Resumo: A malária no Estado do Paraná deve-se principalmente ao fluxo de pessoas advindas de áreas endêmicas de outras regiões do país, e a manutenção do vetor transmissor em algumas regiões do estado onde, o risco para ocorrência de casos autóctones da doença inspira cuidado. O presente estudo teve por objetivo descrever a composição da fauna de Anopheles (Diptera: Culicidae) da Reserva Indígena do Ocoy, foco ativo de malária no município de São Miguel do Iguaçu. As análises foram feitas através de dados da captura de mosquitos Anopheles adultos, em um período de 12 meses, entre maio de 2004 a abril de 2005, tendo sido avaliada a diversidade e abundância das espécies ocorrentes, assim como a distribuição sazonal. As coletas obedeceram a ritmo mensal com período de 12 horas ininterruptas, das 18:00 as 06:00 horas, respeitando intervalos-hora de 60 minutos, sendo 55 minutos para a coleta com atração humana e 5 minutos para inspeção de paredes internas e externas da residência pesquisada. Foram coletados um total de 471 anofelinos, sendo 75,7% coletados entre junho e Setembro de 2004. No período de 12 meses, foi observada maior riqueza de espécies nos meses de junho (10) e setembro (11), enquanto dezembro (1), outubro/2004 e abril/2005 (2), foram os meses que apresentaram o menor número de espécies. Anopheles evansae e Anopheles darlingi, perfizeram 55,7% do anofelinos coletados, ou seja, pouco mais que a metade dos anofelinos locais obtidos neste estudo. Anopheles parvus e Anopheles strodei apresentaram valores aproximados, 9,7% e 9,1% respectivamente, seguidos por Anopheles galvaoi e Anopheles argyritarsis, que apresentaram percentuais de 8% e 5,3%. A frequência observada na população de An. darlingi, onde as maiores densidades não ocorreram no período mais quente e chuvoso, pode estar relacionado com a presença de criadouros permanentes, nas margens do reservatório de Itaipu. A ocorrência e o comportamento característico da população de An. darlingi observado na Reserva Indígena do Ocoy, associada aos hábitos dos indígenas, estreitando a relação homem/vetor. A movimentação constante de indivíduos de uma comunidade para outra, na região das três fronteiras (Brasil, Paraguai e Argentina), permitem a introdução de fontes de infecção contribuindo para ocorrência periódica de novos casos de malária, a qual se considera uma das dificuldades para erradicação de casos autóctones na aldeia. Os resultados demonstram a necessidade de melhores estudos entomológicos e monitoramento da atividade larvária. Identificar fatores que sejam favoráveis ao uso de medidas de controle como, por exemplo, aplicações preventivas de biolarvicidas no controle das populações de anofelinos e desta forma contribuir para o aprimoramento dos trabalhos de vigilância e controle de vetores na Reserva Indígena do Ocoy.

Orientador : Prof. Dr. Mario Antônio Navarro da Silva / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (Entomologia). Defesa: Curitiba, 24/08/2017 / Inclui referências ao final de cada capítulo / Resumo: A família Culicidae (Diptera) compreende um diverso grupo de mosquitos distribuídos entre as regiões temperadas e tropicais no mundo, na qual estão incluídas 3.555 espécies, sendo muitas destas capazes de transmitir diversos patógenos para os humanos. Anopheles cruzii é considerado o principal vetor do agente etiológico malária nas regiões Sul e Sudeste do Brasil. Devido à sua importância epidemiológica, alguns estudos sobre a caracterização morfológica e molecular da espécie foram realizados. Estes estudos sugerem que An. cruzii pode representar um complexo de espécies, porém a distribuição, quantidade e o status destas diferentes linhagens ainda é incerto. Diante deste cenário, o objetivo da tese foi caracterizar as linhagens genéticas de An. cruzii quanto a variações morfológicas, moleculares e ecológicas. Com isso, a tese apresenta-se dividida em dois capítulos, o primeiro intitulado "Análise da estrutura populacional de Anopheles (Kerteszia) cruzii Dyar & Knab, 1908 (Diptera: Culicidae) com base em marcadores mitocondriais e morfometria geométrica" e o segundo "Sobreposição de nicho ecológico entre linhagens genéticas de Anopheles (Kerteszia) cruzii Dyar & Knab, 1908 (Diptera: Culicidae)". Como resultados do primeiro capítulo quatro linhagens genéticas foram descritas para An. cruzii, sendo estas localizadas em Camacan-BA, Itaparica-BA, Morretes-PR + Tapiraí-SP e Florianópolis-SC + Itatiaia-RJ. Todas estas linhagens apresentaram altos índices Fst, ausência de migrantes e representação em clados exclusivos nas análises filogenéticas de máxima verossimilhança. A variação fenotípica interpopulacional também foi constatada, sendo as asas das populações de Camacan-BA e da Ilha do Mel-PR distintas morfologicamente das demais populações analisadas. No segundo capítulo foi avaliada a existência de conservação de nicho ecológico entre as diferentes linhagens genéticas