically five accesses of the Ocimum spp, found in the market of vegetables of Brasilia, DF and Salvador, BA, to compare its characteristics and to evaluate the influence of the seasonality in the yield and chemical composition of the essential oil, concerning linalol, 1,8-cineol and eugenol and in the amount in milligrams of linalol and 1,8-cineol of one access of Ocimum basilicum. The experiment was conducted in the Embrapa, the Institute of Biology of UnB and Biological Experiment Station of Brasilia-UnB, where the accesses had been multiplied by cutting and cultivated in glasshouse. After the rooting the plants had been cultivated in field, where they had remained for six months until the collection of the samples for anatomical analysis. The collections for essential oil extraction had been effected in the rainy and dry seasons. Transversal, paradermic cuts and electronic microscopy were done to analysis. The extractions were made by hidrodistillation in modified Clevenger device and the analyses had been carried out through Shimadzu chromatograph, GC 17A. The identification of the constituents was made based in the specters of mass gotten in Agilent 5973N. In the anatomy of leaves, differences between the accesses studied in relation to the size of tector trichomes in adaxial and abaxial faces of leaves were found. Glandular trichomes had been observed in all the accesses and in both leave faces. The shape of petiole also presented differences between the accesses as well as the number of tector trichomes and its presence in the leave faces. The stomata had been classified as diacític. Three types of trichomes had been observed to all the accesses: uniseriate and pluricellular tector trichomes; capitate glandular trichomes, the same the level of the epidermis (with a basal cell, a stalk and two peltate cells) and glandular trichomes in depressions (with a basal cell and one to four apical cells). The three majority components found in the essential oil of one studied access had been linalol, 1,8-cineol and eugenol. It had effect of season for the essential oil yield, the relative percentage of majority components and the amount in milligrams of linalool. The biggest yields had been observed in the rainy station. The results allow conclude that the anatomical characterization is an essential tool for the differentiation of commercial accesses of the Ocimum found in markets and evidences that the time of harvest is a determinative factor for increase of the yield and essential oil attainment of better quality.
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Organogênese, embriogênese somática e uso de óleo mineral como estratégias de propagação e conservação in vitro de Piper aduncum L. e Piper hispidinervum C. DC / Organogenesis, somatic embryogenesis and use of mineral oil as in vitro propagation and conservation strategies of Piper aduncum L. and Piper hispidinervum C. DC

Sousa, Paulo Cesar Alves de 08 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-01-13T13:31:39Z No. of bitstreams: 1 2013_PauloCesarAlvesdeSousa.pdf: 2751877 bytes, checksum: eb53f7827fae946f8607c11f3efa17d0 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-01-13T14:30:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_PauloCesarAlvesdeSousa.pdf: 2751877 bytes, checksum: eb53f7827fae946f8607c11f3efa17d0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-01-13T14:30:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_PauloCesarAlvesdeSousa.pdf: 2751877 bytes, checksum: eb53f7827fae946f8607c11f3efa17d0 (MD5) / Este trabalho teve como objetivo desenvolver a organogênese e embriogênese somática e avaliar o uso do óleo mineral na propagação e conservação in vitro de Piper aduncum e Piper hispidinervum, bem como avaliar a estabilidade genômica dos acessos regenerados. Plantas germinadas in vitro foram utilizadas como material vegetal. Inicialmente, as sementes passaram por processo de desinfestação, antes da inoculação em meio de crescimento. Para os testes de germinação foram utilizados os meios de cultura de MS e WPM, com incubação nas temperaturas de 25 ºC e 30 ºC, nas condições de luz e escuro. Foi avaliada a taxa de germinação (%), o tempo médio de germinação e a velocidade de germinação. Os resultados sobre a germinação das sementes cultivadas em meio de cultura de MS e WPM a 25 ºC foram: taxa de Germinação = 84% e 81% (P. aduncum MS/WPM), 100% e 100% (P. hispidinervum MS/WPM); tempos médios de germinação = 253,429 e 240,593 horas (P. aduncum MS/WPM), 202,320 e 190,320 horas (P. hispidinervum MS/WPM); velocidades médias de germinação = 3,94 h-1 e 4,14 h-1 (P. aduncum MS/WPM); 4,94 h-1 e 5,25 h-1 (P. hispidinervum MS/WPM). As médias de germinação ficaram com valores próximos em ambos os meios de cultura testados. A