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Controle biológico de nematoides gastrintestinais de bovinos através da utilização do fungo nematófago Arthrobotrys cladodes / Biological control of gastrointestinal nematodes of cattle using the nematophagous fungi Arthrobotrys cladodes

Oliveira, Isabela de Castro 18 July 2017 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-11-01T17:44:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 917792 bytes, checksum: aaa1b0d65b854c17b36c9ecf06c3186c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-01T17:44:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 917792 bytes, checksum: aaa1b0d65b854c17b36c9ecf06c3186c (MD5) Previous issue date: 2017-07-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A cada ano, a participação brasileira no comércio internacional vem crescendo, com destaque para a produção de carne bovina. As doenças parasitárias, principalmente as causadas por endoparasitas ocupam lugar de destaque dentre os fatores que interferem no desenvolvimento pleno da produção animal. Dentre as alternativas promissoras para o combate não químico de parasitos, pode-se destacar a utilização do controle biológico feito através de fungos nematófagos. O potencial antagônico do fungo Arthrobotrys cladodes var. macroides sobre larvas infectantes de nematoides parasitas gastrintestinais de bovinos foi avaliado por meio de microscopia eletrônica de varredura e foi realizado teste in vivo da resistência e viabilidade do fungo em uma formulação a base de alginato de sódio a passagem por via oral de bovinos. O fungo estudado apresentou alta produção de conídios e clamidósporos. Em teste de interação do fungo com os nematoides foi observada uma redução de 68,65% das larvas infectantes de nematóides nas placas de Petri do grupo tratado, em comparação com o controle. Sendo que a interação entre o fungo e os nematoides foi confirmada pela microscopia eletrônica de varredura. A observação das placas contendo as amostras de fezes coletadas após uma administração única por via oral de 100 gramas de péletes contendo o fungo A. cladodes mostrou que o mesmo foi capaz de sobreviver à passagem pelo trato gastrintestinal de ruminantes, crescer sobre o ágar, formar armadilhas e predar as larvas de terceiro estádio de parasitas gastrointestinais. Com o objetivo de avaliar a eficácia do fungo nematofago Arthrobotrys cladodes var. macroides no controle biológico de nematoides gastrintestinais de bovinos, doze bovinos mestiços holandês x zebu com sete a nove meses de idade, foram divididos aleatoriamente em dois grupos (grupo tratado e grupo controle) e distribuídos em piquetes de Brachiaria decumbens, naturalmente infestados com larvas de helmintos. Os animais do grupo tratado receberam 1g de pélete em matriz de alginato de sódio para cada 10 kg de peso vivo animal, contendo o fungo Arthrobotrys cladodes var macroides administrados duas vezes por semana conjuntamente com ração comercial. Já no grupo controle cada animal recebeu 1 g de pélete para cada 10 kg de peso vivo animal, sem micélio fúngico adicionado a ração. Amostras de fezes e pastagens foram coletadas quinzenalmente durante 12 meses. Os gêneros de nematoides mais prevalentes nas coproculturas foram Haemonchus sp., Cooperia sp. e Oesophagostomum sp. refletindo os resultados encontrados na forragem. A pastagem que continha os animais que receberam tratamento com o fungo apresentou redução de 59% e 52% de larvas recuperadas nas distâncias de 20cm e 40cm do bolo fecal, respectivamente . As médias mensais de ovos por grama de fezes e peso não diferiram significativamente (p>0,05) entre o grupo tratado e controle. Amostras de fezes e solo de ambos os grupos foram colonizadas pelo fungo A. cladodes e por outros fungos. A administração do micélio de Arthrobotrys cladodes var macroides por meio de matriz de alginato de sódio, duas vezes na semana, diminuiu a infestação de larvas na pastagem, indicando que esse fungo pode ser um controlador biológico promissor no combate das formas infectantes de nematoides presentes no meio ambiente. / Every year, Brazilian participation in international trade has been increasing, with emphasis on beef production. The parasitic diseases, especially those caused by endoparasites occupy a prominent place among the factors that interfere in the full development of animal production. Among the promising alternatives for the non- chemical control of parasites, one can highlight the use of biological control made by nematophagous fungi. The antagonistic potential of the fungus Arthrobotrys cladodes var. macroides on infective larvae of bovine gastrointestinal parasitic nematodes was evaluated by scanning electron microscopy and an in vivo test of the resistance and viability of the fungus in a formulation based on sodium alginate was carried out orally by bovines. The fungus studied showed high production of conidia and chlamydospores. In a test of interaction of the fungus with the nematodes, a 68.65% reduction of the nematode infecting larvae in the Petri dishes of the treated group was observed, in comparison with the control. The interaction between the fungus and the nematodes was confirmed by scanning electron microscopy. Observation of plates containing feces collected after oral administration of 100 grams of pellets containing the A. cladodes fungus showed that it was able to survive passage through the gastrointestinal tract of ruminants, grow on