A Aniba canelilla (H.B.K.) Mez é uma planta aromática proveniente da região amazônica cujo óleo essencial apresenta como componentes majoritários o 1-nitro-2-feniletano e o metileugenol. Apesar das atividades antifúngicas e anti-inflamatórias cientificamente comprovadas e do uso popular do óleo para o tratamento de dermatites, acnes e feridas, não existe até o momento um estudo que verse sobre a quantificação desses compostos na pele. O objetivo deste trabalho foi a validação de um método bioanalítico otimizado por microextração em fase sólida no modo headspace em cromatógrafo gasoso com detector de ionização de chama (HS-SPME-GC-FID) para a determinação do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol a partir do óleo essencial em diferentes amostras de estudo de permeação cutânea in vitro. Uma metodologia foi desenvolvida e validada por HS-SPME-GC-FID. A faixa da curva de calibração foi de 2,08 - 207,87 μg.mL-1 para o 1-nitro-2-feniletano e de 0,40-40,41 μg.mL-1 para o metileugenol. A presença de matriz e as características intrínsecas da metodologia de HS-SPME requereram uma transformação da curva de calibração. A transformação logarítmica (Log10) foi então aplicada aos dados e os resultados apresentaram homocedasticidade, resíduos dispersos, coeficiente de determinação (r²> 0,99) e recuperação adequados. Estudos de permeação cutânea foram realizados em células de Franz com diferentes quantidades (20, 100 e 200 μL) de óleo essencial de A. canelilla para avaliar o perfil de permeação e retenção em pele de orelha suína e fluido receptor. A análise das amostras nas condições validadas mostrou uma grande permeação e retenção dos compostos na seguinte ordem: fluido receptor >> derme >> epiderme >> estrato córneo. Verificou-se um aumento progressivo e dependência na retenção com base na quantidade aplicada no compartimento doador e grande retenção principalmente no fluido receptor e derme, resultado este compatível com as características físico-químicas de Log P, afinidade ao ambiente hidrofílico e lipofílico, tamanho e peso molecular do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol. Em conclusão, o método proposto por HS-SPME-GC-FID para quantificar os compostos majoritários do óleo essencial de A. canelilla em amostras de pele de orelha suína e fluido receptor foi seletivo, preciso, exato e adequado, e pode ser utilizado em análises futuras. / Aniba canelilla (H.B.K.) Mez is an aromatic plant from the Amazon region whose essential oil has 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol as major compounds. Despite of the scientifically proved antifungal and anti-inflammatory activities and the popular use of oil for the treatment of dermatitis, acnes and wounds, there is no study up to date about the quantification of these compounds in skin samples. The aim of this study was the validation of an optimized bioanalytical method by solid phase microextraction on headspace mode in gas chromatograph with flame ionization detector (HS-SPME-GC-FID) for the determination of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol from the essential oil in different samples of in vitro cutaneous permeation study. A methodology was developed and validated by HS-SPME-GC-FID. The ranges of calibration curves were 2.08 - 207.87 μg.mL-1 for 1-nitro-2-phenylethane and 0.40 - 40.41 μg.mL-1 for methyleugenol. The presence of matrix and the intrinsic characteristics of the HS-SPME methodology required a transformation to the calibration curves. The logarithmic transformation (Log10) was then applied to the data and the results showed homoscedasticity, dispersed residues, and adequate coefficient of determination (r²> 0.99) and recovery. Skin permeation studies were performed on Franz cells with different amounts (20, 100 and 200 μL) of A. canelilla essential oil to evaluate the skin permeation and retention profile in porcine ear skin and receptor fluid. The analysis of the samples under the validated conditions showed a high permeation and retention of the major compounds in the following order: receptor fluid >> dermis >> epidermis >> stratum corneum. A progressive increase and retention dependence were observed based on the amount applied in the donor compartment, and large retention mainly on the receptor fluid and dermis was observed, in accordance with the physicochemical characteristics of Log P, affinity to the hydrophilic and lipophilic environment, size and molecular weight of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol. In conclusion, the method proposed by HS-SPME-GC-FID to quantify the major compounds of A. canelilla essential oil in porcine ear skin and receptor fluid samples was selective, accurate, precise and adequate, and can be used in future analyzes.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-01-31T12:09:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AtividadeAnticolinesterásicaOleos.pdf: 1556207 bytes, checksum: 9b287eb9ebd55962aeec544575a2f925 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-02-01T12:17:40Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AtividadeAnticolinesterásicaOleos.pdf: 1556207 bytes, checksum: 9b287eb9ebd55962aeec544575a2f925 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-01T12:17:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AtividadeAnticolinesterásicaOleos.pdf: 1556207 bytes, checksum: 9b287eb9ebd55962aeec544575a2f925 (MD5) Previous issue date: 2013-05-28 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / Atualmente, a Doença de Alzheimer (DA) é considerada um dos grandes problemas de saúde pública em todo o mundo e uma das principais complicações da patologia é o déficit de atividade dos neurônios colinérgicos, fato esse, que pode ser revertido e/ou atenuado elevando os níveis do neurotransmissor acetilcolina (ACh). A maneira mais eficaz de aumentar a quantidade de acetilcolina disponível é a inibição da enzima acetilcolinesterase (AChE). Na busca por novos inibidores colinesterásicos de origem natural, cinco óleos essenciais da região amazônica e seus componentes majoritários foram investigados utilizando o ensaio de inibição da AChE por bioautografia direta. Os óleos e componentes majoritários foram: Aniba canelilla (1-nitro-2-feniletano), Piper aduncum (dilapiol), P. callosum (safrol), P. divaricatum (metileugenol) e P. marginatum (safrol+3,4-metilenodioxipropiofenona). Os óleos de A.canelilla e P. aduncum apresentaram halo de inibição enzimática nas quantidades de 0,01 ng e 1ng, respectivamente. O óleo de P.marginatum apresentou fraca atividade (~100 ng) e os óleos de P. callosum e P. divaricatum foram inativos. Dentre os constituintes majoritários que apresentaram atividade estão os fenilpropanóides 1-nitro-2-feniletano isolado do óleo de A.canelilla, safrol e elemicina, isolados do óleo de P. callosum, que inibiram a AChE nas quantidades de 0,01, 1000 e 1000 ng, respectivamente. Os resultados indicam que o óleo de A. canelilla e 1-nitro-2-feniletano inibem a AChE nas mesmas proporções do padrão fisostigmina. O estudo de docagem molecular complementou os resultados experimentais e demonstrou que o grupo nitro do 1-nitro-2-feniletano forma ligação do tipo ponte de hidrogênio com o grupo hidroxila do resíduo de serina catalítica da molécula de AChE, sugerindo que o caráter eletronegativo do 1-nitro-2-feniletano pode ser responsável por esta forte interação química. / Currently, Alzheimer's disease (AD) is considered a significant public health problem worldwide and the major complication of the disease is the deficit of cholinergic neuron activity, a fact that can be reversed and/or mitigated by raising levels of the neurotransmitter acetylcholine (ACh). The most effective way to increase the available amount of acetylcholine is the inhibition of the acetylcholinesterase enzyme (AChE). In the search for new natural cholinesterasic inhibitors, the essential oils and major components of five aromatic plants occurring in the Amazon region were investigated using the AChE inhibition test by direct bioautography. The oils and major components were obtained from Aniba canelilla (1-nitro-2-phenylethane), P. aduncum (dillapiole), P. callosum (safrole), P. divaricatum (methyleugenol) and P. marginatum (safrole+3,4-methylenedioxipropiophenone). The oils of A. canelilla and P. aduncum showed enzyme inhibition zone in amounts of 0.01 ng and 1ng, respectively. The oil of P.marginatum showed weak activity (~ 100 ng) and the oils of P. callosum and P. divaricatum were inactive. Among the major constituents, who showed activity are the phenylpropanoids 1-nitro-2-phenylethane, isolated from the oil of A. canelilla, and safrole and elemicin, isolated from the oil of P. callosum, which inhibited the AChE in amounts of 0.01, 1000 to 1000 ng, respectively. The results indicate that the oil of A. canelilla and 1-nitro-2-phenylethane inhibited AChE in the same proportion as the pattern physostigmine. The molecular docking study was added to the experimental results, showing that the nitro group of 1-nitro-2-phenylethane can establish hydrogen bonds with the hydroxyl group of the serine residue existing in the catalytic AChE molecule, suggesting that the electronegative character of 1-nitro-2-phenylethane may be responsible for this strong chemical interaction.

A Aniba canelilla (H.B.K.) Mez é uma planta aromática proveniente da região amazônica cujo óleo essencial apresenta como componentes majoritários o 1-nitro-2-feniletano e o metileugenol. Apesar das atividades antifúngicas e anti-inflamatórias cientificamente comprovadas e do uso popular do óleo para o tratamento de dermatites, acnes e feridas, não existe até o momento um estudo que verse sobre a quantificação desses compostos na pele. O objetivo deste trabalho foi a validação de um método bioanalítico otimizado por microextração em fase sólida no modo headspace em cromatógrafo gasoso com detector de ionização de chama (HS-SPME-GC-FID) para a determinação do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol a partir do óleo essencial em diferentes amostras de estudo de permeação cutânea in vitro. Uma metodologia foi desenvolvida e validada por HS-SPME-GC-FID. A faixa da curva de calibração foi de 2,08 - 207,87 μg.mL-1 para o 1-nitro-2-feniletano e de 0,40-40,41 μg.mL-1 para o metileugenol. A presença de matriz e as características intrínsecas da metodologia de HS-SPME requereram uma transformação da curva de calibração. A transformação logarítmica (Log10) foi então aplicada aos dados e os resultados apresentaram homocedasticidade, resíduos dispersos, coeficiente de determinação (r²> 0,99) e recuperação adequados. Estudos de permeação cutânea foram realizados em células de Franz com diferentes quantidades (20, 100 e 200 μL) de óleo essencial de A. canelilla para avaliar o perfil de permeação e retenção em pele de orelha suína e fluido receptor. A análise das amostras nas condições validadas mostrou uma grande permeação e retenção dos compostos na seguinte ordem: fluido receptor >> derme >> epiderme >> estrato córneo. Verificou-se um aumento progressivo e dependência na retenção com base na quantidade aplicada no compartimento doador e grande retenção principalmente no fluido receptor e derme, resultado este compatível com as características físico-químicas de Log P, afinidade ao ambiente hidrofílico e lipofílico, tamanho e peso molecular do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol. Em conclusão, o método proposto por HS-SPME-GC-FID para quantificar os compostos majoritários do óleo essencial de A. canelilla em amostras de pele de orelha suína e fluido receptor foi seletivo, preciso, exato e adequado, e pode ser utilizado em análises futuras. / Aniba canelilla (H.B.K.) Mez is an aromatic plant from the Amazon region whose essential oil has 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol as major compounds. Despite of the scientifically proved antifungal and anti-inflammatory activities and the popular use of oil for the treatment of dermatitis, acnes and wounds, there is no study up to date about the quantification of these compounds in skin samples. The aim of this study was the validation of an optimized bioanalytical method by solid phase microextraction on headspace mode in gas chromatograph with flame ionization detector (HS-SPME-GC-FID) for the determination of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol from the essential oil in different samples of in vitro cutaneous permeation study. A methodology was developed and validated by HS-SPME-GC-FID. The ranges of calibration curves were 2.08 - 207.87 μg.mL-1 for 1-nitro-2-phenylethane and 0.40 - 40.41 μg.mL-1 for methyleugenol. The presence of matrix and the intrinsic characteristics of the HS-SPME methodology required a transformation to the calibration curves. The logarithmic transformation (Log10) was then applied to the data and the results showed homoscedasticity, dispersed residues, and adequate coefficient of determination (r²> 0.99) and recovery. Skin permeation studies were performed on Franz cells with different amounts (20, 100 and 200 μL) of A. canelilla essential oil to evaluate the skin permeation and retention profile in porcine ear skin and receptor fluid. The analysis of the samples under the validated conditions showed a high permeation and retention of the major compounds in the following order: receptor fluid >> dermis >> epidermis >> stratum corneum. A progressive increase and retention dependence were observed based on the amount applied in the donor compartment, and large retention mainly on the receptor fluid and dermis was observed, in accordance with the physicochemical characteristics of Log P, affinity to the hydrophilic and lipophilic environment, size and molecular weight of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol. In conclusion, the method proposed by HS-SPME-GC-FID to quantify the major compounds of A. canelilla essential oil in porcine ear skin and receptor fluid samples was selective, accurate, precise and adequate, and can be used in future analyzes.

A Aniba canelilla (H.B.K.) Mez é uma planta aromática proveniente da região amazônica cujo óleo essencial apresenta como componentes majoritários o 1-nitro-2-feniletano e o metileugenol. Apesar das atividades antifúngicas e anti-inflamatórias cientificamente comprovadas e do uso popular do óleo para o tratamento de dermatites, acnes e feridas, não existe até o momento um estudo que verse sobre a quantificação desses compostos na pele. O objetivo deste trabalho foi a validação de um método bioanalítico otimizado por microextração em fase sólida no modo headspace em cromatógrafo gasoso com detector de ionização de chama (HS-SPME-GC-FID) para a determinação do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol a partir do óleo essencial em diferentes amostras de estudo de permeação cutânea in vitro. Uma metodologia foi desenvolvida e validada por HS-SPME-GC-FID. A faixa da curva de calibração foi de 2,08 - 207,87 μg.mL-1 para o 1-nitro-2-feniletano e de 0,40-40,41 μg.mL-1 para o metileugenol. A presença de matriz e as características intrínsecas da metodologia de HS-SPME requereram uma transformação da curva de calibração. A transformação logarítmica (Log10) foi então aplicada aos dados e os resultados apresentaram homocedasticidade, resíduos dispersos, coeficiente de determinação (r²> 0,99) e recuperação adequados. Estudos de permeação cutânea foram realizados em células de Franz com diferentes quantidades (20, 100 e 200 μL) de óleo essencial de A. canelilla para avaliar o perfil de permeação e retenção em pele de orelha suína e fluido receptor. A análise das amostras nas condições validadas mostrou uma grande permeação e retenção dos compostos na seguinte ordem: fluido receptor >> derme >> epiderme >> estrato córneo. Verificou-se um aumento progressivo e dependência na retenção com base na quantidade aplicada no compartimento doador e grande retenção principalmente no fluido receptor e derme, resultado este compatível com as características físico-químicas de Log P, afinidade ao ambiente hidrofílico e lipofílico, tamanho e peso molecular do 1-nitro-2-feniletano e metileugenol. Em conclusão, o método proposto por HS-SPME-GC-FID para quantificar os compostos majoritários do óleo essencial de A. canelilla em amostras de pele de orelha suína e fluido receptor foi seletivo, preciso, exato e adequado, e pode