de An. cruzii. Os resultados revelaram a existência de sobreposição de hábitat disponível para a ocorrência das duas linhagens nos Estados de São Paulo e Rio de Janeiro. Os resultados apresentados sugerem que as características do nicho climático dos grupos A e B talvez não tenham sido as mais importantes para dirigir um possível processo de especiação em andamento, já que observou-se a sobreposição de nichos entre as linhagens analisadas. Palavras-chave: diversidade genética, variações fenotípicas, nicho ecológico. / Abstract: The Culicidae (Diptera) family comprises a diverse group of mosquitoes spread through temperate and tropical regions around the world. There are 3,555 species included in this family, many of which are vectors for a number of pathogens to humans. Anopheles cruzii is considered the main vector of the etiologic agent of malaria in the south and southeast regions of Brazil. Given its epidemiologic relevance, a number of studies have been carried on morphologic and molecular characteristics of An. cruzii. Those studies suggest that An. cruzii may represent a complex of species, however the distribution, quantity and status of the different lineages is still uncertain. In light of this, the objective of this thesis is to characterize the genetic lineages of An. cruzii in regards with morphological, molecular and ecological variances. The thesis is divided in two chapters, the first one named "Analysis of population structure of Anopheles (Kerteszia) cruzii Dyar & Knab, 1908 (Diptera: Culicidae) through mitochondrial markers and wing geometric morphometry" and the second one "Ecological niche overlap among genetic lineages of Anopheles (Kerteszia) cruzii Dyar & Knab, 1908 (Diptera: Culicidae)". As results of the first chapter four genetic lineages were described for An. cruzii, being these located in Camacan-BA, Itaparica-BA, Morretes-PR + Tapiraí-SP and Florianópolis-SC + Itatiaia-RJ. All of these lineages presented high levels of Fst, absence of migrants and exclusive clades in phylogenetic analyzes of maximum likelihood. The interpopulational phenotypic variation was also observed, being the wings of the populations of Camacan-BA and Ilha do Mel-PR morphologically distinct from the other populations analyzed. The second chapter evaluated the existence of ecological niche conservatism among the different genetic lineages of An. cruzii. The results revealed the existence of available habitat overlap for the occurrence of the two lineages in the States of São Paulo and Rio de Janeiro. The results suggest that the climatic niche characteristics of the groups A and B may not have been the most important to guide a possible speciation process in progress, since the overlap of niches among the analyzed lineages was observed. Keywords: genetic diversity, phenotypic variability, ecological niche.

Orientador: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Henrique M. C. da Silveira / Banca: Alexandre A. Peixoto / Resumo: Estudos recentes vêm elucidando a importância de uma diversidade de proteínas do intestino médio de insetos vetores, tanto nos processos de digestão como em respostas imunológicas e interações parasita-hospedeiro. Este trabalho teve como objetivo analisar a expressão de genes do intestino médio de Anopheles aquasalis, um importante vetor de malária no Brasil, a partir de clones sequenciados de bibliotecas de cDNA de machos e fêmeas alimentados apenas com sacarose. Nas fêmeas, pôde-se notar a grande predominância de serino proteases, proteínas ligantes de quitina e fatores relacionados à imunidade. Os machos também apresentaram diversos peptídeos de defesa imune, porém apenas uma protease digestiva e uma glicosidase. Alguns genes foram selecionados das bibliotecas para estudo de suas expressões durante a vida de An. aquasalis. Tripsina 1, peritrofina 1 e quinurenina 3-monooxigense tiveram seus níveis de expressão aumentados 6h após a ingestão de sangue, analisados através de qRT-PCR. No entanto, o silenciamento desses genes não resultou em alterações na longevidade de fêmeas adulta. O gene da serpina foi expresso em todas as fases do desenvolvimento do mosquito, exceto em ovos; e o gene da cecropina foi expresso em trato digestivo e carcaça de machos e fêmeas, principalmente após alimentação de açúcar ou sangue. Considerando que a ingestão de alimentos é a principal porta de entrada a microorganismos durante a vida adulta destes mosquitos, a presença de diversos produtos antimicrobianos, bem como a precoce expressão de peritrofina, outra proteína relacionada com a proteção do trato digestivo, mostrou que An. aquasalis está bem preparado imunologicamente contra esses microorganismos. Esta proteção está envolvida com o hábito alimentar desta espécie e pode também estar associada à sua baixa capacidade vetorial com relação aos plasmódios. / Abstract: The importance of midgut proteins of Anopheles aquasalis has been