the agar, form traps and predatory larvae of the third stage of gastrointestinal parasites. In order to evaluate the efficacy of the nematophagous fungus A. cladodes var. macroides of the bovine gastrointestinal nematodes, twelve crossbred Dutch - zebu cattle with seven to nine months of age were randomly divided into two groups (treated group and control group) and distributed in Brachiaria decumbens pickets, naturally infested with larvae of helminths. The animals in the treated group received 1g of sodium alginate matrix pellet for every 10 kg of animal live weight containing the fungus A. cladodes var macroides administered twice a week in conjunction with commercial feed. In the control group, each animal received 1 g of pellet for every 10 kg of animal live weight, without fungal mycelium added to the feed. Samples of feces and pastures were collected biweekly for 12 months. The most prevalent nematode genera in the coprocultures were Haemonchus sp., Cooperia sp. and Oesophagostomum sp. reflecting the results found in forage. The pasture that contained the animals that received treatment with the fungus presented reduction of 59% and 52% of larvae recovered at distances of 20cm and 40cm of the fecal mass, respectively. The mean monthly egg per gram stool and weight did not differ significantly (p> 0.05) between the treated and control groups. Feces and soil samples from both groups were colonized by the fungus A. cladodes and by other fungi. Administration of the mycelium of Arthrobotrys cladodes var macroides by means of a sodium alginate matrix twice weekly reduced the infestation of larvae in the pasture, indicating that this fungus may be a promising biological controller in the control of the nematode infecting forms present in the environment.
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Diversidade genética de isolados do fungo predador de nematóides Arthrobotrys spp. por marcadores moleculares RAPD e PCR-RFLP do rDNA / Genetic diversity of nematophagous predacius fungi Arthrobotrys spp. by RAPD and rDNA PCR-RFLP molecular markers

Ramos, Moema Lopes 08 August 2000 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T17:11:15Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 927356 bytes, checksum: 6c422db022d62f1130f3945fa49dd101 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T17:11:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 927356 bytes, checksum: 6c422db022d62f1130f3945fa49dd101 (MD5) Previous issue date: 2000-08-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A diversidade genética de seis isolados Arthrobotrys conoides, três isolados A. oligospora e sete isolados A. robusta foi avaliada por meio de RAPD. A amplificação resultou em um total de 107 fragmentos de DNA polimórficos, utilizando 11 oligonucleotídeos. As distâncias genéticas variaram de 9 a 83%, quando analisadas em conjunto, demonstrando grande diversidade genética nos isolados dessas três espécies. Por meio dessas análises, pôde-se diferenciar os isolados A51 (A. robusta) e A78 (A. conoides) das suas respectivas espécies. Além desses, o isolado A183 (A. oligospora) também se diferenciou de sua espécie agrupando-se com isolados de A. robusta. A variação dentro da região ITS do rDNA de seis isolados A. conoides e sete isolados A. robusta foi analisada por PCR seguida pela análise do polimorfismo de comprimento de restrição (RFLP). Essa região amplificada inclui o espaçador interno transcrito (ITS), que possui um baixo grau de conservação. Dois isolados fúngicos, A51 e A78, apresentaram polimorfismo de tamanho dentro de suas respectivas espécies. Os produtos da amplificação da região ITS foram hidrolisados com diferentes endonucleases de restrição. Análises de agrupamento, baseadas nos fragmentos de DNA de restrição, separaram os isolados em três distintos grupos: o Grupo 1, que contém os isolados pertencentes à espécie A. conoides, exceto o isolado A78; o Grupo 2, que contém os isolados da espécie A. robusta, exceto o isolado A51; e o Grupo 3, formado pelos isolados A78 e A51, sugerindo uma nova análise na sua classificação. / The genetic diversity of six isolates of Arthrobotys conoides, three of A. oligospora, and seven of A. robusta was evaluated by RAPD. Total DNA amplification using 11 oligonucleotides resulted in 107 distinct polymorphic DNA fragments. The genetic distances varied from 9 to 38%, showing high genetic diversity among the isolates of the three species. By means of RAPD analysis, the isolates A51 (A. robusta) and A78 (A. conoides) could be differentiated from their respective species. Besides A51 and A78, the isolate A183 (A. oligospora) also differentiated from its species, grouping with the isolates of A. robusta. Variation within the rDNA ITS region of six isolates of A. robusta was analyzed by PCR, followed by restriction fragment length polymorphism analysis (RFLP). The amplified region included the internal transcribed spacer (ITS), which possesses a low degree of conservation. Two fungal isolates presented length polymorphism within their respective species. Amplification products of the ITS region were cleaved with different restriction endonucleases. Cluster analysis based on restriction fragments divided the isolates into three groups: Group 1, containing the A conoides isolates, except ixA78; Group 2, containing the A robusta isolates, except A51; and Group 3, formed by A78 and A51, suggesting that their classification should be revised.