ser utilizado em análises futuras. / Aniba canelilla (H.B.K.) Mez is an aromatic plant from the Amazon region whose essential oil has 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol as major compounds. Despite of the scientifically proved antifungal and anti-inflammatory activities and the popular use of oil for the treatment of dermatitis, acnes and wounds, there is no study up to date about the quantification of these compounds in skin samples. The aim of this study was the validation of an optimized bioanalytical method by solid phase microextraction on headspace mode in gas chromatograph with flame ionization detector (HS-SPME-GC-FID) for the determination of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol from the essential oil in different samples of in vitro cutaneous permeation study. A methodology was developed and validated by HS-SPME-GC-FID. The ranges of calibration curves were 2.08 - 207.87 μg.mL-1 for 1-nitro-2-phenylethane and 0.40 - 40.41 μg.mL-1 for methyleugenol. The presence of matrix and the intrinsic characteristics of the HS-SPME methodology required a transformation to the calibration curves. The logarithmic transformation (Log10) was then applied to the data and the results showed homoscedasticity, dispersed residues, and adequate coefficient of determination (r²> 0.99) and recovery. Skin permeation studies were performed on Franz cells with different amounts (20, 100 and 200 μL) of A. canelilla essential oil to evaluate the skin permeation and retention profile in porcine ear skin and receptor fluid. The analysis of the samples under the validated conditions showed a high permeation and retention of the major compounds in the following order: receptor fluid >> dermis >> epidermis >> stratum corneum. A progressive increase and retention dependence were observed based on the amount applied in the donor compartment, and large retention mainly on the receptor fluid and dermis was observed, in accordance with the physicochemical characteristics of Log P, affinity to the hydrophilic and lipophilic environment, size and molecular weight of 1-nitro-2-phenylethane and methyleugenol. In conclusion, the method proposed by HS-SPME-GC-FID to quantify the major compounds of A. canelilla essential oil in porcine ear skin and receptor fluid samples was selective, accurate, precise and adequate, and can be used in future analyzes.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Previamente, foi demonstrado que o tratamento via intravenosa com 1-nitro-2-feniletano (NFE) induziu hipotensÃo que resulta principalmente de sua aÃÃo vasodilatadora diretamente sobre o mÃsculo liso. Nesse estudo, estudamos o mecanismo subjacente ao efeito miorrelaxante do NFE em tecidos vasculares isolados de ratos. Registros isomÃtricos foram obtidos a partir de anÃis isolados de artÃria aorta e do segundo ramo da mesentÃrica de ratos atravÃs de sistema de aquisiÃÃo de dados. Experimentos in silico (docking) de simulaÃÃo da formaÃÃo de complexos entre o NFE e a enzima guanilato ciclase foram realizados. Em preparaÃÃes de aorta isolada com endotÃlio intacto, NFE (1-300 &#61549;g/mL) relaxou a contraÃÃo induzida por fenilefrina ou K+, com valores de CI50 de 35,0 [23,3â52,6] e 73,2 [39,5â134,3] &#61549;g/mL, respectivamente. Os efeitos vasorrelaxantes do NFE foram significativamente (P < 0,05, teste de Mann-Whitney) reduzidos pelo tratamento prÃvio com ODQ (10 ÂM), azul de metileno (10 ÂM), TEA (5 mM), glibenclamida (10 ÂM) ou 4-aminopiridina (1 mM), mas nÃo pela remoÃÃo do endotÃlio vascular ou pelo prÃ-tratamento com L-NAME (100 &#956;M), indometacina (10 &#956;M), MDL-12.330A (3 &#956;M), KT5823 (0.5 ÂM) ou KT5720 (1 &#956;M). A potÃncia do NFE para induzir efeito vasorrelaxante foi significantemente maior (p < 0,01, teste de Mann-Whitney) nas preparaÃÃes de artÃria mesentÃrica quando comparado à aorta, tanto nas contraÃÃes induzidas por K+ como por noradrenalina com valores de CI50 de 5,3 [2,6â10,5] e 6,5 [2,8â14,9] Âg/mL, respectivamente. Em um meio sem cÃlcio, na presenÃa de K+ 60 mM ou fenilefrina 1 ÂM, as contraÃÃes induzidas CaCl2 