elucidated both in digestion process as in immune responses and parasite-host interactions. This project targeted to analyze the midgut genes expression from An. aquasalis, an important malaria vector in Brazil, selecting clones from midgut cDNA library of female and male mosquitoes fed only on sugar. Serine proteases were predominant in females besides chitin binding proteins and immunity factors. Male mosquitoes also showed immune defense peptides, however only one digestive protease and one glucosidase. Some genes were selected from these libraries to expression study during mosquito development stages. Trypsin 1, peritrophin 1 and kynurenine 3-monoxygenase expression were up regulated at the midgut 6h after blood feeding, analyzed by real time PCR. Nevertheless, the gene silencing did not change the survivorship of adult females. Serpin gene was expressed in all mosquito development stages but eggs; cecropin gene was expressed in midgut and carcass from male and female, mainly after sugar or blood feeding. Considering the alimentation is the main entrance way of pathogens, the presence of antimicrobial peptides as the early peritrophin expression showed that An. aquasalis is immunologically adapted against these microorganisms. This protection is involved in feeding behavior of this specie and can be also related to its low Plasmodium vector capacity. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-30Bitstream added on 2014-06-13T18:29:21Z : No. of bitstreams: 1 carlos_bc_me_botib.pdf: 1447163 bytes, checksum: bbee87d6f015501c72b499b26af6cd4a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos recentes vêm elucidando a importância de uma diversidade de proteínas do intestino médio de insetos vetores, tanto nos processos de digestão como em respostas imunológicas e interações parasita-hospedeiro. Este trabalho teve como objetivo analisar a expressão de genes do intestino médio de Anopheles aquasalis, um importante vetor de malária no Brasil, a partir de clones sequenciados de bibliotecas de cDNA de machos e fêmeas alimentados apenas com sacarose. Nas fêmeas, pôde-se notar a grande predominância de serino proteases, proteínas ligantes de quitina e fatores relacionados à imunidade. Os machos também apresentaram diversos peptídeos de defesa imune, porém apenas uma protease digestiva e uma glicosidase. Alguns genes foram selecionados das bibliotecas para estudo de suas expressões durante a vida de An. aquasalis. Tripsina 1, peritrofina 1 e quinurenina 3-monooxigense tiveram seus níveis de expressão aumentados 6h após a ingestão de sangue, analisados através de qRT-PCR. No entanto, o silenciamento desses genes não resultou em alterações na longevidade de fêmeas adulta. O gene da serpina foi expresso em todas as fases do desenvolvimento do mosquito, exceto em ovos; e o gene da cecropina foi expresso em trato digestivo e carcaça de machos e fêmeas, principalmente após alimentação de açúcar ou sangue. Considerando que a ingestão de alimentos é a principal porta de entrada a microorganismos durante a vida adulta destes mosquitos, a presença de diversos produtos antimicrobianos, bem como a precoce expressão de peritrofina, outra proteína relacionada com a proteção do trato digestivo, mostrou que An. aquasalis está bem preparado imunologicamente contra esses microorganismos. Esta proteção está envolvida com o hábito alimentar desta espécie e pode também estar associada à sua baixa capacidade vetorial com relação aos plasmódios. / The importance of midgut proteins of Anopheles aquasalis has been elucidated both in digestion process as in immune responses and parasite-host interactions. This project targeted to analyze the midgut genes expression from An. aquasalis, an important malaria vector in Brazil, selecting clones from midgut cDNA library of female and male mosquitoes fed only on sugar. Serine proteases were predominant in females besides chitin binding proteins and immunity factors. Male mosquitoes also showed immune defense peptides, however only one digestive protease and one glucosidase. Some genes were selected from these libraries to expression study during mosquito development stages. Trypsin 1, peritrophin 1 and kynurenine 3-monoxygenase expression were up regulated at the midgut 6h after blood feeding, analyzed by real time PCR. Nevertheless, the gene silencing did not change the survivorship of adult females. Serpin gene was expressed in all mosquito development stages but eggs; cecropin gene was expressed in midgut and carcass from male and female, mainly after sugar or blood feeding. Considering the alimentation is the main entrance way of pathogens, the presence of antimicrobial peptides as the early peritrophin expression showed that An. aquasalis is immunologically adapted against these microorganisms. This protection is involved in feeding behavior of this specie and can be also related to its low Plasmodium vector capacity.