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Flutuação populacional de Meloidogyne mayaguensis em pomar de goiabeira e estudo do controle biológico com fungos nematófagos associado a culturas de cobertura

Franco, Camila Kauffmann Becaro [UNESP] 29 June 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-29Bitstream added on 2014-06-13T20:13:32Z : No. of bitstreams: 1 franco_ckb_me_jabo.pdf: 1145317 bytes, checksum: 6baff4dc9419d049931f91e06de21723 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Para a cultura da goiabeira esse estudo é de grande interesse, visto que não existem nematicidas registrados. As práticas de manejo desse nematóide visam possibilitar a convivência com a doença. O objetivo da pesquisa foi avaliar a capacidade de parasitismo de ovos de Meloidogyne mayaguensis pelos fungos Pochonia clamydosporia Goddard, isolados FCAV-1 e FCAV-2, Paecilomyces lilacinus Thom., isolados FCAV-1, FCAV-2 e FCAV-3; avaliar a capacidade predatória de juvenis de segundo estádio desse nematóide pelos fungos Arthrobotrys musiformis Drechsler, Arthrobotrys sp., Dactylella leptospora Grove e Monacrosporium elegans Oudem, in vitro; avaliar a resistência de plantas de cobertura como milheto (Pennisetum glaucum), amendoim rasteiro (Arachis pintoi) e crotalária (Crotalaria spectabilis), em casa de vegetação; avaliar a eficácia de fungos nematófagos, adubo organomineral e as mencionadas culturas de cobertura, isoladas e em combinação no controle de M. mayaguensis, em pomar de goiabeiras e estudar a flutuação populacional desse nematoide no período de fevereiro a dezembro de 2009, em pomar de goiabeira irrigado e não irrigado. No presente estudo confirmou-se que a utilização combinada de culturas de cobertura resistentes a M. mayaguensis e fungos nematófagos reduziu significativamente a densidade de população de M. mayaguensis em pomar de goiabeira, e a curva de tendência da flutuação da população de M. mayaguensis em goiabeira, no Estado de São Paulo, exibe picos de população nos meses quentes e chuvosos do ano (fevereiro a dezembro) / This study is of great interest for the culture of guava, since there are no nematicides registered. Management practices are designed to allow these nematodes to living with the disease. The research aimed at evaluating the ability of egg parasitism of Meloidogyne mayaguensis fungi Pochonia clamydosporia Goddard, isolate FCAV-1 and FCAV-2, Paecilomyces lilacinus Thom., Isolate FCAV-1, FCAV-2 and FCAV- 3; evaluate the predatory ability of the fungi Arthrobotrys musiformis Drechsler, Arthrobotrys sp. Dactylella leptospora Grove and Monacrosporium elegans Oudem to second stage juveniles of this nematode, in vitro, evaluate the resistance of cover crops such as millet (Pennisetum glaucum), peanut crop (Arachis pintoi) and (Crotalaria spectabilis) under greenhouse conditions and to evaluate the efficacy of nematophagous fungi, organic mineral fertilizer and the aforementioned cover crops, alone and in combination to control M. mayaguensis, in an orchard of guava trees; and study population dynamics of nematodes in the period from February to December 2009 a the guava orchard with and without irrigation. In the present study it was confirmed that the combined use of cover crops resistant to M. mayaguensis and nematophagous fungi significantly reduced the population density of M. mayaguensis in guava trees, the trend line of population fluctuations of M. mayaguensis in guava in São Paulo, displays peak population in the hot and rainy months of the year (February- December)
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Compatibilidade dos fungos nematófagos Arthrobotrys robusta e Duddingtonia flagrans no controle biológico dos nematoides gastrintestinais de bezerros / The compatibility of nematophagous fungi Arthrobotrys robusta and Duddingtonia flagrans fungi in the biological control of gastrointestinal nematodes of calves

Ayupe, Tiago de Hollanda 25 September 2014 (has links)