foram significativamente reduzidas e atà mesmo abolidas pelo NFE na concentraÃÃo de 100 Âg/mL, respectivamente. Em meio sem cÃlcio, contendo EGTA, a resposta contrÃtil da fenilefrina foi significantemente reduzida pelo NFE (100 Âg/mL ), efeito impedido pelo tratamento com ODQ (10 ÂM), enquanto nÃo teve efeito significativo sobre as contraÃÃes induzidas por cafeÃna. Resultados semelhantes foram obtidos com nitroprussiato de sÃdio. NFE tambÃm foi capaz de inibir a contraÃÃo induzida pela entrada capacitativa de cÃlcio e pelo Ãster de forbol. AlÃm disso, os resultados de docking revelam que existem clusters de provÃveis interaÃÃes do NFE com a enzima guanilato ciclase. O presente estudo sugere que a atividade vasorrelaxante do NFE em aorta de rato à causada por provÃvel estimulaÃÃo da guanilato ciclase e consequente ativaÃÃo da cascata enzimÃtica guanilato ciclase/GMPc/canais de K+. / It was early shown that intravenous treatment with 1-nitro-2-phenylethane (NPE) induced hypotension resulting mainly from its direct vasodilatory action on vascular smooth muscle. Here, it was sudied the underlying mechanism involved in the vasorelaxant effect of NPE in isolated rings of rat arteries. Isometric recordings were obtained from rings made from aorta or mesenteric artery using a digital acquisition system. Experiments in silico (docking) for simulation of molecular interactions between NPE and the enzyme guanylate cyclase were performed. In endothelium-intact aortic preparations, NPE (1-300 &#61549;g/mL) relaxed the phenylephrine or K+-induced contractions with IC50 values of 35.0 [23.3- 52.6] and 73.2 [39.5-134.3] &#61549;g/mL, respectively. Vasorelaxant effects of NPE were significantly (P <0.05, Mann-Whitney test) decreased by pretreatment with ODQ (10 ÂM), methylene blue (10 ÂM), TEA (5 mM), glibenclamide (10 ÂM) or 4-aminopyridine (1 mM) but not by vascular endothelium removal or by pretreatment with L-NAME (100 ÂM), indomethacin (10 ÂM), MDL-12.330A (3 ÂM), KT5823 (0.5 ÂM ) or KT5720 (1 ÂM). Pharmacological potency of NPE was significantly greater (p <0.01, Mann-Whitney test) in preparations of mesenteric artery compared to that of aorta, as in K+- and norepinephrine-induced contraction with IC50 values of 5.3 [2.6-10.5] and 6.5 [2.8-14.9] &#61549;g/mL, respectively. In calcium-free medium, in presence of K+ 60 mM or phenylephrine 1 &#956;M, the CaCl2-induced contractions were significantly reduced and almost abolished by NPE at 100 &#956;g/mL, respectively. In calcium-free medium, containing EGTA, the contractile response of phenylephrine was significantly reduced by NPE (100 &#61549;g/mL), an effect prevented by treatment with ODQ (10 ÂM), whereas NPE was deprived of any significant effect on caffeine-induced contractions. Similar results were obtained with sodium nitroprusside. NPE also inhibited the contractions induced by the capacitive calcium entry or by phorbol ester. In addition, docking results revealed clusters of interactions of NPE with the guanylate cyclase molecule. The present study suggests that vasorelaxant activity of NPE on rat aorta is due to its stimulatory properties on guanylate cyclase, which activates the guanylate cyclase/cGMP/K+ channels pathway.

Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-06-23T12:33:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoMecanismoNitrofeniletano.pdf: 5017141 bytes, checksum: bc956f8f2cf3faae7644e5ba2a5c651a (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-09-08T12:39:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoMecanismoNitrofeniletano.pdf: 5017141 bytes, checksum: bc956f8f2cf3faae7644e5ba2a5c651a (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-08T12:39:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoMecanismoNitrofeniletano.pdf: 5017141 bytes, checksum: bc956f8f2cf3faae7644e5ba2a5c651a (MD5) Previous issue date: 2011 / Estudos anteriores sugerem que o óleo essencial da Aniba canelilla contendo altos níveis de 1-nitro-2-feniletano apresenta atividade antinociceptiva, antiinflamatória e hipotensora. Um estudo teórico de correlação entre estrutura