germinação das sementes cultivadas em meio WPM a 25 ºC e 30 ºC foram: taxa de Germinação = 81% e 74% (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC), 100% e 96% (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC), tempo médio de germinação = 240,593 e 333,081 horas (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 190,320 e 215,250 horas (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC), velocidades médias de germinação = 4,14 h-1 e 3,00 h-1 (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 5,25 h-1 e 4,64 h1 (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC). A temperatura de 25 ºC proporcionou maior percentagem de germinação dentro do menor espaço de tempo para ambas as espécies. Nos testes de micropropagação foi avaliado o cultivo de microestacas em meios de cultura com diferentes concentrações de sais de MS e WPM (50, 70 e 100%), e em outra etapa, o cultivo em meio de MS adicionado de diferentes concentrações dos reguladores BAP (6-benzilaminopurina) e KIN (Cinetina) (0,00; 0,01; 0,05; 0,1; 0,5; 1,0 e 2,0 mg.L-1). Na primeira etapa os dados apresentaram diferenças significativas no que diz respeito ao número de formação de gemas e à altura em ambas as espécies. P. aduncum apresentou melhores resultados, tanto no número de gemas quanto na altura, quando cultivada em meio com concentrações de 50% e 75% de sais de MS e em 75% e 100% de sais de WPM, enquanto P. hispidinervum apresentou melhor desempenho quando cultivada em meio de WPM nas concentrações de 75% e 100%. Com relação ao meio de cultura adicionado dos reguladores de crescimento, P. aduncum apresentou melhores resultados nos tratamentos com 0,50 mg.L-1 de KIN e 0,05 mg.L-1 de BAP, com maior número de brotos; para P. hispidinervum as concentrações dos reguladores foram significativas apenas quando se utilizou o BAP, com melhores resultados obtidos na concentração de 1,0 mg.L-1. Para se determinar um protocolo visando a embriogênese somática a partir de explantes foliares de P. hispidinervum e P. aduncum foram realizados testes combinando diferentes concentrações de ANA (ácido α-naftalenoacético) e BAP adicionados ao meio de MS, formando 5 tratamentos: T1 (5 mg.L-1 de ANA + 0 mg.L-1 de BAP), T2 (10 mg.L-1 de ANA + 0 mg.L-1 de BAP,) T3 (0 mg.L-1 de ANA + 2,5 mg.L-1 de BAP), T4 (5 mg.L-1 de ANA + 2,5 mg.L-1 de BAP) e T5 (10 mg.L-1 de ANA + 2,5mg.L-1 de BAP). Aos 60 dias de cultivo, no escuro, o tratamento T4 proporcionou os melhores resultados para a indução de calos primários em P. aduncum com 80% de formação de calos. A transferência dos calos primários para o meio T5 (10 mg.L-1 de ANA + 2,5mg.L-1 de BAP) ocasionou a formação de calos embriogênicos e surgimento de embriões somáticos. De maneira geral, a regeneração dos embriões somáticos teve início 15 dias após a transferência para meio de crescimento de MS, sob condições de luz. As plantas regeneradas a partir dos embriões de P. aduncum apresentaram crescimento mais lento, portanto, apenas as plantas regeneradas a partir dos embriões de P. hispidinervum foram pré-aclimatizadas e levadas para casa de vegetação. A citometria de fluxo foi utilizada verificar a estabilidade genômica das plantas de P. hispidinervum regeneradas, no que diz respeito à quantidade de DNA. Os resultados revelaram que o conteúdo médio estimado de DNA de P. hispidinervum provenientes de plantas da embriogênese somática e da casa de vegetação foi de 1,8329 ± 0,02 pg e 1,8666 ± 0,05 pg, respectivamente, não havendo existência de instabilidade genômica nas plantas avaliadas. Para a conservação de germoplasma in vitro foi testada a estratégia de conservação por de imersão em óleo mineral (OM). Microestacas de P. aduncum e P. hispidinervum foram inoculadas em tubos de ensaio e cobertas completamente com óleo mineral, sendo cultivadas durante 30 e 180 dias. Aos 30 dias de cultivo, as estacas de P. aduncum e P. hispidinervum submersas em óleo mineral (OM) apresentaram taxa de 100% e 80% de sobrevivência, respectivamente. As estacas vivas foram transferidas para meio de crescimento e após 120 dias de cultivo apenas as estacas de P. aduncum apresentaram sobrevivência (30 %). Na etapa de 180 dias de cultivo, apenas as estacas de P. aduncum sobreviveram, obtendo taxa sobrevivência 40%. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study aimed to develop the organogenesis, somatic embryogenesis and mineral oil as in vitro propagation and conservation strategies of Piper aduncum and Piper hispidinervum as well as assess the genomic stability of regenerated plants. Germinated seeds passed through the process of disinfecting before inoculation into the growth medium. In order for germination tests were used MS and WPM growing medium, with incubation at 25 º C and 30 º C, under the conditions of light and dark. It was evaluated the rate of germination (%), the germination mean time and the speed of germination. The measures of seed germination grown on MS and WPM medium at 25 °C were: rate of germination= 84% and 81% (P. aduncum MS/WPM), 100% and 100% (P. hispidinervum MS/WPM); germination mean time= 253,429 and 240,593 hours (P. aduncum MS/WPM), 202,320 and 190,320 hours (P. hispidinervum MS/WPM); speed of germination= 3,94 h-1 and 4,14 h-1 (P. aduncum MS/WPM); 4,94 h-1 and 5,25 h-1 (P. hispidinervum MS/WPM). The measures germination have demonstrated similar values in both growing medium. The measures of seed germination grown on WPM medium at 25 °C and 30 ºC were: rate of germination= 81% and 74% (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC), 100% and 96% (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC); germination mean time= 240,593 and 333,081 hours (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 190,320 and 215,250 hours (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC); speed of germination= 4,14 h-1 and 3,00 h-1 (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 5,25 h-1 and 4,64 h-1 (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC). The temperature 25 °C had proportioned higher percentage of germination into the shortest time in both species. In the micropropagation tests were evaluated microshoots growing in MS and WPM medium with different concentrations of salts (50, 70 and 100%), and in another step, the culture in MS medium supplemented with different concentrations of BAP (6-benzylaminopurine) and kinetin regulators. (0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1.0 and 2.0 mgL-1). In the first step the results showed significant differences regarding the number of bud formation and height in both species. P. aduncum achieved better results, as numbers of buds as height when grown in medium with 50%, 75%, 100% MS and 50%, 75% and 100% WPM salts concentrations, on the other hand, P. hispidinervum showed the best performance when cultivated in 75% and 100% WPM medium concentrations. Regarding to the culture medium supplemented with regulators, P. aduncum achieved better results in the treatments with 0.50 mgL-1 kinetin and 0.05 mgL-1 BAP which resulted in larger number of shoots, for P. hispidinervum concentrations of regulators were significant only with the use of BAP, and the best results obtained in the concentration of 1.0 mg.L-1. In order to determine a protocol aiming the formation of callus from leaf explants of P. hispidinervum and P. aduncum tests were conducted by combining different concentrations of NAA (α-naphthaleneacetic acid) and BAP added to MS medium, forming 5 treatments: T1 (5 mg.L-1 NAA + 0 mg.L-1 BAP), T2 (10 mgL-1 NAA + 0 mg.L-1 BAP) T3 (0 mg.L-1 + NAA 2.5 mg.L-1 BAP), T4 (5 mg.L-1 + NAA 2.5 mg.L-1 BAP) and T5 (10 mg.L-1 NAA + 2.5 mg.L-1 BAP). Treatment T4 showed the best result in the primary callus induction after 60 days of culture in the dark (P. aduncum with 80% and P. hispidinervum 32% of primary callus formation). The transfer of calluses primary for the treatment T5 (10 mg.L-1 de NAA + 2.5 mg.L-1 de BAP) resulted in the formation of embryogenic callus and somatic embryo emergence. The regeneration of the embryos began 15 days after transfer to growth medium with salts and nutrients of MS and cultivation under light conditions. Plants regenerated from the embryos of P. aduncum grew slower, so only the plants regenerated from the embryos of P. hispidinervum were pre-acclimatized and taken to a greenhouse. The flow cytometry was used to verify the stability of the genome of P. hispidinervum plants regenerated with regard to the amount of DNA. The results showed that the estimated DNA contents of P. hispidinervum from somatic embryogenesis and greenhouse (1.8329 ± 1.8666 ± 0.02 pg and 0.05 pg) with a coefficient of variation below 5% leads to the conclusion about the absence of genomic instability in plants obtained by somatic embryogenesis. For Germplasm in vitro conservation was tested conservation strategy by immersion in mineral oil (MO). Microshoots from P. aduncum and P. hispidinervum were inoculated into sampling tubes and completely covered with mineral oil and cultured for 30 and 180 days. After 30 days of culture, the stakes of P. aduncum and P. hispidinervum submerged in mineral oil (MO) had a survival rate of 100% and 80% respectively. The live cuttings were transferred to growth medium and after 120 days of cultivation only cuttings of P. aduncum showed a survival rate (30%). In the stage 180 days of cultivation, cuttings P. aduncum and P. hispidinervum submerged in mineral oil (MO) had survival rates of 40% and 0% respectively.

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