Submitted by Amauri Alves (amauri.alves@ufv.br) on 2015-11-16T15:34:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 843074 bytes, checksum: 5ac06faebf077fc24647e419df4d44ad (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-16T15:34:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 843074 bytes, checksum: 5ac06faebf077fc24647e419df4d44ad (MD5) Previous issue date: 2014-09-25 / Em todo o mundo, as parasitoses gastrintestinais em ruminantes causadas por nematoides, geram perdas econômicas muitas vezes não visíveis ou quantificadas na produção animal. Dessa forma, a utilização de fungos nematófagos associados, no controle biológico, pode ser uma alternativa eficaz e vantajosa para melhorar os resultados de tratamentos com fungos isoladamente e potencializar o controle dos nematoides que parasitam bovinos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a compatibilidade entre os fungos nematófagos do grupo dos predadores Arthrobotrys robusta (isolado I31) e Duddingtonia flagrans (isolado AC001) em laboratório e a ação conjunta destes na redução ambiental de formas infectantes de nematoides parasitos gastrintestinais de bovinos jovens Holandês-Zebu. Primeiramente, a presença de compatibilidade entre os fungos A. robusta e D. flagrans in vitro foi verificada por testes de confronto direto, de antibiose e de compostos voláteis. Esses testes permitem identificar a competição por espaço entre os organismos e a produção de antibióticos e de compostos voláteis por algum desses fungos. No teste de confrontação direta, A. robusta colonizou aproximadamente 2/3 da placa, o que sugere competição por espaço e, portanto, antagonismo. No teste de antibiose, nenhum fungo produziu antibióticos sobre o meio de cultura, o que resultou na ausência de halo de inibição da cultura subsequentemente semeada na mesma placa. No teste de compostos voláteis, o isolado de A. robusta reduziu (p<0,05) o crescimento de D. flagrans. No ensaio in vivo, cada animal do grupo tratado (A) recebeu 2g/10 kg de peso vivo (PV) de péletes de alginato de sódio com os isolados fúngicos AC001 (0,2 g de micélio/10 kg de PV) e I31 (0,2 g de micélio/10 kg de PV) com ração comercial duas vezes por semana durante 26 semanas, enquanto os animais do grupo controle (B) receberam somente ração comercial. Ao final do experimento, os animais do grupo A apresentaram em relação aos do grupo B os resultados: redução de 72,87% no número de ovos por grama de fezes (OPG) e de 6,07% no número de larvas recuperadas das coproculturas vii respectivamente. Porém, o número total de larvas (L3) recuperadas por quilograma de matéria seca de pastagem foi semelhante (p>0,05) entre os grupos tratado e controle ao final do experimento. / Worldwide, gastrointestinal parasites in ruminants caused by nematodes produce economic losses often not visible or quantified for livestock production. Thus, the use of associated nematophagous fungi, as a form of biological control, can be an effective and advantageous alternative to improve the results of treatments using only fungi and to enhance the control of nematodes that parasitize cattle. The purpose of this study was to evaluate the compatibility between nematophagous fungi from the predator group Arthrobotrys robusta (isolate I31) and Duddingtonia flagrans (isolate AC001) under laboratory conditions and the joint action of these fungi in the environmental reduction of infective forms of gastrointestinal nematodes on young Holstein-Zebu cattle. Firstly, we detected the in vitro compatibility between A. robusta and D. flagrans through direct confrontation, antibiosis and volatile compounds testing. These tests allow the identification of the existence of competition for space between the organisms and the production of volatile compouds and antibiotics for some of these fungi. In direct comparison test, the A. robusta colonized approximately 2/3 of the plate, which suggests that there is competition for space between them and thus a form of antagonism. In antibiosis test, the production of antibiotics on culture medium by any fungus was not observed, which resulted in the absence of inhibition zone of fungus subsequently sown in the same plate. In the volatile compounds test, A. robusta reduced (p <0.05) the growth of D. flagrans. On the in vivo test each animal in the treated group (A) received 2 g/ 10 kg body weight (BW) of sodium alginate pellets containing the fungal isolates AC001 (0.2 g mycelium / 10 kg of BW) and I31 (0.2 g mycelium / 10 kg of BW) with commercial ration twice a week for 26 weeks, whereas animals in the control group (B) received only commercial feed. At the end of the experiment, the animals of group A compared to group B showed the following results: 72.87% reduction in the average number of eggs per gram of feces (EPG) and 6.07% of the ix average number of larvae recovered of coproculture, respectively. However, there was no difference (p> 0.05) of the total number of larvae (L3) recovered per kilogram of dry grassland between the treated and control groups at the end of the experiment.