química versus atividade biológica do 1-nitro-2-feniletano e a prostaglandinaendoperóxido sintase foi realizado. Além disso, foi feita uma análise conformacional do nitrofeniletano, bem como modificações em sua estrutura química, obtendo-se derivados nitroestirenos e cinamatos, para a posterior avaliação da relação estrutura-propriedade. A análise conformacional do nitrofeniletano foi realizada usando o método DFT/B3LYP com o conjunto de base 6-31G(d) através da variação da torção do angulo dihedro entre as ligações dos carbonos C1-C2 ligadas aos grupos fenila e nitro, com variação de intervalos de 5°, na faixa de 0° a 180°, visando a busca dos confôrmeros de menor energia. O confôrmero de 180º do dihedro O2N-C1-C2-C6H5 foi significativamente mais estável e isto pode ser explicado em termos do equilíbrio pela presença de sete geometrias de mais baixas energias. A análise de HOMO e LUMO mostra que os grupamentos fenila e metileno contribuem para a formação deste orbital. O cálculo de energia e determinação de propriedades eletrônicas relacionadas com o mecanismo de interação com a ciclooxigenase demonstrou boa correlação entre os grupos nitro e carboxílico, os quais podem ser classificados como bioisósteros. Os resultados das propriedades físico-químicas calculadas indicam uma maior correlação do nitrofeniletano com o ácido acetilsalicílico, podendo ter seu mecanismo de ação relacionado através de interações com a Arg-120 e Ser-530.Cálculos realizados com a guanidina protonada pelo DFT/B3LYP/6-31G(d,p) parao complexo contendo o grupo carboxilato exibem uma energia de interação mais favorável, com valor de -136,34 kcal/mol, quando comparado com a molécula contendo o grupo nitro, com valor de -12,84 kcal/mol, o que pode explicar a maior efetividade da indometacina, semelhante aos resultados biológicos. Os derivados do nitrofeniletano apresentaram uma relação estrutural com derivados de cinamatos, diferindo nas propriedades redox, o que pode favorecer o desenvolvimento de estruturas protótipo como moléculas bioativas a partir destes esqueletos moleculares. / Previous studies suggest that the essential oil of Aniba canelilla containing high levels of 1-nitro-2-phenylethane has antinociceptive activity, anti-inflammatory and hypotensive. A theoretical study of correlation between chemical structure versus biological activity of 1-nitro-2-phenylethane and prostaglandin-endoperoxide synthase was performed. In addition, an analysis of the conformational nitrophenylethane as well as changes in their chemical structure resulting in cinnamates and nitrostyrenes derivatives, for further evaluation of structureproperty. The conformational analysis was performed using the nitrophenylethane DFT/B3LYP the method with the basis set 6-31G (d) by varying the twist angle between the links of dihedro carbons C1-C2 linked to the phenyl and nitro groups, ranging from 5 ° intervals in the range of 0° to 180° in order to search for the lowest energy conformers. The conformer of the 180° dihedron O2N-C6H5-C1-C2 was significantly more stable and this can be explained in terms of the balance by the presence of seven geometries of lower energies. The HOMO and LUMO analysis shows that the phenyl and methylene groups contribute to the formation of this orbital. The calculation of energy and determination of electronic properties related to the mechanism of interaction with the cyclooxygenase showed a high correlation between nitro and carboxylic groups, which can be classified as bioisosters. The results of physico-chemical calculations show a greater correlation of the nitrophenylethane with acetylsalicylic acid, which may have related to its mechanism of action through interactions with Arg-120 and Ser-530. Calculated with the protonated guanidine by DFT/B3LYP/6-31G (d, p) for the complex containing the carboxylate group exhibit more favorable interaction energy with a value of -136.34 kcal / mol, compared with the molecule containing the nitro group with a value of -12.84 kcal / mol, which may explain the greater effectiveness of indomethacin, similar to biological outcomes. Nitrophenylethane derivatives showed a structural relationship with cinnamates derived from differing in the redox properties, which may favor the development of prototype structures and bioactive molecules from these molecular skeletons.