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Flutuação populacional de Meloidogyne mayaguensis em pomar de goiabeira e estudo do controle biológico com fungos nematófagos associado a culturas de cobertura /

Franco, Camila Kauffmann Becaro. January 2010 (has links)
Resumo: Para a cultura da goiabeira esse estudo é de grande interesse, visto que não existem nematicidas registrados. As práticas de manejo desse nematóide visam possibilitar a convivência com a doença. O objetivo da pesquisa foi avaliar a capacidade de parasitismo de ovos de Meloidogyne mayaguensis pelos fungos Pochonia clamydosporia Goddard, isolados FCAV-1 e FCAV-2, Paecilomyces lilacinus Thom., isolados FCAV-1, FCAV-2 e FCAV-3; avaliar a capacidade predatória de juvenis de segundo estádio desse nematóide pelos fungos Arthrobotrys musiformis Drechsler, Arthrobotrys sp., Dactylella leptospora Grove e Monacrosporium elegans Oudem, in vitro; avaliar a resistência de plantas de cobertura como milheto (Pennisetum glaucum), amendoim rasteiro (Arachis pintoi) e crotalária (Crotalaria spectabilis), em casa de vegetação; avaliar a eficácia de fungos nematófagos, adubo organomineral e as mencionadas culturas de cobertura, isoladas e em combinação no controle de M. mayaguensis, em pomar de goiabeiras e estudar a flutuação populacional desse nematoide no período de fevereiro a dezembro de 2009, em pomar de goiabeira irrigado e não irrigado. No presente estudo confirmou-se que a utilização combinada de culturas de cobertura resistentes a M. mayaguensis e fungos nematófagos reduziu significativamente a densidade de população de M. mayaguensis em pomar de goiabeira, e a curva de tendência da flutuação da população de M. mayaguensis em goiabeira, no Estado de São Paulo, exibe picos de população nos meses quentes e chuvosos do ano (fevereiro a dezembro) / Abstract: This study is of great interest for the culture of guava, since there are no nematicides registered. Management practices are designed to allow these nematodes to living with the disease. The research aimed at evaluating the ability of egg parasitism of Meloidogyne mayaguensis fungi Pochonia clamydosporia Goddard, isolate FCAV-1 and FCAV-2, Paecilomyces lilacinus Thom., Isolate FCAV-1, FCAV-2 and FCAV- 3; evaluate the predatory ability of the fungi Arthrobotrys musiformis Drechsler, Arthrobotrys sp. Dactylella leptospora Grove and Monacrosporium elegans Oudem to second stage juveniles of this nematode, in vitro, evaluate the resistance of cover crops such as millet (Pennisetum glaucum), peanut crop (Arachis pintoi) and (Crotalaria spectabilis) under greenhouse conditions and to evaluate the efficacy of nematophagous fungi, organic mineral fertilizer and the aforementioned cover crops, alone and in combination to control M. mayaguensis, in an orchard of guava trees; and study population dynamics of nematodes in the period from February to December 2009 a the guava orchard with and without irrigation. In the present study it was confirmed that the combined use of cover crops resistant to M. mayaguensis and nematophagous fungi significantly reduced the population density of M. mayaguensis in guava trees, the trend line of population fluctuations of M. mayaguensis in guava in São Paulo, displays peak population in the hot and rainy months of the year (February- December) / Orientador: Jaime Maia dos Santos / Coorientador: Pedro Luiz Martins Soares / Banca: Julio Cesar Galli / Banca: Marineide Mendonça Aguillera / Mestre
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Hodnocení růstových a produkčních parametrů nematofágní houby Arthrobotrys oligospora / Evaluation of growth and production parameters of nematophagous fungus \kur{Arthrobotrys oligospora}

ŠEDIVÁ, Monika January 2010 (has links)
This M.Sc. thesis is aimed to describe growth and production parameters of nematophagous fungus Arthrobotrys oligospora. There was determinated information about growth and sporulation of fungus on artificial and natural substrates, influence of cultivation condition on production biomass and possibility of formulation alginate pellets.

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