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8494_1.pdf: 11553961 bytes, checksum: e948365d416d27f263d11adf962b5add (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e Tecnológico / Este estudo investigou os possíveis mecanismos dos efeitos cardiovasculares do óleo essencial da Aniba canelilla (OEAC) e seu principal constituinte o 1-nitro-2- feniletano (NF) em ratos espontaneamente hipertensos (SHRs). Para tal, foram realizados experimentos in vitro e in vivo. Ratos machos SHRs foram submetidos a cirurgia para implantação dos cateteres na artéria aorta e veia cava inferior. Para os estudos de reatividade vascular os animais foram sacrificados e a artéria mesentérica superior foi isolada. Os anéis foram mantidos em cubas com solução Krebs-Henseleit, (37ºC) e gaseificada com carbogênio. Em ratos anestesiados, injeções intravenosas (i.v.) em bolus do OEAC (1-20 mg/kg) ou NF (1-10 mg/kg) induziram efeitos hipotensor e bradicardizante, dose-dependentes, que foram caracterizados em dois períodos (fase 1 e 2). O componente rápido (fase 1) da resposta hipotensora e bradicardizante induzido pelo OEAC e NF, ambos na dose de 10 mg/kg, foi ausente após a administração direta no ventrículo esquerdo. A fase 1 foi também abolida após a bivagotomia ou pelo tratamento perineural dos nervos vagos com capsaicina (250 &#956;g/mL). No entanto, a fase 1 permaneceu inalterada pelo pré-tratamento i.v. com capsazepina (1 mg/kg) ou ondasetron (30 &#956;g/kg). Em ratos acordados, o NF (5 e 10 mg/kg) induziu efeitos hipotensor e bradicardizante rápidos (fase 1) que foram completamente abolidos pelo pré-tratamento com metilatropina (1 mg/kg, i.v.). Nas concentrações de 0,1-1000 &#956;g/mL, o OEAC e o NF induziram um relaxamento reversível e concentração-dependente nas preparações isoladas de artéria mesentérica pré-contraídas com KCl (75 mM) com a IC50 [média geométrica (95% de intervalo de confiança)] de 294,19 [158,20-94,64] e 501,27 [378,60-624,00] &#956;g/mL, respectivamente, ou com fenilefrina (FEN; 1 &#956;M) [IC50 = 11,07 [6,40-15,68] e 7,91 [4,08-11,74) &#956;g/mL, respectivamente]. O efeito vasorrelaxante do OEAC nas preparações pré-contraídas pela FEN não foi dependente da integridade do endotélio. OEAC e NF também inibiram a curva de concentração-resposta para a FEN (10-10- 3 x10-4 M) ou KCl (25-125 mM). Em meio isento de Ca2+, o OEAC (100 &#956;g/mL) reduziu significativamente a contração induzida pela FEN (1 mM) sem alterar aquela induzida pela cafeína (20 mM). Em meio isento de Ca2+ contendo alta concentração de potássio (75 mM) , as contrações induzidas por CaCl2 e BaCl2 foram reduzidas ou até completamente abolidas pelo OEAC nas concentrações de 100 e 600 &#956;g/mL, respectivamente. Um efeito similar nas contrações induzidas por CaCl2 foi também observado com o NF. O OEAC reduziu de maneira concentraçãodependente (IC50 = 52,66 [10,82-94,64]) a contração induzida pelo dibutirato de forbol (1 &#956;M), um ativador da proteína kinase C. Em conclusão, o OEAC e o NF induzem um reflexo vago-vagal bradicardizante e hipotensor (fase 1) que aparentemente resultou da estimulação das fibras C aferentes vagais pulmonares mas não cardíacas. Este reflexo não parece envolver a ativação dos receptores vanilóides TPRV1 nem dos receptores 5-HT3 localizados nestas fibras sensoriais vagais. O componente tardio (fase 2) da resposta hipotensora do OEAC parece ser decorrente, pelo menos em parte, de um efeito vasorrelaxante principalmente através de um mecanismo miogênico independente da integridade do endotélio do que através de um mecanismo dependente de eventos na membrana celular, envolvendo canais de cálcio dependentes de voltagem ou de receptor. Este efeito vasorrelaxante do OEAC, preferencialmente dependente do acoplamento farmacomecânico, foi principalmente atribuído à ação de seu maior constituinte, o NF